何海 張小榮 趙沙沙 邵晶

摘要 [目的]研究中藥復方治療上呼吸道感染的用藥規(guī)律及核心中藥的作用機制。[方法]通過CNKI數(shù)據(jù)庫收集臨床用于上呼吸道感染的中藥復方，采用Excel 2010及SPSS 24.0 軟件對納入標準的中藥進行頻次、性味歸經(jīng)、四氣五味及功效統(tǒng)計，并對頻數(shù)大于40的中藥進行聚類分析;使用中藥系統(tǒng)藥理學分析平臺數(shù)據(jù)庫（TCMSP）對頻數(shù)較高且在聚類分析中聚為一類的配伍中藥進行成分、靶點篩選，將其靶點與在 GeneCards 數(shù)據(jù)庫和Malacards數(shù)據(jù)庫中篩選得到的上呼吸道感染的疾病靶點進行匹配，獲取高頻中藥治療上呼吸道感染的關鍵靶點;采用STRING 平臺對關鍵靶點進行蛋白相互作用（PPI）網(wǎng)絡分析;采用DAVID 數(shù)據(jù)庫對關鍵靶點進行京都基因與基因組百科全書（KEGG）通路富集分析;通過Cytoscape 3.6.1軟件構建“中藥-活性成分-關鍵靶點-通路”網(wǎng)絡，并進行拓撲分析。[結果]共獲得符合標準的中藥復方464首，涉及中藥414味;其中以補虛藥、清熱藥較多見，歸肺、胃經(jīng)居多，以寒溫、苦辛為主;累計頻次最高且聚為一類的是黃芪、防風、白術。獲得活性成分共32個，核心成分包括槲皮素、山柰酚、異鼠李素、漢黃芩素、β-谷甾醇、5-O-甲維阿斯米醇、防風色原酮等;關鍵靶點175個，核心靶點包括AKT1、MAPK1、TNF、RELA、JUN、TP53、IL6等;通路137條，主要通路包括癌癥通路、PI3K-Akt信號通路、TNF信號通路、Toll樣受體通路等。[結論]治療上呼吸道感染的中藥復方中以補虛藥多見，常配伍清熱藥、止咳化痰平喘藥、消食藥等。組方中以黃芪、防風、白術配伍頻次最高，其作用機制可能是通過槲皮素、山柰酚、異鼠李素、漢黃芩素、β-谷甾醇、5-O-甲維阿斯米醇、防風色原酮等活性成分，作用于AKT1、MAPK1、TNF等關鍵靶點，及PI3K-Akt信號通路、TNF信號通路、Toll樣受體通路等，共同發(fā)揮治療作用。

關鍵詞 上呼吸道感染;中藥復方;數(shù)據(jù)挖掘;網(wǎng)絡藥理學;用藥規(guī)律;作用機制

中圖分類號 R 285? 文獻標識碼 A? 文章編號 0517-6611（2022）03-0178-08

doi：10.3969/j.issn.0517-6611.2022.03.048

Exploring the Rule of Medication and Mechanism of Traditional Chinese Medicine Compound Prescription Against Upper Respiratory Tract Infection Based on Data Mining and Network Pharmacology Methods

HE Hai，ZHANG Xiao-rong，ZHAO Sha-sha et al

（Gansu University of Traditional Chinese Medicine，Lanzhou，Gansu 730000）

Abstract [Objective]To explore the medication rule of traditional Chinese medicine compound against upper respiratory tract infection （URTI） and the mechanism of action of core traditional Chinese medicine （TCM）.[Method]All compounds of clinical research treating upper respiratory tract infection were collected from CNKI database. Excel 2010 and SPSS 24.0 software were used to make statistics of the frequency， nature， taste， meridian tropism， four properties and five flavors and their efficacy of the TCM， and systematic cluster analysis was carried out on the Chinese medicines with frequency more than 40 times. The TCM with higher frequencies and being clustered together were searched for their components and targets through the TCMSP database， and those matched with the disease targets of URTI screened in GeneCards database and Malacards database， so as to obtain the key targets of high-frequency TCM against URTI. The key targets were then used to construct and analyze PPI network and KEGG pathway with STRING and DAVID database. “The network of traditional Chinese medicine-active ingredient-key target-pathway” was constructed by Cytoscape 3.6.1 software， and the topology analysis was carried out. [Result]A total of 464 Chinese herbal compounds were obtained， involving 414 Chinese herbal medicines. Among them， TCM that restoring deficiency and heat-clearing drug， with lung and stomach tropism， cold， warm and bitter and pungent in flavor， were shown the most common;The Astragali radix， radix sileris and Atractylodes macrocephala Koidz were the most frequently used and being clustered together. A total of 32 active components were obtained， and the core components included quercetin， kaempferol， isorhamnetin， wogonin， β-sitosterol， 5-O-Methylvisamminol， divaricatol and so on. There are 175 key targets against URTI， and the core targets include AKT1， MAPK1， TNF， RELA， JUN， TP53， IL6， etc. There are 137 pathways involved， including cancer pathway， PI3K-Akt signaling pathway， TNF signaling pathway， toll-like receptor pathway and so on. [Conclusion]Commonly used TCM for the traditional Chinese medicine compound were those restore deficiency， and they are often combined with heat-clearing drugs， drug for relieving cough， phlegm and asthma， and digestant drugs. The compatibility of the astragali radix， radix sileris and Atractylodes macrocephala Koidz is the most common compound， it may be mainly through quercetin， kaempferol， isorhamnetin， wogonin， β-sitosterol， 5-O-Methylvisamminol， divaricatol and other active ingredients to act on key targets such as AKT1， MAPK1， TNF， and PI3K-Akt signal pathway， TNF signal pathway and Toll-like receptor and other signaling pathways，to take effects together.

Key words Upper respiratory tract infection;Traditional Chinese medicine compound prescription;Data mining;Network pharmacology;Rule of medication;Mechanism of action

基金項目 蘭州市城關區(qū)科技計劃項目（2020-2-2-2）;甘肅省中藥制藥工藝工程研究中心開放課題（ZYGY202004）;甘肅中醫(yī)藥大學科學研究與創(chuàng)新基金項目（2020KCZD-2）;中醫(yī)藥公共衛(wèi)生服務補助專項子課題（2305191901）。

作者簡介 何海（1997—），男，甘肅山丹人，碩士研究生，研究方向：中藥藥效物質基礎及質量控制。

通信作者，教授，博士，碩士生導師，從事中藥藥效物質基礎及質量控制研究。

收稿日期 2021-04-19

呼吸道感染是當前世界導致人類死亡的主要原因之一，全世界有超過10億人受到影響[1-2]。其中，上呼吸道感染（upper respiratory tract infection，URTI）是由細菌、病毒、自身免疫缺陷等因素誘發(fā)[3-4]，在臨床上發(fā)病率較高，且治療控制不及時就容易使炎癥深入蔓延，鼻炎、咽炎、喉炎、扁桃體炎等都屬于上呼吸道感染的類型[5]。臨床常用抗生素作為治療上呼吸道感染的首選藥物，但由于使用抗生素產生的不良反應、耐藥性以及濫用抗生素導致的問題，補充和替代療法在預防和治療上呼吸道感染中成為研究熱點[6]。中醫(yī)是一種基于臨床實踐的經(jīng)驗性醫(yī)學，從中醫(yī)角度來說，上呼吸道感染屬于感冒的范疇，病因多為“正虛邪戀”[7]，許多相關的基礎試驗和臨床用藥都表明中醫(yī)藥在治療上呼吸道感染方面具有優(yōu)勢。為了更好地繼承眾醫(yī)家的用藥經(jīng)驗，該研究借助數(shù)據(jù)挖掘與網(wǎng)絡藥理學分析方法，對治療上呼吸道感染的中藥復方進行整理分析，挖掘中藥治療上呼吸道感染的用藥規(guī)律，并探索高頻中藥的可能作用機制，從而為提高中醫(yī)藥治療上呼吸道感染的有效性和科學性提供依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 數(shù)據(jù)來源

通過中國知網(wǎng)（https：//www.cnki.net/），將“上呼吸道感染”和“中醫(yī)藥”作為主題詞，檢索有關中醫(yī)藥治療上呼吸道感染的相關文獻（1991年10月—2020年12月）。獲得文獻626篇，內含相關組方700余首。

1.2 處方納入標準

明確被診斷為上呼吸道感染的患者用藥處方，組方完整、療效確切且以口服入藥為主要用藥手段的處方。

1.3 處方排除標準

聯(lián)合用藥或用于動物和細胞試驗的處方，交叉重疊的處方，只錄入一篇。

1.4 數(shù)據(jù)處理

共篩選得到相關組方464首，將所有組方涉及的中藥按全國中醫(yī)藥行業(yè)高等教育“十三五”規(guī)劃教材《臨床中藥學》及2020年版《中華人民共和國藥典》中所述，對其名稱、性味歸經(jīng)、功效進行規(guī)范化處理，如將“仙靈脾”規(guī)范為“淫羊藿”，將“惡實”規(guī)范為“牛蒡子”，將“羚羊角粉”規(guī)范為“羚羊角”等，并將處理過的數(shù)據(jù)錄入Excel表格中，整個錄入過程由雙人核對完成。

1.5 數(shù)據(jù)分析

利用Excel對已錄入的中藥及其性味歸經(jīng)、功效等分別進行頻數(shù)統(tǒng)計。運用Excel對上述中藥信息進行處理，并以矩陣的形式導入SPSS 24.0軟件中進行聚類分析，根據(jù)分析結果制作相關圖表。然后通過中藥系統(tǒng)藥理學分析平臺數(shù)據(jù)庫（TCMSP，http：//lsp.nwu.edu.cn/tcmspsearch.php）、Malacards數(shù)據(jù)庫（https：//www.malacards.org/）、 GeneCards 數(shù)據(jù)庫（https：//www.genecards.org/）等對聚類分析后所得的頻數(shù)較高且聚為一類的共性較大的中藥進行成分和靶點的篩選。將篩選得到的靶點與上呼吸道感染的疾病靶點相匹配，獲取高頻中藥作用于上呼吸道感染的關鍵靶點。通過STRING 平臺（https：//string-db.org/）和京都基因與基因組百科全書（Kyoto encyclopedia of genes and genomes，KEGG）對關鍵靶點進行蛋白相互作用（protein-protein interaction，PPI）網(wǎng)絡分析和通路富集分析。最后，通過Cytoscape 3.6.1軟件構建“中藥-活性成分-關鍵靶點-通路”網(wǎng)絡圖，并進行拓撲分析。

2 結果與分析

2.1 用藥頻次統(tǒng)計

對篩選得到的464首處方進行用藥統(tǒng)計，共涉及中藥414味，累計應用頻次4 439次。其中，使用頻次≥40次的中藥共有24味，使用頻次最多的是甘草，共計203次。排名靠前的中藥包括甘草、黃芪、防風、白術、桔梗等。詳見表1。

2.2 性味歸經(jīng)統(tǒng)計

經(jīng)統(tǒng)計（表2），414味中藥的屬性中，性寒的藥物最多，占37.44%;五味屬苦的藥物最多，占46.86%;歸肺經(jīng)的藥物最多，占53.14%。

2.3 主要功效統(tǒng)計

根據(jù)2020版《中華人民共和國藥典》和《臨床中藥學》教材，對414味中藥進行主要功效分類統(tǒng)計。結果發(fā)現(xiàn)（表3），使用頻次較高的是清熱藥和補虛藥，均占19.08%，解表藥和止咳平喘藥次之，各占10.39%和8.70%。補虛藥中又以補氣藥居多，占44.30%。

2.4 高頻中藥系統(tǒng)聚類分析

運用 SPSS 24.0 軟件對頻次≥40次的中藥進行系統(tǒng)聚類分析，共分為6類，如圖1所示。黃芪、防風、白術聚為一類且出現(xiàn)次數(shù)最高。

2.5 高頻藥組抗上呼吸道感染作用機制研究

2.5.1 成分及靶點篩選。

在TCMSP數(shù)據(jù)庫中，以生物利用度（oral bioavailability，OB）≥30%、類藥性（drug like，DL）≥0.18為篩選條件[8]，得到黃芪、防風、白術的活性成分數(shù)量分別為20、18、7。刪除各自無靶點的成分，最終得到黃芪、防風、白術活性成分分別為11、17、4個，共計32個;對應靶點218個。

2.5.2 抗上呼吸道感染關鍵靶點的篩選 。

在GeneCards數(shù)據(jù)庫和Malacards數(shù)據(jù)庫中檢索得到與上呼吸道感染相關的疾病靶點分別為79、6 798個，合并刪除重復項共得到疾病靶點5 331個。將5 331個疾病靶點與黃芪、防風、白術的218個活性成分靶點匹配映射，得到共同靶點175個，即為黃芪、白術、防風抗上呼吸道感染的關鍵靶點。

2.5.3 “中藥-活性成分-關鍵靶點”網(wǎng)絡構建。

將中藥、活性成分、關鍵靶點導入Cytoscape 3.6.1 軟件，初步構建“中藥-活性成分-關鍵靶點”網(wǎng)絡。其中網(wǎng)絡中有210個節(jié)點，該網(wǎng)絡的平均度值為3.75。將Select選擇為Degree Filter，以度值≥3.75為界構建出最終的“中藥-活性成分-關鍵靶點”網(wǎng)絡，見圖2。其中網(wǎng)絡中有49個節(jié)點（3味中藥、22個核心活性成分、24個核心靶點），180條邊。大于平均度值的核心成分見表4。其中槲皮素（quercetin）、漢黃芩素（wogonin）、山柰酚（kaempferol）、β-谷甾醇（beta-sitosterol）、異鼠李素（isorhamnetin）等化合物的度值較大，表明這些化合物可能在含抗上呼吸道感染的復方中發(fā)揮關鍵作用。

2.5.4 關鍵靶點PPI網(wǎng)絡構建。

將黃芪、防風、白術作用于上呼吸道感染的175個關鍵靶點輸入STRING數(shù)據(jù)庫，將Organism 設置為“Homo Sapiens”、combined-score值設置為 0.9，將得到的數(shù)據(jù)以TSV格式導出，將得到的TSV文件導入Cytoscape 3.6.1軟件中，得到蛋白互作網(wǎng)絡，見圖3。度值越大說明靶點在PPI網(wǎng)絡中的位置越重要，表明黃芪、防風、白術治療上呼吸道感染的核心靶點包括AKT1、MAPK1、TNF、RELA、JUN、TP53、IL6等，具體見表5。

2.5.5 關鍵靶點KEGG通路。

將175個關鍵靶點基因導入DAVID 數(shù)據(jù)庫中獲取KEGG數(shù)據(jù)文件。獲得的數(shù)據(jù)文件通過文本文檔導入Excel表格，結果顯示，175個關鍵靶點基因涵蓋了137條通路。根據(jù)靶點基因數(shù)目及P值將前 20 條通路繪制氣泡圖（圖4），發(fā)現(xiàn)黃芪、防風、白術作用上呼吸道感染的通路主要有癌癥通路、TNF 信號通路、HIF-1信號通路等。

2.5.6 “活性成分-關鍵靶點-通路”網(wǎng)絡構建。

采用Cytoscape軟件構建“活性成分-關鍵靶點-通路”網(wǎng)絡，見圖5。所選擇的通路為KEGG 通路分析結果的前20條通路，共包含93個靶點，20條通路中靶點所對應的中藥活性成分有26個，其中來自黃芪、防風、白術的活性成分分別有 8、15、3 個。網(wǎng)絡中度值靠前的活性成分有槲皮素（quercetin）、漢黃芩素（wogonin）、山柰酚（kaempferol）、β-谷甾醇（beta-sitosterol）等;度值靠前的靶點有PTGS2、PIK3CG、MAPK1、AKT1等;度值靠前的通路有癌癥通路、PI3K-Akt 信號通路、TNF信號通路等。

3 討論

3.1 藥味性味歸經(jīng)分析

通過對篩選得到的464首處方所含中藥進行統(tǒng)計分析，結果表明，臨床應用于上呼吸道感染的中藥多歸肺、胃經(jīng)。其中，肺為清虛之體，易受邪氣入侵，

不耐寒熱，故有“肺為嬌臟，難調而易傷”的特點[9]。中醫(yī)認

為，外感六淫，以風為首，風性數(shù)變，可夾寒熱致使肺臟發(fā)生病變。另外，飲食不當，食積腸胃，蘊而化熱，會造成上呼吸道感染的反復發(fā)生[10]。因此，治療上呼吸道感染的中藥常歸肺、胃經(jīng)。四氣五味分析表明，治療上呼吸道感染的中藥以寒溫，苦辛為主。其中，寒性中藥多具有清熱、滋陰、解毒等功效，溫性中藥多具驅寒、助陽、溫里等功效，兩者都可以調節(jié)機體的偏性，抵御外邪入侵[11]。苦味藥多具有清熱、瀉火、燥濕等功效，辛味藥多具有解表、發(fā)散、行氣等功效，現(xiàn)代藥理學研究表明兩者多具有抗炎、抗菌、抗病原微生物等作用[12]。這與上呼吸道感染的病因相一致。

3.2 藥味主要功效分析

通過對篩選得到的中藥進行功效分析發(fā)現(xiàn)，治療上呼吸道感染的中藥使用頻次較高的是補虛藥和清熱藥，解表藥和止咳平喘藥次之，其中補虛藥中又以補氣藥居多。其主要原因：中醫(yī)認為疾病是由機體正氣不足和體質頗偏，外邪入侵產生，如《素問·評熱病論篇》中云“邪之所湊，其氣必虛”[13]。上呼吸道感染病位在肺，肺主一身之氣，當病邪入肺，機體正虛而邪戀[14]，產生咳嗽、喉痛、鼻涕、鼻塞等一系列臨床癥狀[15]。另外，脾主運化，脾胃虛弱，土不生金，肺的衛(wèi)外功能受到損傷，易導致反復上呼吸道感染。本病病因關鍵在于機體正氣虛弱[16]，御邪必先防衛(wèi)固表，因此治療多以補氣藥為主，并根據(jù)其癥候的不同配伍解表藥或清熱藥達到標本兼治的效果。小兒發(fā)病率高，病例多，納入分析的處方較多是導致治療上呼吸道感染的中藥以補虛藥為主的又一重要原因。相關文獻表明成年人每年發(fā)生 2～4 次上呼吸道感染，而兒童發(fā)生6～8 次[17]。兒童的肌膚較為嬌嫩，衛(wèi)外功能較差，較成年人更容易患病[18]。另外由于兒童臟腑嬌嫩，發(fā)病率高，用藥不宜發(fā)散太過且需兼顧久病體虛，所以用藥多以補氣藥為主，解表藥為輔，達到扶正祛邪的目的[19]。上呼吸道感染尤其是急性病毒性上呼吸道感染多會誘發(fā)機體產生發(fā)熱、頭痛、痄腮、喉痛音啞等癥狀，屬于風熱、感冒等范疇，故治療應以清熱解毒、發(fā)散表邪、化痰止咳等為主[20]。因此清熱藥與化痰止咳藥在治療上呼吸道感染的處方中同樣占有較大比例。

3.3 系統(tǒng)聚類分析

為了進一步分析上述所得高頻使用中藥之間的配伍關系及規(guī)律，該研究使用系統(tǒng)聚類分析進行研究，通過配伍頻率分析，結果顯示治療上呼吸道感染的24味高頻中藥被聚為6組，其中配伍頻次最高的一組是黃芪、防風、白術，表明此藥組在上呼吸道感染的預防和治療上表現(xiàn)出積極的作用。方中黃芪主要起補脾益肺的作用，白術可健脾養(yǎng)胃，兩者配伍，增強了黃芪補脾益肺的功效，契合中醫(yī)“培土生金”的思想;另外，黃芪配伍防風，補中兼散、散中有補，有利于散邪而不傷正氣，3藥配伍益氣祛風、扶正祛邪，可有效改善上呼吸道感染癥狀[21]。通過文獻調研發(fā)現(xiàn)，上述3味藥乃玉屏風散的組成[22]。宋代黎民壽在《簡易方》中記載：“《究原方》玉屏風散：治腠理不密，易于感冒”。明代朱橚在《普濟方》中記載：“玉屏風散：治腠理不密，易感風寒，頭昏眩，甚則痛，項強，肩背拘急，噴嚏不已，鼻流清涕，續(xù)續(xù)不斷，經(jīng)久不愈”。表明黃芪、防風、白術常用于治療腠理不密、機體氣虛引起的感冒，與該研究所得的治療上呼吸道感染多以補氣藥和解表藥為主的觀點相一致。由于黃芪、防風、白術3味藥的配伍出現(xiàn)頻次最高且聚為一類，且有文獻表明3味藥配伍后對上呼吸道感染反復發(fā)作的有效率為100%[23]。為了更好地通過網(wǎng)絡藥理學研究對中藥復方抗上呼吸道感染的作用機制進行預測分析，因此選取此藥組進行下一步分析。

3.4 高頻藥組抗上呼吸道感染的作用機制分析

3.4.1 關鍵成分分析。

研究表明，黃芪可調控細胞因子（T細胞和B細胞）以及免疫球蛋白IgG[24]，從而對反復發(fā)作的小兒上呼吸道感染進行預防和治療[25-26]。防風具有解熱、鎮(zhèn)痛、抗炎、增強體液免疫等藥理作用[27]，與其降低血清中IL-1β、IL-6和TNF-α的水平有關[28]。白術可通過促進淋巴細胞轉化、改善免疫細胞的機能[29]以及抑制MAPK和NF-κB通路，抑制炎癥反應[30]而發(fā)揮治療上呼吸道感染的作用。該研究通過“中藥-活性成分-關鍵靶點”網(wǎng)絡分析發(fā)現(xiàn)，在治療上呼吸道感染的中藥復方中，黃芪（槲皮素、山柰酚、異鼠李素）、防風（漢黃芩素、β-谷甾醇、5-O-甲維阿斯米醇、防風色原酮）和白術（3β-乙酰氧基蒼術酮）的活性成分均是其發(fā)揮治療上呼吸道感染作用的可能活性成分。通過文獻調研發(fā)現(xiàn)，槲皮素具有較強的抑菌作用，且抗菌譜較廣[31]，可通過抑制炎癥細胞因子、炎癥酶[32]，調控PI3K/AKT/NF-B信號通路發(fā)揮抗炎作用[33]。山柰酚具有抗菌、抗炎、增強免疫力的作用，與其改變細胞周期[34]，抑制p38 MAPK信號通路[35]，降低炎癥因子水平有關[36]。異鼠李素可通過抑制蛋白激酶、PI3K/AKT/NF-B信號通路發(fā)揮抗炎作用[37]。漢黃芩素可抑制NF-κB信號通路和TGFβ1/Smad3通路減輕炎癥因子的表達[38]。β-谷甾醇具有抗炎、增強免疫力的作用，其作用機制與提高抗炎活性因子、降低炎癥細胞因子、抑制巨噬細胞、增強淋巴細胞增殖等有關[39]。研究表明[28，40-41]，5-O-甲維阿斯米醇和防風中的其他色原酮成分具有解熱、抗炎的作用，其作用機制與降低細胞炎癥因子有關。白術中的蒼術酮可降低細胞ERK、JNK、NF-κB等蛋白的表達并抑制炎癥通路，從而表現(xiàn)出顯著的抗炎作用[42]。綜上分析，黃芪、防風、白術可能通過解熱、鎮(zhèn)痛、抗菌、抗炎、免疫調節(jié)等途徑共同發(fā)揮抗上呼吸道感染的作用。

3.4.2 關鍵靶點分析。

該研究通過PPI網(wǎng)絡分析發(fā)現(xiàn)，黃芪、防風、白術治療上呼吸道感染的核心靶點包括 AKT1、MAPK1、TP53、JUN、RELA、TNF、IL6、MAPK14、EGFR、MAPK8等。其中AKT1屬于AKT組織特異性的亞型之一，可通過磷酸化NF-κB蛋白誘導細胞存活[43]。Liu等[44]研究發(fā)現(xiàn)小檗堿可以通過AKT 1/SOCS 1/NF-κB信號通路，預防DSS誘導的結腸炎。MAPK1是一種絲氨酸/蘇氨酸激酶，在多種細胞的增殖、生存、黏附、遷移和分化過程中起著至關重要的作用[45]。HU等[46]研究發(fā)現(xiàn)，MAPK1可以通過激活p38信號通路，啟動級聯(lián)反應來調節(jié)機體的免疫應答。TP53是具有激活免疫反應和炎癥反應相關基因（趨化因子、細胞因子、細胞外基質調節(jié)因子）功能的一種基因靶點[47]，其突變可顯著增加免疫檢查點（調節(jié)系統(tǒng)性免疫穩(wěn)態(tài)與耐受的信號通路），并激活T-效應器和干擾素信號[48]。JUN是轉錄因子AP-1家族成員[49]，在炎癥的表達過程中起重要作用，Chu等[50]研究表明JNK/c-Jun信號通路可啟動協(xié)同信號級聯(lián)，提高小球膠質細胞炎性小體NLRP3的炎癥活性。NF-κB家族成員RELA是一種廣泛表達的轉錄激活因子，可通過接觸病原體和炎性細胞因子，激活多種炎癥和免疫應答基因的表達[51]。據(jù)此推斷，黃芪、白術、防風中的有效成分作用于上述靶點，通過調節(jié)炎癥細胞的增殖、分化、消亡，增加細胞免疫檢查點，激活T-效應器和干擾素信號等一系列途徑抑制炎癥反應，到達治療上呼吸道感染的目的。

3.4.3 關鍵通路分析。

KEGG 通路分析發(fā)現(xiàn)，黃芪、防風、白術抗上呼吸道感染的主要通路有癌癥通路、PI3K-Akt信號通路、TNF信號通路、Toll樣受體通路等。其中PI3K-Akt信號通路在細胞的增殖、生長、凋亡等過程中起重要作用，當上呼吸道感染病原微生物時，PI3K-Akt通路被激活，通過B細胞和T細胞受體的免疫應答調節(jié)機體的免疫功能[52-53]。TNF信號通路與機體的炎癥反應和免疫應答密切相關[54]，可激活NF-κB信號通路，釋放炎性因子，誘導炎癥反應[55]。Toll樣受體通路與機體的先天性免疫和適應性免疫有關[56]，同時，其還可以調節(jié)NF-κB信號通路，加速炎癥因子的釋放。分析結果顯示，黃芪、防風、白術改善上呼吸道感染的狀況可能是通過調控上述相關信號通路，減輕炎癥反應、調節(jié)免疫應答實現(xiàn)的。

4 總結

該研究總結了中醫(yī)藥治療上呼吸道感染的用藥規(guī)律及高頻藥組的作用機制，發(fā)現(xiàn)治療上呼吸道感染的中藥多以補虛藥為主，常配伍解表藥、清熱藥等，既體現(xiàn)了上呼吸道感染“正虛邪戀”的病因特點，又體現(xiàn)了中醫(yī)扶正祛邪、標本兼治的用藥原則。補虛藥中又以補氣藥為主，體現(xiàn)了補氣藥在上呼吸道感染的治療過程中發(fā)揮的重要作用。治療上呼吸道感染的處方中最常見的基礎配伍為黃芪、防風、白術（玉屏風散）。但目前有關玉屏風散治療上呼吸道感染的“活性成分-關鍵靶點-通路”的綜合機制研究資料較少，該研究通過處方挖掘和數(shù)據(jù)處理得出，其可能主要是通過槲皮素、山柰酚、異鼠李素、漢黃芩素、β-谷甾醇、5-O-甲維阿斯米醇、防風色原酮、3β-乙酰氧基蒼術酮等活性成分，作用于AKT1、MAPK1、TP53、JUN、RELA等關鍵靶點，以及PI3K-Akt信號通路、TNF信號通路、Toll樣受體通路等，共同發(fā)揮預防和治療上呼吸道感染的作用。

參考文獻

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