曹慧慧，王帥，趙海濤，王雅靜，張亮，張賀鳳，劉會(huì)會(huì)，周彥成，湯思凝*，閆艷華*

（1.唐山市食品藥品綜合檢驗(yàn)檢測(cè)中心，河北唐山 063000）（2.河北省農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全檢測(cè)技術(shù)創(chuàng)新中心，河北唐山 063000）（3.唐山市功能性農(nóng)產(chǎn)品產(chǎn)業(yè)技術(shù)研究院，河北唐山 063000）

韭菜具有特殊辛香氣味，是我國(guó)北方人偏愛的鱗莖類蔬菜之一，其營(yíng)養(yǎng)豐富且具有一定的藥用價(jià)值[1]。但由于連作栽培等導(dǎo)致其病蟲害逐年加重，嚴(yán)重影響韭菜的產(chǎn)量和質(zhì)量[2,3]。目前有超過(guò)1100種不同類別的農(nóng)藥以各種形式和組合使用在農(nóng)作物上，用來(lái)殺蟲、殺菌和除草以確保農(nóng)產(chǎn)品的產(chǎn)量和貯存安全[4]。農(nóng)藥使用不當(dāng)，導(dǎo)致殘留在作物與環(huán)境中，通過(guò)食物鏈的富集在生物體內(nèi)不斷積累，對(duì)人體健康構(gòu)成了嚴(yán)重威脅[5]。

近年來(lái)農(nóng)藥殘留急性中毒事件時(shí)有發(fā)生，如2004年河北一地施用禁用劇毒農(nóng)藥甲拌磷灌根防治韭蛆，導(dǎo)致多人中毒[6]；2010年再次爆出青島毒韭菜事件，導(dǎo)致9人中毒[7]。針對(duì)韭菜病害長(zhǎng)期使用農(nóng)藥，產(chǎn)生一定程度的抗藥性，導(dǎo)致過(guò)量使用農(nóng)藥才可獲得比較好的防治效果，加上部分農(nóng)戶未嚴(yán)格執(zhí)行蔬菜采收間隔期的規(guī)定，造成農(nóng)藥殘留超標(biāo)問(wèn)題[8]。開展韭菜中農(nóng)藥殘留檢測(cè)及膳食風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估可以確定主要危害因子和具體來(lái)源，且能夠掌握潛在風(fēng)險(xiǎn)隱患，從而有效控制其質(zhì)量安全。Bolor等[9]對(duì)加納蔬菜中有機(jī)氯農(nóng)藥殘留進(jìn)行了檢測(cè)及風(fēng)險(xiǎn)評(píng)價(jià)；劉淑梅等[10]對(duì)宿州市韭菜5種農(nóng)藥殘留進(jìn)行監(jiān)測(cè)和風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估；張旭昇等[11]對(duì)上海市售韭菜進(jìn)行腐霉利殘留的膳食暴露風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估。但對(duì)一地區(qū)全年不同時(shí)期生產(chǎn)流通的韭菜和多種農(nóng)藥同時(shí)監(jiān)測(cè)的研究文獻(xiàn)報(bào)道較少。

本研究在唐山地區(qū)農(nóng)貿(mào)市場(chǎng)、超市及生產(chǎn)基地等抽取韭菜樣品，利用氣相色譜儀（GC）和高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜（HPLC-MS/MS）對(duì)415個(gè)韭菜樣品進(jìn)行了68種農(nóng)藥殘留定性定量檢測(cè)，并對(duì)韭菜中農(nóng)藥殘留對(duì)居民經(jīng)膳食攝入的風(fēng)險(xiǎn)進(jìn)行分析評(píng)估，旨在明確唐山地區(qū)農(nóng)藥殘留污染與膳食攝入風(fēng)險(xiǎn)情況，確保韭菜質(zhì)量安全受控，并為其安全生產(chǎn)和農(nóng)藥的規(guī)范合理使用提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 樣品采集與制備

韭菜樣本的采集按照相關(guān)規(guī)定執(zhí)行。2020年分批次隨機(jī)對(duì)包括荷花坑批發(fā)市場(chǎng)在內(nèi)的 20家批發(fā)零售市場(chǎng)進(jìn)行抽樣；韭菜病害監(jiān)測(cè)期對(duì)樂亭縣、灤南縣、豐潤(rùn)區(qū)、玉田縣、豐南區(qū)5個(gè)縣區(qū)韭菜生產(chǎn)基地上市產(chǎn)品進(jìn)行抽樣；共采集韭菜樣品415批次，每個(gè)樣本重量約3 kg。

將采集的單個(gè)樣品用四分法取樣，縮分后將其切碎，充分混勻后放入粉碎機(jī)粉碎，將粉碎后的樣品置于待測(cè)樣品盒，標(biāo)記編號(hào)后于-20～8 ℃條件下保存，待測(cè)。制樣工具每處理一個(gè)樣品后應(yīng)沖冼干凈，以防交叉污染。

1.2 試劑

農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)溶液（1000 μg/mL），購(gòu)自農(nóng)業(yè)部環(huán)境保護(hù)科研監(jiān)測(cè)所；色譜級(jí)乙腈和甲醇，純度＞99.9%，均購(gòu)自西格瑪奧德里奇（上海）貿(mào)易有限公司；色譜級(jí)甲酸，純度＞88.0%，購(gòu)自賽默飛世爾科技(中國(guó))有限公司；色譜級(jí)乙酸銨，純度＞99.0%，購(gòu)自天津市光復(fù)精細(xì)化工研究所；提取鹽包由5.5 g無(wú)水硫酸鎂、1.5 g氯化鈉、0.5 g檸檬酸氫二鈉及1 g檸檬酸鈉組成，購(gòu)自北京本立科技有限公司；凈化劑內(nèi)含4 mm氧化鋯珠5粒、100 mg N-丙基乙二胺（PSA）、600 mg無(wú)水硫酸鎂及100 mg C18，氧化鋯珠（R104）和雙層提取凈化管（V03），均購(gòu)自北京本立科技有限公司；純凈水購(gòu)自廣州屈臣氏食品飲料有限公司。

1.3 儀器與設(shè)備

LCMS-8040液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀，配有電噴霧離子源（ESI），日本島津公司；GC-2010plus氣相色譜儀，日本島津公司；SiO-6512全自動(dòng)前處理設(shè)備，北京本立科技有限公司；SZ13022-NY 0.2 μm有機(jī)濾膜，天津市領(lǐng)航實(shí)驗(yàn)設(shè)備股份有限公司；T-200電子天平，常熟雙杰儀器制造廠；色譜柱為Phenomenex C18（50 mm×3.00 mm，2.60 μm）和Rtx-5（30 m×0.25 mm×0.25 μm）；T25型均質(zhì)機(jī)，德國(guó)IKA公司；Vortex-2漩渦混合儀，上海滬西分析儀器廠。

表1 本研究評(píng)估的農(nóng)藥Table 1 The pesticides evaluated by this study

表2 68種農(nóng)藥檢出限值Table 2 Detection limits of 68 pesticides

1.4 檢測(cè)項(xiàng)目及樣品前處理

參照國(guó)家或農(nóng)業(yè)標(biāo)準(zhǔn)方法測(cè)定韭菜中農(nóng)藥殘留[12,13]，利用液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀和氣相色譜儀對(duì) 68種農(nóng)藥殘留進(jìn)行檢測(cè)，主要包括45種殺蟲劑、20種殺菌劑和3種殺螨劑，詳細(xì)信息如表1所示。

樣品前處理采用QuEChERS方法，用乙腈溶液進(jìn)行提取，放入QuEChERS前處理設(shè)備中凈化洗脫，從內(nèi)管中取凈化液過(guò)0.22 μm的有機(jī)微孔濾膜，濾液供LC-MS/MS測(cè)定用；分別取凈化液1 mL進(jìn)行氮吹用正己烷轉(zhuǎn)溶后過(guò)0.22 μm的有機(jī)微孔濾膜，濾液供GC測(cè)定用。每處理20批樣品同時(shí)選取陰性韭菜樣品進(jìn)行農(nóng)藥混合標(biāo)準(zhǔn)液的添加回收率質(zhì)控試驗(yàn)，每組質(zhì)控樣品進(jìn)行3平行處理，加標(biāo)回收率、精密度（RSD）應(yīng)符合相應(yīng)檢測(cè)方法要求。

1.5 數(shù)據(jù)分析與判斷依據(jù)

1.5.1 殘留檢測(cè)結(jié)果判定與分析

對(duì)檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行判定及分析，統(tǒng)計(jì)檢出農(nóng)藥種類與殘留量，通過(guò)《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品中農(nóng)藥最大殘留限量》（GB 2763-2019）[14]和《中國(guó)農(nóng)藥信息網(wǎng)》[15]，查詢韭菜和鱗莖類蔬菜的最大殘留限量（MRL）值及農(nóng)藥登記信息，并對(duì)殘留污染特征進(jìn)行分析。檢測(cè)結(jié)果中農(nóng)藥殘留量低于檢出限的樣品，視為合格樣品，參數(shù)檢出限值如表2所示；檢測(cè)結(jié)果顯示有農(nóng)藥檢出，但殘留量低于GB 2763-2019規(guī)定的MRL即為未超標(biāo)樣品，視為合格樣品；反之，檢測(cè)結(jié)果超過(guò)規(guī)定的MRL即為超標(biāo)樣品，視為不合格樣品；部分農(nóng)藥在樣品中有檢出，但在GB 2763-2016中無(wú)對(duì)應(yīng)樣品的最大殘留限量值，其結(jié)果無(wú)法判定。韭菜樣品農(nóng)殘檢出率、合格率及不合格率分別按公式（1）、（2）、（3）計(jì)算。

1.5.2 膳食風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估

膳食攝入風(fēng)險(xiǎn)按公式（4）計(jì)算[16,17]。

式中：

NEDI——某種農(nóng)藥估算的每日攝入量，mg/(kg bw·d)；

STMRi——農(nóng)藥在某農(nóng)產(chǎn)品中的規(guī)范殘留試驗(yàn)中值，mg/kg；

Fi——一般人群對(duì)某農(nóng)產(chǎn)品的消費(fèi)量，kg/d，韭菜是0.046 kg/d[10]；

bw——人均體重，kg，中國(guó)人一般按照63 kg計(jì)算[17]。

膳食攝入風(fēng)險(xiǎn)按NEDI/ADI比值判斷，其中ADI為每日允許攝入量[14]。當(dāng)NEDI/ADI≤1時(shí)，表示其風(fēng)險(xiǎn)可接受，值越小，風(fēng)險(xiǎn)越低；當(dāng) NEDI/ADI＞1時(shí)，表示有不可接受的慢性風(fēng)險(xiǎn)，值越大，風(fēng)險(xiǎn)越高。

1.6 數(shù)據(jù)處理

MRL和ADI均為GB 2763-2019標(biāo)準(zhǔn)中給定數(shù)值。依據(jù)相關(guān)檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定，殘留含量＞1.00 mg/kg時(shí)，計(jì)算結(jié)果保留3位有效數(shù)字；殘留含量＜1.00 mg/kg時(shí)，計(jì)算結(jié)果保留2位有效數(shù)字。檢出率、合格率和不合格率統(tǒng)一保留兩位小數(shù)。

2 結(jié)果與討論

2.1 農(nóng)藥殘留的總體檢測(cè)情況分析

各農(nóng)藥的殘留結(jié)果如表3所示。2020年根據(jù)韭菜生產(chǎn)及上市情況按需抽檢415個(gè)韭菜樣品，其中共計(jì)288個(gè)樣品檢出農(nóng)藥殘留，檢出率為69.40%；共檢出 41種農(nóng)藥殘留，占檢測(cè)農(nóng)藥總數(shù)（68種）的60.29%，單項(xiàng)農(nóng)藥檢出率為0.24%～41.20%；其中，有171批次樣品檢出噻蟲胺，檢出率最高為41.20%，噻蟲胺被推薦用于防治韭蛆，但此農(nóng)藥在中國(guó)尚未制定韭菜或鱗莖類蔬菜中的限量標(biāo)準(zhǔn)，可能對(duì)人體健康存在潛在風(fēng)險(xiǎn)；韭菜樣品中腐霉利檢出率也較高，為35.42%，這與其他研究中檢出率為32.30%結(jié)果基本一致[10]。張旭晟等[11]報(bào)道 2016～2018年上海市市售157件韭菜樣品中腐霉利殘留總體檢出率也高達(dá)53.00%。

在檢出的41種農(nóng)藥中，有7種為禁用和限用農(nóng)藥，即甲胺磷、治螟磷、甲拌磷（甲拌磷砜、甲拌磷亞砜）和毒死蜱、克百威（3羥基克百威）乙酰甲胺磷、氟蟲腈（氟蟲腈砜、氟甲腈），涉及45批樣品，檢出率為10.84%。

其中27種農(nóng)藥按照國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)[8]判定，有158個(gè)樣品涉及12種農(nóng)藥殘留超標(biāo)，不合格率為38.07%，超標(biāo)農(nóng)藥為腐霉利125批次、敵敵畏16批次、毒死蜱8批次、克百威（3-羥基克百威）5批次、啶蟲脒4批次、辛硫磷3批次、治螟磷2批次和甲拌磷、氟蟲腈、甲霜靈、腈菌唑、甲胺磷各1批次；超標(biāo)農(nóng)藥的MRL值依次為0.2、0.2、0.05、0.1、0.02、0.02、0.02、0.01、0.05、0.2、0.01、0.06和0.02 mg/kg。腐霉利超標(biāo)批次最多，樣品不合格率為30.12%，且最大檢出值為12.0 mg/kg，是MRL值的60倍，與呂冰峰等[18]對(duì)2018年蔬菜國(guó)家食品安全監(jiān)督抽檢結(jié)果進(jìn)行分析得出韭菜不合格的原因主要為腐霉利超標(biāo)研究結(jié)果一致；其次為敵敵畏，超標(biāo)率為 3.86%，韭菜限用藥毒死蜱超標(biāo)率也達(dá)1.93%。

表3 韭菜中農(nóng)藥殘留檢出結(jié)果Table 3 Determination result of pesticide residues in Chinese chives

2.2 不同采樣時(shí)間韭菜農(nóng)藥殘留狀況

由圖1可以看出，韭菜的農(nóng)藥殘留狀況隨季節(jié)和生產(chǎn)方式變換而有所波動(dòng)，這與氣候情況、病蟲害發(fā)生類型以及種植戶噴施農(nóng)藥的習(xí)慣有關(guān)。冬季采收韭菜農(nóng)殘檢出率和不合格率均處于較高水平，4月至 8月期間韭菜合格率相對(duì)較高。

從表4統(tǒng)計(jì)結(jié)果可以看出，不同月份韭菜樣品農(nóng)殘檢出率均處于較高水平，尤其1～3月、12月檢出率均在80.00%以上。1月、2月、12月不合格率分別高達(dá)82.54%、83.33%、70.67%，3個(gè)月超標(biāo)參數(shù)多為腐霉利。當(dāng)前，韭菜種植主要分為露地和大棚兩種生產(chǎn)方式?！盎颐共　笔蔷虏朔N植過(guò)程中一種常見病害，尤其是大棚溫室種植的冬春季韭菜。腐霉利作為防治灰霉病的登記用藥被菜農(nóng)普遍使用。大棚溫室種植環(huán)境濕度大造成腐霉利自然降解能力下降，殘留時(shí)間延長(zhǎng)導(dǎo)致冬春季韭菜腐霉利檢出和超標(biāo)率較高。4月份樣品中敵敵畏的檢出和超標(biāo)率較為突出，在當(dāng)月不合格樣品中占比51.61%。分析認(rèn)為種植戶使用了敵敵畏防治露地韭菜的主要蟲害韭蛆、薊馬等，由于農(nóng)藥使用不當(dāng)或未嚴(yán)格執(zhí)行采收間隔期引發(fā)殘留超標(biāo)現(xiàn)象。

表4 不同采收時(shí)期農(nóng)藥殘留結(jié)果統(tǒng)計(jì)Table 4 Statistical results of pesticide residue in different periods

2.3 膳食風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估

食品中農(nóng)藥殘留結(jié)果評(píng)價(jià)通常按照《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品中農(nóng)藥最大殘留限量》（GB 2763-2019）[14]來(lái)判定樣品是否合格，但此標(biāo)準(zhǔn)中涉及的農(nóng)藥殘留限量并沒有覆蓋所有蔬菜品種，而且產(chǎn)生的風(fēng)險(xiǎn)不僅與蔬菜本身農(nóng)殘含量有關(guān)，還與人的身體情況和膳食習(xí)慣有關(guān)[19]。對(duì)標(biāo)準(zhǔn)中沒有規(guī)定限量的農(nóng)藥，利用這個(gè)方法評(píng)判風(fēng)險(xiǎn)性有一定缺陷。因此，科學(xué)地評(píng)估蔬菜質(zhì)量是否安全以人體對(duì)蔬菜的實(shí)際攝入量和ADI來(lái)評(píng)價(jià)更為合理。

所采韭菜樣品中檢出的農(nóng)藥距末次施藥7 d的最終殘留試驗(yàn)中值（STMRi）、NEDI及其對(duì)應(yīng)的NEDI/ADI如表5所示。從41種農(nóng)藥的檢出濃度平均值來(lái)看，各農(nóng)藥的 NEDI均小于相應(yīng)的 ADI，NEDI/ADI＜1；從NEDI/ADI值排序來(lái)看，檢出的殺蟲劑類農(nóng)藥敵敵畏、甲拌磷、氟蟲腈比值最大，風(fēng)險(xiǎn)較高需引起重視；腐霉利雖然檢出頻次和超標(biāo)率均較高但其NEDI/ADI遠(yuǎn)小于1。從此次檢測(cè)統(tǒng)計(jì)結(jié)果整體來(lái)看唐山地區(qū)韭菜中農(nóng)藥殘留風(fēng)險(xiǎn)可以接受。張旭晟等[11]對(duì)2016～2018年間上海市市售韭菜中腐霉利的殘留情況及居民膳食暴露風(fēng)險(xiǎn)進(jìn)行評(píng)估，得出韭菜中腐霉利的膳食暴露風(fēng)險(xiǎn)較低，建議合理調(diào)整韭菜中腐霉利的限量標(biāo)準(zhǔn)。周勇等[20]研究得出按推薦的施藥時(shí)期、劑量和方法進(jìn)行施藥以及安全間隔期進(jìn)行采收，韭菜中腐霉利存在超標(biāo)風(fēng)險(xiǎn)，但通過(guò)韭菜攝入的腐霉利不會(huì)對(duì)一般人群的健康造成不可接受的風(fēng)險(xiǎn)。

3 結(jié)論

3.1 本研究通過(guò)對(duì)唐山地區(qū)415批韭菜樣品中68種農(nóng)藥殘留進(jìn)行檢測(cè)結(jié)果表明，樣本不合格率為38.07%，農(nóng)藥檢出率為69.40%。共計(jì)檢出42種農(nóng)藥殘留，殘留農(nóng)藥種類復(fù)雜且多個(gè)樣本存在多殘留檢出現(xiàn)像；噻蟲胺檢出率最高，建議進(jìn)一步收集相關(guān)數(shù)據(jù)并開展風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估制定出此農(nóng)藥在韭菜或鱗莖類蔬菜中的限量標(biāo)準(zhǔn)；有10.84%的樣本檢出7種在蔬菜生產(chǎn)中禁限用農(nóng)藥。有12種農(nóng)藥的殘留量超過(guò)了標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的最大殘留限量（MRL），腐霉利不合格率最高。

3.2 本研究對(duì)采集的韭菜樣品經(jīng)膳食暴露風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估，NEDI/ADI值均遠(yuǎn)小于1，風(fēng)險(xiǎn)較低，但檢測(cè)結(jié)果顯示部分樣本存在聯(lián)合用藥情況，多種農(nóng)藥合用毒性具有相加作用。一些國(guó)內(nèi)外學(xué)者和機(jī)構(gòu)已對(duì)農(nóng)藥多殘留和累積膳食風(fēng)險(xiǎn)的問(wèn)題開展研究[21,22]，但是實(shí)際產(chǎn)生的風(fēng)險(xiǎn)不僅與被檢樣品本身農(nóng)殘含量的多少有關(guān)，還與人們的身體情況和膳食習(xí)慣有關(guān)，由于監(jiān)測(cè)數(shù)據(jù)和膳食數(shù)據(jù)的限制，本次研究未評(píng)估農(nóng)藥多殘留的累積風(fēng)險(xiǎn)，待基礎(chǔ)數(shù)據(jù)完善后進(jìn)一步評(píng)估。