王一冰 張 盛 陳志龍 范秋麗 陳 芳 丁發(fā)源 程忠剛 蔣守群

(廣東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院動(dòng)物科學(xué)研究所，畜禽育種國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，農(nóng)業(yè)農(nóng)村部華南動(dòng)物營養(yǎng)與飼料重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，廣東省畜禽育種與營養(yǎng)研究重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，廣州510640)

維生素D3是一種家禽生長所必需的維生素，可促進(jìn)鈣、磷的吸收代謝，維持骨骼正常發(fā)育[1]。除此之外，其還參與多種生理功能。研究表明，維生素D3對(duì)動(dòng)物的生殖、繁殖有關(guān)鍵作用[2]，可參與調(diào)控脂肪代謝[3]，以及調(diào)節(jié)機(jī)體免疫功能[4]等。在肉雞上的研究表明，飼糧添加適宜水平的維生素D3可以提高肉雞的生長性能[1]，提高脛骨灰分含量，降低骨發(fā)育不良癥狀[5]，并促進(jìn)胸腺和脾臟等免疫器官的發(fā)育[6]。

母源營養(yǎng)素可通過在胚胎中的沉積轉(zhuǎn)移至子代，影響后代生長發(fā)育[7-8]。本團(tuán)隊(duì)之前的研究表明，種雞飼糧維生素A水平對(duì)后代黃羽肉雞的免疫功能和肉品質(zhì)均有顯著作用[7]。在小鼠模型上的研究表明，孕期雌鼠飼糧添加維生素D3可提高后代的體增重[9]，促進(jìn)其骨骼的發(fā)育[10]；Wang等[11]研究發(fā)現(xiàn)，對(duì)母鼠飼糧添加維生素D3可促進(jìn)后代小鼠免疫系統(tǒng)正常發(fā)育，減輕免疫疾病模型中的損傷。目前，較少有研究關(guān)注種雞飼糧添加維生素D3對(duì)后代肉雞的影響。因此，本試驗(yàn)探究了維生素D3對(duì)黃羽肉種雞生殖性狀及其后代肉雞生長性能、免疫器官發(fā)育、脛骨性狀和肉品質(zhì)的影響，旨在通過后代肉雞的生長發(fā)育情況對(duì)黃羽肉種雞的維生素D3營養(yǎng)水平提供理論指導(dǎo)，為黃羽肉種雞及其后代肉雞的健康生產(chǎn)提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)動(dòng)物及試驗(yàn)飼糧

本試驗(yàn)采用單因素隨機(jī)分組設(shè)計(jì)，選用嶺南黃羽肉種母雞(快大型，46周齡)作為試驗(yàn)雞。在正式試驗(yàn)開始前，使用未額外添加維生素D3的基礎(chǔ)飼糧對(duì)肉種雞進(jìn)行2周飼喂，以使體內(nèi)維生素D3耗竭。根據(jù)體重和產(chǎn)蛋率一致原則，將720只肉種雞分為6個(gè)組，分別飼喂在基礎(chǔ)飼糧中添加不同水平維生素D3(0、800、1 600、2 400、3 200和4 000 IU/kg)的飼糧，每組6個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)20只雞。正試期為8周。

參考NY/T 3645—2020《黃羽肉雞營養(yǎng)需要量》[12]配制基礎(chǔ)飼糧。黃羽肉種雞基礎(chǔ)飼糧組成及營養(yǎng)水平見表1。

1.2 飼養(yǎng)管理

本試驗(yàn)在廣東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院動(dòng)物科學(xué)研究所動(dòng)物營養(yǎng)與飼料研究試驗(yàn)場(chǎng)開展。試驗(yàn)種雞飼養(yǎng)于3層階梯式飼養(yǎng)籠(325 mm×450 mm×410 mm)內(nèi)，每籠2只。每天08：00向肉種雞投喂飼糧(120 g/只，顆粒料)，試驗(yàn)雞自由飲水，每周結(jié)束時(shí)稱料1次。試驗(yàn)肉種雞每天進(jìn)行16 h恒定光照，自然通風(fēng)。

1.3 種蛋的孵化與后代肉雞的飼養(yǎng)

試驗(yàn)雞飼養(yǎng)至最后2周進(jìn)行人工授精，按照種公雞與種母雞為1∶20的比例，每3天輸精1次(30 μL/只)。連續(xù)收集試驗(yàn)最后6 d的種蛋，剔除畸形蛋等不合格蛋，種蛋按照種雞分組情況分成6組進(jìn)行孵化，記錄雛雞初生體重。根據(jù)體重一致原則每組選取120只出雛后的后代肉雞開展飼養(yǎng)試驗(yàn)，每組6個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)20只雞(公母各占1/2)。

1.4 測(cè)定指標(biāo)及方法

1.4.1 肉種雞生殖性狀

試驗(yàn)結(jié)束時(shí)對(duì)肉種雞進(jìn)行稱重，每重復(fù)選取2只接近平均體重的試雞進(jìn)行屠宰取樣。摘取試雞輸卵管組織，使用電子天平(BSA423S，Sartorius，德國)與皮尺測(cè)量輸卵管的重量及長度；取出卵巢組織，從卵泡柄處剪下卵泡，使用游標(biāo)卡尺區(qū)分直徑>8 mm的黃色卵泡和直徑為6～8 mm的白色卵泡，計(jì)數(shù)并稱重；使用游標(biāo)卡尺測(cè)量直徑>8 mm的黃色卵泡的直徑；使用電子天平對(duì)卵巢基質(zhì)進(jìn)行稱重。

器官相對(duì)重量(%)=[器官重量(g)/
活重(g)]×100。

1.4.2 后代肉雞生長性能

后代肉雞飼養(yǎng)期間以重復(fù)(欄)為單位，記錄每天的采食量。在各試驗(yàn)階段試驗(yàn)結(jié)束(21、42和63日齡)前1天20：00斷料供水，于次日清晨以重復(fù)為單位稱雞空腹重、結(jié)料，用于計(jì)算各生長階段(1～21日齡、22～42日齡和43～63日齡)的平均日增重(ADG)、平均日采食量(ADFI)和料重比(F/G)。

1.4.3 后代肉雞胴體性狀

在后代肉雞21和63日齡時(shí)，每重復(fù)選取2只接近平均體重的試雞進(jìn)行屠宰取樣。分離試雞雙側(cè)腿肌、胸肌，稱重。按照以下公式計(jì)算胸肌和腿肌的相對(duì)重量：

胸肌相對(duì)重量(%)=[雙側(cè)胸肌重量(g)/
活重(g)]×100；
腿肌相對(duì)重量(%)=[雙側(cè)腿肌重量(g)/
活重(g)]×100。

1.4.4 后代肉雞免疫器官相對(duì)重量

摘取1.4.3中后代肉雞的肝臟、脾臟、胸腺與法氏囊，進(jìn)行稱重。器官相對(duì)重量計(jì)算參考1.4.1的公式。

基于虛擬電池模型的DCHP系統(tǒng)全周期功率波動(dòng)平抑策略//樊飛龍,邰能靈,范春菊,王旭東,鄭曉冬//(16):133

1.4.5 后代肉雞脛骨性狀

上述進(jìn)行屠宰取樣的后代肉雞，剝離右側(cè)脛骨，用紙巾拭干、水分，稱鮮重；使用游標(biāo)卡尺測(cè)量脛骨長度；使用無彈性細(xì)線繞脛骨中段3圈，測(cè)量細(xì)線長度并計(jì)算脛骨圍度；脛骨樣品用鉗子夾碎，根據(jù)《飼料中粗灰分的測(cè)定》(GB/T 6438—2007)[14]中的方法，測(cè)量右側(cè)脛骨粗灰分含量。

脛骨粗灰分含量(%)=(粗灰分重量/
脛骨干重)×100。

1.4.6 后代肉雞肉品質(zhì)

上述63日齡屠宰試雞，取2側(cè)胸肌，測(cè)定肉品質(zhì)相關(guān)指標(biāo)，測(cè)定方法和操作步驟參考文獻(xiàn)[7]。

1.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析

采用SPSS 17.0軟件對(duì)試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行單因素方差分析，并對(duì)顯著差異的處理進(jìn)行后續(xù)Duncan氏法多重比較，使用多項(xiàng)式擬合回歸分析對(duì)飼糧中維生素D3水平的線性和二次效應(yīng)進(jìn)行評(píng)價(jià)。統(tǒng)計(jì)顯著性水平為P<0.05，試驗(yàn)結(jié)果數(shù)據(jù)用平均值和均值標(biāo)準(zhǔn)誤(SEM)表示。

2 結(jié)果與分析

2.1 飼糧維生素D3對(duì)黃羽肉種雞生殖性狀的影響

由表2可知，飼糧維生素D3添加水平顯著影響黃羽肉種雞的輸卵管長度以及輸卵管和卵巢基質(zhì)相對(duì)重量(P<0.05)，對(duì)卵泡數(shù)量及相對(duì)重量無顯著影響(P>0.05)。飼糧維生素D3添加水平對(duì)輸卵管長度的影響呈二次變化(P<0.05)，當(dāng)飼糧添加1 600 IU/kg維生素D3時(shí)，肉種雞輸卵管長度最長，且顯著高于飼糧添加0、3 200和4 000 IU/kg維生素D3時(shí)(P<0.05)。飼糧維生素D3添加水平對(duì)輸卵管相對(duì)重量的影響呈線性和二次變化(P<0.05)，當(dāng)飼糧添加1 600、3 200和4 000 IU/kg維生素D3時(shí)，肉種雞輸卵管相對(duì)重量顯著高于未添加維生素D3時(shí)(P<0.05)。飼糧維生素D3添加水平對(duì)卵巢基質(zhì)相對(duì)重量的影響呈線性變化(P<0.05)，當(dāng)飼糧添加4 000 IU/kg維生素D3時(shí)，肉種雞卵巢基質(zhì)相對(duì)重量顯著高于其他各添加水平(P<0.05)。

表2 飼糧維生素D3對(duì)黃羽肉種雞生殖性狀的影響

2.2 種雞飼糧維生素D3對(duì)后代黃羽肉雞生長性能的影響

由表4可知，種雞飼糧維生素D3添加水平并未顯著影響后代肉雞出生初重(P<0.05)，但對(duì)后代肉雞1～21日齡的末重、ADG和F/G均有顯著影響(P<0.05)，且呈二次變化(P<0.05)。當(dāng)種雞飼糧添加4 000 IU/kg維生素D3時(shí)，后代肉雞1～21日齡末重和ADG顯著低于其他各添加水平(P<0.05)，F(xiàn)/G顯著高于添加1 600、2 400和3 200 IU/kg維生素D3時(shí)(P<0.05)。種雞飼糧維生素D3添加水平對(duì)后代肉雞21～42日齡和43～63日齡生長性能無顯著影響(P>0.05)。

表3 種雞飼糧維生素D3對(duì)后代黃羽肉雞生長性能的影響

續(xù)表3項(xiàng)目 Items維生素D3添加水平 Vitamin D3 supplemental levels/(IU/kg)08001 6002 4003 2004 000SEMP值 P-value處理 Treatment線性 Linear二次 Quadratic平均日采食量 ADFI/g38.8638.7438.7537.8237.6437.740.610.6040.0630.173料重比 F/G1.82ab1.77abc1.76bc1.73c1.70c1.86a0.040.0340.9450.01222～42日齡 22 to 42 days of age末重 Final weight/g1 583.121 603.871 560.111 578.271 612.501 624.7023.270.7520.2870.513平均日增重 ADG/g52.0152.3550.2351.1952.6755.031.120.2410.1110.072平均日采食量 ADFI/g102.40102.69100.85100.79104.76104.371.620.5590.3410.550料重比 F/G1.971.962.011.971.991.900.030.1580.1790.07643～63日齡 43 to 63 days of age末重 Final weight/g2 427.202 465.692 415.022 434.702 466.742 536.3119.400.3220.0790.142平均日增重 ADG/g40.1941.0440.7140.7840.6843.410.860.1100.0380.057平均日采食量 ADFI/g158.31153.31150.02150.96154.08156.012.740.3280.7050.059料重比 F/G3.953.743.693.703.793.600.080.0850.0160.086

2.3 種雞飼糧維生素D3對(duì)后代黃羽肉雞胴體性狀的影響

由表4可知，種雞飼糧維生素D3添加水平對(duì)后代黃羽肉雞21和63日齡腿肌和胸肌相對(duì)重量無顯著影響(P>0.05)。

表4 種雞飼糧維生素D3對(duì)后代黃羽肉雞胴體性狀的影響

2.4 種雞飼糧維生素D3對(duì)后代黃羽肉雞免疫器官相對(duì)重量的影響

由表5可知，種雞飼糧維生素D3添加水平顯著影響后代肉雞1日齡肝臟和脾臟相對(duì)重量(P<0.05)，且呈二次變化(P<0.05)；顯著影響后代肉雞21日齡胸腺相對(duì)重量(P<0.05)，且呈二次變化(P<0.05)；并有影響后代肉雞63日齡脾臟相對(duì)重量的趨勢(shì)(P=0.058)，且呈二次變化(P<0.05)。當(dāng)種雞飼糧添加2 400 IU/kg維生素D3時(shí)，后代肉雞1日齡肝臟相對(duì)重量顯著高于其他各添加水平(P<0.05)；當(dāng)種雞飼糧添加800 IU/kg維生素D3時(shí)，后代肉雞1日齡脾臟相對(duì)重量顯著高于添加0、3 200和4 000 IU/kg維生素D3時(shí)(P<0.05)；當(dāng)種雞飼糧添加4 000 IU/kg維生素D3時(shí)，后代肉雞21日齡胸腺相對(duì)重量顯著低于其他各添加水平(P<0.05)。

表5 種雞飼糧維生素D3對(duì)后代黃羽肉雞免疫器官相對(duì)重量的影響

2.5 種雞飼糧維生素D3對(duì)后代黃羽肉雞脛骨性狀的影響

由表6可知，種雞飼糧維生素D3添加水平顯著影響后代肉雞1日齡脛骨長度和圍度(P<0.05)，且分別呈二次和線性變化(P<0.05)；顯著影響后代肉雞21日齡脛骨重量、長度、圍度和粗灰分含量(P<0.05)，且呈二次和線性變化(P<0.05)。當(dāng)種雞飼糧添加800 IU/kg維生素D3時(shí)，后代肉雞1日齡脛骨圍度顯著高于其他各添加水平(P<0.05)，1日齡脛骨長度顯著高于添加0、3 200和4 000 IU/kg維生素D3時(shí)(P<0.05)。當(dāng)種雞飼糧添加4 000 IU/kg 維生素D3時(shí)，后代肉雞21日齡脛骨重量、長度和圍度均顯著低于其他各添加水平(P<0.05)；當(dāng)種雞飼糧添加800～2 400 IU/kg維生素D3時(shí)，后代肉雞21日齡脛骨粗灰分含量顯著高于添加3 200和4 000 IU/kg維生素D3時(shí)(P<0.05)。種雞飼糧維生素D3添加水平對(duì)后代肉雞63日齡脛骨性狀無顯著影響(P>0.05)。

表6 種雞飼糧維生素D3對(duì)后代黃羽肉雞脛骨性狀的影響

續(xù)表6項(xiàng)目 Items維生素D3添加水平 Vitamin D3 supplemental levels/(IU/kg)08001 6002 4003 2004 000SEMP值 P-value處理 Treatment線性 Linear二次 Quadratic長度 Length/cm72.56a72.34a72.71a72.51a72.58a70.53b0.420.0040.0120.001圍度 Perimeter/mm1.94a1.98a1.93a1.91a1.96a1.84b0.030.0390.0280.037粗灰分 Ash/%39.74ab40.20a39.97a40.21a38.95bc38.38c0.430.0020.0020.00163日齡 63 days of age重量 Weight/g25.4923.2924.4121.8623.8523.401.430.7140.3920.486長度 Length/cm127.03128.44129.59128.73130.21129.081.580.8620.3140.469圍度 Perimeter/mm3.063.113.153.103.093.140.080.9840.6730.891粗灰分 Ash/%43.6843.7143.2041.9242.0743.412.400.3620.1330.113

2.6 種雞飼糧維生素D3對(duì)后代黃羽肉雞肉品質(zhì)的影響

由表7可知，種雞飼糧維生素D3添加水平顯著影響后代肉雞63日齡宰后24 h的胸肌肉色黃度(b*)值、亮度(L*)值和pH(P<0.05)。當(dāng)種雞飼糧添加800和1 600 IU/kg維生素D3時(shí)，后代肉雞宰后24 h胸肌pH顯著高于添加0和4 000 IU/kg維生素D3時(shí)(P<0.05)；當(dāng)飼糧添加4 000 IU/kg維生素D3時(shí)，后代肉雞宰后24 h胸肌L*值顯著高于添加1 600 IU/kg維生素D3時(shí)(P<0.05)；當(dāng)種雞飼糧添加2 400和4 000 IU/kg維生素D3時(shí)，后代肉雞宰后24 h胸肌b*值顯著高于添加0和3 200 IU/kg維生素D3時(shí)(P<0.05)。

表7 種雞飼糧維生素D3對(duì)后代黃羽肉雞肉品質(zhì)的影響

2.7 基于二次曲線回歸分析種雞飼糧維生素D3最適添加水平

分別以種雞輸卵管長度及相對(duì)重量，1日齡后代肉雞肝臟和脾臟相對(duì)重量、脛骨長度，1～21日齡后代肉雞末重、ADG和F/G，21日齡后代肉雞胸腺相對(duì)重量以及脛骨重量、長度、圍度和粗灰分含量，63日齡后代肉雞宰后24 h胸肌pH作為評(píng)價(jià)指標(biāo)，根據(jù)種雞維生素D3添加水平變化做二次曲線擬合分析，結(jié)果如表8所示。以種雞輸卵管長度及相對(duì)重量為評(píng)價(jià)指標(biāo)，黃羽肉種雞飼糧維生素D3最適添加水平分別為2 623和3 791 IU/kg；以1日齡后代肉雞肝臟和脾臟相對(duì)重量、脛骨長度為評(píng)價(jià)指標(biāo)，黃羽肉種雞飼糧維生素D3最適添加水平分別為2 036、1 531和1 902 IU/kg；以1～21日齡后代肉雞末重、ADG和F/G為評(píng)價(jià)指標(biāo)，黃羽肉種雞飼糧維生素D3最適添加水平分別為1 727、1 745和2 014 IU/kg；以21日齡后代肉雞胸腺相對(duì)重量以及脛骨重量、長度、圍度和粗灰分含量為評(píng)價(jià)指標(biāo)，黃羽肉種雞飼糧維生素D3最適添加水平分別為1 719、1 574、1 405、1 017和1 232 IU/kg；以63日齡后代肉雞宰后24 h胸肌pH為評(píng)價(jià)指標(biāo)，黃羽肉種雞飼糧維生素D3最適添加水平為1 707 IU/kg。

表8 基于二次曲線回歸分析種雞飼糧維生素D3最適添加水平

3 討 論

3.1 飼糧維生素D3對(duì)黃羽肉種雞生殖性狀的影響

維生素D3參與多種生理功能。維生素D受體(VDR)在雄性睪丸、精子和雌性卵巢、子宮等生殖器官、細(xì)胞中廣泛表達(dá)[15]，對(duì)人類和動(dòng)物的生殖途徑起著關(guān)鍵作用[2]。研究表明，維生素D3缺乏造成雄性大鼠睪丸結(jié)構(gòu)損傷，各生殖細(xì)胞數(shù)下降，精細(xì)胞的濃度、形態(tài)和運(yùn)動(dòng)能力均受到影響，這些變化可能與血清中生殖激素如睪酮和促性腺激素水平降低有關(guān)[16]；董洪俊[17]報(bào)道，飼糧維生素D3可通過上調(diào)精子細(xì)胞色素P450 24A亞家族多肽1(CYP24A1)和VDR的基因表達(dá)水平，促進(jìn)血漿睪酮等分泌，改善精液品質(zhì)。關(guān)于飼糧維生素D3對(duì)雌性畜禽中生殖性狀的研究較少，本試驗(yàn)中，飼糧維生素D3添加水平對(duì)黃羽肉種雞的輸卵管長度、輸卵管與卵巢基質(zhì)的相對(duì)重量有顯著影響，當(dāng)飼糧添加1 600 IU/kg維生素D3時(shí)，種雞輸卵管長度與相對(duì)重量顯著提高。這可能與維生素D3影響雌性生殖激素的分泌有關(guān)，研究表明，維生素D3可以上調(diào)卵泡刺激素(FSH)反應(yīng)性，抑制抗苗勒管激素(AMH，卵泡轉(zhuǎn)化的負(fù)調(diào)節(jié)因子)分泌，從而參與調(diào)控一系列生殖過程[18]。值得注意的是，本試驗(yàn)中，飼糧維生素D3添加水平對(duì)肉種雞輸卵管的影響呈二次變化，意味著過高的添加水平會(huì)損害輸卵管性狀，這與Gorelova等[2]的研究結(jié)果一致，該研究表明維生素D3水平過高對(duì)卵母細(xì)胞的發(fā)育產(chǎn)生不利影響。

3.2 種雞飼糧維生素D3對(duì)后代黃羽肉雞生長性能的影響

作為機(jī)體必不可缺的維生素，維生素D3對(duì)肉雞的生長具有促進(jìn)作用。Jiang等[1]和施傳信等[19]的研究表明，適宜水平的維生素D3可以提高快大型黃羽肉雞和羅斯(Ross)308肉雞的ADG和ADFI。母源營養(yǎng)素可以通過在胚胎中的沉積轉(zhuǎn)移至子代，影響后代生長發(fā)育[7]。醫(yī)學(xué)研究證明，維生素D3影響生命早期的生長發(fā)育，孕婦缺乏維生素D3會(huì)導(dǎo)致新生兒體重較低[20]；黃利華等[9]研究表明，孕期雌鼠補(bǔ)充維生素D3可促進(jìn)后代小鼠的生長；飼糧缺乏維生素D3的孕雌鼠其胚胎中多種生長因子(血管內(nèi)皮生長因子-α、胎盤生長因子和胰島素樣生長因子-2)和營養(yǎng)轉(zhuǎn)運(yùn)泵(葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1、鈉偶聯(lián)中性氨基酸轉(zhuǎn)運(yùn)體2和脂肪酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白4)表達(dá)下調(diào)，這可能是種雞飼糧維生素D3影響后代生長發(fā)育的作用機(jī)理[21]。關(guān)于種雞飼糧維生素D3對(duì)后代肉雞生長性能的作用研究較少。Driver等[22]研究發(fā)現(xiàn)，種雞飼糧缺乏維生素D3導(dǎo)致Ross肉雞后代雛雞ADG和ADFI下降。本試驗(yàn)結(jié)果表明，種雞飼糧維生素D3添加水平對(duì)后代肉雞1～21日齡末重、ADG和F/G均有顯著影響。另外，本試驗(yàn)中，種雞飼糧維生素D3添加水平對(duì)后代肉雞21～42日齡和43～63日齡生長性能無顯著影響，后代肉雞第63日齡末重也無顯著差異。這與本課題組先前關(guān)于維生素A的研究結(jié)果[7]相似，該研究表明，種雞營養(yǎng)素水平引起的黃羽肉雞后代雞生長性能差異可以通過后代飼糧營養(yǎng)素的補(bǔ)充來消除；彭煥偉[23]對(duì)青腳麻雞的研究也發(fā)現(xiàn)，種雞維生素營養(yǎng)的直接效應(yīng)發(fā)生在1～21日齡階段。

3.3 種雞飼糧維生素D3對(duì)后代黃羽肉雞免疫器官的影響

免疫細(xì)胞表達(dá)1-α羥化酶和VDR，所以維生素D3還是一種重要的免疫調(diào)節(jié)劑[24]，在調(diào)節(jié)機(jī)體免疫功能和增強(qiáng)傳染病抗性方面具有重要意義[4]。研究表明，飼糧維生素D3顯著影響5～8周齡愛拔益加(AA)肉雞的胸腺和脾臟指數(shù)[6]，顯著影響1～6周齡絲毛烏骨雞脾臟和法氏囊的相對(duì)重量[25]。作為雞的免疫器官，在正常情況下肝臟、胸腺、脾臟和法氏囊的相對(duì)重量代表著免疫器官的發(fā)育狀況[26]，以上研究說明飼糧維生素D3對(duì)肉雞的免疫功能有著重要影響。此前未有研究關(guān)注種雞飼糧維生素D3對(duì)后代肉雞免疫器官的作用。本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，種雞飼糧維生素D3添加水平顯著影響后代肉雞1日齡肝臟和脾臟相對(duì)重量以及21日齡胸腺相對(duì)重量。在仔鼠模型中，孕期補(bǔ)充維生素D3可以提高后代仔鼠血清中免疫球蛋白A含量，提高CD4+/CD8+T淋巴細(xì)胞比例，增強(qiáng)子代的細(xì)胞免疫[27]。母源維生素D3對(duì)后代免疫功能的調(diào)節(jié)作用與VDR有密切關(guān)系，該受體在免疫細(xì)胞生長分化和免疫調(diào)節(jié)等方面起重要作用。王志會(huì)等[28]研究證明，補(bǔ)充母源維生素D3可以增強(qiáng)仔鼠胸腺中VDR蛋白表達(dá)量；在雙酚A誘導(dǎo)母鼠造成的仔鼠免疫疾病模型中，對(duì)母鼠補(bǔ)充維生素D3可以通過調(diào)節(jié)VDR依賴的轉(zhuǎn)錄因子和細(xì)胞因子來減輕免疫系統(tǒng)副作用，促進(jìn)后代免疫系統(tǒng)正常發(fā)育[11]。值得注意的是，本研究中，當(dāng)種雞飼糧添加4 000 IU/kg維生素D3時(shí)，后代肉雞21日齡胸腺相對(duì)重量顯著低于其他各添加水平；同樣地，陳凌燕等[29]報(bào)道，過量補(bǔ)充母源維生素D3可能加重哮喘模型仔鼠的肺部炎癥浸潤等氣道炎癥反應(yīng)。以上結(jié)果提示，母源補(bǔ)充營養(yǎng)素應(yīng)注意優(yōu)化劑量選擇。

3.4 種雞飼糧維生素D3對(duì)后代黃羽肉雞脛骨性狀的影響

維生素D3對(duì)家禽來說最基本的功能是促進(jìn)腸道對(duì)鈣、磷的吸收代謝，從而促進(jìn)骨骼正常發(fā)育[30-31]。本試驗(yàn)結(jié)果表明，種雞飼糧維生素D3添加水平顯著影響后代肉雞1日齡脛骨長度和圍度以及21日齡脛骨重量、長度、圍度和粗灰分含量。這與先前的研究結(jié)果[5,22]一致，適宜水平的種雞飼糧維生素D3可以提高Ross肉雞后代雛雞脛骨灰分含量，降低鈣佝僂病發(fā)生率及脛骨軟骨發(fā)育不良的發(fā)病率和程度。對(duì)上述作用機(jī)理進(jìn)行分析，母源維生素D3缺乏會(huì)影響后代血鈣含量，從而影響后代骨骼骨化，這與母體VDR基因多態(tài)性和后代VDR基因及蛋白的表達(dá)有關(guān)[32]。在仔鼠上的研究表明，母源維生素D3缺乏可導(dǎo)致后代股骨中VDR基因表達(dá)水平下降[33-34]，從而下調(diào)靶基因如骨形態(tài)發(fā)生蛋白-2、核結(jié)合因子α1(編碼成骨細(xì)胞特異性轉(zhuǎn)錄因子)和骨基質(zhì)酸性蛋白1等的水平[10]，影響后代骨骼的發(fā)育。另外，維生素D3能直接作用于成骨細(xì)胞、破骨細(xì)胞和軟骨細(xì)胞，通過調(diào)節(jié)其增殖分化直接參與到骨形成和骨吸收過程中[35]。李賽慧[36]報(bào)道，維生素D3可以直接于雞胚原代成骨細(xì)胞，促進(jìn)其增殖與分化，這可能從另一方面解釋了種雞飼糧維生素D3對(duì)后代肉雞骨骼發(fā)育的作用機(jī)制，即維生素D3通過胚胎沉積，作用于后代胚胎成骨相關(guān)細(xì)胞，從而發(fā)揮調(diào)控骨骼生長發(fā)育的作用。

3.5 種雞飼糧維生素D3對(duì)后代黃羽肉雞肉品質(zhì)的影響

研究表明，飼糧添加維生素D3對(duì)雞肉[1]、豬肉[37]和牛肉[38]的肉品質(zhì)均具有改善作用。在本試驗(yàn)中，種雞飼糧維生素D3添加水平對(duì)后代肉雞63日齡宰后24 h胸肌L*值和pH有顯著影響。同樣地，Wilborn等[37]和Wiegand等[39]研究發(fā)現(xiàn)飼糧中添加維生素D3可以降低育肥豬腰背肌肉的L*值，改善肉色。維生素D3改善肉品質(zhì)可能通過以下2種作用機(jī)理：1)適宜的維生素D3可以減少肌肉中丙二醛含量，提高抗氧化酶的活性，提高機(jī)體抗氧化能力，從而改善肉色[38,40]；2)此前研究表明，種雞飼糧添加維生素D3可以提高黃羽肉雞后代肉雞血漿中鈣的含量[13]，而肌肉中游離鈣的增加可間接增強(qiáng)肌肉鈣依賴性蛋白酶的活性，從而影響肌肉纖維的形態(tài)結(jié)構(gòu)[38]，進(jìn)而影響肉品質(zhì)。

綜上所述，VDR廣泛存在于在肉雞多種器官中，無論在調(diào)控種雞生殖性狀，還是后代肉雞的免疫系統(tǒng)、脛骨性狀方面都發(fā)揮著巨大作用。而種雞飼糧維生素D3是否以及如何調(diào)控VDR，以及作用于下游靶蛋白進(jìn)而影響后代肉雞性狀的機(jī)理仍需深入研究。

4 結(jié) 論

種雞飼糧維生素D3添加水平顯著影響黃羽肉種雞生殖性狀以及后代肉雞的生長性能(生長初期)、免疫器官發(fā)育、脛骨性狀和肉品質(zhì)。綜合試驗(yàn)觀測(cè)與回歸分析，種雞飼糧添加1 600～2 000 IU/kg維生素D3后代肉雞即可獲得較優(yōu)的生長性能，但若要獲得黃羽肉種雞最優(yōu)生殖性狀，飼糧維生素D3添加水平需為2 600～3 800 IU/kg。