史云峰 杜卉蓮 盤錦遼油寶石花醫(yī)院 （遼寧 盤錦 124010）

內(nèi)容提要： 目的：觀察并分析日立全自動(dòng)生化分析儀HITACHI 7600-110以及貝克曼DXI800免疫功能儀器臨床檢測(cè)溶血指數(shù)的實(shí)際效果。方法：納入2019年5月～2020年8月本院門診及住院部送檢標(biāo)本2824例，檢測(cè)溶血指數(shù)以及有關(guān)的其他檢驗(yàn)項(xiàng)目。選用日立全自動(dòng)生化分析儀HITACHI 7600-110以及貝克曼DXI800免疫功能儀器，將超過(guò)15的溶血指數(shù)分為六大統(tǒng)計(jì)組，檢測(cè)并統(tǒng)計(jì)每組溶血標(biāo)本的分布情況及構(gòu)成比例、累計(jì)比例。結(jié)果：本研究納入的2824例溶血標(biāo)本，經(jīng)檢測(cè)，溶血指數(shù)高于15的共計(jì)149例，溶血率為5.28%。其中，溶血指數(shù)在15～100的低溶血指標(biāo)累計(jì)比達(dá)到87.92%。根據(jù)本研究選用的日立全自動(dòng)生化分析儀HITACHI 7600-110以及貝克曼DXI800免疫功能儀器使用說(shuō)明書中提供的溶血指數(shù)干擾閾值界定，溶血指數(shù)處于51～100的溶血標(biāo)本具體值為19例，占據(jù)溶血構(gòu)成占比的12.75%。結(jié)論：在溶血指數(shù)檢測(cè)時(shí)應(yīng)用生化免疫分析儀，檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確性較高。

溶血指數(shù)是指在一定條件下，能夠使血液中紅細(xì)胞完全溶解的最低濃度。例如甘草皂苷的溶血指數(shù)為1:4000；薯蕷皂苷的溶血指數(shù)為1:40萬(wàn)[1]。通常情況下，有效運(yùn)用溶血指數(shù)，能夠粗略測(cè)算出皂苷的含量，并完成中草藥的皂苷定性檢查。在血液檢測(cè)中，如果受檢者的溶血指數(shù)檢測(cè)結(jié)果提示陽(yáng)性，則表明受檢者的血液可能存在溶血狀態(tài)，由于紅細(xì)胞溶解率較高，故容易誘發(fā)溶血性貧血[2]?；加性擃惣膊〉幕颊?，其鞏膜和皮膚會(huì)呈現(xiàn)出明顯的發(fā)黃現(xiàn)象，并伴有發(fā)熱、全身浮腫等癥狀。在正常狀態(tài)下，每個(gè)人的溶血指數(shù)都會(huì)出現(xiàn)輕微的變化，與患者當(dāng)前的生活習(xí)慣（包含飲食、作息等）相關(guān)，但浮動(dòng)上下區(qū)間都處于合理、可控的范圍內(nèi)。如果溶血指數(shù)出現(xiàn)較大的波動(dòng)，則說(shuō)明患者身體存在較為嚴(yán)重的異常情況，必須前往醫(yī)院進(jìn)行治療[3]。根據(jù)臨床實(shí)驗(yàn)室誤差統(tǒng)計(jì)，最小40%，最大可達(dá)70%的檢測(cè)誤差產(chǎn)生于分析前，溶血指數(shù)的不確定，對(duì)檢驗(yàn)結(jié)果造成的干擾往往最大。面對(duì)此種情況，醫(yī)療設(shè)備廠商基于溶血指數(shù)的自動(dòng)量化檢測(cè)，生產(chǎn)出了客觀、靈敏度高、耗時(shí)短、易于標(biāo)準(zhǔn)化檢測(cè)的生化分析儀及免疫功能檢測(cè)儀，核心要素為自動(dòng)化溶血指數(shù)檢測(cè)方法以及檢驗(yàn)項(xiàng)目的干擾閾值設(shè)定[4]。本研究圍繞生化免疫分析儀檢測(cè)溶血指數(shù)的臨床應(yīng)用效果而展開，現(xiàn)梳理有關(guān)結(jié)果，報(bào)道如下。

1.資料與方法

1.1 一般資料

納入2019年5月～2020年8月本院門診及住院部送檢標(biāo)本2824例，按照醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室操作規(guī)程，檢測(cè)溶血指數(shù)以及有關(guān)的其他檢驗(yàn)項(xiàng)目。

1.2 方法

選用日立全自動(dòng)生化分析儀HITACHI 7600-110，參數(shù)設(shè)置及具體操作如下：①分析方式：多樣品、多項(xiàng)目可同時(shí)處理；處理能力800測(cè)試/h（不含ISE測(cè)定，ISE單元處理能力為300樣品/h）；若采用比色法進(jìn)行分析時(shí)，最大測(cè)試量可達(dá)到3200/h；②通道數(shù)：同時(shí)分析86項(xiàng)目；③樣品量：2～35μL/測(cè)試，上下可調(diào)整范圍0.1μL；④試劑量：終反應(yīng)體積150～380μL/測(cè)試；每種測(cè)試體積范圍20～270μL，可調(diào)整空間為1μL；⑤樣品架：5個(gè)（包含標(biāo)準(zhǔn)樣品被、微量樣品被、原始采血管），可同時(shí)容納300個(gè)樣品；⑥反應(yīng)時(shí)間：3/4/5/10/15/22min任選；⑦反應(yīng)溫度（37.0±0.1）?C；⑧測(cè)試波長(zhǎng)：340～800nm，共計(jì)12種，可選擇單波長(zhǎng)、雙波長(zhǎng)、多波長(zhǎng)測(cè)定；⑨數(shù)據(jù)處理：基于統(tǒng)計(jì)學(xué)計(jì)算、統(tǒng)計(jì)圖、精度統(tǒng)計(jì)計(jì)算，可處理10000個(gè)樣本的數(shù)據(jù)，并監(jiān)視反應(yīng)過(guò)程，生成曲線；⑩模塊組合方式：非平行，兩模塊不同；?離子選擇電極速度：最大900測(cè)試/h；?雙試劑下的同步分析項(xiàng)目：最大62項(xiàng)；?試劑位置：D模塊雙試劑16位，P模塊雙試劑43位；ISE3項(xiàng)；?試劑量范圍：20～270μL，上下課增減范圍1μL；?進(jìn)樣方式及樣品數(shù)量：后軌道式（同時(shí)300樣品，5樣品/架）；?樣品量范圍：2～35μL（0.1μL步進(jìn)），最小2μL/測(cè)試；?試劑冷藏：4～12?C；?離子選擇電極（ISE）：K、Na、CL三項(xiàng)[5]。

免疫儀器為貝克曼DXI800，具有操作簡(jiǎn)單、檢測(cè)速度快，靈敏性、特異性、準(zhǔn)確性、穩(wěn)定性均較高，檢測(cè)速度可達(dá)400T/hr，是較為先進(jìn)的全自動(dòng)微粒子化學(xué)發(fā)光免疫分析系統(tǒng)。

基于上述儀器特點(diǎn)，完成溶血指數(shù)測(cè)定參數(shù)設(shè)定；負(fù)壓靜脈血液采集系統(tǒng)可采用非可替4mL惰性分離膠血清管。

1.3 溶血指數(shù)結(jié)果報(bào)告生成方式

將溶血指數(shù)通過(guò)檢驗(yàn)信息系統(tǒng)導(dǎo)出。如果出現(xiàn)高于溶血指數(shù)干擾閾值的檢驗(yàn)項(xiàng)目，檢測(cè)人員需要在結(jié)果顯示欄添加異常標(biāo)識(shí)。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

本研究的檢測(cè)數(shù)據(jù)（包含送檢標(biāo)本綜述、溶血指數(shù)異常的標(biāo)本數(shù)、溶血標(biāo)本的構(gòu)成比例等），借助全自動(dòng)生化免疫分析儀自帶的數(shù)據(jù)信息處理功能即可完成。

2.結(jié)果

本研究納入的2824例溶血標(biāo)本，經(jīng)檢測(cè)，溶血指數(shù)高于15的共計(jì)149例，溶血率為5.28%。其中，溶血指數(shù)在15～100的低溶血指標(biāo)累計(jì)比達(dá)到87.92%。根據(jù)本研究選用的日立全自動(dòng)生化分析儀HITACHI 7600-110以及貝克曼DXI800免疫功能儀器使用說(shuō)明書中提供的溶血指數(shù)干擾閾值界定，溶血指數(shù)處于25～50的標(biāo)本數(shù)為34例，構(gòu)成比為22.82%；51～100的溶血標(biāo)本具體值為19例，占據(jù)溶血構(gòu)成占比的12.75%，見表1。

表1.溶血指數(shù)超過(guò)15的149例溶血標(biāo)本具體指數(shù)分布情況

3.討論

生化免疫分析是一種“合稱”，分為“生化分析”和“免疫分析”兩部分[6]。其中，生化分析是指通過(guò)多種生物化學(xué)反應(yīng)，測(cè)定受檢者體內(nèi)的酶類、糖類、脂類、蛋白、非蛋白氮類、無(wú)機(jī)元素類、肝功能等指標(biāo)，是醫(yī)院常規(guī)檢測(cè)必不可少的項(xiàng)目。此種檢測(cè)方式在我國(guó)已經(jīng)發(fā)展了數(shù)十年，主要通過(guò)檢測(cè)患者某一項(xiàng)或某幾項(xiàng)生物指標(biāo)，與相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行比對(duì)，判斷患者是否患有特定的疾病。比如通過(guò)乙肝五項(xiàng)檢測(cè)，根據(jù)每一項(xiàng)抗體、抗原的檢測(cè)值，與感染乙肝病毒或曾經(jīng)感染乙肝病毒的標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行比對(duì)，有助于確診患者病情。時(shí)至今日，受發(fā)展時(shí)間較長(zhǎng)的影響，我國(guó)生化診斷試劑市場(chǎng)的發(fā)展較為成熟，試劑品種相對(duì)齊全，測(cè)量技術(shù)的完善程度較高，測(cè)量結(jié)果的準(zhǔn)確性可得到保障。免疫分析是指利用待測(cè)物質(zhì)與其對(duì)應(yīng)物質(zhì)之間的“專一特異性反應(yīng)”，成功建立的一種具備“高選擇性”的診斷方法。此種方法主要圍繞抗原抗體之間進(jìn)行免疫反應(yīng)，完成對(duì)樣本的檢測(cè)。具體而言，檢測(cè)期間需要使用多種載體，完成對(duì)反應(yīng)信號(hào)的增幅，從而達(dá)到增強(qiáng)檢測(cè)靈敏度的目的。目前，可用于進(jìn)行標(biāo)記的物質(zhì)包含同位素、多種酶、化學(xué)發(fā)光物質(zhì)?；诖耍唧w的免疫分析方式可分為放射免疫分析、酶聯(lián)免疫分析、化學(xué)發(fā)光免疫分析、電化學(xué)發(fā)光免疫分析等多種方式。此種檢測(cè)方式主要針對(duì)受檢者體內(nèi)的小分子蛋白、激素、脂肪酸、藥物等物質(zhì)進(jìn)行檢驗(yàn)，可有效檢測(cè)出包含傳染性疾病、內(nèi)分泌疾病、腫瘤疾病在內(nèi)的多種疾病。除此之外，在孕前檢查、血型抗原等檢測(cè)中也較為常見。相較于常規(guī)的生化分析檢驗(yàn)方式，生化免疫分析更加側(cè)重于對(duì)感染性疾病進(jìn)行檢測(cè)[7]。

分析本次溶血標(biāo)本可以得知女性標(biāo)本溶血率明顯高于男性，主要是因?yàn)榕造o脈較細(xì)，更加脆弱，血液流量較少，血流速度與男性相比較慢。在反復(fù)穿刺的情況下所產(chǎn)生的痛感會(huì)增加患者心理負(fù)擔(dān)，從而增加穿刺難度，而這也增加了女性采血過(guò)程中溶血現(xiàn)象的發(fā)生。同時(shí)老年人和幼兒在進(jìn)行抽血的時(shí)候也容易出現(xiàn)溶血，因?yàn)槔夏耆搜茌^為脆弱，幼兒恐懼感較高都成為了溶血率偏高的原因。使用目測(cè)法可以在一定程度上對(duì)標(biāo)本中存在的一些不合格現(xiàn)象進(jìn)行篩查，但并不夠精準(zhǔn)。目測(cè)法會(huì)受到干擾，且存在不確定性，溶血后產(chǎn)生游離血紅蛋白超出0.3g/L后才能被目測(cè)，會(huì)導(dǎo)致嚴(yán)重誤差。為了避免個(gè)體差異和主觀漏斷，減少輕度溶血標(biāo)本的漏判，接受生化免疫分析有著非常重要的作用。雖然輕度溶血標(biāo)本不會(huì)對(duì)大部分生化免疫項(xiàng)目檢測(cè)產(chǎn)生影響，但是還存在一定的影響，特別是針對(duì)一些對(duì)溶血較為敏感的乳酸脫氫酶、血鉀等。使用生化免疫分析儀可以最大程度上減少人為干預(yù)，其檢測(cè)數(shù)據(jù)更為客觀、準(zhǔn)確。所以在日常工作中借助生化免疫分析儀能夠提升檢驗(yàn)報(bào)告準(zhǔn)確性，客觀評(píng)估溶血干擾程度，將溶血指數(shù)檢測(cè)結(jié)果包含在報(bào)告中，對(duì)檢驗(yàn)報(bào)告進(jìn)行審核，定期分析和回顧能夠使分析結(jié)果更加規(guī)范化，減少誤差帶來(lái)臨床風(fēng)險(xiǎn)。

在過(guò)去，臨床生化免疫分析最常見、應(yīng)用范圍最廣的方法為酶聯(lián)免疫檢測(cè)法。此種檢測(cè)方式的原理為：選擇各種酶作為標(biāo)記物，用于對(duì)某一種抗原或抗體的檢測(cè)。由于檢測(cè)試劑成本較低，故可進(jìn)行大規(guī)模檢驗(yàn)。但此種檢測(cè)方式的靈敏度相對(duì)較低，故在未來(lái)會(huì)被逐漸淘汰。相較于酶聯(lián)免疫檢測(cè)法，化學(xué)發(fā)光檢測(cè)法的靈敏度更高、特異性更強(qiáng)、重現(xiàn)性更好，故在一、二線城市的三甲醫(yī)院、很多?？漆t(yī)院中，一些高端的化學(xué)發(fā)光檢測(cè)系統(tǒng)已經(jīng)逐漸取代酶聯(lián)免疫，成為臨床最主要的免疫診斷方法。除了上述優(yōu)勢(shì)外，化學(xué)發(fā)光免疫檢測(cè)過(guò)程可進(jìn)行半定量和定量分析，檢測(cè)耗時(shí)短、準(zhǔn)確率極高[8]。

目前，醫(yī)院使用的生化免疫檢測(cè)設(shè)備一般為全自動(dòng)生化免疫系統(tǒng)檢測(cè)儀（如本研究開展期間，使用的日立全自動(dòng)生化分析儀HITACHI 7600-110），該設(shè)備是一類具備極強(qiáng)靈活性、選擇性、先進(jìn)性的生化分析儀。在檢測(cè)及相關(guān)操作方面，全自動(dòng)生化免疫分析儀的應(yīng)用優(yōu)勢(shì)在于：①操作難度低；②清洗時(shí)間少；③只需少量時(shí)間即可完成樣本的更換；④幾乎沒(méi)有其他較為繁瑣的檢測(cè)手續(xù)；⑤為了增加測(cè)定精度，可將測(cè)定方式選擇為“雙波長(zhǎng)”形式；⑥針對(duì)一些疑難指標(biāo)進(jìn)行檢測(cè)時(shí)，可通過(guò)使用雙試劑的方式，實(shí)現(xiàn)試劑選擇性的增加，并改善測(cè)定方法；⑦基于此類設(shè)備的檢測(cè)過(guò)程能夠屏蔽絕大多數(shù)內(nèi)源性和外源性干擾，有利于長(zhǎng)時(shí)間保管試劑，大幅度提升使用期限。

本研究共納入2824例溶血樣本，借助日立全自動(dòng)生化分析儀HITACHI 7600-110以及貝克曼DXI800免疫功能儀器進(jìn)行對(duì)溶血指標(biāo)的生化分析及免疫檢測(cè)，替代了傳統(tǒng)的目測(cè)識(shí)別溶血及人工錄入相關(guān)信息的檢測(cè)方式；基于干擾閾值的設(shè)定，檢驗(yàn)全過(guò)程抗干擾能力較強(qiáng)，結(jié)果的可靠性極高，極大地提升了檢測(cè)全過(guò)程的安全性以及結(jié)果報(bào)告的準(zhǔn)確性，有效避免了人工作業(yè)模式引發(fā)的誤讀及遺漏。

針對(duì)2824例溶血樣本的檢測(cè)，溶血指標(biāo)超過(guò)15的標(biāo)本共計(jì)149例，溶血率為5.28%。該結(jié)果與國(guó)外某實(shí)驗(yàn)室的檢測(cè)結(jié)果（10.42%）相比，差異較大[9]。研究組成員對(duì)本研究結(jié)果與其他兩項(xiàng)研究的操作過(guò)程、結(jié)果生成等環(huán)節(jié)進(jìn)行全面對(duì)比后認(rèn)為，造成差異的原因?yàn)椋罕狙芯考{入的2824例溶血標(biāo)本均來(lái)自于本院門診及住院部，其他研究人員開展研究時(shí)，納入的溶血標(biāo)本總例數(shù)近5000，對(duì)比之下，標(biāo)本納入數(shù)量差異較大[10]；此外，由于其他研究人員選用的設(shè)備為全自動(dòng)生化免疫分析儀，能夠針對(duì)溶血標(biāo)本進(jìn)行自動(dòng)一體化檢測(cè)，而本研究選用的設(shè)備為日立全自動(dòng)生化分析儀HITACHI 7600-110以及貝克曼DXI800免疫功能儀器，導(dǎo)致檢測(cè)過(guò)程需分成兩步走，故結(jié)果出現(xiàn)近3個(gè)百分點(diǎn)的差異，處于可接受范圍內(nèi)[11]。

綜合而言，聯(lián)合使用生化分析儀及免疫功能檢測(cè)儀測(cè)量溶血指數(shù)，圍繞溶血程度分別進(jìn)行生化分析及免疫檢測(cè)，并將相關(guān)信息發(fā)布于檢測(cè)報(bào)告單中，能夠大大地提升臨床醫(yī)生對(duì)標(biāo)本信息的掌控水平，有效降低了誤診的發(fā)生率。