雷立鋒 李 雪 胡會(huì)杰

肺癌主要發(fā)生于支氣管黏膜上皮，根據(jù)相關(guān)研究[1]報(bào)道顯示，近些年肺癌的發(fā)病率及病死率呈逐年上升趨勢(shì)，主要與現(xiàn)代工業(yè)化的發(fā)展及環(huán)保意識(shí)的不健全、自然環(huán)境惡化、空氣質(zhì)量下降以及長(zhǎng)期吸煙等因素相關(guān)[1]。由于早期肺癌通常無(wú)明顯癥狀表現(xiàn)，因而在臨床確診時(shí)大多已處于局部晚期或晚期，失去手術(shù)治療的最佳機(jī)會(huì)[2]。臨床采取胸部CT篩查，有利于及早發(fā)現(xiàn)周圍型肺癌[3]，對(duì)于發(fā)生在支氣管管腔內(nèi)的小的、中心型肺癌，影像學(xué)手段一般很難發(fā)現(xiàn)[4]。盡管采取活檢的方式對(duì)肺部腫物可以進(jìn)行確診，但由于該方式為侵入性手段，不適合廣泛篩查。血清腫瘤標(biāo)志物作為近年來(lái)逐漸發(fā)展起來(lái)的一個(gè)輔助檢查手段[5]，由于具有無(wú)創(chuàng)、給患者造成的痛苦小、簡(jiǎn)單經(jīng)濟(jì)、快速有效以及有一定的特異度和靈敏度等多種優(yōu)勢(shì)，因而在臨床上越來(lái)越受到醫(yī)生和患者的認(rèn)可。本研究探討血清程序化細(xì)胞死亡分子5(programmed cell death5，PDCD5)蛋白、癌胚抗原(carcino-embryonic antigen，CEA)和細(xì)胞白蛋白19(Cytokeratin-19，CYFRA21-1)在不同分期肺癌患者中的表達(dá)水平，同時(shí)分析其臨床意義，現(xiàn)將結(jié)果報(bào)告如下。

1 材料與方法

1.1 一般資料

選取我院2016年8月至2020年8月收治的肺癌患者184例作為肺癌組，包括腺癌72例，鱗癌60例，小細(xì)胞癌52例；116例男性，68例女性；年齡25～76歲，平均年齡(62.51±4.86)歲；TNM分期：Ⅰ期～Ⅱ期76例，Ⅲ期～Ⅳ期108例。納入標(biāo)準(zhǔn)：①年齡大于18歲；②預(yù)期壽命至少大于3個(gè)月；③臨床資料完整；④了解本研究目的且愿意簽署知情同意書。排除標(biāo)準(zhǔn)：①入院前已接受手術(shù)或放化療治療者；②依從性差；③缺乏肺癌病理學(xué)診斷者。選取同期于我院接受體檢的健康體檢者(常規(guī)體檢及肝腎功能正常且無(wú)肺癌相關(guān)高危因素)80例作為對(duì)照組，46例男性，34例女性；年齡26～80歲，平均年齡(61.89±4.79)歲。2組一般資料差異均不顯著(P>0.05)，見表1。

表1 2組一般資料比較(例，%)

1.2 方法

(1)樣本采集：所有研究者入院后，均采集5 ml清晨空腹靜脈血，并于室溫靜置30 min后，于轉(zhuǎn)速為3000 r/min的離心機(jī)內(nèi)離心10 min，以分離血清，并分裝保存于-70 ℃超低溫冰箱內(nèi)，集中檢測(cè)。(2)血清PDCD5蛋白檢測(cè)方法：采用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)檢測(cè)血清PDCD5蛋白水平，PDCD5試劑盒購(gòu)自武漢博士德生物公司，具體操作嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書進(jìn)行。(3)血清CEA和CYFRA21-1檢測(cè)方法：采用電化學(xué)發(fā)光免疫分析法檢測(cè)CEA和CYFRA21-1水平，儀器為美國(guó)Roche公司的Cobas e 601型化學(xué)發(fā)光免疫多功能檢測(cè)儀，試劑由Roche公司提供，嚴(yán)格按照說(shuō)明書操作。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

2 結(jié)果

2.1 2組血清PDCD5、CEA和CYFRA21-1表達(dá)水平比較

肺癌組PDCD5水平明顯低于對(duì)照組，CEA和CYFRA21-1水平明顯高于對(duì)照組，其差異均具統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05)，見表2。

表2 2組血清PDCD5、CEA和CYFRA21-1表達(dá)水平比較

2.2 不同TNM分期肺癌患者血清PDCD5、CEA和CYFRA21-1表達(dá)水平比較

Ⅰ～Ⅱ期肺癌患者血清PDCD5水平明顯高于Ⅲ～Ⅳ期肺癌患者，CEA和CYFRA21-1水平明顯低于Ⅲ～Ⅳ期肺癌患者，其差異均具統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05)，見表3。

表3 不同TNM分期肺癌患者血清PDCD5、CEA和CYFRA21-1表達(dá)水平比較

2.3 血清PDCD5、CEA和CYFRA21-1水平與肺癌患者TNM分期相關(guān)性分析

經(jīng)Pearson相關(guān)性分析，血清PDCD5水平與肺癌患者TNM分期呈負(fù)相關(guān)(γ=-0.423)，血清CEA和CYFRA21-1水平與肺癌患者TNM分期呈正相關(guān)(γ1=0.514，γ2=0.346)，見表4。

表4 血清PDCD5、CEA和CYFRA21-1水平與肺癌患者TNM分期相關(guān)性分析

3 討論

肺癌發(fā)病率和死亡率近些年呈逐年上升趨勢(shì)，已成為絕大多數(shù)國(guó)家癌癥死亡的主要原因[6]。由于肺癌發(fā)生的隱匿性較強(qiáng)，當(dāng)有確切的影像學(xué)和組織病理學(xué)證據(jù)時(shí)，大部分患者都已診斷為晚期，失去了最佳治療的機(jī)會(huì)，因此對(duì)早期肺癌患者進(jìn)行血清腫瘤標(biāo)志物的檢測(cè)已成為目前臨床診斷肺癌的重要的輔助檢查手段之一[7]。

PDCD5是近年來(lái)發(fā)現(xiàn)的一個(gè)新的人類基因，其編碼的PDCD5蛋白可與半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Caspase-3)結(jié)合，在細(xì)胞凋亡過(guò)程中發(fā)揮重要作用[8]，由于PDCD5蛋白與Caspase-3結(jié)合明顯延長(zhǎng)活化的Caspase-3的體外半衰期，提示PDCD5基因可能作為Caspase-3的正調(diào)控分子參與細(xì)胞凋亡[9]，但其具體機(jī)制還有待進(jìn)一步確證。另也有相關(guān)文獻(xiàn)[10]顯示，PDCD5蛋白可與組蛋白乙酰轉(zhuǎn)移酶Tip60相互作用，導(dǎo)致DNA損傷，從而促進(jìn)細(xì)胞凋亡。本研究對(duì)肺癌患者和健康體檢者血清PDCD5水平進(jìn)行比較，結(jié)果顯示，肺癌患者血清PDCD5的表達(dá)水平明顯低于健康體檢者，與汪端等[11]研究結(jié)果一致，均顯示血清PDCD5在胃癌患者中的水平顯著低于正常人群。CEA是一種糖蛋白，相對(duì)分子質(zhì)量較大，肺癌細(xì)胞可直接產(chǎn)生，主要作為非小細(xì)胞肺癌相關(guān)的有特異性的腫瘤標(biāo)志[12]。CYFRA21-1廣泛存在于上皮細(xì)胞，是一種分化特異的蛋白質(zhì)，為組成細(xì)胞骨架的蛋白質(zhì)之一，在上皮細(xì)胞惡性轉(zhuǎn)化過(guò)程中，激活的蛋白酶加速角蛋白的降解，使大量角蛋白片段釋放入血，在肺癌患者血循環(huán)中通常含量較豐富[13]。本研究對(duì)肺癌患者和健康體檢者血清CEA和CYFRA21-1水平進(jìn)行比較，結(jié)果顯示，肺癌患者血清CEA和CYFRA21-1水平均明顯高于健康體檢者，與單新潔等[14]研究結(jié)果一致，由于CEA和CYFRA21-1在肺癌腫瘤細(xì)胞中高表達(dá)，當(dāng)腫瘤細(xì)胞凋亡或死亡時(shí)釋放入血，因此，在臨床上可將CEA和CYFRA21-1水平作為腫瘤診斷的一個(gè)重要指標(biāo)。

根據(jù)TNM分期，本研究將肺癌患者分為Ⅰ期～Ⅱ期76例，Ⅲ期～Ⅳ期108例，分別對(duì)2組血清PDCD5、CEA和CYFRA21-1水平進(jìn)行比較，發(fā)現(xiàn)Ⅰ～Ⅱ期肺癌患者血清PDCD5水平顯著高于Ⅲ～Ⅳ期肺癌患者，這提示PDCD5蛋白表達(dá)與患者臨床分期有關(guān)，且該蛋白的低表達(dá)預(yù)示著患者臨床分期晚以及不良預(yù)后；Ⅰ～Ⅱ期肺癌患者CEA和CYFRA21-1水平顯著低于Ⅲ～Ⅳ期肺癌患者，分析原因，可能由于腫瘤處于中晚期時(shí)，細(xì)胞發(fā)生大量增殖，并出現(xiàn)異常分化或低分化，因而導(dǎo)致各種腫瘤標(biāo)志物在腫瘤細(xì)胞的表達(dá)急劇增多，在腫瘤細(xì)胞凋亡或異常裂解時(shí)進(jìn)入血液，從而造成血清中各種腫瘤標(biāo)志物水平明顯升高。經(jīng)Pearson相關(guān)性分析，發(fā)現(xiàn)肺癌患者血清PDCD5水平與肺癌患者TNM分期呈負(fù)相關(guān)(γ=-0.423)，血清CEA和CYFRA21-1水平與肺癌患者TNM分期呈正相關(guān)(γ1=0.514，γ2=0.346)，這也為臨床治療肺癌提供了血清參考指標(biāo)，臨床上可通過(guò)提高PDCD5水平，降低CEA和CYFRA21-1水平來(lái)達(dá)到改善患者預(yù)后的目的。本研究后續(xù)還需進(jìn)一步擴(kuò)大樣本量，并進(jìn)行隨訪觀察，動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)PDCD5、CEA和CYFRA21-1水平，以進(jìn)一步確證其相關(guān)性，為肺癌的治療提供新的病情評(píng)估指標(biāo)。

綜上所述，肺癌患者血清PDCD5水平存在明顯低表達(dá)，而CEA和CYFRA21-1水平存在明顯高表達(dá)，PDCD5、CEA和CYFRA21-1均與TNM分期密切相關(guān)，可將其作為肺癌臨床診斷、治療以及預(yù)后評(píng)估的參考依據(jù)。