施清蓉 寧長秀

1.江西省宜春市第二人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，江西宜春 336000；2.江西省撫州市第一人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，江西撫州 344000

目前臨床上觀察患者凝血功能的指標(biāo)包括凝血酶原時(shí)間（prothrombin time，PT）、活化部分凝血活酶時(shí)間（activeated partial thromboplasting time，APTT）、凝血酶時(shí)間（thrombin time，TT）、纖維蛋白原（fipinogen，F(xiàn)IB）等，監(jiān)測上述指標(biāo)的變化有助于評(píng)估患者具體病情[1-2]。實(shí)際檢驗(yàn)過程中，對(duì)于高脂血的標(biāo)本，由于受到大量三酰甘油的影響，對(duì)于生化、凝血指標(biāo)的檢測容易受到干擾，降低了檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性[3-4]。相關(guān)研究顯示溶血、高脂血癥、高膽紅素血癥等均是影響監(jiān)測結(jié)果的重要因素[5]。因此對(duì)于這一類標(biāo)本，探討更為精確的檢測方法具有重要的臨床意義。美國實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)協(xié)會(huì)推薦采用高速離心法能夠去除脂質(zhì)對(duì)檢測結(jié)果的影響[6-7]。本研究對(duì)高脂血癥患者標(biāo)本進(jìn)行高速離心，并檢測其凝血指標(biāo)，以探討降低高脂血對(duì)凝血指標(biāo)檢測影響的有效方案。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2020年7月至2021年7月宜春市第二人民醫(yī)院收治的85 例患者作為研究對(duì)象，按照患者有無高脂血癥將其分為觀察組（43 例）和對(duì)照組（42例），觀察組中，男23 例，女20 例；年齡23～38 歲，平均（29.15±5.29）歲。對(duì)照組中，男25 例，女17 例；年齡25～40 歲，平均（30.05±6.57）歲。兩組患者的一般資料比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性。本研究經(jīng)醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，所有患者及家屬均知情同意。納入標(biāo)準(zhǔn)：①年齡≥18 歲；②患者凝血功能正常；③精神狀態(tài)正常，能順利配合治療。排除標(biāo)準(zhǔn)：①重癥感染者；②晚期惡性腫瘤患者；③近期口服調(diào)血脂藥物；④合并血液系統(tǒng)疾病。

1.2 使用儀器

湘儀H1650-W 高速離心機(jī)；中佳SC-3616 低速離心機(jī)；貝克曼AU-5800 型生化檢測儀；日本希斯美康生產(chǎn)的CA-2000i 型全自動(dòng)血凝儀；德國西門子公司生產(chǎn)的相應(yīng)試劑（對(duì)應(yīng)批號(hào)APTT：547173；PT：545519；TT：42826；FIB：538064；OV 緩沖液：547026）。所有儀器及標(biāo)本在檢測前均經(jīng)質(zhì)控中心檢查通過（質(zhì)檢批號(hào)：107913N/P）。

1.3 檢測方法

將所有標(biāo)本采集完畢后進(jìn)行離心，使用3000 r/min的離心機(jī)將所得標(biāo)本進(jìn)行離心，離心時(shí)間為15 min，離心半徑為15.5 cm，以消除標(biāo)本中的血小板成分對(duì)檢測結(jié)果的影響，可見觀察組患者采集血清呈混濁乳白色，對(duì)照組患者采集血清呈清亮色。使用全自動(dòng)血凝儀檢測兩組患者標(biāo)本APTT、PT、TT、FIB 值，隨后將剩余血清置于三支1.5 ml 離心管中，分別將標(biāo)本置于16000 r/min 的高速離心機(jī)（18 516×g）內(nèi)高速離心10、20、30 min，離心半徑為15.5 cm，此時(shí)上層為所得懸浮脂質(zhì)，下層為清亮血清液，去除上層脂質(zhì)用吸管提取下層所得標(biāo)本，使用CA-2000i 型全自動(dòng)血凝儀測定相應(yīng)的APTT、PT、TT、FIB 值。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

使用SPSS 26.0 統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計(jì)量資料采用計(jì)數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，組間比較采用t 檢驗(yàn)，多組間比較采用單因素方差分析，組間兩兩比較采用SNK 檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料用率表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)，以P＜0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

對(duì)照組患者離心10、20、30 min 的APTT、PT、TT、FIB 水平比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。觀察組患者 離 心10、20、30 min 的APTT、PT、TT、FIB 水平比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。組內(nèi)比較，觀察組患者離心20、30 min APTT、PT、TT、FIB 水平低于本組離心10 min，觀察組患者離心30 min APTT、PT、TT、FIB水平低于離心20 min，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 （P＜0.05）。組間比較，觀察組患者標(biāo)本經(jīng)離心10、20 min APTT、PT、TT、FIB 水平高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），兩組患者間離心30 min APTT、PT、TT、FIB 水平比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）（表1）。

表1 兩組標(biāo)本經(jīng)高速離心后不同時(shí)間點(diǎn)APTT、PT、TT、FIB 值的比較（±s）

表1 兩組標(biāo)本經(jīng)高速離心后不同時(shí)間點(diǎn)APTT、PT、TT、FIB 值的比較（±s）

注 與本組離心10 min 比較，aP＜0.05；與本組離心20 min 比較，bP＜0.05；APTT：活化部分凝血酶原時(shí)間；PT：凝血酶原時(shí)間；TT：凝血酶時(shí)間；FIB：纖維蛋白原

組別 APTT（s） PT（s） TT（s） FIB（g/L）觀察組（n=43）離心10 min離心20 min離心30 min F 值P 值對(duì)照組（n=42）離心10 min離心20 min離心30 min F 值P 值29.87±2.54 28.02±2.19a 26.41±1.82ab 8.326 0.001 15.89±1.85 13.87±1.64a 12.33±2.03ab 5.364 0.018 21.69±2.54 19.55±2.09a 18.06±2.23ab 6.714 0.006 5.06±1.59 4.55±1.47a 3.25±0.79ab 5.604 0.016 t 離心10 min 組間比較值P 離心10 min 組間比較值t 離心20 min 組間比較值P 離心20 min 組間比較值t 離心30 min 組間比較值P 離心30 min 組間比較值27.34±2.05 26.58±2.14 26.14±1.98 1.457 0.163 4.506 0.002 3.854 0.008 1.014 0.102 12.84±2.06 12.25±1.98 12.57±2.13 1.534 0.154 5.617＜0.001 4.204 0.005 0.854 0.118 18.09±2.31 17.54±1.98 17.95±2.16 1.097 0.206 4.819 0.001 3.519 0.009 0.637 0.167 3.24±0.64 3.09±0.59 3.14±0.72 1.605 0.194 6.219＜0.001 4.529 0.005 0.941 0.129

3 討論

凝血項(xiàng)目檢測是臨床上常用的檢查項(xiàng)目，根據(jù)此檢測結(jié)果有助于臨床醫(yī)師評(píng)估患者病情的變化及手術(shù)指征，同時(shí)能夠指導(dǎo)臨床決策。然而目前臨床上干擾凝血項(xiàng)目檢測結(jié)果的因素較多，其中高血脂是最常見的干擾因素，影響檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性[8-9]。近年來隨著人們生活水平的提高，臨床上高脂血癥的發(fā)病率逐年增加，其不僅影響患者生化檢測結(jié)果，同時(shí)影響生化指標(biāo)。為了降低高血脂對(duì)于生化、血脂等指標(biāo)的影響，據(jù)報(bào)道目前常用的方法包括去脂劑、高速離心法、去離子水稀釋法和乙醚萃取法等[10-11]。本研究使用高速離心法對(duì)重度高脂血癥患者血清標(biāo)本及正常體檢組標(biāo)本分別進(jìn)行離心10、20、30 min，并采用全自動(dòng)血凝儀檢測患者APTT、PT、TT、FIB 指標(biāo)。

關(guān)于重度高脂血癥對(duì)于凝血指標(biāo)檢測的干擾，分析原因?yàn)槿詣?dòng)血凝儀的檢測是以光學(xué)比濁法為原理，而透光度降低的水平為判斷的標(biāo)準(zhǔn)，因此普通的光學(xué)系統(tǒng)檢測會(huì)受到黃疸、高血脂及溶血血漿等因素的干擾；高血脂會(huì)導(dǎo)致吸光強(qiáng)度出現(xiàn)變化，繼而使得散射光及透光度出現(xiàn)異常變化；對(duì)于高血脂標(biāo)本影響凝血功能的檢測結(jié)果是因?yàn)槲舛仍黾邮沟醚笜?biāo)的檢測結(jié)果增加；脂血對(duì)血漿內(nèi)血凝因子的包裹使血凝試劑不能與血漿內(nèi)凝血因子充分發(fā)生反應(yīng)，只能檢測出多數(shù)脂肪的吸光度，而全自動(dòng)血凝儀分析是以雙磁路磁珠法為檢測原理，突破了標(biāo)本外觀的干擾[12-13]。本研究結(jié)果顯示，對(duì)照組患者標(biāo)本經(jīng)高速離心機(jī)離心10、20、30 min 后，三個(gè)時(shí)間點(diǎn)APTT、PT、TT、FIB 水平比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），提示對(duì)于常規(guī)標(biāo)本凝血指標(biāo)的檢測不會(huì)受到影響。

本研究結(jié)果還顯示，觀察組患者標(biāo)本經(jīng)高速離心機(jī)離心10、20、30 min 后，三個(gè)時(shí)間點(diǎn)APTT、PT、TT、FIB 水平差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。與離心10 min相比，離心20、30 min 后APTT、PT、TT、FIB 水平降低，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。因此根據(jù)此研究結(jié)果，隨著高速離心時(shí)間的延長，所測得的凝血指標(biāo)越接近于真實(shí)水平。由于對(duì)照組患者測得的凝血指標(biāo)更為精確，本研究進(jìn)一步比較兩組患者APTT、PT、TT、FIB 水平的差異，結(jié)果顯示兩組患者標(biāo)本經(jīng)離心10、20 min 后檢測結(jié)果顯示，觀察組患者標(biāo)本經(jīng)離心10、20 min 后APTT、PT、TT、FIB 水平高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 （P＜0.05），兩組患者間離心30 min 后APTT、PT、TT、FIB 水平比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），提示對(duì)于重度高血脂標(biāo)本經(jīng)高速離心30 min之后可基本消除對(duì)于APTT、PT、TT、FIB 測定的干擾。值得一提的是，由于臨床檢測結(jié)果具有一定時(shí)效性，因此離心時(shí)間不應(yīng)過久，而通過高速離心30 min 即可使血脂標(biāo)本得到最大程度的澄清，消除高脂血對(duì)于APTT、PT、TT、FIB 檢測的影響[14-15]。

綜上所述，重度高脂血標(biāo)本會(huì)影響APTT、PT、TT、FIB 凝血指標(biāo)的檢測結(jié)果。因此實(shí)際臨床工作中遇到高脂血標(biāo)本時(shí)，可采用高速離心30 min 來澄清脂血標(biāo)本，以消除重度脂血對(duì)儀器檢測的影響。