許曉輝，蔡衛(wèi)衛(wèi)，劉 超，段智慧

(鄭州大學(xué)附屬洛陽(yáng)中心醫(yī)院，河南 洛陽(yáng) 471000)

流行病學(xué)數(shù)據(jù)顯示，有30% 急性腦梗死(acute cerebral infarction,ACI)由頸動(dòng)脈病變引起，且斑塊的易損性較狹窄程度更易引起缺血事件的發(fā)生[1]。斑塊破裂或粥樣硬化斑塊不穩(wěn)定均會(huì)阻塞血管腔，減少動(dòng)脈血流量，引發(fā)ACI[2]。纖維帽主要由細(xì)胞外基質(zhì)(extracellular matrix,ECM)及血管平滑肌細(xì)胞組成，炎癥反應(yīng)、內(nèi)皮細(xì)胞遷移、細(xì)胞外基質(zhì)降解均導(dǎo)致纖維帽變薄，甚至斑塊破裂。基質(zhì)金屬蛋白酶(matrix metalloproteinase,MMP)可降解、再塑造ECM。斑塊局部合成MMPs亦會(huì)致纖維帽變薄，增加脆性，降低穩(wěn)定性[3]。C1q/TNF相關(guān)蛋白3(C1q/TNF—relatedprotein 3,CTRP3)有正性作用，在改善血管內(nèi)皮功能、保護(hù)心肌、調(diào)節(jié)代謝方面有重要作用，且CTRP3還可抑制血管重塑、血栓形成[4，5]。已有研究分析MMP2、MMP9與ACI患者動(dòng)脈粥樣硬化有關(guān)，但較少探討MMP2、MMP12、CTRP3聯(lián)合檢測(cè)與ACI患者動(dòng)脈粥樣硬化的關(guān)系。本研究分析MMP-12、MMP-2、CTRP3在ACI及不同性質(zhì)斑塊中的表達(dá)情況，探討MMPs因子及脂肪因子在影響易損斑塊發(fā)生、發(fā)展的可能機(jī)制。

1 資料與方法

1.1 一般資料2018年3月至2021年3月我院收治的120例ACI患者(觀察組)，納入標(biāo)準(zhǔn)：①診斷為ACI[6]；②既往無(wú)心腦血管疾病史；③腦部CTA證實(shí)存在頸內(nèi)動(dòng)脈粥樣硬化性狹窄。排除標(biāo)準(zhǔn)：房顫、出血性腦血管疾病導(dǎo)致的頸動(dòng)脈狹窄。另選取同期64例健康體檢者為對(duì)照組，兩組一般資料比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，見(jiàn)表1。

表1 兩組一般資料比較

1.2 方法

1.2.1血清學(xué)指標(biāo)檢測(cè) 采集受試者入院24 h內(nèi)治療前血標(biāo)本，采用ELISA法檢測(cè)MMP-2、12及CTRP3水平。

1.2.2不同梗死程度患者血清指標(biāo)比較 采用日本日立公司提供的SSD-α10彩色多普勒超聲診斷儀探查頸動(dòng)脈詳情，計(jì)算腦梗死體積[7]。并應(yīng)用神經(jīng)功能缺損評(píng)分(neurological deficit,NDF)評(píng)估腦梗死嚴(yán)重程度：0～15分為輕度，16～30分為中度，31～45分為重度[8]，比較不同梗死程度患者M(jìn)MP-12、MMP-2、CTRP3水平。

1.2.3不同斑塊性質(zhì)患者血清指標(biāo)比較 采用上述彩色多普勒超聲診斷儀評(píng)估斑塊性質(zhì)：易損斑塊：頸部血管超聲(carotid artery ultrasound,CDU)檢查顯示存在大片低回聲，且伴或不伴斑塊形態(tài)不規(guī)則或纖維帽不完整、斑塊內(nèi)出血、斑塊內(nèi)見(jiàn)血流信號(hào)；穩(wěn)定斑塊：CDU檢查顯示斑塊呈中等均質(zhì)回聲，斑塊纖維帽完整、形態(tài)規(guī)則或斑塊呈均質(zhì)強(qiáng)回聲或中等回聲[9]。比較不同斑塊性質(zhì)患者M(jìn)MP-2、12及CTRP3水平。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法采用SPSS 20.0軟件處理數(shù)據(jù)。計(jì)數(shù)資料比較采用χ2檢驗(yàn)；計(jì)量資料比較采用t檢驗(yàn)或F檢驗(yàn)及LSD-t檢驗(yàn)；采用ROC曲線評(píng)價(jià)MMP-12、MMP-2、CTRP3在ACI患者頸動(dòng)脈粥樣斑塊中的預(yù)測(cè)價(jià)值；采用Pearson相關(guān)性分析MMP-12、MMP-2、CTRP3與梗死程度及易損斑塊相關(guān)性。P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組MMP-12、MMP-2及CTRP3水平比較觀察組MMP-12、MMP-2均高于對(duì)照組，CTRP3低于對(duì)照組(P<0.05)，見(jiàn)表2。

表2 觀察組與對(duì)照組MMP-12、MMP-2及CTRP3水平比較

2.2 不同梗死程度患者M(jìn)MP-12、MMP-2及CTRP3水平比較重度患者M(jìn)MP-12、MMP-2>中度>輕度患者，CTRP3<中度<輕度患者(P<0.05)，見(jiàn)表3。

表3 不同梗死程度MMP-12、MMP-2及CTRP3水平比較

2.3 MMP-12、MMP-2及CTRP3與梗死程度相關(guān)性分析MMP-12、MMP-2與梗死程度呈正相關(guān)(r分別為0.354，0.367，均P<0.05)，CTRP3與梗死程度呈負(fù)相關(guān)(r=-0.411，P<0.05)。

2.4 不同斑塊性質(zhì)患者M(jìn)MP-12、MMP-2及CTRP3水平比較易損斑塊患者M(jìn)MP-12、MMP-2水平>穩(wěn)定斑塊>無(wú)斑塊患者，CTRP3<穩(wěn)定斑塊<無(wú)斑塊患者(P<0.05)，見(jiàn)表4。

表4 不同斑塊性質(zhì)患者M(jìn)MP-12、MMP-2及CTRP3水平比較

2.5 MMP-12、MMP-2及CTRP3與斑塊性質(zhì)相關(guān)性分析MMP-12、MMP-2與斑塊性質(zhì)呈正相關(guān)(r分別為0.361，0.353，均P<0.05)，CTRP3與斑塊性質(zhì)呈負(fù)相關(guān)(r=-0.379，P<0.05)。

2.6 MMP-12、MMP-2及CTRP3在頸動(dòng)脈粥樣斑塊穩(wěn)定中的預(yù)測(cè)價(jià)值以易損斑塊為對(duì)照，MMP-12、MMP-2、CTRP3在頸動(dòng)脈粥樣斑塊穩(wěn)定中具有一定預(yù)測(cè)價(jià)值，見(jiàn)圖1、表5。

圖1 MMP-12、MMP-2及CTRP3在頸動(dòng)脈粥樣斑塊穩(wěn)定中預(yù)測(cè)價(jià)值的ROC曲線

表5 MMP-12、MMP-2及CTRP3在頸動(dòng)脈粥樣斑塊穩(wěn)定中的預(yù)測(cè)價(jià)值

3 討論

動(dòng)脈粥樣硬化病理過(guò)程復(fù)雜，穩(wěn)定粥樣硬化斑塊在臨床上無(wú)明顯癥狀，穩(wěn)定斑塊中有豐富的平滑肌細(xì)胞及細(xì)胞外基質(zhì)，易損斑塊中富含巨噬細(xì)胞及泡沫細(xì)胞，且細(xì)胞外基質(zhì)可促進(jìn)病變斑塊與纖維帽分離，纖維帽破裂后，會(huì)誘導(dǎo)血栓形成，管腔中血栓還可阻塞動(dòng)脈，若分離為小碎片進(jìn)入血液循環(huán)中，堵塞下游誘發(fā)血管栓塞[10]。且部分粥樣硬化患者還可發(fā)展為動(dòng)脈狹窄，隨著斑塊逐漸增大，至血管狹窄至80%以上時(shí)則會(huì)導(dǎo)致局部缺血，是嚴(yán)重的公共衛(wèi)生問(wèn)題[11,12]，因此加強(qiáng)對(duì)腦梗死患者頸部動(dòng)脈粥樣斑塊發(fā)展的監(jiān)測(cè)是臨床研究重點(diǎn)。

本研究發(fā)現(xiàn)ACI 患者M(jìn)MP-2顯著高于健康者，且隨著梗死嚴(yán)重程度發(fā)展，MMP-2逐漸升高，提示MMP-2參與腦梗死疾病的發(fā)展，可反映梗死嚴(yán)重程度。另外易損斑塊、穩(wěn)定斑塊、無(wú)斑塊者M(jìn)MP-2比較差異顯著，且斑塊者M(jìn)MP-2明顯升高，其水平的升高可能會(huì)促進(jìn)斑塊不穩(wěn)定性的發(fā)展，分析可能是因?yàn)槊髂z酶MMP-2經(jīng)血管內(nèi)皮細(xì)胞、單核巨噬細(xì)胞、中性粒細(xì)胞合成，可降解細(xì)胞核密度、增大內(nèi)膜面積、細(xì)胞外基質(zhì)成分等方式為提供空間支持斑塊發(fā)展，而若此過(guò)程無(wú)法阻止，則會(huì)誘發(fā)斑塊破裂[13]。且MMP-2的高表達(dá)為斑塊發(fā)展提供條件，促進(jìn)破裂[14]。

已有研究提出，間質(zhì)溶解素MMP-12經(jīng)巨噬細(xì)胞分泌，可降解多種基質(zhì)蛋白[15]，MMP-12最早是在肺部巨噬細(xì)胞中被發(fā)現(xiàn)，常應(yīng)用在呼吸系統(tǒng)疾病研究中，較少應(yīng)用于心血管方面。本研究發(fā)現(xiàn)ACI患者M(jìn)MP-12高于健康者，重度患者M(jìn)MP-12、MMP-2高于中度及輕度患者，經(jīng)Pearson相關(guān)性分析發(fā)現(xiàn)，MMP-12、MMP-2與梗死程度呈正相關(guān)，提示隨著梗死嚴(yán)重程度的發(fā)展，患者M(jìn)MP-12逐漸升高，提示MMP-12參與腦梗死的發(fā)生、發(fā)展，猜測(cè)與疾病嚴(yán)重程度密切相關(guān)。分析可能是因?yàn)镸MP-12的表達(dá)，會(huì)促進(jìn)巨噬細(xì)胞浸潤(rùn)，加速斑塊破裂。另易損斑塊者M(jìn)MP-12顯著高于穩(wěn)定斑塊及無(wú)斑塊者，且經(jīng)Pearson相關(guān)性分析發(fā)現(xiàn)，MMP-12、MMP-2與斑塊性質(zhì)呈正相關(guān)，提示隨著斑塊的發(fā)展，MMP-12水平呈現(xiàn)逐漸升高趨勢(shì)，分析MMP-12可增強(qiáng)單核細(xì)胞的組織遷移能力，通過(guò)巨噬細(xì)胞的生成，破壞和重塑血管，增強(qiáng)斑塊不穩(wěn)定性，還可促進(jìn)巨噬細(xì)胞發(fā)生浸潤(rùn)、遷徙，形成惡性循環(huán)，加快粥樣硬化斑塊的破裂[16]。

CTRP3為新型脂肪細(xì)胞因子，具有心腦血管保護(hù)作用[17]。本研究發(fā)現(xiàn)ACI患者CTRP3明顯低于健康者，重度患者CTRP3明顯低于中度及輕度患者，且CTRP3與梗死程度呈負(fù)相關(guān)，猜測(cè)CTRP3參與腦梗死的發(fā)展，且與疾病的嚴(yán)重程度有一定關(guān)系，分析CTRP3可激活PI3K/AKT/eNOS信號(hào)通路抑制ox-LDL誘導(dǎo)的內(nèi)皮功能障礙及主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞炎癥，加快形成動(dòng)脈粥樣硬化[18]。本研究還發(fā)現(xiàn)易損斑塊患者CTRP3低于穩(wěn)定斑塊及無(wú)斑塊者，且CTRP3與斑塊性質(zhì)呈負(fù)相關(guān)，提示隨著斑塊的發(fā)展，CTRP3呈降低趨勢(shì)，分析可能是因?yàn)镃TRP3可促進(jìn)PPARγLXRα-ABCA1/ABCG1、TLR4-NF-kB信號(hào)通路參與巨噬細(xì)胞及抗炎細(xì)胞的轉(zhuǎn)換，表達(dá)下調(diào)可降低抗炎活性，促進(jìn)斑塊發(fā)展、破裂[19,20]。另外，本研究中經(jīng)ROC曲線分析發(fā)現(xiàn)，治療前MMP-12、MMP-2、CTRP3在穩(wěn)定斑塊中具有一定預(yù)測(cè)價(jià)值，提示臨床可通過(guò)監(jiān)測(cè)以上指標(biāo)變化情況，對(duì)斑塊變化進(jìn)行有效預(yù)測(cè)，為改善預(yù)后提供客觀價(jià)值。

綜上所述，MMP-12、MMP-2、CTRP3在ACI中疾病嚴(yán)重程度及頸動(dòng)脈粥樣硬化斑塊診斷中具有指導(dǎo)意義。