◎ 方榮謙,林偉琦
(廈門市產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)院,福建 廈門 361000)
廈門是我國(guó)著名的沿海旅游城市,海鮮等水產(chǎn)品特別有名。鮮活的水產(chǎn)品在運(yùn)輸中往往需要用到麻醉劑,受運(yùn)輸條件及成本影響,鮮活的水產(chǎn)品往往集中在有限的空間內(nèi),密度大,容易缺氧;且由于過(guò)度聚集,魚類等水產(chǎn)品容易受到驚嚇,加之運(yùn)輸途中顛簸的影響,常常引起魚類等水產(chǎn)品劇烈掙扎,容易造成脫鱗等體表傷害,最終導(dǎo)致魚患病而亡[1]。麻醉藥品能夠不同程度抑制魚類等水產(chǎn)品的中樞神經(jīng),從而減緩新陳代謝,降低其應(yīng)激反應(yīng),進(jìn)而使其活動(dòng)減緩,減少因群體躁動(dòng)引起的體表?yè)p傷,減少運(yùn)輸死亡率,保證水產(chǎn)品在長(zhǎng)途運(yùn)輸中的鮮活度,有效降低了運(yùn)輸成本[2]。近年來(lái),隨著餐飲業(yè)的迅速發(fā)展,麻醉藥品在魚產(chǎn)品中的應(yīng)用水平有所提升,人們對(duì)水產(chǎn)品中麻醉藥品的殘留量及安全性也越來(lái)越重視[3]。在運(yùn)輸過(guò)程中,商家對(duì)麻醉劑的使用往往局限于他人的經(jīng)驗(yàn)或者自己摸索,對(duì)使用劑量缺少一定的把控標(biāo)準(zhǔn),容易造成麻醉劑的濫用。因此,對(duì)魚及暫養(yǎng)水進(jìn)行麻醉劑含量的檢測(cè)很有必要。
6500 液相色譜-三重四極桿質(zhì)譜聯(lián)用儀(美國(guó)AB SCIEX 公司);GC 6890N-5975MSD 氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀(安捷倫公司);氮?dú)獯蹈蓛x(北京Lab Tech 公司);高通量固相萃取裝置[??苾x器(廈門)有限公司];Vortex 漩渦混勻器(德國(guó) IKA 公司);ME204 電子天平(梅特勒托利多儀器上海有限公司);Milli Q 超純水器(美國(guó)Millipore 公司)。
購(gòu)買有證書的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì),均可溯源;水為Minipore超純水機(jī)制備的一級(jí)水;有機(jī)溶劑甲醇、正己烷和乙腈等(色譜純),購(gòu)自默克股份兩合公司;無(wú)水硫酸鈉,國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司。
魚與暫養(yǎng)水樣本源于市面,在對(duì)魚進(jìn)行抽樣的同時(shí)也對(duì)相應(yīng)的暫養(yǎng)水進(jìn)行抽樣。樣本涉及福建省廈門市6 個(gè)市轄區(qū)餐飲環(huán)節(jié)和流通領(lǐng)域,共抽樣100 批次,在餐飲環(huán)節(jié)抽檢42 批次,其中大型餐館4 批次,中型餐館22 批次,小型餐館16 批次;在流通環(huán)節(jié)抽檢58 批次,其中,超市44 批次,農(nóng)貿(mào)市場(chǎng)8 批次,批發(fā)市場(chǎng)2 批次,小食雜店4 批次?;靖采w了市民能夠購(gòu)買和消費(fèi)鮮活魚類的經(jīng)營(yíng)場(chǎng)所。涉及淡水魚及其暫養(yǎng)水樣本共50 批次(各25 批次),海水魚及其暫養(yǎng)水樣本共50 批次(各25 批次),基本覆蓋了市面上常見魚的品種,使樣本具備典型性。
1.3.1 魚類中麻醉劑的檢測(cè)方法及判定標(biāo)準(zhǔn)
丁香酚:采用《水產(chǎn)品及水中丁香酚類化合物的測(cè)定》(BJS 201908)中檢測(cè)方法。取2 g 樣品于離心管中,加入5 g 無(wú)水硫酸鈉,適當(dāng)攪拌混勻,加入一顆陶瓷均質(zhì)子和10 mL 乙腈,渦旋混勻1 min,超聲提取15 min,離心,上清液轉(zhuǎn)至另一50 mL 離心管中;殘?jiān)性偌尤?0 mL 乙腈重復(fù)提取一次,合并所有上清液;再加入5 mL 乙腈飽和的正己烷,渦旋振蕩1 min,離心,棄去正己烷層;乙腈層加入50 μL 的DMSO,40 ℃氮吹至近干,用1 mL 乙腈溶解殘余物,混勻,過(guò)濾膜后待測(cè)。
三卡因和苯唑卡因:稱取1 ~5 g 的樣品于50 mL聚乙烯離心管中,加入20 mL 甲醇,中速均質(zhì)2 min,超聲10 min,離心后取澄清液氮吹并用1 mL 甲醇水溶液溶解殘余物,過(guò)濾膜后待測(cè)。
1.3.2 暫養(yǎng)水中3 種麻醉劑的檢測(cè)方法
將水樣用快速濾紙過(guò)濾,準(zhǔn)確量取50 mL 的水樣,調(diào)節(jié)pH 至3 左右,過(guò)HLB 固相萃取柱(該柱先用6 mL甲醇和6 mL 水進(jìn)行預(yù)活化平衡),隨后用10 mL 水進(jìn)行淋洗,去雜,用泵抽干淋洗液,再用6 mL 甲醇進(jìn)行洗脫,控制流速在4 mL·min-1左右,洗脫液轉(zhuǎn)移到氮?dú)獯蹈蓛x中,于40 ℃下吹近干,用1 mL 乙腈溶解殘余物,過(guò)濾膜,待上機(jī)檢測(cè)。
1.3.3 主要儀器參數(shù)
(1)色譜條件。色譜柱選擇ShimNex UP C18高純硅膠色譜柱(100 mm×2.1 mm,1.8 μm)。柱溫:35 ℃;進(jìn)樣量:1 μL;流速:0.2 ~0.3 mL·min-1。流動(dòng)相:甲酸水溶液(0.1%,V/V)(A)和甲酸乙腈溶液(0.1%,V/V)(B)。梯度洗脫程序見表1。
表1 梯度洗脫程序表
(2)質(zhì)譜條件及參數(shù)。采用AB6500 液相色譜-三重四極桿質(zhì)譜聯(lián)用儀,檢測(cè)模式:多反應(yīng)選擇監(jiān)測(cè)模式。離子源溫度,600 ℃;門簾氣壓(CUR),35 psi;Gas1,55 psi;Gas2,50 psi;離子噴射電壓(IS),5 500 V;碰撞氣壓:medium。3 種麻醉劑的母離子、子離子及去簇電壓(Declustering Potential,DP)、碰撞能(Collision Energy,CE)見表2。
表2 目標(biāo)麻醉劑藥物的串聯(lián)質(zhì)譜檢測(cè)參數(shù)表
1.3.4 判定標(biāo)準(zhǔn)
丁香酚在國(guó)內(nèi)是一種食品添加劑,作為香精香料可在食品中使用,但不得在水產(chǎn)品中使用[4]。三卡因,又名魚安定或MS222,國(guó)內(nèi)目前尚無(wú)法律或法規(guī)對(duì)水產(chǎn)品中的麻醉劑進(jìn)行種類和劑量的規(guī)定,嚴(yán)格來(lái)說(shuō)不允許在水產(chǎn)品中使用。即對(duì)丁香酚、三卡因和苯唑卡因的參考值應(yīng)均列為“不得檢出”。
100 批次樣本中,有14 批次魚樣品檢出丁香酚,1 批次暫養(yǎng)水(淡水魚暫養(yǎng)水)檢出三卡因,苯唑卡因未檢出,丁香酚和三卡因的檢出情況見表3。
表3 魚及暫養(yǎng)水樣本中麻醉劑的檢出情況表
從表3 看出,有14 批次魚樣品檢測(cè)到丁香酚,占比為28%,可見丁香酚作為麻醉劑在魚產(chǎn)品中使用相當(dāng)廣泛。在14 批次檢出丁香酚的魚樣品中,檢測(cè)出淡水魚6 批次,海水魚8 批次,說(shuō)明兩種魚使用麻醉劑丁香酚的數(shù)量并無(wú)顯著差異,可以推測(cè)海水魚和淡水魚在運(yùn)輸過(guò)程中均不同程度地使用丁香酚作麻醉劑。在50 批次魚樣本中檢測(cè)出14 批次丁香酚,而在相應(yīng)的50 批次暫養(yǎng)水并未檢出丁香酚??梢酝茢圄~體中的丁香酚極可能來(lái)源于運(yùn)輸過(guò)程中的水體;暫養(yǎng)水中未檢出丁香酚,說(shuō)明在超市、農(nóng)貿(mào)市場(chǎng)等流通領(lǐng)域和餐飲店等餐飲領(lǐng)域,由于魚即將被消費(fèi)者買走或即將被宰殺做菜,因此無(wú)再添加麻醉劑的必要。
14 批次丁香酚的檢出含量在0.03 ~7.00 mg·kg-1,由于丁香酚具有抗菌、抗氧化、防腐功能,應(yīng)用廣泛[5],不僅可作為香料成分應(yīng)用于口腔護(hù)理領(lǐng)域,還是我國(guó)規(guī)定允許使用的食用香料,可按正常生產(chǎn)需要適量使用,如丁香酚在熟肉制品中使用量為40 ~2 000 mg·kg-1,調(diào)味品中9.6 ~100.0 mg·kg-1等。本次魚體內(nèi)檢出丁香酚含量≤7.0 mg·kg-1,對(duì)人體健康影響不大。
本次專項(xiàng)在50 批次暫養(yǎng)水中檢測(cè)1 批次三卡因,而魚體中并未檢測(cè)出三卡因。如上所述,在暫養(yǎng)水中并無(wú)添加麻醉劑的必要,暫養(yǎng)水中的三卡因極可能是隨著魚一起殘留的運(yùn)輸水體帶入;魚體中未檢出三卡因,主要原因是三卡因一般是在魚的器官中累積,殘留在魚肉中的很少,因此未檢出。
本次專項(xiàng)在采樣批次魚及暫養(yǎng)水中均未檢測(cè)到苯唑卡因。原因可能為使用苯唑卡因麻醉的魚容易沉底而造成缺氧死亡,所以苯唑卡因作為魚類麻醉劑應(yīng)用較少。
此次實(shí)驗(yàn)首次對(duì)魚及暫養(yǎng)水中的丁香酚、三卡因和苯唑卡因3 種麻醉劑含量進(jìn)行檢測(cè),發(fā)現(xiàn)多批次的魚體內(nèi)檢測(cè)出含量不等的丁香酚,1 批次暫養(yǎng)水檢測(cè)三卡因??梢娐樽韯┰谒a(chǎn)品運(yùn)輸過(guò)程中的應(yīng)用是廣泛存在的。研究發(fā)現(xiàn),魚及暫養(yǎng)水中麻醉劑的檢出量并不高,大部分含量均低于丁香酚在食品中的使用含量,幾乎對(duì)人體的健康不會(huì)造成影響。此次抽檢的數(shù)據(jù)量較為有限,今后的抽檢中則需要制定進(jìn)一步的抽檢方案,對(duì)魚蝦、蟹、貝類等其他水產(chǎn)品進(jìn)行抽檢,獲取更多數(shù)據(jù),更全面地了解風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)的來(lái)源,提出麻醉劑對(duì)人體健康影響程度及消除麻醉劑對(duì)人體影響的解決辦法。