張麗琴，蘭 梅，胡靖鋒，徐學(xué)忠，楊紅麗，和江明

（云南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院 園藝作物研究所，云南 昆明 650205）

葉用萵苣（Lactuca sativa L.）屬菊科萵苣屬萵苣種中的葉用類(lèi)型，為一、二年生草本植物，以生食為主，也可炒食或做湯。葉用萵苣極富營(yíng)養(yǎng)，含有抗氧化物、胡蘿卜素及維生素B1、B2、B6、VC、VE，它還含有豐富的微量元素，如鈣、磷、鉀、鈉、鎂及少量的銅、鐵、鋅，此外，還富含膳食纖維素，莖葉的乳狀汁液還含有大量有機(jī)物，如糖、有機(jī)酸、蛋白質(zhì)、苦苣素等［1］?？嘬乃匚犊?，有鎮(zhèn)痛、催眠的作用。萵苣可入藥，能利五臟，通經(jīng)脈，對(duì)高血壓、心臟病、腎病、精神衰弱等疾病有輔助療效［2］。種質(zhì)資源的鑒定和篩選是培育和改良優(yōu)良品種的一項(xiàng)基礎(chǔ)工作［3］。資源合理利用的前提是資源的鑒定評(píng)價(jià)，表型性狀是基因型和環(huán)境共同作用的結(jié)果［4-5］。我國(guó)對(duì)葉用萵苣的研究主要集中在生理生化方面［6-7］，關(guān)于葉用萵苣遺傳多樣性的研究較少。近年來(lái)，分子標(biāo)記技術(shù)在鑒定國(guó)內(nèi)葉用萵苣材料的特異性和穩(wěn)定性上取得了一定進(jìn)展［8］，但資源分析鑒定的首選方法仍是表型鑒定，因其具有直觀、便利且成本低等優(yōu)勢(shì) ，同時(shí)也是分子鑒定的前提［9］。國(guó)內(nèi)外學(xué)者開(kāi)展了葉用萵苣資源的相關(guān)工作，如捷克斯洛伐克的科學(xué)家針對(duì)葉用萵苣的野生資源進(jìn)行了詳細(xì)的農(nóng)藝性狀調(diào)查［10］；董潔等［11］對(duì)55份葉用萵苣種質(zhì)資源的主要數(shù)量性狀和質(zhì)量性狀進(jìn)行了詳細(xì)的調(diào)查分析；魏仕偉等［12］對(duì)從國(guó)外引進(jìn)的153份葉用萵苣種質(zhì)資源的15個(gè)表型性狀進(jìn)行了系統(tǒng)鑒定；王亞楠等［13］利用TRAP標(biāo)記分析47份紫色葉用萵苣種質(zhì)的親緣關(guān)系及遺傳多樣性。葉用萵苣是云南省的主要外銷(xiāo)蔬菜［14］，隨著國(guó)內(nèi)外市場(chǎng)對(duì)葉用萵苣多樣化需求的日益增長(zhǎng)，對(duì)品種類(lèi)型的多樣性和抗逆性有著迫切的需求，因此，有必要加強(qiáng)對(duì)葉用萵苣種質(zhì)資源的引進(jìn)和快速有效的鑒定。本試驗(yàn)對(duì)云南葉用萵苣主產(chǎn)區(qū)采集的43份葉用萵苣材料主要質(zhì)量性狀和數(shù)量性狀在田間觀測(cè)的基礎(chǔ)上進(jìn)行分析，為資源的合理利用、種質(zhì)創(chuàng)制提供參考。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

從云南省4個(gè)州（市）6個(gè)縣（區(qū)）采集的43個(gè)品種作為試驗(yàn)材料，各材料的編號(hào)、品種名稱(chēng)及來(lái)源地見(jiàn)表1。這些種質(zhì)有的是本地品種，有的是引種栽培時(shí)間較長(zhǎng)的自留種類(lèi)型。

表1 43份參試材料的編號(hào)、品種名稱(chēng)及來(lái)源地

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 試驗(yàn)設(shè)計(jì) 試驗(yàn)材料于2019年9月上旬在云南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院嵩明試驗(yàn)基地播種，10月初定植，定植株行距為25 cm×25 cm。試驗(yàn)材料種植于簡(jiǎn)易水泥預(yù)制件的大棚內(nèi)，土層深厚、土壤肥沃，每份材料種植6.0 m2。根據(jù)氣候和田間長(zhǎng)勢(shì)，科學(xué)、合理地澆水、施肥，整個(gè)生育期內(nèi)注意對(duì)霜霉病、病毒病、軟腐病、細(xì)菌性角斑病的預(yù)防，以及蚜蟲(chóng)、黃曲跳甲、斑潛蠅、薊馬的防治。

1.2.2 性狀觀測(cè)記載與數(shù)據(jù)處理 在不同生育期，根據(jù)《萵苣種質(zhì)資源描述規(guī)范和數(shù)據(jù)標(biāo)準(zhǔn)》［15］，對(duì)株高、株幅、葉長(zhǎng)、葉寬、葉柄長(zhǎng)、葉柄寬、葉柄厚、單株葉片數(shù)、單株重共9個(gè)數(shù)量性狀，以及子葉形狀、葉形、葉尖、葉基部形狀、葉緣、葉裂刻、葉面褶皺、葉面光澤、葉色、葉柄色共10個(gè)質(zhì)量性狀進(jìn)行田間調(diào)查，其中子葉性狀在苗期調(diào)查，其他性狀均在采收期調(diào)查，每份資源調(diào)查5株，分析其葉片表型的遺傳多樣性。采用SPSS 13.0軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 葉用萵苣質(zhì)量性狀的統(tǒng)計(jì)分析

苗期主要對(duì)試驗(yàn)材料的子葉形狀進(jìn)行調(diào)查，子葉形狀有倒卵形（62.8%）和長(zhǎng)橢圓（37.2%）2種。采收期葉片表型性狀的調(diào)查結(jié)果見(jiàn)表2。本試驗(yàn)材料的葉形、葉尖、葉緣、葉色等表型性狀表現(xiàn)出多種類(lèi)型。葉片整體形狀以近圓（20.7%）、橢圓（23.3%）和披針形（37.2%）為主；葉尖形狀以圓形（51.2%）、銳尖（30.2%）為主；大多數(shù)材料的葉緣為鈍齒（60.5%）和全緣（37.2%）；葉裂刻大多數(shù)為無(wú)缺刻，占比90.7%；葉片顏色大多為綠（55.8%）和黃綠（32.7%）。

表2 葉用萵苣10個(gè)質(zhì)量性狀田間統(tǒng)計(jì)

2.2 散葉萵苣數(shù)量性狀的多樣性分析

21份散葉萵苣品種9個(gè)數(shù)量性狀的分析結(jié)果表明（表3）：9個(gè)數(shù)量性狀的變異系數(shù)為9.08%~28.05%，平均變異系數(shù)為17.81%。葉柄長(zhǎng)變異系數(shù)最大，達(dá)到28.05%，葉柄厚度、株高、單株重、葉長(zhǎng)、葉寬變異系數(shù)均大于17.00%，其中單株重變異系數(shù)達(dá)到19.71%?？梢钥闯?，該材料的產(chǎn)量變化較大，研究?jī)r(jià)值較高。與葉片相關(guān)的數(shù)量性狀中，株幅的變異系數(shù)最低，為9.08%。除品種性狀外，田間種植密度與株幅大小密切相關(guān)。

表3 散葉萵苣9個(gè)數(shù)量性狀的變異情況

2.3 油麥菜數(shù)量性狀的多樣性分析

對(duì)16份油麥菜品種的9個(gè)主要數(shù)量性狀的測(cè)定分析結(jié)果表明（表4）：數(shù)量性狀間差異顯著。9個(gè)數(shù)量性狀的變異系數(shù)為7.31%~20.91%，平均為11.09%。葉柄寬度變異系數(shù)最大為20.91%，葉片寬度、葉柄長(zhǎng)度、葉柄厚度和單株重的變異系數(shù)均在10%以上，其中單株質(zhì)量變異系數(shù)達(dá)到13.13%?？梢钥闯?，該材料的產(chǎn)量變化較大，研究?jī)r(jià)值較高。與葉片相關(guān)的數(shù)量性狀中株幅的變異系數(shù)最小為7.31%，株幅除與品種特性有關(guān)外，還與田間種植密度有很大關(guān)系。

表4 油麥菜品種9個(gè)數(shù)量性狀的變異情況

2.4 結(jié)球萵苣數(shù)量性狀的多樣性分析

對(duì)6份結(jié)球萵苣品種的11個(gè)主要數(shù)量性狀的測(cè)定結(jié)果表明（表5）：各數(shù)量性狀差異明顯，11個(gè)數(shù)量性狀的變異系數(shù)為4.88%~13.82%，平均為8.77%。葉柄厚度的變異系數(shù)最大為13.82%，葉長(zhǎng)、球葉數(shù)、單球重的變異系數(shù)均大于10%，其中單球重的變異系數(shù)達(dá)到12.91%。可以看出，該材料的產(chǎn)量變化較大，研究?jī)r(jià)值較高。與葉片有關(guān)的數(shù)量性狀中株幅的變異系數(shù)較小為5.83%，株幅除與品種特性有關(guān)外，還與田間種植密度有很大關(guān)系。

表5 結(jié)球萵苣的11個(gè)數(shù)量性狀變異情況

2.5 散葉萵苣數(shù)量性狀的相關(guān)性分析

散葉萵苣主要數(shù)量性狀的相關(guān)分析結(jié)果表明（表6）：葉長(zhǎng)與株幅、單株重呈顯著正相關(guān)；葉長(zhǎng)與株高、葉寬、葉柄厚，單株重與株高、葉寬、葉柄長(zhǎng)、葉片數(shù)呈極顯著正相關(guān)；葉長(zhǎng)與葉柄寬、葉片數(shù)，株高與葉柄寬呈極顯著負(fù)相關(guān)。以上分析結(jié)果表明：要選育高產(chǎn)散葉萵苣品種，需將株高、葉寬、葉柄長(zhǎng)、葉片數(shù)作為主要的目標(biāo)性狀。

表6 散葉萵苣9個(gè)數(shù)量性狀的相關(guān)分析

2.6 油麥菜數(shù)量性狀的相關(guān)性分析

油麥菜主要數(shù)量性狀的相關(guān)分析結(jié)果表明（表7）：株高與葉長(zhǎng)、葉柄寬，以及葉寬與葉柄寬呈極顯著正相關(guān)；葉長(zhǎng)與單株重呈顯著正相關(guān)；株幅與葉寬、葉柄厚呈極顯著負(fù)相關(guān)。以上分析結(jié)果表明：葉長(zhǎng)是衡量產(chǎn)量的重要指標(biāo)，要選育高產(chǎn)油麥菜品種需將葉長(zhǎng)作為主要的目標(biāo)性狀。

表7 油麥菜9個(gè)數(shù)量性狀的相關(guān)分析

2.7 結(jié)球萵苣數(shù)量性狀的相關(guān)性分析

結(jié)球萵苣主要數(shù)量性狀的相關(guān)分析結(jié)果表明（表8）：葉柄寬與葉寬、葉柄長(zhǎng)，以及球橫徑與葉柄厚、球縱徑呈顯著正相關(guān)；葉長(zhǎng)與葉寬、球橫徑與單球重呈極顯著正相關(guān)；株高與葉柄厚，葉寬與球葉數(shù)呈極顯著負(fù)相關(guān)。

表8 結(jié)球萵苣11個(gè)數(shù)量性狀的相關(guān)分析

3 小結(jié)與討論

創(chuàng)制新種質(zhì)和利用植物種質(zhì)資源的基礎(chǔ)和前提是熟悉和掌握主要表型性狀的遺傳多樣性和親緣關(guān)系［16］，對(duì)供試43份葉用萵苣材料21個(gè)主要農(nóng)藝性狀的遺傳多樣性進(jìn)行了分析，其中10個(gè)質(zhì)量性狀具有豐富的表型，11個(gè)數(shù)量性狀的變異系數(shù)的分布范圍在4.88%~28.05%之間，3種類(lèi)型葉用萵苣葉片相關(guān)數(shù)量性狀中，單株（球）重變異系數(shù)在12.91%以上，可見(jiàn)所選材料在產(chǎn)量上具有很大的變異，研究?jī)r(jià)值較高。株幅的變異系數(shù)較小，株幅除跟品種特性有關(guān)外， 還與田間種植密度有很大關(guān)系。

通過(guò)主要性狀之間的相關(guān)性分析可以看出，要選育高產(chǎn)散葉萵苣品種需將株高、葉寬、葉柄長(zhǎng)、葉片數(shù)作為主要目標(biāo)性狀；葉長(zhǎng)是衡量油麥菜產(chǎn)量的重要指標(biāo)，要選育高產(chǎn)油麥菜品種需將葉長(zhǎng)作為主要的目標(biāo)性狀；球橫徑與單球重呈極顯著正相關(guān)，在結(jié)球萵苣的育種研究中可把球橫徑、單球重作為結(jié)球萵苣高產(chǎn)育種的主要目標(biāo)性狀。

對(duì)43份參試材料的表型性狀及產(chǎn)量、抗病性等性狀進(jìn)行綜合評(píng)價(jià)，S7（紅力四季生菜）、Y2（綠健四季生菜）、J1（射手101）的田間綜合性狀表現(xiàn)優(yōu)良；S5（太陽(yáng)神意大利）、S4（四季美滿意大利生菜688）、Y14（臻品良森油麥菜）、J4（瑞大）可作為高產(chǎn)品種選育的資源材料；S6（意大利生菜333）、Y5（臺(tái)農(nóng)精品油荬菜）為早熟品種，霜霉病發(fā)病率高。在葉用萵苣的新品種選育中，可根據(jù)不同的育種目標(biāo)，有針對(duì)性地優(yōu)先考慮選擇相關(guān)性狀。

按照植物學(xué)分類(lèi)葉用萵苣可劃分為3個(gè)變種：皺葉萵苣（L. sativa L. var. crispa L.）、結(jié)球萵苣（L.sativa L. var. capitata L.）、直立萵苣（L. sativa L.var. longgifolia Lam.）［17］。葉用萵苣是自花授粉植物，長(zhǎng)期自交繁育使群體內(nèi)基因逐漸純和，遺傳變異減少；在商業(yè)化育種進(jìn)程中，被反復(fù)循環(huán)利用的優(yōu)良種質(zhì)資源或相關(guān)基因的遺傳多樣性會(huì)降低，在形態(tài)特征上表型相近。有研究表明，生產(chǎn)上栽培的同一類(lèi)型間葉用萵苣的親緣關(guān)系較近、遺傳背景狹窄［18］。目前，葉用萵苣新品種選育工作在我國(guó)處于起步階段，具有自主知識(shí)產(chǎn)權(quán)的品種和類(lèi)型有限［19］。隨著葉用萵苣資源收集保存數(shù)量的增加，應(yīng)借鑒李國(guó)強(qiáng)［20］、張永兵［21］等對(duì)大白菜、甜瓜的研究構(gòu)建葉用萵苣的核心種質(zhì)。鑒于表型揭示變異的局限性以及分子鑒定的應(yīng)用，應(yīng)將形態(tài)標(biāo)記與分子標(biāo)記技術(shù)結(jié)合［22］，通過(guò)對(duì)葉用萵苣資源進(jìn)行大規(guī)模的調(diào)查、鑒定和分析，為今后萵苣的育種打下良好基礎(chǔ)。