熊申明，任章朋，史夢婕，楊宏富

基于mTOR通路和自噬探討香菇多糖改善膿毒癥小鼠肺損傷的作用機制

熊申明1，任章朋1，史夢婕1，楊宏富2

1. 新鄉(xiāng)市中心醫(yī)院（新鄉(xiāng)醫(yī)學院第四臨床醫(yī)院）重癥醫(yī)學科一區(qū)，河南 新鄉(xiāng) 453000 2. 鄭州大學第一附屬醫(yī)院 重癥醫(yī)學科，河南 鄭州 450052

探討香菇多糖對膿毒癥肺損傷小鼠自噬的影響及作用機制。將C57BL/6小鼠分為假手術組、模型組、香菇多糖（100 mg/kg）組、哺乳動物雷帕霉素靶蛋白（mammalian target of rapamycin，mTOR）通路激活劑MHY1485（10 mg/kg）組、香菇多糖＋MHY1485組，每組15只。除假手術組外，其他組均按照盲腸結扎穿孔法構建膿毒癥模型。造模成功后，給予相對藥物進行干預，假手術組和模型組ip等體積的生理鹽水。末次給藥24 h后，檢測小鼠右肺中葉肺組織濕質(zhì)量/干質(zhì)量；ELISA法檢測小鼠肺泡灌洗液中白細胞介素-1β（interleukin-1β，IL-1β）、IL-6和腫瘤壞死因子-α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）水平；蘇木素-伊紅（HE）染色法檢測肺組織病理變化；透射電子顯微鏡（TEM）觀察肺組織中自噬小體的形成；Western blotting檢測肺組織Beclin1、微管相關蛋白1輕鏈3（microtubule-associated protein 1 light chain3，LC3）、mTOR、磷酸化mTOR（phosphorylated mTOR，p-mTOR）、p70核糖體蛋白S6激酶（p70 ribosomal protein S6 kinase，p70S6K）和磷酸化p70S6K（phosphorylated p70S6K，p-p70S6K）蛋白表達情況。與假手術組比較，模型組小鼠肺組織結構破壞，肺組織濕質(zhì)量/干質(zhì)量及肺泡灌洗液中IL-1β、IL-6、TNF-α水平和肺組織p-mTOR/mTOR、p-p70S6K/p70S6K蛋白表達水平顯著升高（＜0.05），自噬小體數(shù)量及肺組織Beclin1、LC3-II/LC3-I蛋白表達水平顯著降低（＜0.05）；與模型組比較，香菇多糖組小鼠肺組織損傷減輕，肺組織濕質(zhì)量/干質(zhì)量及肺泡灌洗液中IL-1β、IL-6、TNF-α水平和肺組織p-mTOR/mTOR、p-p70S6K/p70S6K蛋白表達水平顯著降低（＜0.05），自噬小體數(shù)量及肺組織Beclin1、LC3-II/LC3-I蛋白表達水平顯著升高（＜0.05），而MHY1485組小鼠肺組織損傷加劇，上述對應指標與香菇多糖組呈相反趨勢（＜0.05）；MHY1485可減弱香菇多糖對膿毒癥小鼠肺損傷的保護作用。香菇多糖可能通過抑制mTOR通路激活自噬來發(fā)揮對膿毒癥肺損傷小鼠的保護作用。

香菇多糖；膿毒癥；肺損傷；哺乳動物雷帕霉素靶蛋白通路；自噬

膿毒癥是臨床實踐中常見的急危重癥，肺損傷是膿毒癥患者最常見的伴隨并發(fā)癥[1]。據(jù)報道，膿毒癥引起的肺損傷涉及氧化應激、炎癥、細胞焦亡和自噬等一系列指標的變化，而自噬在肺損傷中扮演著重要的角色[2]。香菇多糖是從香菇子實體中提取的細胞壁葡聚糖，具有抗腫瘤、抗炎和免疫調(diào)節(jié)活性[3-5]。已有研究報道，香菇多糖治療膿毒癥引起的肺損傷安全且有效[6]，但其具體作用機制尚不清楚。哺乳動物雷帕霉素靶蛋白（mammalian target of rapamycin，mTOR）通路是調(diào)節(jié)自噬的關鍵通路，抑制該通路可激活自噬進而改善脂多糖誘導的大鼠腦炎癥[7]。因此，本研究基于mTOR通路探討香菇多糖對膿毒癥小鼠肺損傷的影響，旨在為膿毒癥的臨床治療提供理論依據(jù)。

1 材料

1.1 動物

SPF級雄性C57BL/6小鼠75只，8周齡，體質(zhì)量20～22 g，購自廣州銳格生物科技有限公司，許可證號SCXK（粵）2021-0059。小鼠于45%～55%濕度和12 h光/暗循環(huán)的無菌籠中，適應性喂養(yǎng)1周。動物實驗按照實驗動物護理和使用指南進行，并經(jīng)鄭州大學第一附屬醫(yī)院動物倫理委員會批準（批號2019-100802）。

1.2 藥品與試劑

香菇多糖（質(zhì)量分數(shù)≥98%，批號190825）購自上海吉至生化科技有限公司；mTOR通路激活劑MHY1485（批號190921）購自武漢純度生物科技有限公司；白細胞介素-1β（interleukin-1β，IL-1β）ELISA檢測試劑盒（批號191022）、IL-6 ELISA檢測試劑盒（批號190817）、腫瘤壞死因子-α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）ELISA檢測試劑盒（批號190711）購自南京森貝伽生物科技有限公司；兔源Beclin1抗體、微管相關蛋白1輕鏈3（microtubule-associated protein 1 light chain3，LC3）抗體、mTOR抗體、磷酸化mTOR（phosphorylated mTOR，p-mTOR）抗體、p70核糖體蛋白S6激酶（p70 ribosomal protein S6 kinase，p70S6K）抗體、磷酸化p70S6K（phosphorylated p70S6K，p-p70S6K）抗體、甘油醛-3-磷酸脫氫酶（glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase，GAPDH）抗體及HRP標記的山羊抗兔二抗均購自北京索萊寶生物科技有限公司。

1.3 儀器

YP2002型電子天平（北京巴古頓生物公司）；3-18KS型臺式高速冷凍離心機（美國Sigma公司）；DYCZ-25D型蛋白電泳儀（北京六一儀器廠）； IX53型顯微鏡（日本Olympus公司）；JEM-ARM300F型透射電子顯微鏡（TEM，北京捷歐路科貿(mào)公司）。

2 方法

2.1 膿毒癥模型的構建

隨機選取15只小鼠作為假手術組，其余小鼠均按照文獻方法[8]利用盲腸結扎穿孔法建立膿毒癥模型。小鼠ip戊巴比妥鈉（50 mg/kg）麻醉，然后沿腹部中線切開1.5～2.0 cm的切口以暴露盲腸，剝離腸系膜后，在盲腸末端的一半處用4號線結扎盲腸；用21號無菌針在結扎遠端1 cm處進行盲腸穿孔，然后進行傷口縫合；術后，以1 mL 37 ℃的生理鹽水進行液體復蘇。假手術組僅打開腹腔，游離盲腸，不結扎穿孔。觀察小鼠一般情況，當小鼠出現(xiàn)活動減少、飲水減少、萎靡不振、呼吸急促等現(xiàn)象代表膿毒癥小鼠模型構建成功。

2.2 分組及給藥

小鼠造模成功12 h后，將膿毒癥小鼠隨機分為模型組、香菇多糖（100 mg/kg）[9]組、MHY1485（10 mg/kg）[10]組、香菇多糖＋MHY1485組。各給藥組ip相應藥物（10 mL/kg），假手術組和模型組ip等體積生理鹽水，1次/d，連續(xù)7 d。

末次給藥24 h后，每組選取3只小鼠用于肺組織濕質(zhì)量/干質(zhì)量的測定，每組選取3只小鼠用于肺泡灌洗液的收集，將剩余小鼠的肺組織分為3部分，一部分用于自噬小體的觀察，一部分用于蘇木素-伊紅（HE）染色，一部分用于Western blotting實驗。

2.3 小鼠肺組織濕質(zhì)量/干質(zhì)量的測定

每組選取3只小鼠，脫頸椎處死小鼠后，完整取出肺組織，取大鼠右肺中葉，吸去表面水分，稱定濕質(zhì)量，60 ℃烘箱中烘干48 h，稱定干質(zhì)量，計算肺組織濕質(zhì)量/干質(zhì)量。

2.4 ELISA法檢測小鼠肺泡灌洗液中IL-1β、IL-6和TNF-α水平

每組選取3只小鼠，脫頸椎處死，打開胸腔，結扎右肺，在近端氣管處向小鼠左肺泡內(nèi)緩慢注入預冷的生理鹽水，然后緩慢抽出，重復4次，收集肺泡灌洗液后離心并收集上清液，按照ELISA試劑盒說明書測定上清液中IL-1β、IL-6和TNF-α水平。

2.5 HE染色檢測小鼠肺組織病理變化

將肺組織固定在4%多聚甲醛中，然后以石蠟包埋并切成5 μm的切片，將切片用蘇木精染色5 min，伊紅染色3 min；再將組織切片在梯度乙醇中脫水并用中性樹脂密封，于顯微鏡下觀察小鼠肺組織病理變化，并對炎性細胞浸潤進行評分，評分標準參照文獻方法[11]，0分表示無炎癥細胞浸潤，1分表示輕度炎性浸潤，3分表示中度炎性浸潤，5分表示重度炎性浸潤。

2.6 TEM觀察小鼠肺組織中自噬小體的形成

用戊二醛固定肺組織，經(jīng)梯度乙醇脫水后，將肺組織包埋在環(huán)氧樹脂中，用切片機將包埋的肺組織切片切成50～70 nm厚的切片，用檸檬酸鉛染色，于TEM下觀察自噬小體的形成情況。

2.7 Western blotting法檢測肺組織Beclin1、LC3、mTOR、p-mTOR、p70S6K和p-p70S6K蛋白表達

用RIPA裂解緩沖液裂解并提取肺組織總蛋白，使用BCA試劑盒測量蛋白質(zhì)量濃度，將等量的蛋白質(zhì)樣品經(jīng)電泳、轉膜、封閉后，分別加入Beclin1、LC3、mTOR、p-mTOR、p70S6K、p-p70S6K和GAPDH抗體（1∶1000），4 ℃孵育過夜，然后加入HRP標記的羊抗兔二抗，室溫孵育1 h，采用ECL化學發(fā)光試劑盒觀察蛋白顯色情況，通過Image J 軟件分析條帶灰度值。

2.8 統(tǒng)計分析

3 結果

3.1 各組小鼠肺組織濕質(zhì)量/干質(zhì)量

如表1所示，與假手術組比較，模型組小鼠肺組織濕質(zhì)量/干質(zhì)量顯著升高（＜0.05）；與模型組比較，香菇多糖組小鼠肺組織濕質(zhì)量/干質(zhì)量顯著降低（＜0.05），MHY1485組小鼠肺組織濕質(zhì)量/干質(zhì)量顯著升高（＜0.05）；與香菇多糖組比較，香菇多糖＋MHY1485組小鼠肺組織濕質(zhì)量/干質(zhì)量顯著升高（＜0.05）。

表1 各組小鼠肺組織濕質(zhì)量/干質(zhì)量比較(, n = 3)

Table 1 Comparison of wet mass/dry mass of lung tissue of mice in each group (, n = 3)

組別劑量/(mg·kg?1)濕質(zhì)量/干質(zhì)量 假手術—3.87±0.34 模型—6.95±0.67# 香菇多糖1004.56±0.42* MHY1485109.26±0.88* 香菇多糖＋MHY1485100＋106.45±0.57△

與假手術組比較：#＜0.05；與模型組比較：*＜0.05；與香菇多糖組比較：△＜0.05，下表同

#<0.05sham group;*<0.05model group;△<0.05lentinan group, same as below tables

3.2 各組小鼠肺泡灌洗液中IL-1β、IL-6和TNF-α水平

如表2所示，與假手術組比較，模型組小鼠肺泡灌洗液中炎癥因子IL-1β、IL-6和TNF-α水平顯著升高（＜0.05）；與模型組比較，香菇多糖組小鼠肺泡灌洗液中IL-1β、IL-6和TNF-α水平顯著降低（＜0.05），MHY1485組小鼠肺泡灌洗液中炎癥因子IL-1β、IL-6和TNF-α水平顯著升高（＜0.05）；與香菇多糖組比較，香菇多糖＋MHY1485組小鼠肺泡灌洗液中炎癥因子IL-1β、IL-6和TNF-α水平顯著升高（＜0.05）。

3.3 各組小鼠肺組織病理變化

如圖1所示，假手術組小鼠肺組織結構正常，與假手術組比較，模型組小鼠肺組織結構破壞，肺間質(zhì)增厚，有大量炎性細胞浸潤；與模型組比較，香菇多糖組小鼠肺組織損傷減輕，炎性細胞浸潤減少，而MHY1485組小鼠肺組織損傷加??；與香菇多糖組比較，香菇多糖＋MHY1485組小鼠的肺組織肺間質(zhì)增厚和炎性細胞浸潤加重。

表2 各組小鼠肺泡灌洗液中炎癥因子IL-1β、IL-6和TNF-α水平(, n = 3)

Table 2 Levels of inflammatory factors IL-1β, IL-6 and TNF-α in alveolar lavage fluid of mice in each group (, n = 3)

組別劑量/(mg·kg?1)IL-1β/(pg·mL?1)IL-6/(pg·mL?1)TNF-α/(ng·mL?1) 假手術—15.58±1.0811.75±1.0175.54±6.84 模型—84.45±5.27#70.63±4.52#286.54±9.84# 香菇多糖10029.92±2.11*23.34±2.07*112.27±7.58* MHY148510123.34±8.67*98.35±7.08*345.59±11.24* 香菇多糖＋MHY1485100＋1076.63±5.31△62.34±4.11△243.34±8.67△

圖1 各組小鼠肺組織HE染色結果(HE, ×200)

如表3所示，與假手術組比較，模型組小鼠肺組織炎癥評分顯著升高（＜0.05）；與模型組比較，香菇多糖組小鼠肺組織炎癥評分顯著降低（＜0.05），MHY1485組小鼠肺組織炎癥評分顯著升高（＜0.05）；與香菇多糖組比較，香菇多糖＋MHY1485組小鼠肺組織炎癥評分顯著升高（＜0.05）。

3.4 各組小鼠肺組織中自噬小體形成情況

如圖2所示，與假手術組比較，模型組小鼠肺組織中自噬小體數(shù)量顯著降低（＜0.05）；與模型組比較，香菇多糖組小鼠肺組織中自噬小體的數(shù)量顯著增加（＜0.05），MHY1485組小鼠肺組織中自噬小體的數(shù)量顯著減少（＜0.05）；與香菇多糖組比較，香菇多糖＋MHY1485組小鼠肺組織中自噬小體的數(shù)量顯著減少（＜0.05）。

表3 各組小鼠肺組織炎癥評分(, n = 3)

Table 3 Lung tissue inflammation scores of mice in each group (, n = 3)

組別劑量/(mg·kg?1)炎癥評分 假手術—0.00 模型—3.78±0.21# 香菇多糖1001.23±0.12* MHY1485104.72±0.25* 香菇多糖＋MHY1485100＋103.21±0.18△

圖2 TEM觀察各組小鼠肺組織中自噬小體的形成

3.5 各組小鼠肺組織中自噬相關蛋白Beclin1、LC3表達情況

如圖3和表4所示，與假手術組比較，模型組小鼠肺組織中Beclin1和LC3-II/LC3-I蛋白表達水平顯著降低（＜0.05）；與模型組比較，香菇多糖組小鼠肺組織中Beclin1和LC3-II/LC3-I蛋白表達水平顯著升高（＜0.05），MHY1485組小鼠肺組織中Beclin1和LC3-II/LC3-I蛋白表達水平顯著降低（＜0.05）；與香菇多糖組比較，香菇多糖＋MHY1485組小鼠肺組織中Beclin1和LC3-II/LC3-I蛋白表達水平顯著降低（＜0.05）。

圖3 各組小鼠肺組織中自噬相關蛋白Beclin1和LC3表達情況

表4 各組小鼠肺組織中自噬相關蛋白Beclin1、LC3表達情況(, n = 3)

Table 4 Comparison of expression of autophagy-related proteins Beclin1 and LC3 in lung tissue of mice in each group (, n = 3)

組別劑量/ (mg·kg?1)蛋白相對表達量 Beclin1/GAPDHLC3-II/LC3-I 假手術—0.75±0.051.15±0.12 模型—0.34±0.02#0.63±0.04# 香菇多糖1000.64±0.04*0.81±0.07* MHY1485100.12±0.01*0.30±0.02* 香菇多糖＋MHY1485100＋100.45±0.03△0.56±0.03△

3.6 各組小鼠肺組織中mTOR通路相關蛋白表達情況

如圖4和表5所示，與假手術組比較，模型組小鼠肺組織中p-mTOR/mTOR和p-p70S6K/p70S6K蛋白表達水平顯著升高（＜0.05）；與模型組比較，香菇多糖組小鼠肺組織中p-mTOR/mTOR和p-p70S6K/p70S6K蛋白表達水平顯著降低（＜0.05），MHY1485組小鼠肺組織中p-mTOR/mTOR和p-p70S6K/p70S6K蛋白表達水平顯著升高（＜0.05）；與香菇多糖組比較，香菇多糖＋MHY1485組小鼠肺組織中p-mTOR/mTOR和p-p70S6K/p70S6K蛋白表達水平顯著升高（＜0.05）。

圖4 各組小鼠肺組織中mTOR通路相關蛋白表達情況

表5 各組小鼠肺組織中mTOR通路相關蛋白表達情況 (, n = 3)

Table 5 mTOR pathway-related protein expression in lung tissues of mice in each group (, n = 3)

組別劑量/ (mg·kg?1)蛋白相對表達量 p-mTOR/mTORp-p70S6K/p70S6K 假手術—0.18±0.010.26±0.02 模型—0.75±0.06#0.94±0.07# 香菇多糖1000.34±0.03*0.46±0.04* MHY1485100.98±0.07*1.25±0.11* 香菇多糖＋MHY1485100＋100.66±0.05△0.72±0.05△

4 討論

膿毒癥是世界上最致命的疾病之一，通常會導致多器官衰竭，主要由于不受控制的炎癥反應引起。肺是膿毒癥期間最脆弱和最關鍵的器官，肺損傷是一種常見的膿毒癥誘發(fā)的炎癥性疾病[12]。本研究通過盲腸結扎穿孔法構建膿毒癥小鼠模型，結果發(fā)現(xiàn)，與假手術組比較，模型組小鼠肺組織濕質(zhì)量/干質(zhì)量以及肺泡灌洗液中炎癥因子IL-1β、IL-6、TNF-α水平顯著升高，肺組織結構破壞，肺間質(zhì)增厚，有大量炎性細胞浸潤，表明膿毒癥模型小鼠肺組織破壞嚴重，炎癥反應劇烈，肺功能異常。細胞自噬可以通過形成與溶酶體融合的雙膜自噬體來非選擇性或選擇性地清除受損的蛋白質(zhì)和細胞器[13]。Beclin-1和LC3是自噬的關鍵蛋白，Beclin-1與III類磷脂酰肌醇3-激酶相互作用以啟動自噬并參與涉及自噬體與溶酶體融合的后續(xù)步驟，LC3有LC3-I、LC3-II 2種形式，主要參與自噬體的形成[14-15]。本研究發(fā)現(xiàn)，與假手術組比較，模型組小鼠肺組織中自噬小體數(shù)量顯著降低，Beclin1和LC3-II/LC3-I蛋白表達顯著降低，表明膿毒癥模型小鼠肺組織中存在保護性自噬被抑制的現(xiàn)象。

香菇多糖是一種中藥提取物，對膿毒癥具有一定的改善作用。研究發(fā)現(xiàn)，香菇多糖對膿毒癥大鼠急性腎損傷具有一定的保護作用，其機制與抑制核因子-κB（nuclear factor-κB，NF-κB）的激活有關[16]；香菇多糖能有效改善膿毒癥引起的肺水腫，減輕肺損傷[17]；香菇多糖能有效改善膿毒癥急性腎損傷小鼠的腎功能，抑制腎組織細胞凋亡[18]。本研究發(fā)現(xiàn)，與模型組比較，香菇多糖組小鼠肺組織損傷減輕，炎性細胞浸潤減少，小鼠肺組織濕質(zhì)量/干質(zhì)量及肺泡灌洗液中炎癥因子IL-1β、IL-6、TNF-α水平顯著降低，自噬小體的數(shù)量及Beclin1和LC3-II/LC3-I蛋白表達顯著升高，表明香菇多糖可通過抑制炎癥反應，促進保護性自噬來改善膿毒癥小鼠的肺損傷。

mTOR是一種進化上保守的絲氨酸/蘇氨酸激酶，參與多種生物過程，包括細胞增殖、自噬、蛋白質(zhì)合成和代謝，抑制mTOR下游關鍵激酶p70S6K的激活可以促進自噬[19]。據(jù)報道，雷帕霉素可通過抑制mTOR和p70S6K的表達，減輕炎癥因子和氧化應激損傷，從而對脂多糖誘導的急性肺損傷發(fā)揮保護作用[20]；蛇床子素對碘海醇所致腎損傷大鼠模型具有保護作用，與其抑制mTOR/P70S6K信號通路活性，激活自噬有關[21]；雷帕霉素通過抑制mTOR/p70S6K信號通路激活自噬減輕碘克沙醇糖尿病大鼠腎損傷[22]。本研究發(fā)現(xiàn)，與假手術組比較，模型組小鼠肺組織中p-mTOR/mTOR、p-p70S6K/p70S6K蛋白表達水平顯著升高；與模型組比較，香菇多糖組小鼠肺組織中p-mTOR/mTOR、p-p70S6K/p70S6K蛋白表達水平顯著降低，推測香菇多糖可能通過抑制mTOR通路激活自噬來發(fā)揮對膿毒癥肺損傷小鼠的保護作用。為了驗證該推測，本研究利用mTOR通路激活劑MHY1485進行干預，結果發(fā)現(xiàn)，與模型組比較，MHY1485組小鼠肺組織中p-mTOR/mTOR、p-p70S6K/p70S6K蛋白表達水平顯著升高，小鼠肺組織損傷加劇，肺泡灌洗液中炎癥因子IL-1β、IL-6、TNF-α水平顯著升高，自噬小體的數(shù)量及Beclin1和LC3-II/LC3-I蛋白表達顯著降低；與香菇多糖組比較，香菇多糖＋MHY1485組小鼠對應指標與上述趨勢相同，證實香菇多糖可能通過抑制mTOR通路激活自噬來發(fā)揮對膿毒癥肺損傷小鼠的保護作用。

綜上所述，香菇多糖可能通過抑制mTOR通路激活自噬，從而發(fā)揮對膿毒癥肺損傷小鼠的保護作用。

利益沖突 所有作者均聲明不存在利益沖突

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Mechanism of lentinan on improving lung injury in septic mice based on mTOR pathway and autophagy

XIONG Shen-ming1, REN Zhang-peng1, SHI Meng-jie1, YANG Hong-fu2

1. District 1, Department of Critical Care Medicine, Xinxiang Central Hospital (The Fourth Clinical Hospital of Xinxiang Medical College), Xinxiang 453000, China 2. Department of Critical Care Medicine, The First Affiliated Hospital of Zhengzhou University, Zhengzhou 450052, China

To investigate the effect and mechanism of lentinan on autophagy in septic lung injury mice.C57BL/6 mice were divided into sham group, model group, lentinan (100 mg/kg) group, mammalian target of rapamycin (mTOR) pathway activator MHY1485 (10 mg/kg) group, lentinan + MHY1485 group, 15 rats in each group. Except for sham group, all other groups constructed sepsis models according to cecal ligation and perforation method. After the model was successfully built, the corresponding drugs were given for intervention, sham group and model group were ip same amount of normal saline. 24 h after the last administration, wet mass/dry mass of lung tissue in middle lobe of right lung of mouse was measured; ELISA method was used to detect interleukin-1β (IL-1β), (IL-6) and tumor necrosis factor-α (TNF-α) levels in alveolar lavage fluid of mice; HE staining was used to detect lung tissue pathological changes; Transmission electron microscopy (TEM) was used to observe the formation of autophagosomes in lung tissue; Western blotting was used to detect Beclin1, microtubule-associated protein 1 light chain 3 (LC3), mTOR, phosphorylated mTOR (p-mTOR), p70 ribosomal protein S6 kinase (p70S6K) and phosphorylated p70S6K (p-p70S6K) protein expression of lung tissue.Compared with sham group, lung tissue structure of mice in model group was destroyed, wet mass/dry mass of lung tissue, levels of IL-1β, IL-6 and TNF-α in alveolar lavage fluid, and protein expression levels of p-mTOR/mTOR, p-p70S6K/p70S6K in lung tissue were significantly increased (< 0.05), number of autophagosomes and Beclin1, LC3-II/LC3-I protein expressions in lung tissue were significantly decreased (< 0.05); Compared with model group, lung tissue damage of mice in lentinan group was reduced, wet mass/dry mass of lung tissue, levels of IL-1β, IL-6 and TNF-α in alveolar lavage fluid, and protein expression levels of p-mTOR/mTOR, p-p70S6K/p70S6K were significantly reduced (< 0.05); The number of autophagosomes, and Beclin1, LC3-II/LC3-I protein expression in lung tissue were significantly increased (< 0.05), while the lung tissue damage of mice in MHY1485 group was aggravated, and the corresponding indicators above showed an opposite trend to lentinan group (< 0.05); MHY1485 attenuated the protective effect of lentinan on lung injury in septic mice.Lentinan may play a protective effect on septic lung injury mice by inhibiting mTOR pathway and activating autophagy.

lentinan; sepsis; lung injury; mammalian target of rapamycin pathway; autophagy

R285.5

A

0253 - 2670(2022)07 - 2071 - 07

10.7501/j.issn.0253-2670.2022.07.016

2021-12-24

2019年河南省醫(yī)學科技攻關計劃聯(lián)合共建項目（LHGJ20190213）

熊申明（1981—），男，碩士，主治醫(yī)師，從事重癥醫(yī)學方面研究。Tel: 18336062076 E-mail: xs1981m@163.com

[責任編輯 李亞楠]