張立國，郭繼香，許虎君

(1 哈爾濱敷爾佳科技股份有限公司，黑龍江 哈爾濱 150000；2 江南大學(xué)化工學(xué)院，江蘇 無錫 214122)

敏感性皮膚具有敏感性高、耐受性差和易反應(yīng)性等三大特點，表現(xiàn)為紅斑、水腫、毛細(xì)血管擴(kuò)張等[1]。積雪草的主要成分有積雪草苷、羥基積雪草苷、積雪草二糖苷等，具有促進(jìn)創(chuàng)傷愈合、抗敏、抗炎作用[2-5]。積雪草提取物可促進(jìn)膠原蛋白形成，幫助受損的組織愈合。Bonte等[6]將人的纖維細(xì)胞進(jìn)行體外培養(yǎng)，一定濃度的積雪草提取物組分能刺激膠原蛋白和纖維結(jié)合素的合成，說明積雪草提取物具有促進(jìn)傷口愈合的作用。積雪草提取物作為主要舒緩活性成分的面膜具有很好的舒緩修護(hù)功能，能恢復(fù)和調(diào)節(jié)皮膚的水分含量。本文將積雪草提取物與舒緩多肽復(fù)配應(yīng)用于面膜產(chǎn)品，研究其對面部皮膚的舒緩效果。

1 實 驗

1.1 試劑與儀器

面部圖像分析系統(tǒng)Visia-CR，美國Canfield公司；RW20 Digital攪拌機(jī)、T25 Digital均質(zhì)機(jī)、電子天平(精度 0.01 g)。

1.2 實驗方法

1.2.1 面膜的制備

A相：去離子水，卡波姆，尿囊素，透明質(zhì)酸鈉，甘草酸二鉀，甘油。

B相：氫氧化鈉，去離子水。

C相：丁二醇，對羥基苯乙酮，1,2-己二醇。

D相：羥苯基丙酰胺苯甲酸，丁二醇，1,2-戊二醇，抗壞血酸棕櫚酸酯，積雪草提取物，泛醇，舒緩多肽(水，丁二醇，聚山梨醇酯-20，PEG-40 氫化蓖麻油，甘草酸二鉀，聚丙烯酸酯交聯(lián)聚合物-6，棕櫚酰三肽-8，棕櫚酰四肽-7)。

(1)配制工藝

①加熱至82～85 ℃,將A相中的粉料逐一加入去離子水中，完全攪拌至分散均勻，攪拌均勻后均質(zhì)5～8 min，保溫15～20 min消毒，消泡，降溫；先把卡波姆用水分散均質(zhì)均勻，透明質(zhì)酸鈉可以用甘油分散加入，多次均質(zhì)至完全分散均勻，加入其他粉末，攪拌至完全溶解，保溫15～20 min滅菌，消泡，開始降溫；

②提前預(yù)溶B相，待降溫至60～70 ℃，加入B相物料，攪拌至完全均勻；

③將C相原料混合，加熱溶解后，冷卻至室溫，備用；

④降溫到42～45 ℃時，依次加入C相物料和D相，中速攪拌至完全均勻；

⑤攪拌至室溫后，取樣，檢測，合格后，200目濾網(wǎng)過濾出料。

1.2.2 舒緩成分初選

積雪草面膜主要著重于舒緩功效，對此，選擇了2組具舒緩功效的活性物組合，采用單一變量法，在保持配方中其他原料添加量一致的情況下，用不同的活性物組合進(jìn)行樣品制備，具體見表1。

表1 舒緩活性物及用量Table 1 Soothing active substance and dosage

1.2.3 配方的優(yōu)化

(1)積雪草提取物添加量調(diào)整

因初期選擇在舒緩多肽-plus的組成成分中含有二裂酵母發(fā)酵產(chǎn)物濾液，與其他宣稱二裂酵母發(fā)酵產(chǎn)物的產(chǎn)品重復(fù)，因此，去掉舒緩多肽-plus這一活性成分，以積雪草提取物作為舒緩的主要功效活性物。根據(jù)上述因素對舒緩活性物進(jìn)行調(diào)整，調(diào)整后活性物組合見表2。

表2 配方調(diào)整后活性物及用量Table 2 Active substance and dosage after formulation adjustment

(2)舒緩活性物調(diào)整

在確定好積雪草提取物添加量為0.1%的前提下，進(jìn)一步添加額外的舒緩活性物來提高面膜的受試者面部紅區(qū)情況的即時改善率。因此在上述測試的基礎(chǔ)上，對活性物的添加量和配方進(jìn)行調(diào)整，調(diào)整后活性物組合見表3。

表3 添加量調(diào)整后活性物及用量Table 3 Active substance and dosage after adding amount adjustment

1.2.4 功效測試

(1)采用面部圖像分析系統(tǒng)Visia-CR，測試一定數(shù)量的受試者面部。

(2)數(shù)據(jù)采集

受試者入選標(biāo)準(zhǔn)：健康狀態(tài)良好、年齡范圍18～45歲(男女不限)、自述皮膚有敏感或泛紅的情況；試驗期間不使用與受試樣品同類功效的皮膚護(hù)理產(chǎn)品；試驗期間同意不使用任何對結(jié)果有影響的化妝品、藥物和保健品。

受試者信息：本次測試共有15名受試者，8名女性，7名男性，年齡23～26歲，均集中在江蘇無錫。本次測試的時間為2021年8月27日到2021年10月20日。

受試者根據(jù)使用要求使用測試產(chǎn)品，在受試者相應(yīng)測試部位采集皮膚數(shù)據(jù)，并分析測試區(qū)域使用樣品前后皮膚數(shù)據(jù)變化。具體測試過程如下：

①測試當(dāng)天受試部位不使用任何化妝品，用潔面慕斯對受試部位進(jìn)行清潔，靜坐30 min后開始測試；

②用Visia-CR儀器的Mirror軟件對受試者進(jìn)行面部拍照，拍攝受試者的正臉和左、右側(cè)臉。初始數(shù)據(jù)采集完成后，給受試者發(fā)放樣品，并讓其按照要求使用測試樣品(左臉敷活性物組合1的面膜樣品，右臉敷活性物組合2的樣品，敷15 min后取下面膜，用清水對臉部進(jìn)行清潔)；

③受試者使用樣品15 min后，測試人員對受試者面部皮膚數(shù)據(jù)進(jìn)行重復(fù)采集；

④受試者使用樣品1周后，測試人員對受試者面部皮膚數(shù)據(jù)進(jìn)行重復(fù)采集。

(3)數(shù)據(jù)分析

①用Visia-CR儀器的IMage-Pro Plus對拍攝照片中的紅區(qū)圖片進(jìn)行分析，用側(cè)臉圖片分析受試者使用樣品前后面部紅區(qū)的變化情況，得到相應(yīng)的數(shù)據(jù)；

②用SPSS軟件對得到的紅區(qū)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析。

1.2.5 穩(wěn)定性實驗

將打樣后的面膜液置于棕色瓶中，分別在4 ℃、48 ℃、常溫和光照條件下進(jìn)行穩(wěn)定性測試，觀察樣品狀態(tài)。

2 結(jié)果與討論

2.1 舒緩成分初選

2.1.1 使用后15 min選定區(qū)域紅區(qū)面積和紅區(qū)面積/選定區(qū)域面積(%)

選定區(qū)域紅區(qū)面積變化率，此值越低，樣品舒緩的效果越好；紅區(qū)面積/選定區(qū)域面積(%)變化率，此值越低，樣品舒緩的效果越好。選定區(qū)域紅區(qū)面積和紅區(qū)面積/選定區(qū)域面積(%)統(tǒng)計結(jié)果見表4、表5。

表4 選定區(qū)域紅區(qū)面積統(tǒng)計結(jié)果Table 4 Statistical results of the red zone area of the selected region

表5 紅區(qū)面積/選定區(qū)域面積(%)統(tǒng)計結(jié)果Table 5 Statistical results of red area/selected area (%)

由表4和表5可以看出，受試者使用面膜產(chǎn)品15 min后，選定區(qū)域紅區(qū)面積和紅區(qū)面積/選定區(qū)域面積(%)的數(shù)值均有所降低，選定區(qū)域紅區(qū)面積和紅區(qū)面積/選定區(qū)域面積(%)的變化率均為負(fù)值，這說明，使用測試產(chǎn)品15 min后，受試者面部紅區(qū)情況得到了改善，但從數(shù)值上看，改善效果一般。兩組活性物的樣品使用15 min后紅區(qū)改善效果均不是很明顯，出現(xiàn)這種情況可能是受試者皮膚初次接觸面膜樣品有一定的應(yīng)激反應(yīng)。

2.1.2 使用后1周時間選定區(qū)域紅區(qū)面積和紅區(qū)面積/選定區(qū)域面積(%)

選定區(qū)域紅區(qū)面積和紅區(qū)面積/選定區(qū)域面積(%)統(tǒng)計結(jié)果見表6，表7。

表6 選定區(qū)域紅區(qū)面積統(tǒng)計結(jié)果Table 6 Statistical results of the red zone area of the selected region

表7 紅區(qū)面積/選定區(qū)域面積(%)統(tǒng)計結(jié)果Table 7 Statistical results of red area/selected area (%)

由表6和表7可以看出，受試者使用面膜產(chǎn)品1周時間后，選定區(qū)域紅區(qū)面積和紅區(qū)面積/選定區(qū)域面積(%)的數(shù)值均有所降低，選定區(qū)域紅區(qū)面積和紅區(qū)面積/選定區(qū)域面積(%)的變化率均為負(fù)值，這說明使用測試產(chǎn)品1周后，受試者面部紅區(qū)情況得到了改善，其中，使用活性物組合1樣品的受試者紅區(qū)改善率為30.87%，使用活性物組合2樣品的受試者紅區(qū)改善率為22.32%；即兩個樣品使用1周后均具有改善面部紅區(qū)情況的效果，但組合1的樣品效果更好。

在舒緩多肽-plus的添加量保持2.5%不變時，積雪草提取物添加量為0.05%的樣品的紅區(qū)改善效果優(yōu)于積雪草提取物添加量為0.5%的樣品，即在其他原料添加量保持不變的情況下，適當(dāng)降低積雪草提取物的添加量，樣品的紅區(qū)改善效果更好。因此，初步確定積雪草提取物添加量為0.05%。

2.2 配方的優(yōu)化

2.2.1 積雪草提取物添加量調(diào)整

采用單一變量法，除舒緩多肽不加入外，保持整體面膜配方中其他原料添加量一致的情況下，用不同的活性物組合進(jìn)行打樣，并對相應(yīng)樣品按照功效測試的方法和步驟進(jìn)行相應(yīng)的功效測試，具體的測試結(jié)果如表8所示。

表8 不同活性物添加量組合的樣品所對應(yīng)的測試結(jié)果Table 8 Test results of samples with different combinations of active substances

由表8可知，在其余原料保持一致的情況下，0.1%積雪草提取物添加量樣品與0.35%積雪草提取物樣品的即時效果均不大明顯，0.1%積雪草提取物樣品的面部紅區(qū)情況長期改善效果最優(yōu)，由此可知，在其余原料添加量一致的情況下，適當(dāng)降低積雪草提取物的添加量有利于提高受試者面部紅區(qū)情況的改善率，因此，將面膜中積雪草提取物的添加量定為0.1%。鑒于兩個活性物的樣品的受試者面部紅區(qū)情況的即時改善率均不明顯，所以需要進(jìn)一步尋求能提高即時改善率的活性原料。

2.2.2 舒緩活性物調(diào)整

采用單一變量法，在保持配方中其他原料添加量一致的情況下，用不同的活性物組合準(zhǔn)備面膜樣品，并對相應(yīng)樣品按照功效測試的方法和步驟進(jìn)行相應(yīng)的功效測試，具體的測試結(jié)果如表9所示。

表9 不同活性物添加量組合的樣品所對應(yīng)的測試結(jié)果Table 9 Test results of samples with different combinations of active substances

由表9可以看出，當(dāng)積雪草提取物的添加量保持0.1%不變，以舒緩多肽的添加量作為變量，舒緩多肽的添加量為0.5%時，即時改善效果略優(yōu)于舒緩多肽添加量為1%的樣品，而長期改善效果則舒緩多肽添加量為1%的樣品更優(yōu)些。出現(xiàn)這種情況的原因是舒緩多肽中的主要舒緩活性物質(zhì)為多肽，皮膚在接觸到多肽物質(zhì)時會有相應(yīng)的免疫反應(yīng)來分解多肽，而這一反應(yīng)呈現(xiàn)出來即為對皮膚有輕微刺激性。當(dāng)舒緩多肽的添加量為1%時，出現(xiàn)的刺激會略高于添加量為0.5%的樣品，這也是0.5%的樣品即時效果更好的原因。但針對長期效果而言，舒緩多肽的添加量還是適當(dāng)提高更好。

鑒于0.5%舒緩多肽的樣品的即時效果更佳且長期效果也與1%舒緩多肽樣品接近，再結(jié)合整體成本，最終選擇組合1樣品，添加活性物和添加量為0.1%積雪草提取物+0.5%舒緩多肽。

此外，配方調(diào)整后的樣品經(jīng)過單位組織人員試用，上臉均未反饋刺激情況。

2.3 穩(wěn)定性測試

按照配方表進(jìn)行打樣，并對樣品進(jìn)行穩(wěn)定性觀察，結(jié)果見表10。

由表10可知，樣品的高溫、低溫、常溫和光照樣品基本均無異常，穩(wěn)定性良好。

表10 穩(wěn)定性測試結(jié)果Table 10 Results of stability test

3 結(jié) 論

選擇積雪草提取物和舒緩多肽作為舒緩活性物制備了面膜，經(jīng)過人體功效測試，在積雪草提取物的添加質(zhì)量分?jǐn)?shù)0.1%的面膜的長期改善效果較好；在積雪草提取物添加量為0.1%時，增加舒緩多肽有利于提高面膜的即時舒緩改善率，并且該樣品經(jīng)過試用上臉無刺激感。結(jié)合功效測試數(shù)據(jù)與配方成本，舒緩活性物組合最終選擇0.1%積雪草提取物+0.5%舒緩多肽 這一組合。同時所制備的面膜在高溫、低溫、常溫和光照樣品基本均無異常，穩(wěn)定性良好。開發(fā)的舒緩面膜的功效性較好，具有較好的市場應(yīng)用前景。