馮 磊，唐圣松，劉 芳，戴長庚，邢濟(jì)春，李鴻波*

(1.貴州大學(xué)昆蟲研究所，貴陽 550025；2. 貴州省農(nóng)業(yè)科學(xué)院植物保護(hù)研究所，貴陽 550006；3. 安順學(xué)院農(nóng)學(xué)院，貴州安順 561000)

草地貪夜蛾Spodopterafrugiperda與粘蟲Mythimnaseparata屬鱗翅目夜蛾科，均是典型的遠(yuǎn)距離遷飛性昆蟲。兩者具有食性雜、分布廣和繁殖能力強(qiáng)的特點(diǎn)，決定了其是我國農(nóng)作物上的重要害蟲(姜玉英等，2014；郭井菲等，2019)。草地貪夜蛾又名秋粘蟲，原產(chǎn)于美洲熱帶和亞熱帶地區(qū)，自2018年12月入侵我國云南以來(陳輝等，2020)，已在26個省(市、區(qū))1 518縣(區(qū))發(fā)現(xiàn)草地貪夜蛾，其為害面積為65.53×104hm2，其中玉米為害面積占比達(dá)98.6%(姜玉英等，2019；王磊和陸永躍，2020)。目前，草地貪夜蛾已在我國華南和西南地區(qū)成功定殖，并在冬季玉米種植區(qū)周年繁殖為害(邱良妙等，2020；齊國君等，2020；姜玉英等，2021)，因此該害蟲將是我國玉米上的常發(fā)性害蟲。粘蟲又名行軍蟲，在我國為害歷史悠久，除新疆外其它省份均有分布，每年有4～5次大范圍遷飛為害。近年來，隨著全球氣候變暖和耕作制度的改變，農(nóng)田生態(tài)系統(tǒng)已發(fā)生變化，粘蟲在我國玉米主要生產(chǎn)區(qū)爆發(fā)成災(zāi)(江幸福等，2014；姜玉英等，2014)。例如，僅2019-2020年粘蟲在我國的發(fā)生面積就高達(dá)近900萬hm2，且在北方和西南部分地區(qū)出現(xiàn)高密度集中為害，造成了嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失(姜玉英等，2019；2020)。我們前期調(diào)查發(fā)現(xiàn)，兩種害蟲在田間常?；旌习l(fā)生且為害部位相同，二者的復(fù)合為害給玉米產(chǎn)量造成嚴(yán)重的損失。因此，如何有效控制草地貪夜蛾和粘蟲的為害已成為當(dāng)前玉米安全生產(chǎn)的首要任務(wù)。

目前，化學(xué)防治仍然是防治草地貪夜蛾和粘蟲的主要手段。然而，多項(xiàng)研究表明這兩種害蟲對多種化學(xué)農(nóng)藥均產(chǎn)生了抗性。例如，研究表明入侵我國的草地貪夜蛾種群攜帶有機(jī)磷和氨基甲酸酯類殺蟲劑的抗性基因(李妍等，2020；Guanetal., 2020；Zhangetal., 2020)，且已對甲維鹽和氯蟲苯甲酰胺產(chǎn)生了不同程度的抗藥性(蘇湘寧等，2020)。粘蟲對有機(jī)磷類、擬除蟲菊酯類和酰胺類殺蟲劑也產(chǎn)生了不同水平的抗藥性(董杰等，2014；Zhaoetal., 2018)。因此，為延緩抗性產(chǎn)生和減少化學(xué)殺蟲劑使用，生產(chǎn)上急需發(fā)展控制草地貪夜蛾和粘蟲的新策略。

生物殺蟲劑具有安全無污染、與環(huán)境高度相容和不易產(chǎn)生抗性的優(yōu)點(diǎn)，是當(dāng)前防治害蟲的重要手段之一。目前，國內(nèi)外已有關(guān)于生物殺蟲劑防治草地貪夜蛾和粘蟲的相關(guān)報道(Batemanetal., 2018；Sharmaetal., 2018；龍育堂等，2019；林素坤等，2020；張海波等，2020)，但這些生物殺蟲劑是否同時對兩種害蟲有效還不清楚。為此，本研究評價了7種新型生物殺蟲劑對兩種害蟲的室內(nèi)毒力和田間防治效果，以期篩選出高效生物殺蟲劑，為同時控制兩種害蟲提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1供試蟲源

草地貪夜蛾室內(nèi)種群由2019年采自貴州省農(nóng)業(yè)科學(xué)院玉米試驗(yàn)田(26°50′55.57″N，106°66′66.49″E)的幼蟲建立，粘蟲室內(nèi)種群于2014年采自貴州省黔西縣素樸鎮(zhèn)(27°01′39.72″N，106°20′2.92″E)玉米試驗(yàn)田的幼蟲建立。在室內(nèi)分別參照李鴻波等(2018)和Zhaoetal.(2020)的方法采用人工飼料進(jìn)行飼養(yǎng)，飼養(yǎng)條件為：溫度25℃±1℃、相對濕度70%～80%，光周期16 L ∶8 D。選取發(fā)育一致的2齡幼蟲作為毒力測定試蟲。

1.1.2供試生物殺蟲劑

7種生物殺蟲劑均購自農(nóng)資市場，具體名稱，含量及生產(chǎn)廠家見表1，田間使用劑量為商品推薦使用劑量。

表1 生物殺蟲劑信息

1.2 方法

1.2.17種生物殺蟲劑對草地貪夜蛾和粘蟲的室內(nèi)毒力測定

采用飼料藥膜法進(jìn)行毒力測定(吳益東等，2019)。具體如下：在24孔培養(yǎng)板中，每孔分別加入冷卻至60℃的人工飼料900 μL，置于室溫下自然固化。將測試藥劑原藥以丙酮配置成母液，將母液用水稀釋成5～7個濃度梯度，以清水為對照。在每孔人工飼料表面加入100 μL藥劑溶液后置于室溫下晾干。在24孔培養(yǎng)板中每孔接入1頭2齡幼蟲。每個濃度處理48頭。接蟲后的培養(yǎng)板用兩層黑色棉布覆蓋后再蓋上培養(yǎng)板蓋以防止試蟲逃逸，置于25℃±1℃，相對濕度為70%～80%，光周期為16L ∶8D的條件中飼養(yǎng)。每隔24 h檢查存活情況，以小毛筆輕觸蟲體不能協(xié)調(diào)爬行為死亡，對照死亡率控制在5%以下。根據(jù)預(yù)備試驗(yàn)，多殺霉素于接蟲后24 h計算其LC50，其它藥劑于接蟲后72 h計算其LC50。

1.2.27種生物殺蟲劑對草地貪夜蛾和粘蟲的田間防效評價

試驗(yàn)地點(diǎn)1：草地貪夜蛾田間試驗(yàn)在貴州省農(nóng)業(yè)科學(xué)院內(nèi)的玉米田進(jìn)行(26°50′55.57″N，106°66′66.49″E)，試驗(yàn)地為黃壤，肥力中等。種植玉米品種為金玉818(貴州省金農(nóng)科技有限公司提供)，株距25 cm，行距50 cm，肥水管理按照農(nóng)民習(xí)慣進(jìn)行。

施藥器械：背負(fù)式電動噴霧器(型號：3WBD-18B，臺州市路橋區(qū)嘉能植保機(jī)械廠公司)，購自當(dāng)?shù)剞r(nóng)資市場。

試驗(yàn)時間及方法：試驗(yàn)于2020年6月18-25日進(jìn)行，玉米生育期為苗期。試驗(yàn)設(shè)置7個處理，并以清水為對照，每個處理重復(fù)3次，共計24個小區(qū)，每個小區(qū)的面積為30 m2(長×寬： 5 m×6 m)，并隨機(jī)排列。采用二次稀釋法將供試殺蟲劑按表1的稀釋倍數(shù)進(jìn)行稀釋，并按450 kg/hm2藥液量進(jìn)行莖葉均勻噴霧。施藥時間為6月18日早上10點(diǎn)，施藥時天氣為陰天，氣溫為25℃，風(fēng)力小于3級。于藥前1 d和藥后3 d和7 d，采用五點(diǎn)取樣法調(diào)查，每個點(diǎn)選擇10株，共計50株有蟲的玉米植株進(jìn)行標(biāo)記，調(diào)查每株玉米上的幼蟲數(shù)，并按下列公式分別計算蟲口減退率和防效：

試驗(yàn)地點(diǎn)2：由于試驗(yàn)地點(diǎn)1的粘蟲蟲口密度較低，達(dá)不到試驗(yàn)要求，故其田間試驗(yàn)在畢節(jié)市黔西縣觀音洞鎮(zhèn)黃泥村(27°01′39.72″N，106°20′2.92″E)進(jìn)行。施藥時間為2020年6月20日，試驗(yàn)地玉米品種為盛農(nóng)3號(貴州畢節(jié)盛農(nóng)科技有限責(zé)任公司提供)，調(diào)查方法同上。

1.3 數(shù)據(jù)分析

采用生物測定中的Prohibit分析計算致死中濃度(LC50)及95%置信區(qū)間，斜率及標(biāo)準(zhǔn)誤；采用單因素分析法分析不同殺蟲劑防效的差異顯著性，并采用Duncan新復(fù)極差法進(jìn)行多重比較；采用T-test分析同種殺蟲劑處理下兩種害蟲防效的差異顯著性，顯著性水平為P<0.05。所有統(tǒng)計過程在DPS17.0和Excel中完成。

2 結(jié)果與分析

2.1 7種生物殺蟲劑對草地貪夜蛾與粘蟲的室內(nèi)毒力比較

藥后24 h，多殺霉素對草地貪夜蛾和粘蟲均具有較好的抑制作用，其中多殺霉素對粘蟲的毒力較高，LC50為0.0006 μg/mL，而對草地貪夜蛾的毒力相對較低，LC50分別為0.0080 μg/mL。藥后72 h，甘藍(lán)夜蛾NPV和短穩(wěn)桿菌對粘蟲的毒力高于草地貪夜蛾，其中甘藍(lán)夜蛾NPV對粘蟲的LC50為5.71×103PIB/mL，對草地貪夜蛾的LC50為8.75×104PIB/mL；短穩(wěn)桿菌對粘蟲的LC50為4.63×107cfu/mL，對草地貪夜蛾的LC50為3.00×108cfu/mL；金龜子綠僵菌對兩種害蟲的毒力則剛好相反，即金龜子綠僵菌對草地貪夜蛾的毒力高于粘蟲，其對兩種害蟲的LC50分別為1.10×106cfu/mL和1.40×108cfu/mL；Bt-1和Bt-2對兩種害蟲的毒力相當(dāng)，其LC50在167.80～195.97 IU/mL之間，而Bt-3對草地貪夜蛾的毒力高于粘蟲，其LC50分別為40.46 IU/mL和158.57 IU/mL(表2)。

表2 7種生物殺蟲劑對草地貪夜蛾與粘蟲2齡幼蟲的室內(nèi)毒力測定

2.2 7種生物殺蟲劑對草地貪夜蛾與粘蟲的田間防效

藥后3 d，7種生物殺蟲劑對田間草地貪夜蛾的防效在44.79%～97.22%之間，其中20億PIB/mL甘藍(lán)夜蛾NPV SC、100億cfu/mL短穩(wěn)桿菌SC、20%多殺霉素SC和3種32 000 IU/mg Bt WP的防效均大于75%且無顯著差異，但都顯著高于80億cfu/mL金龜子綠僵菌OF的防效(44.79%)。7種殺蟲劑對田間粘蟲的防效在1.15%～91.85%之間，其中20%多殺霉素SC的防效最高(91.85%)，其次為20億PIB/mL甘藍(lán)夜蛾NPV SC(80.58%)，而100億cfu/mL短穩(wěn)桿菌SC的防效最低(1.15%)。T-test分析表明，同種藥劑處理100億cfu/mL短穩(wěn)桿菌SC、20%多殺霉素SC、32 000 IU/mg Bt-1 WP和32 000 IU/mg Bt-2 WP對草地貪夜蛾的防效分別顯著高于對粘蟲的防效(表3)。

藥后7 d，7種生物殺蟲劑對田間草地貪夜蛾的防效在16.55%～98.11%之間，其中多殺霉素防效最高(98.11%)，其次為20億PIB/mL甘藍(lán)夜蛾NPV SC(88.63%)，而80億cfu/mL金龜子綠僵菌OF防效最低(16.55%)。7種殺蟲劑對田間粘蟲的防效在46.24%～96.74%之間，以20%多殺霉素SC的防效最高(96.74%)，20億PIB/mL甘藍(lán)夜蛾NPV SC次之(93.53%)，100億cfu/mL短穩(wěn)桿菌SC的防效最低(46.24%)。T-test分析表明，同種藥劑處理下，7種生物殺蟲劑對草地貪夜蛾和粘蟲的防效差異不顯著(表3)。

表3 7種生物殺蟲劑對草地貪夜蛾與粘蟲的田間防效

續(xù)表3 Continued table 3

3 結(jié)論與討論

由于我國的草地貪夜蛾與粘蟲對部分化學(xué)殺蟲劑已產(chǎn)生不同程度的抗性(董杰等，2014；Zhaoetal., 2018；蘇湘寧等，2020)，因此生物殺蟲劑將在延緩抗性和減少化學(xué)殺蟲劑用量方面發(fā)揮重要作用(趙勝園等，2019)。同時這兩種害蟲在田間混合發(fā)生且為害部位相同，因此田間防控時往往需要同時考慮對兩種害蟲的防控效果。為此，本研究評價了7種生物殺蟲劑對草地貪夜蛾和粘蟲的室內(nèi)毒力和田間防控效果。室內(nèi)毒力測定發(fā)現(xiàn)，甘藍(lán)夜蛾NPV、多殺霉素和短穩(wěn)桿菌對粘蟲的LC50低于草地貪夜蛾的LC50，說明這兩種殺蟲劑對粘蟲的毒力高于草地貪夜蛾；然而，金龜子綠僵菌對草地貪夜蛾的LC50低于粘蟲的LC50，說明該殺蟲劑對草地貪夜蛾毒力高于粘蟲；3種Bt對兩種害蟲的毒力存在差異，其中Bt-1和Bt-2對草地貪夜蛾和粘蟲的LC50十分接近，而Bt-3對草地貪夜蛾的LC50則低于粘蟲的LC50，說明Bt-1和Bt-2對兩種害蟲毒力相當(dāng)，而Bt-3對草地貪夜蛾的毒力高于粘蟲，這可能與不同Bt菌株產(chǎn)生的殺蟲蛋白種類、數(shù)量、表達(dá)量有關(guān)(劉華梅等，2019)。

田間試驗(yàn)結(jié)果表明，多殺霉素對草地貪夜蛾和粘蟲藥后3 d和7 d的防效均大于90%，而趙勝園等(2019)的研究發(fā)現(xiàn)藥后3 d和7 d的防效均在75%以下，導(dǎo)致差異的原因可能與殺蟲劑的生產(chǎn)廠家、使用劑量、試驗(yàn)時蟲齡的大小、試驗(yàn)地點(diǎn)及氣候等因素有關(guān)。甘藍(lán)夜蛾NPV是近年來登記的一種廣譜病毒殺蟲劑，生產(chǎn)上主要用于防治鱗翅目害蟲(鄭靜君等，2016)，本研究結(jié)果表明，藥后3 d甘藍(lán)夜蛾NPV對草地貪夜蛾和粘蟲的防效分別為85.57%和80.58%，藥后7 d甘藍(lán)夜蛾NPV對草地貪夜蛾和粘蟲的防效分別為88.63%和93.53%，與已有的研究結(jié)果基本一致(占軍平等，2020；張海波等，2020)，表明該殺蟲劑對鱗翅目特別是夜蛾科幼蟲具有較強(qiáng)的殺蟲活性。因此，當(dāng)田間兩種害蟲混合發(fā)生且蟲齡較大時，可選擇多殺霉素和甘藍(lán)夜蛾NPV進(jìn)行應(yīng)急防治。Bt作為一種革蘭氏陽性昆蟲病原菌，因?qū)Σ溉閯游锏确前袠?biāo)生物安全，已被美國和巴西等國廣泛用于防治草地貪夜蛾等害蟲(Sanahujaetal., 2011)。本研究中，3種Bt對草地貪夜蛾藥后7 d防效在62.01%～88.47%之間，對粘蟲的防效則在66.43%～80.05%之間，表明其對兩種害蟲均有較好的防效，同時這一結(jié)果與已報道的結(jié)果基本一致(趙勝園等，2019；劉華梅等，2019)。金龜子綠僵菌是最近登記防治草地貪夜蛾的微生物殺蟲劑。本研究發(fā)現(xiàn)藥后7 d金龜子綠僵菌對草地貪夜蛾的防效為16.55%，而對粘蟲的防效為61.56%，前者低于林璐璐等(2020)的結(jié)果，而后者則與已有的報道相符(龍育堂等，2019)。短穩(wěn)桿菌此前主要用于防治十字花科蔬菜和水稻上的鱗翅目幼蟲(孫劍華等，2018；郭梅燕等，2020)，本研究發(fā)現(xiàn)該殺蟲劑藥后7 d對兩種害蟲的防效分別為64.37%和46.24%，表明其防效相對較低，可作為低密度種群的預(yù)防性控制藥劑。

總體而言，多殺霉素和甘藍(lán)夜蛾NPV對草地貪夜蛾和粘蟲的速效性較好，可以作為同時防治兩種害蟲的應(yīng)急藥劑，而3種Bt和短穩(wěn)桿菌對兩種害蟲的防效相對較低，建議在兩種害蟲種群密度較低且蟲齡較小時使用。