張開(kāi)志 劉宏程 梅文泉 方海仙 陳興連 耿慧春

摘 要：目的：建立蔬菜中辛硫磷農(nóng)藥殘留量的氣相色譜測(cè)定方法。方法：樣品采用乙腈提取，經(jīng)濃縮用丙酮定容，在優(yōu)化的氣相色譜條件下進(jìn)行測(cè)定。結(jié)果：標(biāo)準(zhǔn)曲線線性相關(guān)性好，相關(guān)系數(shù)r為0.999 95，添加量在0.02 mg/kg、0.10 mg/kg和0.50 mg/kg，即添加低、中、高3個(gè)水平濃度下，平均回收率為97.4%～99.9%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差0.36%～3.80%，檢出限0.01 mg/kg，定量限0.03 mg/kg。結(jié)論：該方法具有靈敏度高、分析速度快、重現(xiàn)性好等特點(diǎn)，滿足蔬菜中對(duì)辛硫磷農(nóng)藥殘留分析要求。

關(guān)鍵詞：蔬菜;辛硫磷;氣相色譜法;農(nóng)藥殘留

Determination of Phoxim Pesticide Residues in Vegetables by Gas Chromatography

ZHANG Kaizhi1， LIU Hongcheng2，3， MEI Wenquan2，3， FANG Haixian2，3， CHEN Xinglian2，3， GENG Huichun2，3

（1.Ruili Agricultural Products Quality and Safety Inspection Station of Yunnan Province， Ruili 678600， China; 2.Quality Standardizing and Testing Technology Institute， Yunnan Academy of Agricultural Science， Kunming 650223， China; 3.Supervision & Testing Center for Farm Products Quality， Ministry of Agriculture Kunming Section， Kunming 650223， China）

Abstract： objective： To establish a method for determination of phoxim pesticide residue in vegetables. Methods： The sample was extracted with actonitrile， purified with acetone， and injected into the gas chromatography for determination of phoxim. Result： Under the condition of optimum gas chromatography， the standard curve of good linear correlation obtained， and the correlation coefficient（r） was 0.999 95. At the adding lever of 0.02 mg/kg， 0.10 mg/kg and 0.50 mg/kg， the average recoveries was 97.4%～99.9%， the relative standard deviations were 0.36%～3.80%， the detection limits （LODs） of method was 0.01 mg/kg，and the quantification limits （LOQs） 0.03 mg/kg. Conclusion： This method has the? characteristics of high sensitivity， fast analysis speed and good reproducibility， and can meet the requirements for the analysis? of phoxim pesticide residue in vegetables.

Keywords： vegetable; phoxim; gas chromatography; pesticide residues

辛硫磷又稱肟硫磷、倍腈松和快殺光等，化學(xué)名稱O，O-二乙基-O-α-氰基亞芐基氨基硫逐磷酸酯，分子式C12H15N2O3PS。國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品中農(nóng)藥最大殘留限量》（GB 2763—2021）[1]規(guī)定了大蒜、普通白菜和結(jié)球甘藍(lán)中辛硫磷最大殘留限量為0.1 mg/kg，其他蔬菜中辛硫磷的最大殘留限量為0.05 mg/kg。建立高效、快速、精準(zhǔn)、靈敏度高的蔬菜中辛硫磷農(nóng)藥殘留量的氣相色譜測(cè)定方法具有重要意義。已報(bào)道的辛硫磷的測(cè)定方法主要有高效液相色譜法[2]、酶抑制法[3]、氣相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法[4]、液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法[5]等。高效液相色譜法檢測(cè)靈敏度較低;酶抑制法存在假陽(yáng)性;氣相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法、液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法，儀器價(jià)格比較昂貴，不利于在基層檢測(cè)機(jī)構(gòu)推廣。本文通過(guò)反復(fù)試驗(yàn)，優(yōu)化了氣相色譜條件，建立了蔬菜中辛硫磷農(nóng)藥殘留量的氣相色譜測(cè)定方法。

1 材料與方法

1.1 儀器與試劑

1.1.1 試劑與材料

氯化鈉，乙腈（分析純，國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司）;丙酮（色譜純，默克股份兩合公司）;0.2 μm有機(jī)相濾膜（天津市津騰實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司）;辛硫磷標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液（1 000 mg/L，國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)研究中心）。

1.1.2 儀器

Agilent 7890B氣相色譜儀，帶火焰光度檢測(cè)器（625 nm磷濾光片），自動(dòng)進(jìn)樣器，分流/不分流進(jìn)樣器（美國(guó)安捷倫公司）;JD500-2型電子天平（沈陽(yáng)龍騰電子有限公司）;飛利浦三合一攪拌機(jī)（中國(guó)珠海經(jīng)濟(jì)特區(qū)飛利浦家庭電器有限公司）;QL-861型旋渦混合器（海門(mén)市其林貝爾儀器制造有限公司）;T25型高速勻漿機(jī)（德國(guó)IKA公司）;Advantage ML型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀（德國(guó)海道爾夫）。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 試樣制備

本次試驗(yàn)所使用蔬菜樣品為番茄，樣品購(gòu)于昆明市大爾多超市，取可食部分切碎，充分混勻放入攪拌機(jī)中搗碎，制成待測(cè)樣，放入樣品盒中，于-20～-16 ℃條件下保存，備用。

1.2.2 提取

準(zhǔn)確稱取25.0 g試樣放入150 mL具塞三角瓶中，加入50.0 mL乙腈，在高速勻漿機(jī)中勻漿2 min后用濾紙過(guò)濾，濾液收集在裝有5～7 g氯化鈉的100 mL具塞量筒中，收集濾液40～50 mL，塞上蓋子，劇烈振蕩1 min，在室溫下靜置30 min，使乙腈相和水相分層。

1.2.3 凈化

從具塞量筒中吸取10.0 mL乙腈溶液，放入100 mL具塞三角瓶中，在設(shè)定加熱溫度為40 ℃的旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上蒸發(fā)近干，準(zhǔn)確加入5.0 mL丙酮混勻，用0.2 μm有機(jī)溶劑濾膜過(guò)濾后移入2 mL自動(dòng)進(jìn)樣器樣品瓶中，待測(cè)定。

1.3 氣相色譜條件

采用50%聚苯基甲基硅氧烷（DB-17）色譜柱（30 m×0.53 mm，1.0 μm）作為分離柱;檢測(cè)器溫度250 ℃;進(jìn)樣口溫度180 ℃，不分流進(jìn)樣;吹掃流量20 mL/min，吹掃時(shí)間0.75 min;柱箱溫度采用程序升溫：210 ℃保持1 min;以10 ℃/min升至250 ℃，保持5 min;燃燒氣氫氣流量80 mL/min;空氣流量120 mL/min;載氣為高純氮?dú)?，純度?9.999%;色譜柱流量15 mL/min;隔墊吹掃流量5 mL/min;尾吹氣90 mL/min。

2 結(jié)果與分析

2.1 氣相色譜條件試驗(yàn)

2.1.1 色譜柱的選擇

對(duì)測(cè)定農(nóng)藥殘留常用的3根色譜柱即100%聚甲基硅氧烷（DB-1）柱（30 m×0.53 mm，1.0 μm）、50%聚苯基甲基硅氧烷（DB-17）柱（30 m×0.53 mm，1.0 μm）和（DB-1701）柱（30 m×0.32 mm，0.1 μm）進(jìn)行比較試驗(yàn)。DB-1701柱測(cè)定辛硫磷的峰型扁平，響應(yīng)低;DB-1柱和DB-17柱峰型都好，但相同濃度標(biāo)液下DB-1柱峰高和峰面積均比DB-17柱小，因此本次試驗(yàn)采用50%聚苯基甲基硅氧烷（DB-17）柱作為分離柱。

2.1.2 柱箱初始溫度試驗(yàn)

柱溫直接影響分離效能和分析時(shí)間[6]。對(duì)不同的柱箱初始溫度進(jìn)行了試驗(yàn)，設(shè)置柱箱初始溫度為150 ℃、160 ℃、170 ℃、180 ℃、190 ℃、200 ℃、210 ℃和220 ℃，測(cè)定濃度為0.20 μg/mL辛硫磷。結(jié)果表明，柱箱初始溫度對(duì)辛硫磷峰面積影響大。當(dāng)柱箱初始溫度為210 ℃時(shí)，峰型最好，峰面積最大，因此本試驗(yàn)選擇柱箱初始溫度為210 ℃。

2.1.3 進(jìn)樣口溫度試驗(yàn)

對(duì)不同的進(jìn)樣口溫度進(jìn)行試驗(yàn)，設(shè)置進(jìn)樣口溫度為170 ℃、180 ℃、190 ℃、200 ℃和210℃，測(cè)定濃度為0.20 μg/mL辛硫磷。結(jié)果表明，進(jìn)樣口溫度180 ℃時(shí)，峰面積最大，因此本試驗(yàn)選擇進(jìn)樣口溫度為180 ℃。

2.1.4 尾吹流量試驗(yàn)

對(duì)不同的尾吹流量進(jìn)行了試驗(yàn)，設(shè)置尾吹流量30 mL/min、50 mL/min、70 mL/min、90 mL/min、110 mL/min和130 mL/min，測(cè)定濃度為0.20 μg/mL辛硫磷。結(jié)果表明，尾吹流量為90 mL/min時(shí)，峰面積最大，因此本次試驗(yàn)選擇尾吹流量為90 mL/min。

2.1.5 色譜柱流量試驗(yàn)

對(duì)不同的色譜柱流量進(jìn)行試驗(yàn)，設(shè)置色譜柱流量為10 mL/min、11 mL/min、12 mL/min、13 mL/min、14 mL/min、15 mL/min、16 mL/min和17 mL/min，測(cè)定濃度為0.20 μg/mL辛硫磷。結(jié)果表明，色譜柱流量為15 mL/min時(shí)，峰面積最大，因此本次試驗(yàn)選擇色譜柱流量為15 mL/min。

綜上所述，色譜條件中選擇柱箱初始溫度為210 ℃，進(jìn)樣口溫度為180 ℃，尾吹流量為90 mL/min，色譜柱流量為15 mL/min，辛硫磷峰型最好，峰面積最大。

2.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制

配制濃度為0.01 μg/mL、0.02 μg/mL、0.10 μg/mL、0.50 μg/mL和1.00 μg/mL的辛硫磷標(biāo)準(zhǔn)溶液，測(cè)定對(duì)應(yīng)的峰面積，以進(jìn)樣濃度為橫坐標(biāo)，峰面積為縱坐標(biāo)，作圖，得到標(biāo)準(zhǔn)曲線見(jiàn)圖1。辛硫磷標(biāo)準(zhǔn)曲線回歸方程為Y=4.04×103X-5.09，相關(guān)系數(shù)r為0.999 95。

2.3 方法檢出限、定量限和加標(biāo)回收率測(cè)定

2.3.1 方法的檢出限、定量限以3倍信噪比（S/N=3）確定方法檢出限，以10倍（S/N=10）信噪比確定方法定量限，辛硫磷的檢出限為0.01 mg/kg，定量限為0.03 mg/kg。

2.3.2 加標(biāo)回收率和相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差測(cè)定

在優(yōu)化的氣相色譜條件下，空白樣品中基線平穩(wěn)，辛硫磷保留時(shí)間4.755 min，辛硫磷色譜峰峰形尖銳，有利于高靈敏度測(cè)定樣品中的辛硫磷含量。由表1可知，在添加0.02 mg/kg、0.10 mg/kg和0.50 mg/kg，即添加低、中、高3個(gè)水平濃度下，加標(biāo)樣品回收率平均值為97.4%～99.9%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差0.36%～3.80%，符合《實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制規(guī)范 食品理化檢測(cè)》（GB/T 27404—2008）[7]的回收率和精密度要求（回收率80%～110%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差小于11%），說(shuō)明方法準(zhǔn)確度和精密度好，分析速度快，適用于測(cè)定蔬菜中辛硫磷農(nóng)藥殘留量。

3 結(jié)論

采用優(yōu)化色譜條件后的氣相色譜法測(cè)定蔬菜中辛硫磷的殘留量，在添加0.02 mg/kg、0.10 mg/kg和0.50 mg/kg，即添加低、中、高3個(gè)水平濃度下，平均回收率97.4%～99.9%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差0.36%～3.80%，符合有機(jī)磷農(nóng)藥殘留分析要求。本文建立的方法具有準(zhǔn)確度、精密度和靈敏度高、分析速度快等優(yōu)點(diǎn)，適用于蔬菜中辛硫磷農(nóng)藥殘留量的測(cè)定。

參考文獻(xiàn)

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