賀小霞 郭 林 魏麗紅

腦膜瘤作為常見的顱內腫瘤，約占所有顱內腫瘤類型的20%[1]。大約38%～67%的腦膜瘤表現(xiàn)出不同程度的瘤周水腫(PTBE)[2]。PTBE會影響顱內腦膜瘤的外科手術治療，并且由于圍手術期顱內壓升高，術后血腫和神經功能缺損的風險增加而導致癲癇發(fā)病率升高[3-4]。因此尋找與PTBE發(fā)生機制相關的生物標志物是目前的研究熱點。白介素-1α(IL-1α)是主要的警報蛋白細胞因子，可觸發(fā)并增強炎癥反應[5]。而且越來越多的研究表明IL-1α參與了癌癥的發(fā)病機理，在不同類型的癌癥中均發(fā)揮抗腫瘤作用[6]。有研究發(fā)現(xiàn)Ephrin A型受體2(EphA2)的過表達與大多數(shù)癌癥的不良預后相關[7]。最近，還發(fā)現(xiàn)EphA2受體參與調節(jié)腫瘤血管生成[8]。但是關于PTBE與IL-1α、EphA2表達水平研究較少，相關機制尚不清楚。本文通過探討IL-1α、EphA2在腦膜瘤及瘤周水腫組織中的表達及臨床意義，旨在為腦膜瘤尋找生物標志物進一步研究提供研究基礎。

1 資料與方法

1.1 對象

選取2018年2月至2020年2月本院收治的腦膜瘤瘤周水腫患者52例。其中男性25例，女性27例，年齡24～71歲，平均(48.31±8.26)歲。①術前行頭部MRI懷疑腦膜瘤者；②首次在我院行腦膜瘤切除術；③術后病理證實為腦膜瘤[9]；④入組患者或家屬在同意知情書上簽字。 排除標準：①合并嚴重頭部外傷史或其他器官功能障礙者；②合并其他器官或部位存在腫瘤者；③既往有顱內腫瘤或其他類型腫瘤病史者。

1.2 樣本準備

腫瘤組織標本取近腫瘤邊緣處，瘤周水腫標本取非功能區(qū)組織，生理鹽水清洗后，放入中性4%甲醛溶液固定24 h后石蠟包埋，切片厚4 μm，待檢。

1.3 免疫組化

首先二甲苯脫蠟，剃度乙醇水化后用PBS清洗，每次3 min，重復3次；將其置入檸檬酸修復液后在100 ℃ 下加壓修復2 min；滴加0.3%過氧化氫液50 μl，室溫孵育15 min，PBS清洗同上；甩干后滴加一抗(其中IL-1α抗體購自上海艾博抗貿易有限公司，工作濃度：1∶50稀釋，EphA2 抗體購于美國 Santa Cruz生物技術公司，工作濃度：1∶300稀釋) 50 μl，4 ℃孵育過夜，PBS清洗同上；甩干后滴加50 μl二抗，靜置30 min，PBS清洗同上；甩干后滴加DAB顯色液50～100 μl；蒸餾水沖洗，用蘇木精復染，0.1%鹽酸乙醇分化，PBS再次沖洗返藍，經梯度乙醇脫水干燥，二甲苯透明，中性樹膠封固。

1.4 結果判定

以IL-1α、EphA2 在細胞質內出現(xiàn)棕黃色染色定為陽性。用半定量積分法，顯微鏡隨機選取5個400倍視野，取平均陽性細胞個數(shù)，以100個腫瘤細胞中陽性細胞個數(shù)進行表達強度判定。陰性(-)：陽性細胞<10 %，陽性(+)：陽性細胞≥10 %。

1.5 水腫指數(shù)

計算腫瘤及PTBE 體積[10]。腫瘤體積(VT)=腫瘤最大層面橫徑×直徑×最大高度/2；PTBE體積(VPTBE)=水腫最大層面橫徑×直徑×最大高度/2-腫瘤體積。公式EI=(VPTBE+ VT)/VT，PTBE程度：02為重度水腫。

1.6 統(tǒng)計學處理

2 結果

2.1 IL-1α和EphA2表達與腦膜瘤患者臨床資料的關系

IL-1α和EphA2表達與患者性別、年齡、飲酒、吸煙、腫瘤部位無相關性(P<0.05)，見表1。

表1 IL-1α和EphA2表達與腦膜瘤患者臨床資料的關系/例

2.2 IL-1α、EphA2在腦膜瘤組織、瘤周水腫組織中的表達

IL-1α、EphA2在腦膜瘤組織、瘤周水腫組織中的陽性表達率比較，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；其中腦膜瘤組織IL-1α、EphA2陽性表達率明顯高于瘤周水腫組織(P<0.05)，結果見表2。

表2 IL-1α、EphA2在腦膜瘤組織、瘤周水腫組織中的表達(例，%)

2.3 IL-1α、EphA2在不同程度瘤周水腫組織中的表達

IL-1α、EphA2在不同程度瘤周水腫組織中陽性表達率比較，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)， IL-1α、EphA2在瘤周水腫中度以及重度中陽性表達率明顯高于輕度水腫(P<0.05)， IL-1α、EphA2在瘤周水腫重度中陽性表達率明顯高于中度水腫(P<0.05)，見表3。

表3 IL-1α、EphA2在不同程度瘤周水腫組織中的表達/例

3 討論

腦膜瘤是最常見的非神經膠質顱內腫瘤，根據(jù)世界衛(wèi)生組織(WHO)的分類，腦膜瘤分為三個組織學等級：良性，非典型性和惡性，腦膜瘤大多是良性腫瘤[11-12]。其中有40%～78%的腦膜瘤患者形成PTBE[13]。PTBE的形狀和大小各不相同，可能會比一般腫瘤大兩到三倍[14]。PTBE的發(fā)生主要與腦血管受壓迫有關，PTBE也會進一步引起患者顱內壓升高，甚至導致術后并發(fā)癥的發(fā)生[15-16]。PTBE的病理生理學主要包括如腫瘤大小，組織學分級，性激素受體表達，血管化和生長因子的表達等方面[17]。目前有許多關于PTBE的發(fā)生與年齡、性別、組織學分級、腫瘤大小、性激素表達和血管內皮生長因子表達的相關性研究，但它們研究結果往往不一致[18]。

自1940年IL-1α被發(fā)現(xiàn)以來，IL-1α的結構和生物活性得到了廣泛研究，并已成為機體炎癥反應和造血過程中的重要調節(jié)劑[19]。IL-1α被蛋白酶切割，以N末端和C末端的形式存在[20-21]。IL-1α是作為一種獨特的細胞因子，可以定位在細胞質，細胞膜和細胞核上[22]。有越來越多的研究表明IL-1α在癌癥的發(fā)病機制中起到了重要作用，且在不同類型的癌癥中均發(fā)揮了抗腫瘤作用[23]。本研究發(fā)現(xiàn)腦膜瘤組織的IL-1α陽性表達率明顯高于瘤周水腫組織。IL-1α在瘤周水腫中度以及重度的陽性表達率明顯高于輕度水腫，IL-1α在瘤周水腫重度的陽性表達率明顯高于中度水腫，說明IL-1α與腦膜瘤以及瘤周水腫具有一定的相關性，與目前關于IL-1α與癌癥方面的研究具有一致性。

EphA2的過表達與大多數(shù)癌癥相關，包括乳腺癌，卵巢癌和膠質母細胞瘤等[24]，這些腫瘤的發(fā)生發(fā)展均與血管生成的有關，其中EphA2受體也在調節(jié)腫瘤血管生成的過程中起作用[25]。在腦腫瘤中，如間變性星形細胞瘤和膠質細胞瘤，主要是在晚期腫瘤中檢測到EphA2的高表達[26]。EphA2蛋白在神經膠質瘤細胞中的表達失調可以促進腫瘤的轉移和侵襲[27]。本研究發(fā)現(xiàn)腦膜瘤組織中EphA2陽性表達率明顯高于瘤周水腫組織。EphA2在瘤周水腫組織中中度以及重度的陽性表達率明顯高于輕度水腫， EphA2在瘤周水腫組織中重度的陽性表達率明顯高于中度水腫，說明 EphA2過表達與腦膜瘤相關，這與目前的研究結果一致，還說明了EphA2也與瘤周水腫程度相關，為未來研究瘤周水腫的危險因素提供了新思路。

綜上，本研究表明IL-1α 、EphA2水平在腦膜瘤患者中的表達及與臨床價值的關系，對未來關于腦膜瘤患者的研究提供了一定的數(shù)據(jù)參考。但是本研究有一定缺陷，比如缺少大量的樣本數(shù)據(jù)以及中心單一，還需要進一步的研究完善。