范偉光，孟娟，蘇苗苗，王浩，石鵬輝，張珍

人類免疫缺陷病毒（human immunodeficiency virus，HIV）感染與慢性T細胞活化、慢性抗原提呈和免疫細胞穩(wěn)態(tài)失調(diào)等多種機制引起的進行性CD4+T細胞丟失和免疫功能障礙有關(guān)，可導(dǎo)致獲得性免疫缺陷綜合征（acquired immunodeficiency syndrome，AIDS），它的疾病進展主要取決于對免疫系統(tǒng)的破壞程度和病毒數(shù)量[1]。HIV/AIDS在世界范圍內(nèi)的迅速傳播和擴散已成為嚴(yán)重的社會問題[2-3]。高效抗反轉(zhuǎn)錄病毒治療（highly active anti-retroviral therapy，HAART）的應(yīng)用可以降低與HIV相關(guān)疾病的發(fā)生率和死亡率，是減少HIV傳播和治療AIDS的最有效方法[4]。2014 年替諾福韋（tenofovirdisoproxil，TDF）+拉米夫定（lamivudine，3TC）+依非韋倫（efavirenz，EFV）被推薦作為我國HIV/AIDS病人初始HAART 首選方案[5]。

HIV病毒載量（viral load，VL）檢測可直接客觀反映HIV/AIDS病人體內(nèi)HIV-RNA病毒復(fù)制情況，是公認(rèn)監(jiān)測HIV/AIDS病人疾病進展和評價抗反轉(zhuǎn)錄病毒治療效果的指標(biāo)[6]。本研究通過建立前瞻性研究隊列，探討HIV感染者抗病毒治療期間病毒載量與免疫學(xué)指標(biāo)的關(guān)系，包括CD4+、CD8+、CD4+/CD8+、免疫球蛋白G（immune globulin G，IgG）、免疫球蛋白M（immune globulin M，IgM）、免疫球蛋白A（immune globulin A，IgA）以提供更多的臨床證據(jù)，現(xiàn)報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料建立前瞻性研究隊列，選取2018年1月至2019年1月在保定市人民醫(yī)院治療的經(jīng)蛋白質(zhì)印跡法（Western blotting，WB）確認(rèn)為HIV-1感染陽性并符合《艾滋病和艾滋病病毒感染診斷標(biāo)準(zhǔn)》[7]的感染者200例為研究對象。納入標(biāo)準(zhǔn)：（1）病人在此之前均未接受過任何HARRT藥物治療；（2）年齡超過18周歲；（3）治療符合臨床治療標(biāo)準(zhǔn)。排除標(biāo)準(zhǔn)：（1）其他病毒感染；（2）女性病人處于妊娠期或隨訪期間有受孕意愿；（3）其他自身免疫性疾病、腫瘤、藥物等造成干擾的病人。向所有研究對象說明研究的目的和性質(zhì)，病人及近親屬知情同意。本研究符合《世界醫(yī)學(xué)協(xié)會赫爾辛基宣言》相關(guān)要求。

1.2 方法

1.2.1 治療方案 所有病人均給予TDF（300毫克/次，每天1次）+3TC（300毫克/次，每天1次）+EFV（600毫克/次，每天1次），治療18個月。

1.2.2 VL水平檢測 分別采集病人用藥前及用藥后1、3、6、12和18月的外周血樣本，6 h內(nèi)分離血漿，以3 000 r/min離心10 min，?80℃保存。應(yīng)用全自動病毒載量分析儀（COBAS AmpliPrep/COBAS TaqMan，美國）及配套試劑檢測HIV病毒載量。

1.2.3 免疫學(xué)指標(biāo)檢測 檢測VL同時，用流式細胞計數(shù)儀（美國FACSCalibur）及配套試劑盒檢測T淋巴細胞亞群CD4+、CD8+。應(yīng)用免疫比濁方法檢測免疫球蛋白IgG、IgM、IgA水平，試劑盒購于寧波瑞源生物科技有限公司。各測定指標(biāo)的正常人參考范圍為：IgG 6.80～14.45 g/L，IgM 0.40～2.14 g/L；IgA 0.70～4.06 g/L。

1.3 觀察指標(biāo)（1）病人一般資料；（2）治療前后不同時間VL水平比較；（3）治療前后不同時間免疫學(xué)指標(biāo)比較；（4）VL水平與免疫學(xué)指標(biāo)的相關(guān)性分析。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法使用SPSS24.0軟件分析處理數(shù)據(jù)，計量資料以±s描述，重復(fù)測量資料比較采用重復(fù)測量資料方差分析，兩兩樣本比較采用LSD-t檢驗，計數(shù)資料采用例（%）表示，數(shù)據(jù)比較采用χ2檢驗。VL水平與免疫學(xué)指標(biāo)的相關(guān)性分析采用Pearson相關(guān)法。P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 一般資料200例病人中男159例（79.50%），女41例（20.50%）；年齡（37.51±7.39）歲，年齡范圍為18～70歲，其中20～30歲階段病人最多，所占比例為40.50%（81/200）；病程（7.24±2.78）年，范圍為5～11年；感染途徑：同性傳播137例（68.50%）、異性傳播58例（29.00%）、其他 5例（2.50%）；漢族 198例（99.00%）、其他2例（1%）；婚姻狀況：已婚有配偶106例（53.00%）、未婚78例（39.00%）、離異或喪偶16例（8.00%）；文化程度：初中87例（43.50%）、高中或中專69例（34.50%）、大專及以上44例（22.00%）。

2.2 治療前后不同時間VL水平計量資料比較治療前VL水平為（4.89±1.63）log/mL，治療后1、3、6、12和18月的VL水平分別為（3.34±1.01）、（2.57±1.26）、（2.15±0.72）、（1.54±0.24）、（1.03±0.42）log/mL，與治療前比較，治療后VL水平隨著治療時間延長而下降，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（F=61.17，P<0.05）。

2.3 治療前后不同時間免疫學(xué)指標(biāo)計量資料比較與治療前比較，治療后CD4+及CD4+/CD8+隨時間延長而升高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05），IgG、IgA隨時間延長而下降，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05），CD8+及IgM治療前后不同時間比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。見表1。

表1 人類免疫缺陷病毒感染者200例治療前后免疫學(xué)指標(biāo)水平/±s

表1 人類免疫缺陷病毒感染者200例治療前后免疫學(xué)指標(biāo)水平/±s

注：①與治療前比較，P<0.05。②與治療后1個月比較，P<0.05。③與治療后3個月比較，P<0.05。④與治療后6個月比較，P<0.05。⑤與治療后12個月比較，P<0.05。

IgA/（g/L）4.34±0.78 4.08±0.85①3.61±0.87①②3.32±0.56①②③2.97±0.45①②③④2.87±0.34①②③④⑤125.37<0.05治療時間0 1個月3個月6個月12個月18個月F值P值例數(shù)200 200 200 200 200 200 CD4+/（個/微升）376.23±102.34 395.91±104.92①421.39±116.91①②479.37±113.21①②③520.84±147.39①②③④587.43±134.57①②③④⑤57.76<0.05 CD8+/（個/微升）1 364.87±269.32 1 196.24±229.18 1 257.27±231.48 1 289.38±283.38 1 428.34±212.39 1 490.59±232.08 29.25>0.05 CD4+/CD8+0.28±0.03 0.33±0.04①0.35±0.05①②0.43±0.06①②③0.54±0.06①②③④0.65±0.07①②③④⑤43.34<0.05 IgG/（g/L）21.94±5.49 19.95±4.19①16.91±4.28①②15.76±3.75①②③14.71±4.21①②③④12.33±2.45①②③④⑤97.68<0.05 IgM/（g/L）1.48±0.27 1.43±0.29 1.42±0.14 1.38±0.15 1.35±0.25 1.44±0.21 16.58>0.05

2.4 VL水平與免疫學(xué)指標(biāo)的相關(guān)性分析分析經(jīng)Pearson相關(guān)性分析，VL與CD4+、CD4+/CD8+呈負(fù)相關(guān)（r=?0.869，P<0.001；r=?0.794，P<0.001），VL載量與免疫學(xué)指標(biāo)CD8+無明顯相關(guān)性（r=0.010，P>0.05）。VL與IgG、IgA水平均呈正相關(guān)（r=0.892，P<0.001；r=0.901，P<0.001）。VL與IgM水平無明顯相關(guān)性（r=0.03，P>0.05）。

3 討論

HIV感染機體后快速復(fù)制并攻擊機體的免疫系統(tǒng)，可能會導(dǎo)致機會感染或腫瘤等最終導(dǎo)致病人死亡[8]。AIDS目前還無法治愈，HAART是目前國際上主要的控制HIV的療法。HAART能較好地控制HIV在人體內(nèi)的復(fù)制，降低HIV/AIDS病人體內(nèi)VL并維持在較低的水平，提高艾滋病病人的免疫功能[9]。這一治療方式能夠有效減少單一用藥產(chǎn)生的抗藥性，抑制病毒的復(fù)制，對被破壞的機體免疫功能具有恢復(fù)的作用，能夠有效延緩病人的病程，改善預(yù)后，延長病人生命[10]。

本研究的200例HIV感染者治療后，VL水平隨著治療時間延長而下降，說明抗病毒治療效果明顯。茅乃玲等[11]發(fā)現(xiàn)，通過有效的抗病毒治療以后，隨著治療時間的延長，VL顯著下降。有研究發(fā)現(xiàn)[12]，TDF+3TC+EFV作為成人初始HAART方案能在短期內(nèi)明顯降低病人HIV的VL并升高CD4+。同樣有研究證明[13]，免費抗病毒治療的5年累積生存率為95.8%。以上結(jié)果提示，有效抗病毒治療效果顯著。

AIDS病人是由于HIV病毒感染后浸入人體免疫系統(tǒng)，而作為細胞免疫的主要因素T淋巴細胞成為主要被攻擊對象[14]。T淋巴細胞是人體免疫系統(tǒng)中最重要的一組淋巴細胞群，主要有CD4+和CD8+[15]。本研究結(jié)果提示在抗病毒治療過程中，病人經(jīng)過HAART后，CD4+及CD4+/CD8+比值隨時間延長而升高，提示抗病毒治療對免疫功能的改善起到了積極作用。與陳昭云等[16]的研究結(jié)果一致。本研究結(jié)果中，病人IgG、IgA水平在治療前均高于正常范圍，說明在AIDS病人中存在著體液免疫增強反應(yīng)，故導(dǎo)致血漿中免疫球蛋白含量增高。本研究中，HIV感染者治療前后血清IgM水平變化不明顯，可能因為IgM為機體體液第一次發(fā)生免疫應(yīng)答后早期生成的免疫球蛋白，半衰期較短，并且存在的時間比較短而不容易被檢測到所致[17]。與陳燕萍等[18]研究結(jié)果一致。

本研究中Pearson相關(guān)性分析結(jié)果顯示，VL與免疫學(xué)指標(biāo) CD4+、CD4+/CD8+呈負(fù)相關(guān)，與 IgG、IgA水平呈正相關(guān)。有研究表明[19]，基線CD4值與VL抑制有著密切的關(guān)聯(lián)。鄧林等[20]發(fā)現(xiàn)，CD4+淋巴細胞數(shù)及CD4+/CD8+比值與VL結(jié)果呈負(fù)相關(guān)。黃慧謙等[21]發(fā)現(xiàn)，AIDS病人抗病毒治療期間，IgG、IgA水平與VL正相關(guān)，與本研究結(jié)果一致。以上研究說明AIDS病人的VL水平與免疫學(xué)指標(biāo)CD4+、CD4+/CD8+、IgG、IgA水平密切相關(guān)。

綜上所述，TDF+3TC+EFV能在短期內(nèi)明顯降低HIV感染者的VL，改善免疫指標(biāo)，且VL載量與免疫學(xué)指標(biāo)CD4+、CD4+/CD8+呈負(fù)相關(guān)，與IgG、IgA水平呈正相關(guān)。今后在HIV感染者抗病毒治療過程中，可通過檢測VL或免疫指標(biāo)的綜合研判，對抗毒度治療效果及機體免疫功能做出評價，以指導(dǎo)臨床治療。