丁小梅，董怡博，王 力，王 芳，3*

（1 泉州師范學(xué)院 海洋與食品學(xué)院 福建泉州 362000 2 集美大學(xué)海洋食品與生物工程學(xué)院 福建廈門 361021 3 福建省海洋藻類活性物質(zhì)制備與功能開發(fā)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室 福建泉州 362000）

南美白對蝦（Litopenaeus vannamei Boone）又稱為凡納濱對蝦，在全球水產(chǎn)養(yǎng)殖蝦中占據(jù)重要地位[1]。因其生長迅速、肉質(zhì)鮮美、營養(yǎng)豐富而深受消費(fèi)者的喜愛，在我國養(yǎng)殖規(guī)模日益壯大，逐漸成為我國主要的養(yǎng)殖蝦類[2]。南美白對蝦組織中富含蛋白質(zhì)和水分，在微生物的作用下，南美白對蝦體內(nèi)的酪氨酸酶易被激活，從而導(dǎo)致“黑變現(xiàn)象”，嚴(yán)重影響對蝦的品質(zhì)[3-4]。酪氨酸酶（EC1.14.18.1），又稱為多酚氧化酶，在生物體的內(nèi)黑色素合成過程中，作為關(guān)鍵限速酶發(fā)揮著重要作用[5-10]。在黑色素合成過程中，酪氨酸酶能催化L-酪氨酸，經(jīng)兩次轉(zhuǎn)化形成高活性物質(zhì)多巴醌，多巴醌在經(jīng)一系列自發(fā)的化學(xué)反應(yīng)后，轉(zhuǎn)化成黑色素和其它酚類化合物，從而導(dǎo)致南美白對蝦及其它水產(chǎn)品黑變[10-15]。建立一種科學(xué)有效的方法用于檢測南美白對蝦及其它水產(chǎn)品中的酪氨酸酶含量，對于實(shí)現(xiàn)對它們的質(zhì)量監(jiān)測具有重要意義，同時也可為其質(zhì)量評價提供新參考標(biāo)準(zhǔn)。

目前，人們已建立起多種方法體系用于酪氨酸酶活性的檢測，主要分為三大類：比色法[16-19]、電化學(xué)法[14，20-22]和熒光法[23-28]。這些方法在操作性、靈敏度、準(zhǔn)確性等方面均具有一定優(yōu)勢。其中電化學(xué)法是更為理想的一種方法，在自動化程度和檢測速度以及復(fù)雜體系的實(shí)時監(jiān)測等方面優(yōu)勢較為突出[29]。

多金屬氧酸鹽（POMs）是一類具有強(qiáng)大的抗氧化能力和良好的電子傳輸能力的納米級無機(jī)過渡金屬-氧簇[30-32]。此類物質(zhì)具有均一且確定的無機(jī)多聚體結(jié)構(gòu)，穩(wěn)定性和耐熱性良好，具有優(yōu)良的氧化-還原性質(zhì)[33-35]，經(jīng)多電子氧化還原過程后，可保持結(jié)構(gòu)不變，這種優(yōu)良的性質(zhì)決定其在電化學(xué)領(lǐng)域的重要作用[36]。

本文合成了H8[P2Mo17Ni（OH2）O61]、H8[P2Mo17Cr（OH2）O61]、H8[P2Mo17Co（OH2）O61]、H6[P2Mo18O62]（分別簡寫為P2Mo17Ni、P2Mo17Cr、P2Mo17Co、P2Mo18）4 種Dawson 型多金屬氧酸鹽，采用電化學(xué)法研究4 種過Dawson 型多金屬氧酸鹽對酪氨酸酶的電化學(xué)傳感，以期建立一種新型酪氨酸酶水平的檢測方法，用于南美白對蝦及其它水產(chǎn)品中酪氨酸酶的檢測，以實(shí)現(xiàn)它們的質(zhì)量評價。

1 試驗(yàn)部分

1.1 主要試劑

酪氨酸酶，Sigma-Aldrich 公司；硫酸鎳、氯化銨、硫酸鈷、硫酸鉻、鉬酸鈉、磷酸、鹽酸、硫酸，磷酸氫二鈉、磷酸二氫鈉、氯化鈉、氯化鉀等，西隴化工股份有限公司；無水乙醚、無水乙醇、氯化鉀、鐵氰化鉀、亞鐵氰化鉀，國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司；以上試劑均為分析純級。氧化鋁粉，天津艾達(dá)恒晟科技有限公司，純度為99.9%。

1.2 主要儀器設(shè)備

Cintra 2020 型紫外-可見分光光度計，澳大利亞GBC 儀器公司；Nicolet Avatar 330 型傅里葉變換紅外光譜儀，美國Thermo Electron 公司；Φ5 mm 玻碳電極、232 型飽和甘汞電極、鉑絲電極，武漢高仕睿聯(lián)科技有限公司；PGSTAT302N 型電化學(xué)工作站，瑞士萬通中國有限公司。

1.3 試驗(yàn)方法

1.3.1 Dawson 型過渡金屬取代磷鉬酸和磷鉬酸母體的合成與表征 Dawson 型磷鉬酸母體的合成過程分為兩步，首先將10 g Na2MoO4·2H2O 溶于45 mL 水中，加入1.5 mL 85% H3PO4和8 mL濃鹽酸，加熱回流8 h。冷卻后加10 g NH4Cl，待固體析出后抽濾。稱取所得固體，溶解于蒸餾水中，加濃HCl，用乙醚（銨沉淀∶蒸餾水∶濃鹽酸∶無水乙醚=5∶10∶6∶6 的比例進(jìn)行萃?。┹腿。谜麴s水重結(jié)晶，得H6[P2Mo18O62]（P2Mo18）晶體[37]。

3 種過渡金屬取代磷鉬酸的制備方法參照文獻(xiàn)[38]，向100 mL 水中加人0.01 mol 可溶性過渡元素化合物（硫酸鎳、硫酸鈷、硫酸鉻），在磁力攪拌下分別向溶液中加人25 mL 0.02 mol 的磷酸二氫鈉溶掖，在pH 計監(jiān)側(cè)下，緩慢滴加1∶1 硫酸，調(diào)到pH=4，蒸后加人75 mL 0.17 mol 的Na2MoO4溶液，再用1∶1 硫酸調(diào)到pH=3.6，回流8 h，冷卻后，轉(zhuǎn)移到分液漏斗中，用乙醚萃取法可制得過渡金屬取代磷鉬酸的醚合物，分離出醚合物后，真空干燥后即得到樣品。用蒸餾水對所得樣品進(jìn)行重結(jié)晶。

將上述合成的化合物通過紫外分光光度技術(shù)（UV）和傅里葉變換紅外光譜技術(shù)（IR）進(jìn)行結(jié)構(gòu)表征，并與文獻(xiàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行對比，以判斷合成物質(zhì)是否為所需化合物。

1.3.2 過渡金屬取代的磷鉬酸及母體對酪氨酸酶的電化學(xué)傳感 玻碳電極的預(yù)處理：將玻碳電極分別用不同粒徑的氧化鋁粉（粒徑分別為1.0，0.3和0.05 μm）進(jìn)行拋光處理，然后分別在超純水、無水乙醇中超聲清洗3～5 min。隨后將電極置于2.5 mmol/L 的[Fe（CN）6]3-/4-溶液（含0.1 mol/L KCl 溶液）中進(jìn)行循環(huán)伏安掃描，以驗(yàn)證電極是否拋光合格。其中以玻碳電極為工作電極，飽和甘汞電極為參比電極，鉑絲電極為輔助電極，電勢范圍為-0.2 V～+0.8 V，掃速為100 mV/s。一般而言，所得循環(huán)伏安圖中氧化還原峰的電位差在80 mV 左右時即認(rèn)為電極拋光合格[14]。

1）多金屬氧酸鹽溶液濃度與其峰電流的關(guān)系 在反應(yīng)體系中加入4 mL 不同濃度 （1～5 mmol/L）的多金屬氧酸鹽溶液，在相同條件下，進(jìn)行循環(huán)伏安掃描。觀察4 種多金屬氧酸鹽作用下所得循環(huán)伏安圖中響應(yīng)峰電流的變化規(guī)律，研究磷鉬酸溶液的濃度與其響應(yīng)峰電流之間的線性關(guān)系。

2）掃速對其峰電流的影響 在反應(yīng)體系中加入4 mL 4 mmol/L 多金屬氧酸鹽溶液，在電勢范圍為-0.4 V～+0.6 V 的條件下，分別在10～200 mV/s 的掃速下進(jìn)行循環(huán)伏安掃描，研究不同掃速下對應(yīng)響應(yīng)峰電流的變化關(guān)系。

3）4 種化合物對酪氨酸酶的催化作用 在反應(yīng)體系中加入4 mL 4 mmol/L 多金屬氧酸鹽溶液，加入0.4 mL 不同濃度的酪氨酸酶溶液，使得反應(yīng)體系中酪氨酸酶終濃度分別為0，24.46，40.30，56.48，72.56，88.77 U/mL 在掃速為50 mV/s，電勢范圍為-0.4～+0.6 V 的條件下，進(jìn)行循環(huán)伏安掃描。將不同濃度酪氨酸酶作用下所得的循環(huán)伏安圖疊加，觀察其規(guī)律，得到響應(yīng)峰電流與酪氨酸酶之間的關(guān)系曲線，進(jìn)一步研究過渡金屬取代的磷鉬酸及母體對酪氨酸酶的電化學(xué)傳感。

1.3.3 計時安培曲線測定 采用計時安培曲線的方法，對P2Mo17Ni 進(jìn)行進(jìn)一步的研究，考察該試驗(yàn)方法的檢測靈敏度和檢出限。由于P2Mo17Ni 水溶液的循環(huán)伏安圖中第一還原峰在-0.25 V 附近，因此，在-0.25 V 的恒定電位下，向反應(yīng)體系中加入4 mL 4 mmol/L P2Mo17Ni 水溶液，隨后在磁力攪拌的作用下，每隔30 s 向反應(yīng)體系中加入0.4 mL 40.305 U/mL 酪氨酸酶溶液，根據(jù)計時安培曲線中所得的響應(yīng)電流，得到響應(yīng)電流與其對應(yīng)酪氨酸酶濃度的線性關(guān)系，計算該方法的檢測靈敏度和檢測限。

1.3.4 樣品的檢測 南美白對蝦樣品檢測液的制備方法參照Nirmal 等[39]的方法作適當(dāng)修改，取100 g 南美白對蝦，加入3 倍南美白對蝦質(zhì)量的50 mmol/L 磷酸緩沖液（0.5 mol/L NaCl、0.2% Brij 35，pH 7.5）中，用組織搗碎機(jī)充分搗碎，靜置后離心（8 000 r/min，30 min），所得上清液即為樣品檢測液，將上清液置于-20 ℃的冰箱中備用。

1）P2Mo17Ni 水溶液對南美白對蝦中酪氨酸酶的檢測 取南美白對蝦樣品檢測液，將其稀釋成不同倍數(shù)（稀釋倍數(shù)為0，5，10，50），在反應(yīng)體系中加入4 mL P2Mo17Ni 水溶液，再加入0.4 mL不同稀釋倍數(shù)的南美白對蝦樣品檢測液，在50 mV/s 掃速下，獲得不同稀釋倍數(shù)的南美白對蝦樣品檢測液的循環(huán)伏安圖，電勢范圍為：-0.4 V～+0.6 V。然后根據(jù)響應(yīng)電流計算出不同稀釋倍數(shù)的南美白對蝦樣品檢測液中的酪氨酸酶。

2）加標(biāo)回收試驗(yàn) 在上述試驗(yàn)條件下，通過對同稀釋倍數(shù)的南美白對蝦樣品檢測液的加標(biāo)回收試驗(yàn)來驗(yàn)證本試驗(yàn)方法的可行性。分別取稀釋5 倍的南美白對蝦樣品檢測液各0.2 mL，再加入0.2 mL 不同濃度為酪氨酸溶液，使得反應(yīng)體系中的酪氨酸酶含量（去除南美白對蝦樣品中的酪氨酸酶含量）分別為10，15，20 U/mL，采用該試驗(yàn)方法進(jìn)行加標(biāo)回收試驗(yàn)，根據(jù)檢出的結(jié)果與酪氨酸酶的添加量，計算回收率。

3）P2Mo17Ni 水溶液對酪氨酸酶的催化作用的穩(wěn)定性和選擇性 用P2Mo17Ni 水溶液對稀釋5倍的南美白對蝦樣品檢測液進(jìn)行選擇性試驗(yàn)，評估了可能干擾P2Mo17Ni 水溶液對酪氨酸酶的催化作用的幾種物質(zhì)。以判斷P2Mo17Ni 水溶液對酪氨酸酶的催化作用的選擇性和結(jié)果的可靠性，進(jìn)一步分析該試驗(yàn)方法的可行性。

2 結(jié)果與分析

2.1 Dawson 型過渡金屬取代磷鉬酸和磷鉬酸母體的結(jié)構(gòu)表征

3 種Dawson 型過渡金屬取代磷鉬酸和磷鉬酸母體的紅外和紫外表征數(shù)據(jù)如表1所示。由紅外光譜數(shù)據(jù)可知，4 種化合物在700～1 100 cm-1之間均出現(xiàn)了4 個特征峰，分別為：在1 065 cm-1附近的P-Oa 鍵拉伸振動吸收峰，在960 cm-1附近的Mo-Od 鍵拉伸振動吸收峰，在900 cm-1附近的Mo-Ob-Mo 鍵拉伸振動吸收峰和在800 cm-1附近的Mo-Oc-Mo 鍵拉伸振動吸收峰。由紫外光譜數(shù)據(jù)可知，所合成的化合物在210 nm 附近均具有一個特征吸收峰，對應(yīng)于Od-Mo 的電荷躍遷。結(jié)果表明，所合成的化合物均具有Dawson 型多金屬氧酸鹽的結(jié)構(gòu)，其結(jié)果與參考文獻(xiàn)相符[37-38]。

表1 4 種多金屬氧酸鹽的紅外和紫外表征數(shù)據(jù)Table 1 Infrared and ultraviolet characterization data of four polyoxometalates

2.2 4 種化合物對酪氨酸酶的催化作用

2.2.1 濃度對多金屬氧酸鹽水溶液電化學(xué)響應(yīng)電流的影響 分別掃描不同濃度下的P2Mo17Ni、P2Mo17Cr、P2Mo17Co、P2Mo18的循環(huán)伏安圖，研究濃度對多金屬氧酸鹽水溶液的電化學(xué)性質(zhì)的影響，結(jié)果如圖1a～1d 所示。由圖1可以看出4 種化合物的循環(huán)伏安圖均存在3 對氧化還原峰（I-I'，IIII'，III-III'），分別對應(yīng)于2-，2-和4-電子轉(zhuǎn)移[40]。以3 mmol/L 濃度下P2Mo17Cu 的循環(huán)伏安圖為例，平均峰電位E1/2=（Epa+Epc）/2 分別是：206 mV （II'），-122 mV（II-II'），-212 mV（III-III'），對應(yīng)的氧化峰與還原峰之間的電位差（ΔEp）分別為46，49 和59 mV。計算發(fā)現(xiàn)，其它濃度下P2Mo17Cu 以及其它化合物的對應(yīng)氧化峰還原峰之間的電位差均小于60 mV，表明這4 種化合物的氧化還原過程均是可逆的。由圖1可知，隨著4 種化合物濃度的不斷增大，對應(yīng)的氧化還原峰電流逐漸增強(qiáng)，化合物濃度與其對應(yīng)的響應(yīng)峰電流之間呈現(xiàn)出良好的線性關(guān)系?；衔餄舛扔? mmol/L 變化至5 mmol/L 時，對應(yīng)循環(huán)伏安圖中多金屬氧酸鹽的特征氧化還原峰也逐漸明顯，當(dāng)化合物濃度達(dá)到5 mmol/L 時最為顯著。但考慮到高濃度下多金屬氧酸鹽水溶液體系的穩(wěn)定性欠佳的問題，因此為了保證試驗(yàn)的穩(wěn)定性和檢測靈敏度，選擇4 mmol/L作為后續(xù)試驗(yàn)的最佳濃度較為合適。

圖1 濃度對多金屬氧酸鹽水溶液電化學(xué)響應(yīng)電流的影響Fig.1 The effect of concentration on the electrochemical response current of polyoxometalates solution

2.2.2 掃速對多金屬氧酸鹽水溶液電化學(xué)響應(yīng)電流的影響 將化合物在不同掃速下的循環(huán)伏安圖疊加，研究掃速對多金屬氧酸鹽水溶液的電化學(xué)性質(zhì)的影響，結(jié)果如圖2a～2d 所示。由圖2可以看出4 種化合物在不同掃速下的循環(huán)伏安圖中均存在3 對氧化還原峰（I-I'，II-II'，III-III'），隨著掃速的不斷增大，4 種化合物的氧化還原峰電流也不斷增強(qiáng)。并且隨著掃速的不斷增大，4 種化合物的氧化峰電位均向正方向移，而對應(yīng)的還原峰電位均向負(fù)方向移，表明這4 種化合物的氧化還原過程符合可逆但非典型的氧化還原過程。由插圖可知，峰電流與掃描速度的平方根呈現(xiàn)良好的正比例關(guān)系，說明4 種化合物的氧化還原過程均為擴(kuò)散控制過程[40]。

圖2 掃速對多金屬氧酸鹽水溶液電化學(xué)響應(yīng)電流的影響Fig.2 The effect of scanning speed on electrochemical response current of polyoxometalates solution

2.2.3 4 種化合物對酪氨酸酶的催化作用 分別在不同化合物中加入不同濃度的酪氨酸酶溶液，通過掃描加入酪氨酸酶溶液的多酸化合物的循環(huán)伏安圖，從而分析化合物對酪氨酸酶的催化作用，結(jié)果如圖3a～3d 所示。由圖能夠看出，隨著酪氨酸酶濃度不斷增加，對應(yīng)循環(huán)伏安圖中氧化還原峰電流均呈現(xiàn)減弱趨勢，即4 種多金屬氧酸鹽作為既具有氧化作用又具有還原作用的雙功能催化劑，在酪氨酸酶的氧化還原過程中發(fā)揮著重要作用。由插圖可知，響應(yīng)電流與酪氨酸酶的濃度之間具有良好的線性關(guān)系，計算得到響應(yīng)電流與酪氨酸酶加入量的線性曲線分別為：I（P2Mo17Ni，II）=0.0006986c-0.2497；I（P2Mo17Cr，II'）=-0.0005002c+0.07183；I（P2Mo17Co，II）=0.0008365c-0.2758；I（P2Mo18，II）=0.0002783c-0.1906。計算出最低檢出限分別為X （S/N=3）=4.971，14.48，10.26，17.74 U/mL。結(jié)果表明，4 種多金屬氧酸鹽對酪氨酸酶均具有較好的電化學(xué)催化效果，其中P2Mo17Ni 水溶液對酪氨酸酶的催化效果是4 種化合物中最優(yōu)的，可用該化合物催化下不同濃度的酪氨酸酶的線性曲線作為標(biāo)準(zhǔn)曲線，用于檢測水產(chǎn)品中的酪氨酸酶的含量，從而實(shí)現(xiàn)對水產(chǎn)品的品質(zhì)評價。

圖3 化合物催化不同濃度酪氨酸酶溶液的循環(huán)伏安圖Fig.3 Cyclic voltammograms of compounds catalyzed by different concentrations of tyrosinase solutions

2.3 P2Mo17Ni 水溶液催化酪氨酸酶的計時安培曲線

P2Mo17Ni 溶液催化酪氨酸酶的計時安培曲線如圖4所示。從圖4可以看出，隨著酪氨酸酶溶液的加入，計時安培曲線中的響應(yīng)電流呈現(xiàn)階躍性增大趨勢，電流響應(yīng)的時間為30 s。即響應(yīng)電流隨著酪氨酸酶含量的增大而增大。由計時安培曲線可得在3.66～26.87 U/mL 范圍內(nèi)的線性曲線為I=0.00848c-1.20101，R2=0.997，最低檢出限（S/N=3）為0.4095 U/mL。

圖4 計時安培曲線Fig.4 Chronoampere curve

2.4 樣品檢測

2.4.1 P2Mo17Ni 水溶液對南美白對蝦中酪氨酸酶的檢測 通過對不同稀釋倍數(shù)的南美白對蝦樣品檢測液在相同條件下的循環(huán)伏安掃描，根據(jù)所得響應(yīng)電流可以計算出不同稀釋倍數(shù)的南美白對蝦樣品檢測液中的酪氨酸酶，結(jié)果如表2所示。不同稀釋倍數(shù)的南美白對蝦樣品檢測液中酪氨酸酶的含量分別為166.0762，32.6894，15.8246，3.0283 U/mL，其計算結(jié)果RSD 均低于5.0%。這些結(jié)果表明，P2Mo17Ni 水溶液可用于南美白對蝦中酪氨酸酶含量的檢測分析。

表2 P2Mo17Ni 溶液對南美白對蝦中酪氨酸酶的檢測結(jié)果Table 2 Test results of tyrosinase in Litopenaeus vannamei Boone with P2Mo17Ni solution

2.4.2 加標(biāo)回收試驗(yàn) 通過向相同體系中加入已知量的酪氨酸溶液，在相同條件下分別進(jìn)行循環(huán)伏安掃描，根據(jù)檢出的結(jié)果與實(shí)際酪氨酸酶的添加量計算回收率。由表3可知，采用本試驗(yàn)方法測得的3 組樣品回收率分別為98.0477%，99.5872%，98.8489%，3 組樣品的RSD 值均在合理范圍之內(nèi)（RSD＜5%），說明P2Mo17Ni 水溶液對南美白對蝦中酪氨酸酶的檢測具有良好的可靠性。

表3 加標(biāo)回收試驗(yàn)結(jié)果Table 3 Result of spike and recovery test

2.4.3 P2Mo17Ni 水溶液對酪氨酸酶的催化作用的穩(wěn)定性和選擇性 當(dāng)電極在P2Mo17Ni 水溶液中，在-0.4 V～+0.6 V 的電位范圍內(nèi)，掃速為50 mV/s的條件下掃描80 圈，其陰極電流下降不到10%。因而可以說明P2Mo17Ni 溶液在對酪氨酸酶進(jìn)行檢測的過程中具有較好的穩(wěn)定性。

用P2Mo17Ni 溶液對稀釋5 倍的南美白對蝦樣品檢測液進(jìn)行選擇性試驗(yàn)，評估了可能干擾P2Mo17Ni 溶液對酪氨酸酶的催化作用的幾種物質(zhì)。試驗(yàn)結(jié)果如圖所示。結(jié)果表明：在允許相對誤差±5.0%以內(nèi)，200 倍的葡萄糖、氯化鎂，150 倍的氯化鈉，100 倍的氯化鉀，50 倍的氯化鈣，硫酸鈉，抗壞血酸（VC），硫酸銅，硫酸亞鐵加入到含有稀釋5 倍的南美白對蝦樣品檢測液的體系中，在此體系中只檢測到硫酸亞鐵到相對微弱的氧化峰，其它物質(zhì)未檢測到峰，并且沒有影響酪氨酸酶還原峰電流的大小，所以該方法具有較好的選擇性。

圖5 不同干擾物質(zhì)對P2Mo17Ni 水溶液催化酪氨酸酶的電化學(xué)穩(wěn)定性的影響Fig.5 The influence of different interfering substances on the electrochemical stability of P2Mo17Ni aqueous solution catalyzed by tyrosinase

3 結(jié)論

本文研究了P2Mo17Ni、P2Mo17Cr、P2Mo17Co 和P2Mo184 種Dawson 型多金屬氧酸鹽，分別研究了多酸濃度、循環(huán)伏安掃速對這4 種化合物水溶液電化學(xué)響應(yīng)電流的影響，以及多金屬氧酸鹽水溶液對酪氨酸酶的催化作用。結(jié)果表明4 種化合物的氧化還原過程均屬于擴(kuò)散控制過程。根據(jù)響應(yīng)電流與酪氨酸酶加入量濃度的線性曲線，可以得到4 種化合物對酪氨酸酶的檢出限（S/N=3）分別為4.971（P2Mo17Ni）；14.48（P2Mo17Cr）；10.26（P2Mo17Co）；17.74（P2Mo18）U/mL。由檢出限分析可知，P2Mo17Ni 的檢測效果是4 種化合物中最優(yōu)的。通過計時安培曲線可知，在3.66～26.87 U/mL 范圍內(nèi)，P2Mo17Ni 對酪氨酸酶的最低檢出限（S/N=3）可至0.4095 U/mL，并且該檢測方法對酪氨酸酶具有較好的選擇性，抗干擾能力強(qiáng)，穩(wěn)定性良好。將此方法應(yīng)用于南美白對蝦中酪氨酸酶含量的檢測，回收率為98.0477%～99.5872%，表明方法的準(zhǔn)確性好，應(yīng)用前景較為可觀，有望用于食品質(zhì)量安全領(lǐng)域，建立一種新型水產(chǎn)品質(zhì)量的監(jiān)測方法。