李卓妮，劉 峰，孔艷華，崔恩慧，孫朋浩，朱曉巖，孔向軍，蘇印泉，許中正，趙善廷*

(1.西北農(nóng)林科技大學(xué)，陜西楊凌 712100；2.靈寶市動(dòng)物和畜產(chǎn)品檢疫監(jiān)測(cè)中心，河南靈寶 472500;3.靈寶市帥華牧業(yè)有限公司，河南靈寶 472500)

杜仲(EucommiaulmoidesOliv.)是一種落葉喬木，是我國(guó)名貴的藥用樹(shù)種[1]，我國(guó)是杜仲唯一的主產(chǎn)國(guó)，同時(shí)也是杜仲的主要消費(fèi)市場(chǎng)，需求相對(duì)穩(wěn)定[2]。我國(guó)對(duì)于杜仲的研究和利用已經(jīng)有2 000多年的歷史，杜仲皮可以入藥，性溫，具有補(bǔ)益肝腎、強(qiáng)筋壯骨等功效[3]，杜仲雄花屬于新資源食品，具有較好的鎮(zhèn)靜安神、抗氧化等作用[4]，其水提物具有降壓的功效[5]?，F(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究發(fā)現(xiàn)，杜仲是優(yōu)良的抗氧化劑、抗炎劑[6]、抗微生物劑[7]、抗腫瘤[8]、心臟保護(hù)劑[9]和神經(jīng)保護(hù)劑[10]，已被用于多種疾病的臨床治療中。杜仲提取物可以促進(jìn)星形膠質(zhì)細(xì)胞和小膠質(zhì)細(xì)胞的活化，減輕大腦神經(jīng)性疾病[10]，被認(rèn)為是治療帕金森病最有希望的候選藥物[11]。杜仲是我國(guó)農(nóng)業(yè)農(nóng)村部許可使用的飼料添加劑之一，其樹(shù)皮中含有18種黃酮類(lèi)物質(zhì)，其中5種有顯著體外肝保護(hù)活性[12]，杜仲不同部位所含的黃酮含量差別很大，在杜仲葉中含量最高，且老葉中的含量最高[13]。近年來(lái)的研究發(fā)現(xiàn)，杜仲葉具有和杜仲皮相似的生理活性成分，此后杜仲葉的開(kāi)發(fā)利用受到了廣泛的關(guān)注[14]。杜仲葉主要成分有木質(zhì)素類(lèi)、多糖類(lèi)、黃酮類(lèi)和杜仲膠等[15]，微生物的發(fā)酵技術(shù)是杜仲提取重要的途徑之一，該方法可以有效去除纖維類(lèi)物質(zhì)[16]，通過(guò)發(fā)酵得到的杜仲葉保存了更多的有效成分且口感較佳[1]。

幼齡雞和成年雞相比，抵抗能力較差，生長(zhǎng)發(fā)育受到包括飼糧、環(huán)境在內(nèi)的各種影響，也更容易受到疫病侵襲，在實(shí)際生產(chǎn)中容易造成較大的經(jīng)濟(jì)損失。雖然杜仲干粉作為飼料添加劑的研究已經(jīng)屢見(jiàn)不鮮，但是畜禽對(duì)于杜仲較好的吸收方式卻沒(méi)有定論。本研究以飼料添加劑的方式將杜仲葉發(fā)酵物和杜仲葉提取物分別添加進(jìn)飼料中，探究不同的杜仲葉產(chǎn)品對(duì)雛雞生長(zhǎng)發(fā)育、免疫力及肉品質(zhì)的影響，為杜仲相關(guān)產(chǎn)品在幼齡雞飼料添加相關(guān)生產(chǎn)實(shí)踐中的應(yīng)用提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 主要試劑 杜仲葉、植物乳桿菌，河南省靈寶市帥華牧業(yè)有限公司產(chǎn)品；雞白痢沙門(mén)氏菌，西北農(nóng)林科技大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)院微生物實(shí)驗(yàn)室惠贈(zèng)。

1.1.2 主要儀器設(shè)備 氨基酸分析儀(L89001001A型)，日本日立公司產(chǎn)品；高速大容量冷凍離心機(jī)(5804R型)，德國(guó)艾本德公司產(chǎn)品。

1.1.3 試驗(yàn)用動(dòng)物 試驗(yàn)用動(dòng)物，河南省靈寶市帥華牧業(yè)有限公司養(yǎng)殖基地同棟?rùn)谏?、同一批次、體重相近的健康2日齡海蘭白雛雞，喂養(yǎng)采取自由飲食飲水方式，飼料由帥華牧業(yè)有限公司提供。

1.2 方法

1.2.1 飼養(yǎng)管理 選取海蘭白雛雞90只，依據(jù)同質(zhì)性均分為3組，每組30只，分別為對(duì)照組(飼喂基礎(chǔ)飼料)、精粉組(飼喂基礎(chǔ)日糧+0.6%的杜仲葉發(fā)酵物)和提取物組(飼喂基礎(chǔ)日糧+1%杜仲葉提取物)，飼喂時(shí)間為2個(gè)月，基礎(chǔ)飼料配方見(jiàn)表1。

表1 基礎(chǔ)飼料配方

杜仲葉發(fā)酵物采用植物乳桿菌發(fā)酵提取的方式制成，杜仲葉提取物采用水提法濃縮干燥的方式制成。

1.2.2 樣品采集與檢測(cè)指標(biāo) 飼喂2個(gè)月后，將各組剩余所有雞稱(chēng)重，并計(jì)算各組的平均體重；從對(duì)照組、精粉組和提取物組選6只同質(zhì)性相當(dāng)?shù)慕】惦u，心臟采血，血樣傾斜靜置30 min后，4 000 r/min離心10 min后，取上清液進(jìn)行血液生化檢測(cè)；取雞兩大腿肌肉，去除肌腱后冷凍保存，檢測(cè)肌肉氨基酸含量。免疫力檢測(cè)試驗(yàn)是從對(duì)照組、精粉組和提取物組中各選6只健康幼齡雞，腹腔注射沙門(mén)氏菌進(jìn)行攻毒，72 h后心臟采血，檢測(cè)血清球蛋白水平。血液生化檢測(cè)和免疫力檢測(cè)均送至西北農(nóng)林科技大學(xué)動(dòng)物醫(yī)院使用半自動(dòng)生化儀測(cè)定。

1.2.3 數(shù)據(jù)分析 用SPSS19.0軟件對(duì)收集的數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，方法為單因素方差分析，差異性比較采用最小顯著性差異法(LSD)，P<0.05則視為差異顯著。

2 結(jié)果

2.1 對(duì)增重的影響

結(jié)果見(jiàn)表2。由表2可以看出，精粉組雞的平均體重顯著高于提取物組與對(duì)照組(P<0.05)，提取物組雞的平均體重與對(duì)照組無(wú)顯著差異。

表2 對(duì)增重的影響

2.2 血清生化檢測(cè)結(jié)果

結(jié)果見(jiàn)表3。由表3可知，總蛋白、白蛋白、球蛋白、膽固醇與甘油三酯在3個(gè)組之間均無(wú)顯著性差異。精粉組與提取物組的球蛋白與甘油三酯兩項(xiàng)指標(biāo)結(jié)果略高于對(duì)照組，但無(wú)顯著性差異(P>0.05)，而白蛋白、膽固醇與白球比結(jié)果略低于對(duì)照組，但無(wú)顯著性差異(P>0.05)。

表3 血清生化檢測(cè)結(jié)果

2.3 肉品質(zhì)檢測(cè)

結(jié)果見(jiàn)表4。精粉組和提取物組的氨基酸總量與鮮味氨基酸含量均顯著高于對(duì)照組(P<0.05)；精粉組雛雞大腿肌肉中天冬氨酸、谷氨酸、脯氨酸、丙氨酸、蛋氨酸、苯丙氨酸、賴(lài)氨酸含量均顯著高于對(duì)照組(P<0.05)；提取物組雛雞大腿肌肉中脯氨酸、異亮氨酸、酪氨酸和組氨酸含量顯著高于對(duì)照組(P<0.05)，而天冬氨酸、胱氨酸、纈氨酸和精氨酸含量顯著低于精粉組(P<0.05)。

表4 肉品質(zhì)檢測(cè)

2.4 免疫球蛋白檢測(cè)

結(jié)果見(jiàn)表5。由表5可以看出，精粉組與提取物組雞的血清球蛋白含量略高于對(duì)照組，但無(wú)顯著性差異(P>0.05)。

表5 免疫球蛋白檢測(cè)

3 討論

3.1 對(duì)增重的影響

中草藥及其活性成分的藥理作用復(fù)雜多樣，作為飼料添加劑時(shí)可以改善動(dòng)物的生產(chǎn)性能。段俊紅等[1]通過(guò)用杜仲飼喂烏骨雜交雞，發(fā)現(xiàn)能夠顯著提高雞的生長(zhǎng)性能和屠宰性能，王瑞等[18]用杜仲提取物飼喂固始雞發(fā)現(xiàn)能夠明顯提高固始雞的生長(zhǎng)速度，并改善其屠宰性能，在飼料中添加杜仲提取物能改善斷奶仔豬的生長(zhǎng)性能，并降低其腹瀉率，提高仔豬抗氧化力和免疫功能[19-20]。本研究結(jié)果顯示，精粉組雞的平均體重顯著高于提取物組與對(duì)照組，這說(shuō)明精粉組的發(fā)酵工藝可以促進(jìn)雞的生長(zhǎng)發(fā)育，提高其生產(chǎn)性能。

3.2 對(duì)血清生化指標(biāo)的影響

杜仲具有補(bǔ)肝腎、強(qiáng)筋骨、安胎和降血壓等作用，主治腰膝痛，有除陰下癢濕的功能[15]。中醫(yī)認(rèn)為，肝主疏泄而調(diào)暢氣機(jī)，主藏血而調(diào)節(jié)血運(yùn)。李燕舞等[21]的研究發(fā)現(xiàn)，杜仲提取物可以提高肉兔總蛋白、白蛋白和球蛋白含量，Ding H等[22]用杜仲提取物飼喂仔豬，發(fā)現(xiàn)能夠提高其血清白蛋白和總蛋白的水平。本試驗(yàn)中，杜仲提取物組與精粉組的甘油三酯均高于對(duì)照組，這與李晨燕等[23]研究杜仲提取物對(duì)寧鄉(xiāng)豬作用的結(jié)果一致。同時(shí)，膽固醇的高低反映機(jī)體的脂類(lèi)代謝水平，含量過(guò)高有引起心血管疾病的風(fēng)險(xiǎn)，李風(fēng)龍等[24-25]的研究發(fā)現(xiàn)，發(fā)酵杜仲葉粉能夠顯著降低蛋雞血液總膽固醇的含量。白球比是白蛋白與球蛋白的比值，白球比下降說(shuō)明血清中球蛋白的相對(duì)數(shù)目增加，本試驗(yàn)中，精粉組與提取物組的總蛋白、球蛋白兩項(xiàng)指標(biāo)結(jié)果均高于對(duì)照組，而白球比和膽固醇含量結(jié)果均低于對(duì)照組，說(shuō)明杜仲葉飼料添加劑不但可以調(diào)節(jié)血脂的代謝途徑，還可以增強(qiáng)雛雞的免疫力，對(duì)疫病的預(yù)防起到一定的作用。

3.3 對(duì)肉品質(zhì)的影響

肉品質(zhì)是動(dòng)物產(chǎn)品檢測(cè)中的關(guān)鍵指標(biāo)，其中氨基酸含量能反映其營(yíng)養(yǎng)價(jià)值，鮮味氨基酸決定了其風(fēng)味。有研究發(fā)現(xiàn)，飼糧中添加杜仲葉提取物可以提高肌肉中不飽和脂肪酸的含量，改善肉的風(fēng)味和品質(zhì)[26]，在飼料中添加杜仲葉粉可以顯著提高青魚(yú)中鮮味氨基酸的含量[27]。Li H等[28]通過(guò)杜仲提取物飼喂豬的研究發(fā)現(xiàn)，杜仲提取物可以改善肉的滴水損失、肉中羰基等肉品質(zhì)指標(biāo)及肉的氧化情況。杜仲提取物可以改善肉雞生長(zhǎng)性能和肉品質(zhì)、氧化穩(wěn)定性和脂肪酸分布情況[29]。Liu H等[30]的研究發(fā)現(xiàn)杜仲提取物雖然對(duì)羔羊的生長(zhǎng)性能無(wú)明顯影響，但能改善其應(yīng)激指標(biāo)、肉質(zhì)，以及抗氧化狀態(tài)。Zhou Y等[31]的研究發(fā)現(xiàn)杜仲提取物可以改善豬背最長(zhǎng)肌的肉品質(zhì)和肌纖維類(lèi)型組成。鮮味氨基酸作為肉品質(zhì)檢測(cè)中重要的檢測(cè)指標(biāo)，是天冬氨酸、谷氨酸、甘氨酸、丙氨酸和精氨酸的總和。本試驗(yàn)中精粉組和提取物組的氨基酸總量顯著高于對(duì)照組，說(shuō)明兩種杜仲產(chǎn)品均能增加雞肉營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)含量，從而改善肉品質(zhì)；精粉組與提取物組的鮮味氨基酸的含量均高于對(duì)照組，與段明房等[32]的研究結(jié)果一致，說(shuō)明杜仲具有改善雞肉品質(zhì)的功效。

3.4 免疫球蛋白檢測(cè)

將杜仲作為飼料添加劑飼喂蛋雞，可以減少甚至替代抗生素，有效減少藥物殘留和細(xì)菌耐藥性的產(chǎn)生[33]。陳紹紅等[34]通過(guò)用杜仲素飼喂貴妃雞后，發(fā)現(xiàn)雞的血清新城疫病毒抗體滴度和IgG含量有升高的趨勢(shì)。Bai L等[35]研究發(fā)現(xiàn)杜仲混合提取物可以提高麻鴨的抗氧化能力和免疫功能。袁帶秀等[36]研究發(fā)現(xiàn)杜仲總黃酮可以有效提高鉛中毒小鼠的免疫球蛋白含量，改善其抗氧化能力。機(jī)體應(yīng)對(duì)外來(lái)刺激時(shí)球蛋白水平的變化反映了機(jī)體特異性免疫的強(qiáng)弱，由本試驗(yàn)結(jié)果可以看出，杜仲精粉組與提取物組的球蛋白水平高于對(duì)照組，說(shuō)明杜仲有增強(qiáng)機(jī)體抵抗力的功效。

本研究通過(guò)將兩種不同的杜仲產(chǎn)品作為飼料添加劑飼喂幼齡雞，發(fā)現(xiàn)兩種產(chǎn)品均是有潛力的幼齡雞飼料添加劑。且杜仲葉發(fā)酵物較之提取物有更強(qiáng)的促進(jìn)雞的生長(zhǎng)發(fā)育、改善肉品質(zhì)和提高免疫力的功效，對(duì)相關(guān)畜牧產(chǎn)業(yè)的發(fā)展有著一定的應(yīng)用價(jià)值。