余云志 杜梅 朱金惠 胡季芳 魯衍強 段桂芬 楊姝淼 黃靜 劉群玲

(1 大理白族自治州婦幼保健院，云南 大理 671000； 2 上海張江普匯轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)研究院)

同型半胱氨酸(Hcy)是甲硫氨酸代謝的中間產(chǎn)物，是一種非蛋白質(zhì)氨基酸。高Hcy血癥是一種以血液中Hcy升高為特征的疾病，通常指血清中Hcy濃度超過15 μmol/L。高Hcy血癥是心血管疾病、腦血管病、認(rèn)知障礙和骨質(zhì)疏松相關(guān)骨折的獨立危險因素。圍孕期女性血清中Hcy水平升高易導(dǎo)致不良妊娠以及新生兒早產(chǎn)和出生缺陷[1-3]。將血清中Hcy控制在較低水平，對孕產(chǎn)婦及新生兒的健康意義重大。引起血清中Hcy升高的因素有很多，研究顯示，不同地區(qū)和不同民族人群中Hcy基線水平存在差異。目前尚無針對大理白族自治州圍孕期女性血清中Hcy水平的調(diào)查研究。本研究通過調(diào)查大理白族自治州圍孕期女性血清中Hcy水平，并分析其臨床意義，為臨床優(yōu)生優(yōu)育提供數(shù)據(jù)參考?，F(xiàn)將結(jié)果報告如下。

1 對象與方法

1.1 受檢者

選擇2019年12月—2020年5月于大理白族自治州婦幼保健院進行圍孕期保健的健康女性750例，平均年齡(28.93±4.85)歲。受檢者納入標(biāo)準(zhǔn)：①無不良孕產(chǎn)史和妊娠合并癥；②知情并同意采集口腔黏膜細胞進行遺傳檢驗，采集靜脈血進行血清Hcy檢測。排除標(biāo)準(zhǔn)：①合并嚴(yán)重消化系統(tǒng)疾病及肝腎功能不全者；②罹患冠心病、糖尿病、甲狀腺等疾病者；③不能配合參與本研究者。將所有受檢者按照年齡不同分為≤24歲組115例，25～29歲組304例，30～34歲組256例，≥35歲組75例。根據(jù)第8版《婦產(chǎn)科學(xué)》[4]定義將受檢者分為早孕期組(0～13+6周)213例，中孕期組(14～27+6周)218例，晚孕期組(28周以后)290例以及產(chǎn)后組29例。本研究經(jīng)我院倫理委員會批準(zhǔn)。

1.2 研究方法

采集所有受檢者外周靜脈血5 mL，并于60 min內(nèi)3 000 r/min離心5 min，取上清液，留作樣本。使用西門子Dimension RxL Max生化分析儀檢測血清中Hcy濃度，試劑盒由上海速率生物科技有限公司提供，檢測方法為胱硫醚循環(huán)酶速率法。采集受檢者口腔黏膜脫落細胞，使用硅膠吸附方法提取基因組DNA，使用美國ABI公司的試劑和7900型熒光定量PCR儀檢測口腔黏膜脫落細胞中5,10-亞甲基四氫葉酸還原酶(MTHFR)基因C677T位點多態(tài)性。

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法

2 結(jié) 果

2.1 不同年齡組受檢者血清中Hcy水平比較

≤24歲組、25～29歲組、30～34歲組、≥35歲組孕婦血清中Hcy水平分別為(7.02±2.6)、(6.10±2.03)、(6.09±2.07)和(6.61±1.97)μmol/L，各組間比較差異有顯著性(F=6.57，P<0.05)。

2.2 不同孕期組受檢者血清中Hcy水平比較

早孕期組、中孕期組、晚孕期組以及產(chǎn)后組血清中Hcy水平分別為(6.54±1.95)、(5.62±2.06)、(6.42±2.19)和(8.12±2.38)μmol/L，各組間比較差異有顯著性(F=16.21，P<0.05)。

2.3 不同MTHFR C677T基因型受檢者血清中Hcy水平比較

根據(jù)檢測的MTHFR基因C677T位點多態(tài)性結(jié)果顯示，CC、CT和TT基因型頻率分布占比分別為40.27%、46.40%和13.33%。CC、CT、TT基因型的圍孕期女性血清中Hcy水平分別為(6.15±2.11)、(6.27±1.89)和(6.76±2.98)μmol/L，各組間比較差異有顯著性(F=3.04，P<0.05)。

3 討 論

血清中Hcy水平異常升高會對孕婦及胎兒產(chǎn)生諸多不良影響，包括增加復(fù)發(fā)性流產(chǎn)、子癇、妊娠期糖尿病的患病風(fēng)險，以及導(dǎo)致胎盤血管性疾病和出生缺陷的發(fā)生[5-7]。調(diào)查不同年齡組、不同孕期階段以及不同MTHFRC677T基因型的女性血清中Hcy水平，對監(jiān)測圍孕期女性健康狀況具有重要的臨床意義。

本研究結(jié)果顯示，不同年齡組的受檢者血清中Hcy水平差異有顯著性。其中≤24歲組受檢者血清中Hcy水平較高；25～34歲是主要孕齡期，在此階段機體的功能較好，這可能是25～29和30～34歲組受檢者血清中Hcy水平較低主要原因。≥35歲組受檢者血清中Hcy水平較高，推測原因可能是隨著年齡增長身體機能下降，體內(nèi)酶活性逐漸降低，新陳代謝能力減弱，從而導(dǎo)致血清中蛋氨酸代謝中間產(chǎn)物Hcy的累積。圍孕期女性在早孕期Hcy水平逐漸降低，中孕期之后逐漸升高。研究發(fā)現(xiàn)，中孕期孕婦血清中Hcy水平的降低可能與循環(huán)血容量增加、血液稀釋及雌激素水平升高有關(guān)[8-9]。MTHFR是參與葉酸代謝和Hcy代謝過程的關(guān)鍵酶[10]，而C677T則是MTHFR基因重要的多態(tài)性位點。有研究認(rèn)為血清中高Hcy水平最常見的遺傳原因可能就是該基因位點由C到T的轉(zhuǎn)換[11]，假設(shè)CC基因型編碼的MTHFR酶活性為100%，CT基因型編碼的MTHFR酶活性則為71%，而TT基因型編碼的MTHFR酶活性則只有34%[12]。因此，不同的基因型導(dǎo)致MTHFR酶的活性不同,從而影響體內(nèi)葉酸和血清中Hcy代謝水平。本研究結(jié)果提示，TT基因型受檢者血清中Hcy水平高于CC基因型，與既往研究結(jié)果一致[13-16]；大理白族自治州女性TT基因型的分布頻率為13.3%，該值低于河南開封市(41.1%)[17]、山東海陽市(36.5%)[18]，高于廣西南寧市(7.7%)[19]、廣東佛山市(5.6%)[20]等地的漢族人群檢測結(jié)果。

綜上所述，本研究探討了大理白族自治州圍孕期女性血清中Hcy水平與年齡、孕周以及MTHFR基因C677T位點多態(tài)性的相關(guān)性。因此，在圍孕期保健中應(yīng)該加強孕婦血清中Hcy水平的監(jiān)測，尤其是針對高齡和MTHFR基因C677T中TT基因型孕婦的檢測，這對于制定個體化的葉酸增補和圍孕期保健方案具有重要的臨床指導(dǎo)意義。

利益沖突聲明：所有作者聲明不存在利益沖突。

ConflictsofInterest: All authors disclose no relevant conflicts of interest.

作者貢獻：所有作者共同參與了論文的研究設(shè)計、寫作和修改。所有作者均閱讀并同意發(fā)表該論文。

Contributions：All the authors have participated in the research design, writing and revision of the manuscript.All the authors have read the last version of the paper and consented submission.