■楊尚霖 王 鼎 付洋洋 周勝杰 陳光吉 郭春華*

（1.西南民族大學(xué)畜牧獸醫(yī)學(xué)院，四川 成都 610041；2.阿壩職業(yè)學(xué)院，四川 阿壩 623200；3.銅仁豐收畜牧有限責(zé)任公司，貴州 銅仁 554399；4.貴州省農(nóng)業(yè)科學(xué)院草業(yè)研究所，貴州 貴陽 550006）

飼料占畜禽養(yǎng)殖成本的70%以上，因此加大綠色、安全、高效飼料資源的研究和開發(fā)十分必要[1]。近年來，隨著飼料“禁抗”政策的全面執(zhí)行，基于我國傳統(tǒng)中醫(yī)藥理論，探索中草藥應(yīng)用于畜禽飼糧方面的研究成為熱點之一，且多數(shù)報道為不同程度的正效應(yīng)，具有良好開發(fā)前景[2-5]。

杜仲（Eucommia ulmoides）為杜仲科杜仲屬，系多年生落葉喬木，是原產(chǎn)于我國西南諸省山區(qū)的特有經(jīng)濟樹種，屬名貴中藥材。杜仲入藥由來已久，《神農(nóng)本草經(jīng)》稱：“杜仲，又名思仙、木綿、思仲、玉絲皮等，主腰脊痛，補中益精氣，堅筋骨，強志，除陰下癢濕、小便余瀝”，現(xiàn)代藥理學(xué)研究發(fā)現(xiàn)杜仲葉、皮均含有豐富的苯丙素類（氯原酸）、環(huán)烯醚萜類（京尼平苷酸、京尼平苷）、杜仲膠和黃酮類等功能性成分，具有增強免疫力、降壓、抗炎、抗病毒、抗應(yīng)激、健筋骨、利膽、抗衰老、抗氧化等多種藥理作用[6]。受中醫(yī)藥理論啟發(fā)，杜仲作為飼料添加物的研究逐漸增多：諸多報道指出，杜仲葉及其提取物作為飼料添加劑具有促進畜禽生長、提高免疫力和改善畜產(chǎn)品品質(zhì)等作用[7-11]，但還鮮見杜仲葉應(yīng)用于肉牛日糧中直接評價其飼用價值的研究。本試驗在日糧中添加杜仲葉研究其對育肥肉牛生長性能、屠宰性能、養(yǎng)分消化率及肉品質(zhì)的影響，為杜仲葉作為肉牛飼料添加物的合理利用提供參考。

1 材料與方法

1.1 試驗時間和地點

飼養(yǎng)試驗于2017年5～10月在貴州省銅仁市碧江區(qū)瓦屋鄉(xiāng)克蘭寨銅仁豐收畜牧有限公司進行，試驗樣品的分析測定工作在西南民族大學(xué)動物科學(xué)實驗室進行。

1.2 杜仲葉的來源

試驗所用的杜仲葉由貴州五新農(nóng)業(yè)科技有限公司提供。杜仲葉產(chǎn)自貴州省銅仁市石阡縣白沙鎮(zhèn)，經(jīng)自然晾曬至風(fēng)干狀態(tài)后粉碎過20目篩。試驗所用杜仲葉營養(yǎng)成分含量見表1。

表1 杜仲葉營養(yǎng)成分含量（DM基礎(chǔ)，%）

1.3 試驗動物與試驗設(shè)計

采用完全隨機試驗設(shè)計，隨機選取75頭（252.67±6.00）kg 11月齡本地黃?！廖鏖T塔爾雜交公牛，根據(jù)初始體重，按隨機區(qū)組試驗設(shè)計分為5組（0組、1%組、2%組、3%組和4%組），每組3 個重復(fù)，每個重復(fù)5 頭牛。全混合日糧精粗比為3∶7，0組飼喂基礎(chǔ)日糧，1%～4%組分別在基礎(chǔ)日糧中添加1%、2%、3%和4%的杜仲葉以替代基礎(chǔ)日糧中的粗料。預(yù)試期15 d，正試期150 d。各處理組日糧組成及營養(yǎng)水平見表2。

表2 各處理組全混合日糧組成和營養(yǎng)水平（DM基礎(chǔ)）

1.4 飼養(yǎng)管理

試驗前對育肥肉牛圈舍進行清潔和消毒處理，對肉牛進行藥物驅(qū)蟲。每5頭肉牛1個圈（面積60 m2），圈內(nèi)散放飼養(yǎng)。每日飼喂2 次全混合日糧（8：00 和16：00），自由采食，自由飲水。

1.5 測定指標(biāo)及方法

1.5.1 生長性能

以重復(fù)（圈）為單位，在試驗開始和結(jié)束時于晨飼前對每個重復(fù)5 頭牛一起稱重，根據(jù)始重和末重，計算每頭牛的平均日增重（ADG）。

1.5.2 養(yǎng)分表觀消化率

試驗結(jié)束前3 d，每天在每個圈采集新鮮糞樣100 g，加入10%硫酸10 mL以固氮，然后將同一圈3 d的糞樣混合后置-20 ℃冰箱保存待測。同時采集每個處理的全混合日糧樣品各1 000 g。采用內(nèi)源指示劑（酸不溶性灰分，AIA）法[12]，測定日糧中CP、EE、NDF、ADF、Ca和P的表觀消化率。

1.5.3 肉品質(zhì)的測定

試驗結(jié)束時，從每個圈中選取1頭接近該圈平均體重的育肥肉牛進行屠宰，分別在3～4胸椎處、5～6肋間處取背最長肌肉樣200 g、1 000 g，用于pH、蒸煮損失、滴水損失、剪切力、肌肉氨基酸、肌肉脂肪酸等指標(biāo)的測定。

①pH：用精密pH 計（pH-star）于屠宰后45 min測定3～4胸椎處眼肌肉樣pH，同一肉樣在4 ℃下貯存24 h后再次測定。

②蒸煮損失：屠宰后取5～6 肋間處眼肌新鮮肉樣[沿肌纖維方向切取長×寬×厚=（6×3×3）cm3左右]，稱重記為M1，放入水溫為80 ℃的水浴鍋中保持30 min，取出后在室內(nèi)晾15 min，稱重記為M2。

蒸煮損失（%）=（M1-M2）/M1×100

③滴水損失：取5～6 肋間處眼肌新鮮肉樣，準(zhǔn)確稱取100 g左右的肉樣[沿肌纖維方向切取長×寬×厚=（5×3×2）cm3左右]，記錄重量記為N1，將肉樣裝入塑料袋中，用絲線將肉樣吊掛起來，一同放入4 ℃冰箱中24 h后再次稱重記為N2。

滴水損失（%）=（N1-N2）/N1×100

④眼肌面積：用硫酸紙描繪倒數(shù)第1與第2肋骨間背最長肌橫斷面輪廓，描繪完后與標(biāo)準(zhǔn)面積的物塊進行拍照，使用Image Pro Plus V6.0 軟件計算眼肌面積。

⑤剪切力：使用英國SMSTA食品物性測試儀（型號：TA-XT plus）測定做完蒸煮損失后的肉樣剪切力，測定時刀片垂直于肉樣肌纖維。肉色：屠宰后1～2 h內(nèi)，使用pH-200型精密色差儀（中國漢譜科儀有限公司）測定肌肉表面的L*值、a*值、b*值，其中L*值表示肌肉亮度，a*值表示肌肉紅度，b*值表示肌肉黃度。

⑥常規(guī)營養(yǎng)成分：屠宰后取倒數(shù)第1與第2肋骨間背最長肌測定水分、CP、EE 含量，參照張麗英[13]的方法。

⑦氨基酸和脂肪酸的組成和含量：屠宰后取3～4胸椎處眼肌40 g，送四川威爾檢測技術(shù)股份有限公司進行檢測。氨基酸參照GB/T 5009.124—2016《食品中氨基酸的測定》，通過日本日立氨基酸分析儀（型號：L-8900）測定。脂肪酸參照GB/T 5009.168—2016《食品中脂肪酸的測定》中第三種方法（歸一化法），通過美國安捷倫氣相色譜儀（型號：GC7890）測定。

1.6 數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析

本試驗數(shù)據(jù)用Excel（2010）軟件進行初步整理后，采用SAS（SAS Institute，2003）統(tǒng)計軟件中的單因素GLM 程序進行方差分析，采用最小二乘均數(shù)（lsmeans）進行多重比較，然后采用正交多項式（orthogonal polynomial CONTRAST）進行線性（Linear）和二次（Quadratic）效應(yīng)分析。以P＜0.05 代表差異顯著性為判斷標(biāo)準(zhǔn)，P＜0.01 表示差異極顯著，P＜0.10 表示有趨勢。結(jié)果用“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”表示。

2 結(jié)果與分析

2.1 生長性能和屠宰性能（見表3）

由表3可知各處理組的ADG、屠宰率和眼肌面積以3%組為最高，分別比0 組提高6.37%、4.99%和15.13%，但差異不顯著（P＞0.05）。

表3 杜仲葉添加量對育肥肉牛生長性能和屠宰性能的影響

2.2 養(yǎng)分表觀消化率（見表4）

由表4 可知，隨著杜仲葉添加量的增加，各處理組間CP、NDF、ADF、EE、Ca、P表觀消化率差異不顯著（P＞0.05）。與0 組相比，隨著杜仲葉添加量的升高，NDF和ADF的表觀消化率略有降低。

表4 杜仲葉添加量對育肥肉牛養(yǎng)分表觀消化率的影響(%)

2.3 肌肉理化指標(biāo)（見表5）

表5 杜仲葉添加量對育肥肉牛背最長肌肌肉理化指標(biāo)的影響

由表5 可知，各處理組肉牛背最長肌的pH、蒸煮損失、滴水損失、剪切力、水分含量和CP含量無顯著差異（P＞0.05）。肉色L*值、a*值和b*值各處理組間差異不顯著（P＞0.05）。杜仲葉降低肉牛背最長肌中EE的含量，以3%組最低（2.11%），比0組（4.89%）低56.85%，但各處理間差異不顯著（P＞0.05）。

2.4 肌肉氨基酸組成和含量（見表6）

由表6可知，各處理組間各種氨基酸的含量均差異不顯著（P＞0.05）。

表6 杜仲葉添加量對育肥肉牛肌肉氨基酸組成和含量的影響（鮮樣基礎(chǔ)，%）

2.5 肌肉脂肪酸組成和含量（見表7）

由表7 可知，添加杜仲葉對各種類脂肪酸含量、SFA、USFA、MUFA和PUFA含量的影響均差異不顯著（P＞0.05），γ-亞麻酸（C18∶3n3）的含量有上升趨勢（P=0.07），以3%組（0.83%）為最高，比0組（0.43%）提高93.02%。3%組的PUFA（13.58%）比0組（8.97%）提高了51.39%。

表7 杜仲葉添加量對育肥肉牛背肌脂肪酸組成和含量的影響（鮮樣基礎(chǔ)，%）

3 討論

3.1 杜仲葉添加量對育肥肉牛平均日增重和屠宰性能的影響

本試驗結(jié)果顯示，隨著杜仲葉添加量的增加，試驗組肉牛平均日增重略有上升，3%組平均日增重最高，比0 組提高了6.37%，隨后又下降。提示杜仲葉的添加對育肥肉牛生長性能有正面作用，這與張琪等[14]在松遼黑豬飼料中添加2%杜仲粉可提高育肥豬平均日增重9.75%，生長性能顯著提高的報道結(jié)果相似。屠宰率和眼肌面積是動物產(chǎn)肉性能的重要經(jīng)濟指標(biāo)，其中眼肌面積與產(chǎn)肉率呈正相關(guān)。本研究發(fā)現(xiàn)，屠宰率隨著杜仲葉添加量的增加，有所升高，且以3%組最高，說明了杜仲葉作為肉牛日糧添加物具有提高生長性能和產(chǎn)肉性能的作用，這與石海仁等[15]在育肥豬飼料中添加杜仲葉，試驗組比對照組屠宰率有

所提高、眼肌面積增加的結(jié)果一致，具體機理有待進一步研究。

3.2 杜仲葉添加量對育肥肉牛養(yǎng)分表觀消化率的影響

日糧消化率是表征其組成結(jié)構(gòu)合理性的重要指標(biāo)。嚴(yán)欣茹等[16]利用體外產(chǎn)氣試驗，研究了杜仲對牦牛瘤胃發(fā)酵及養(yǎng)分降解率的影響，結(jié)果顯示日糧中添加杜仲葉可以提高日糧纖維的降解率，降低瘤胃液氨態(tài)氮濃度，提高瘤胃微生物蛋白的合成。本研究發(fā)現(xiàn)，各處理CP、NDF、ADF、EE、Ca、P 表觀消化率影響均不顯著，該結(jié)果與前述報道的趨勢不盡一致，原因可能是體外法僅體現(xiàn)了杜仲葉在瘤胃消化段的降解特性，而本試驗測定的是全腸道的養(yǎng)分表觀消化率，與體外法的差異在于后者還反映了后端腸道對養(yǎng)分消化利用的影響。

3.3 杜仲葉添加量對育肥肉牛肌肉理化指標(biāo)的影響

動物屠宰后肌糖原無氧酵解產(chǎn)生乳酸速度是影響肉的適口性、嫩度、烹煮損失的重要因子，因此肌肉pH 是反映肌肉品質(zhì)的重要指標(biāo)。研究發(fā)現(xiàn)，動物屠宰后肌肉要經(jīng)過僵直、解僵、成熟階段，因此pH 會隨著時間的推移呈現(xiàn)先迅速下降又緩慢上升的趨勢，最終達到6.0 左右，該動態(tài)變化趨勢由動物品種、年齡、營養(yǎng)狀況和激素分泌等原因所決定，通常新鮮牛肉的pH 為6.5～7.2。本次試驗結(jié)果顯示，試驗組與對照組pH 差異不顯著，說明杜仲葉的添加沒有影響屠宰后牛肉肌糖原酵解速度和乳酸積累量，這與石海仁等[15]的結(jié)果保持一致。

肌肉顏色是肌肉中肌紅蛋白和血紅蛋白顏色的直接體現(xiàn)，充分放血時肌紅蛋白占肌肉色素的70%～80%，其中肌紅蛋白含量越高，肉色越深。影響肌肉中肌紅蛋白的含量的因素有動物的種類、年齡、肌肉部位、運動程度等。本次試驗結(jié)果顯示，試驗組與對照組肉色L*值、a*值和b*值均無顯著差異，但隨著杜仲葉添加量的上升，肉色a*值和b*值略微上升，本試驗結(jié)果與馬馳聘等[17]報道的生長育肥豬飼糧中添加杜仲葉肉質(zhì)和背膘脂肪肉色b*值隨杜仲葉添加而升高的結(jié)果一致。

肉的滴水損失和蒸煮損失是反映肉系水力的常用指標(biāo)，蒸煮損失是肌肉在加熱的過程中肌原纖維等組成成分釋放出來水分、蛋白質(zhì)、肽類和游離氨基酸等化合物的一系列理化變化從而使肌肉產(chǎn)生的重量損失，蒸煮損失越高或滴水損失越大，持水能力則越高，肉的多汁性越差，最終影響口感。本次試驗結(jié)果顯示，試驗組與對照組肌肉滴水損失和蒸煮損失均無顯著差異，說明杜仲葉的添加對牛肉系水力無顯著影響。

肌肉剪切力是通過儀器測定，客觀評價肉的嫩度的常用指標(biāo)。肉在食用時口感的老嫩，是肉嫩度的主觀評判標(biāo)準(zhǔn)。肉嫩度是消費者評判肉質(zhì)優(yōu)劣最常用指標(biāo)之一。肌肉嫩度與肌肉中肌纖維的特性有關(guān)。肌纖維越細(xì)、肌節(jié)長度越長，肉的嫩度越大[18]。本次試驗結(jié)果顯示，試驗組與對照組肌肉剪切力差異不顯著，說明杜仲葉的添加對牛肉嫩度無顯著影響。

肌肉組成中水分的含量最高，可占肌肉總質(zhì)量的70%～80%。隨著動物年齡的增長，肌肉內(nèi)脂肪含量的增加，肉中水分含量逐漸降低。在肌肉中水分以3 種狀態(tài)存在：不易流動水（80%）、自由水（15%）和結(jié)合水（5%）。肉的保水能力由不易流動水決定。肉中水分含量過高，易引起細(xì)菌繁殖、肉品腐??；含量過低，會影響肉的組織形態(tài)、風(fēng)味等。肉中水分含量及存在狀態(tài)對肉的加工質(zhì)量和貯藏有很大影響[19]。本試驗結(jié)果顯示，試驗組與對照組肌肉水分含量差異不顯著，說明杜仲葉的添加對牛肉水分含量無顯著影響。

脂肪和蛋白質(zhì)的含量和組成是影響肉品質(zhì)風(fēng)味的重要物質(zhì)，其中蛋白質(zhì)可以通過與肌肉中的風(fēng)味氨基酸組成和含量等物質(zhì)結(jié)合來影響肉的風(fēng)味，某些脂肪酸本身就是脂肪中重要的風(fēng)味物質(zhì)或揮發(fā)性風(fēng)味物質(zhì)的前體。試驗結(jié)果顯示，隨著杜仲葉添加量的增加，試驗組與對照組肌肉CP、EE 含量沒有顯著差異，肌肉中EE 含量有所降低，這可能與杜仲中的有效成分能夠降低育肥肉牛肌間脂肪的沉積有關(guān)。

3.4 杜仲葉添加量對育肥肉牛肌肉氨基酸組成和含量的影響

肌肉蛋白質(zhì)的質(zhì)量和含量體現(xiàn)出肉的營養(yǎng)價值，人類對必需氨基酸需要量的滿足程度更為重要。蛋白質(zhì)的基本構(gòu)成單位是氨基酸，所以蛋白質(zhì)的營養(yǎng)實質(zhì)上指氨基酸的營養(yǎng)。動物或人類從食物中攝取的氨基酸是構(gòu)建機體內(nèi)功能物質(zhì)(如酶、激素和抗體等)的主要成分、機體組織的主要原料、組織修補和更新的主要原料以及轉(zhuǎn)化為糖和脂肪為機體提供能量的重要組分。根據(jù)聯(lián)合國糧農(nóng)組織（FAO）、世界衛(wèi)生組織（WHO）提出的理想蛋白質(zhì)模型：食物蛋白質(zhì)組成中EAA/TAA 在40%左右，EAA/NEAA 高于60%，被認(rèn)為是優(yōu)質(zhì)蛋白食物。本次試驗結(jié)果表明，隨著杜仲葉添加量的上升，各處理組間總氨基酸含量差異不顯著（P＞0.05）。各試驗組鮮味氨基酸（DTAA）、DTAA/TAA、甜味氨基酸STAA、STAA/TAA 差異均不顯著（P＞0.05），各試驗組EAA/TAA 在40%左右，EAA/NEAA 高于60%。說明杜仲葉的添加對育肥肉牛肌肉品質(zhì)沒有影響，同時，2%杜仲葉添加量能夠降低肌肉蛋白中非必需氨基酸的含量，提高必需氨基酸含量，EAA/TAA 是唯一高于40%的處理組，與對照組相比，是更為優(yōu)質(zhì)的蛋白食物。

3.5 杜仲葉添加量對育肥肉牛肌肉脂肪酸組成和含量的影響

近年來，隨著人們生活水平的提高，飲食觀念和結(jié)構(gòu)也相應(yīng)發(fā)生變化，人們越來越關(guān)注食品中的安全和健康問題。牛肉因其優(yōu)質(zhì)的蛋白、獨特的風(fēng)味和較高的營養(yǎng)價值，越來越受到人們的青睞。牛肉的營養(yǎng)價值除了蛋白質(zhì)含量高以外，還體現(xiàn)在其均衡的脂肪酸組成上。研究表明，人體的健康與每天食用的肌肉中脂肪酸種類和含量有密切聯(lián)系，其中血液中膽固醇（CHO）和低密度脂蛋白（LDL）升高的主要原因是因為SFA 的攝取量過高，易繼發(fā)人體動脈血管腔狹窄，形成動脈粥樣硬化，增加患冠心病的風(fēng)險；MUFA 和PUFA 共同組成USFA。USFA 對人體健康有很大益處，其中MUFA 能夠降低血液中膽固醇、三酰甘油及低密度脂蛋白，進而預(yù)防動脈壁因膽固醇過多而硬化，PUFA在體內(nèi)具有降低血液黏稠度，有助于降低心腦血管疾病[19-21]。本試驗結(jié)果表明，隨著杜仲葉添加量的增加，各處理組間各脂肪酸含量、SFA、USFA、MUFA 和PUFA 差異均不顯著（P＞0.05），但多不飽和脂肪酸γ-亞麻酸（C18∶3n3）有上升趨勢（P=0.07）；USFA 和PUFA，均有所上升，說明杜仲葉的添加能夠提高育肥肉牛肌肉脂肪酸品質(zhì)，更符合人們對脂肪酸的需求。該試驗結(jié)果與楊改青等[22]在綿羊基礎(chǔ)日糧中添加杜仲葉能降低SFA，顯著升高USFA結(jié)果一致。

4 結(jié)論

日糧中添加杜仲葉具有提高肉牛屠宰率，降低肌肉脂肪含量，改善肌肉脂肪酸組成的作用，適宜添加量為3%。