祝惠欽

云浮市人民醫(yī)院，廣東云浮 527300

耳聾是人類殘疾中的常見(jiàn)類型，隨著分子生物學(xué)和遺傳學(xué)的深入研究，遺傳因素導(dǎo)致的耳聾逐步被人們重視。我國(guó)每年約有2 000萬(wàn)新生兒出生，新生兒先天性耳聾的發(fā)生率在 0.93%～7.70%[1]，新生兒耳聾基因攜帶率可達(dá)5.00%[2]。我國(guó)常見(jiàn)耳聾基因主要有GJB2、SLC26A4、GJB3和線粒體DNA(mtDNA)基因，且不同地區(qū)、民族突變熱點(diǎn)和頻率各有不同[3]，故積極開展耳聾基因篩查有重要的臨床意義。本研究通過(guò)分析云浮地區(qū)1 983例新生兒遺傳性耳聾基因篩查結(jié)果，初步了解云浮地區(qū)新生兒遺傳性耳聾基因突變特點(diǎn)，為云浮地區(qū)的遺傳性耳聾防治提供參考依據(jù)。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2019年1月至2021年3月在云浮市人民醫(yī)院出生并接受遺傳性耳聾基因篩查的新生兒1 983例作為研究對(duì)象，其中男嬰1 100例，女嬰883例。所有監(jiān)護(hù)人同意新生兒接受遺傳性耳聾基因篩查和聽力篩查并由監(jiān)護(hù)人簽署知情同意書。

1.2方法 采集所有新生兒足跟血斑點(diǎn)標(biāo)本，采用PCR+導(dǎo)流雜交法對(duì)4個(gè)常見(jiàn)遺傳性耳聾易感基因(GJB2、SLC26A4、GJB3和 mtDNA)13個(gè)突變位點(diǎn)進(jìn)行檢測(cè)。13個(gè)突變位點(diǎn)分別是：GJB2基因的 235delc、299delAT、176del16、35delG、155delTCTG，SLC26A4基因的IVS7-2A>G、1229C>T、2168A>G，GJB3基因的538C >T，以及mtDNA基因的12SrRNA1555A>G、12SrRNA1494C>T、tRNA7445A>G、tRNA12201T>C。耳聾易感基因檢測(cè)試劑盒購(gòu)自廣州凱普醫(yī)藥科技有限公司。使用耳聲發(fā)射器進(jìn)行聽力篩查，儀器購(gòu)自德國(guó)麥科(Maico)聽力儀器設(shè)備公司。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 利用Excel 2007建立數(shù)據(jù)庫(kù)，應(yīng)用SPSS23.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。計(jì)數(shù)資料以率或構(gòu)成比表示，采用χ2檢驗(yàn)，當(dāng)期望頻數(shù)小于5時(shí)采用Fisher精確檢驗(yàn)，以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1不同性別常見(jiàn)遺傳性耳聾基因攜帶率分析 1 983例新生兒4個(gè)常見(jiàn)遺傳性耳聾基因突變攜帶率為2.72%(54/1 983)，其中男嬰遺傳性耳聾基因突變攜帶率為2.45%(27/1 100)，女嬰遺傳性耳聾基因突變攜帶率為3.06%(27/883)，男女遺傳性耳聾基因突變攜帶率差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=0.673，P>0.05)。

2.24個(gè)常見(jiàn)遺傳性耳聾基因突變攜帶率分析 GJB2基因攜帶率為1.51%(30/1 983)，占比為55.56%(30/54)。SLC26A4基因攜帶率為0.96%(19/1 983)，占比為35.19%(19/54)。GJB3基因攜帶率為0.10%(2/1 983)，mtDNA基因攜帶率為0.15%(3/1 983)。以GJB2基因攜帶為主，SLC26A4基因次之。4個(gè)常見(jiàn)遺傳性耳聾基因突變攜帶率比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=40.320，P<0.001)。

2.34個(gè)常見(jiàn)遺傳性耳聾基因13個(gè)突變位點(diǎn)情況分析 4個(gè)常見(jiàn)遺傳性耳聾基因13個(gè)基因位點(diǎn)突變頻率以GJB2 235delC(33.33%)最高，SLC26A4 IVS7-2A>G(25.93%)次之，mtDNA 12SrRNA1494C>T和mtDNA tRNA12201T>C未檢出。GJB2基因以雜合突變?yōu)橹鳎急葹?6.67%(29/30)，僅有1例是GJB2基因純合突變，為GJB2 155delTCTG，未檢出GJB2基因復(fù)合雜合突變。SLC26A4和GJB3 538C>T均為雜合突變，而mtDNA異質(zhì)突變和均質(zhì)突變均有檢出。見(jiàn)表1。

表1 1 983例新生兒4個(gè)遺傳性耳聾基因13個(gè)突變位點(diǎn)情況分析

2.454例耳聾基因突變新生兒聽力篩查情況分析 54例耳聾基因突變新生兒循醫(yī)囑在本院完成聽力篩查的有34例。其中有32例為雙耳均通過(guò)聽力篩查，有1例新生兒聽力篩查結(jié)果為雙耳均不通過(guò)，是GJB2 235delC基因雜合突變，有1例新生兒聽力篩查結(jié)果為左耳不通過(guò)、右耳通過(guò)，是GJB2 299delAT基因雜合突變。

3 討 論

耳聾是人類主要的殘疾病之一，主要由遺傳因素引起，占60%～70%[4]。在已開展耳聾基因篩查的機(jī)構(gòu)中，4個(gè)基因9個(gè)位點(diǎn)及4個(gè)基因20個(gè)位點(diǎn)的篩查方案應(yīng)用較廣，其中以GJB2基因及SLC26A4基因變異最為常見(jiàn)[2]。本研究對(duì)4個(gè)常見(jiàn)遺傳性耳聾基因13個(gè)基因位點(diǎn)的檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行分析，并對(duì)耳聾基因突變的新生兒進(jìn)行聽力篩查追蹤分析。

本研究分析本地區(qū)1 983例新生兒遺傳性耳聾基因篩查結(jié)果發(fā)現(xiàn)，遺傳性耳聾基因突變攜帶率為2.72%(54/1 983)，低于其他地區(qū)報(bào)告的攜帶率(3.56%～3.85%)[5-8]?？紤]本研究檢測(cè)的是4個(gè)常見(jiàn)遺傳性耳聾基因13個(gè)基因位點(diǎn)，通過(guò)增加檢測(cè)相關(guān)基因及突變位點(diǎn)個(gè)數(shù)，新生兒的常見(jiàn)遺傳性耳聾基因攜帶檢出率是否會(huì)升高，有待進(jìn)一步的研究。分析本地區(qū)不同性別新生兒常見(jiàn)遺傳性耳聾基因攜帶率發(fā)現(xiàn)，男嬰和女嬰之間的遺傳性耳聾基因突變攜帶率差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=0.673，P>0.05)，與韓佳佳等[9]報(bào)道的結(jié)果一致。4個(gè)常見(jiàn)遺傳性耳聾基因之間突變攜帶率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=40.320，P<0.001)，提示云浮地區(qū)不同基因突變位點(diǎn)的攜帶率有所不同，以GJB2基因攜帶為主，SLC26A4基因次之。

GJB2基因突變與遲發(fā)性耳聾存在一定的相關(guān)性，存在種族、地區(qū)差異性[10]，而GJB2 235 delC突變?cè)跂|亞較常見(jiàn)[11]。本研究中，GJB2基因攜帶率為1.51%，以GJB2 235delC(33.33%)突變頻率最高，提示云浮地區(qū)新生兒235delC是GJB2基因上的熱點(diǎn)突變，與梁少明等[12]報(bào)道的粵西部分地區(qū)耳聾患者一致，而梁少明等[12]同時(shí)發(fā)現(xiàn)GJB2 109G>A也是粵西地區(qū)GJB2基因的突變熱點(diǎn)。云浮地區(qū)是否需要將GJB2 109G>A突變位點(diǎn)作為耳聾基因篩查的常規(guī)項(xiàng)目，有待進(jìn)一步的臨床研究。本研究檢出1例為GJB2 155delTCTG純合突變，該病例聽力初篩通過(guò)，雖然為非先天性聾兒，但也應(yīng)及早進(jìn)行干預(yù)，避免由聾致啞。SLC26A4基因與耳聾-甲狀腺腫綜合征、大前庭導(dǎo)水管綜合征的關(guān)系非常密切。本研究SLC26A4基因攜帶率為0.96%，以IVS7-2A>G(25.93%)位點(diǎn)突變?yōu)橹?，低于余紅等[13]報(bào)道的新生兒SCL26A4檢出率(1.17%)，但與其IVS7-2A>G位點(diǎn)突變構(gòu)成比(25.47%)一致。本研究檢出3例為SLC26A4 1229C>T雜合突變，均能通過(guò)聽力初篩。GJB3基因位屬常染色體顯性或隱性遺傳，該基因突變往往會(huì)導(dǎo)致高頻聽力損失或后天性耳聾[14]。本研究檢出2例新生兒GJB3 538C>T雜合突變(0.10%)，這2例新生兒均能通過(guò)聽力初篩。mtDNA 12SrRNA1555A>G和12SrRNA1494C>T與藥物性耳聾關(guān)系密切，部分患者對(duì)氨基糖甙類抗菌藥物高度敏感，可致攜帶者不可逆轉(zhuǎn)的聽力損失[15]。本研究中云浮地區(qū)雖然暫未檢出12SrRNA1494C>T，但有檢出2例患者是12SrRNA1555A>G異質(zhì)突變(0.10%)，提示臨床對(duì)這2例患者應(yīng)禁止使用氨基糖苷類抗菌藥物進(jìn)行治療。本研究檢出1例為tRNA7445A>G均質(zhì)突變，能通過(guò)聽力初篩，未檢出tRNA12201T>C。通過(guò)分析云浮地區(qū)與其他地區(qū)[5-9]的4個(gè)耳聾基因(GJB2、SLC26A4、GJB3和 mtDNA)的攜帶情況，發(fā)現(xiàn)不同地區(qū)相同耳聾基因的攜帶率各有特點(diǎn)，所以各地區(qū)應(yīng)積極開展遺傳性耳聾基因篩查工作，了解區(qū)域內(nèi)的耳聾基因突變特點(diǎn)，采取合適的防治措施。

綜上所述，云浮地區(qū)新生兒遺傳性耳聾基因以GJB2基因攜帶為主、SLC26A4基因次之，而GJB3基因與mtDNA基因攜帶相對(duì)少見(jiàn)。基因位點(diǎn)突變頻率以GJB2 235delC(33.33%)最高，SLC26A4 IVS7-2A>G(25.93%)次之。同一地區(qū)不同耳聾基因突變位點(diǎn)的攜帶率不同，不同地區(qū)相同耳聾基因的攜帶各有特點(diǎn)，需要根據(jù)當(dāng)?shù)剡z傳性耳聾基因突變特點(diǎn)采取合適的防治措施。