王剛祚，姚寶珍

(武漢大學(xué)人民醫(yī)院兒科，湖北 武漢 430060)

輪狀病毒感染腸炎主要由A組輪狀病毒感染所致的急性消化道傳染病，好發(fā)于嬰幼兒，發(fā)病高峰在秋季，是引起小兒感染性腹瀉的主要原因[1]。在全球尤其是發(fā)展中國(guó)家，輪狀病毒感染腸炎引起5歲以下患兒死亡的幾率極高，造成嚴(yán)重疾病負(fù)擔(dān)，且迄今為止輪狀病毒無(wú)特效治療方式，多采用對(duì)癥支持治療[2]。研究[3]表明，嬰幼兒免疫功能較弱，輪狀病毒感染時(shí)腸道菌群發(fā)生紊亂，雙歧桿菌、乳酸菌、梭菌屬等數(shù)量明顯減少，腸道內(nèi)的菌膜屏障受損導(dǎo)致病毒更易侵襲腸黏膜，加重腸道感染。益生菌可調(diào)節(jié)腸道內(nèi)菌群平衡，提高小兒免疫力并抑制腸道炎癥，臨床常采用蒙脫石散(腸黏膜保護(hù)劑)與雙歧桿菌(益生菌制劑)聯(lián)合治療輪狀病毒感染腸炎，效果良好[4]。羅伊氏乳桿菌與枯草桿菌同屬于革蘭氏陽(yáng)性菌，枯草桿菌是芽孢桿菌屬的一種，其分泌的胞外酶可與機(jī)體腸道產(chǎn)生的消化酶共同發(fā)揮作用維持腸道健康狀態(tài)；腸道內(nèi)的羅伊氏乳桿菌是天然形成的，可抑制真菌、病毒的生長(zhǎng)，提高免疫力[5]。兩種微生物制劑聯(lián)合治療小兒輪狀病毒感染腸炎的研究較少。因此，本研究擬探討羅伊氏乳桿菌聯(lián)合蒙脫石散、枯草桿菌二聯(lián)活菌治療小兒輪狀病毒感染腸炎的效果及其對(duì)腸道菌群、胃腸激素的影響。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2019年3月到2021年6月武漢大學(xué)人民醫(yī)院收治的113例感染輪狀病毒腸炎的患兒，其中男性62例，女性51例。納入標(biāo)準(zhǔn)：(1)經(jīng)臨床檢查及實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)診斷為輪狀病毒感染腸炎[6]；(2)臨床表現(xiàn)以腹瀉為主，伴發(fā)熱、惡心嘔吐、腹痛腹脹等；(3)大便常規(guī)檢查輪狀病毒抗原為陽(yáng)性；(4)發(fā)病后未使用抗菌治療；(5)患兒家屬知情同意。排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)合并其他胃腸道疾??；(2)嚴(yán)重營(yíng)養(yǎng)不良；(3)伴重度脫水及電解質(zhì)紊亂；(4)低血容量性休克；(5)合并嚴(yán)重循環(huán)系統(tǒng)疾?。?6)肝腎功能異常；(7)入組前曾使用影響本研究的治療手段；(8)依從性差。將112例患兒按治療方式不同分成觀察組(n=57)和常規(guī)組(n=56)。觀察組中，男性33例，女性24例；年齡3個(gè)月～6歲，平均(3.68±0.97)歲，病程1～6 d，平均(2.56±0.63)d，大便6～11次/d，平均(8.35±2.08)次/d。常規(guī)組中，男性29例，女性27例；年齡2個(gè)月～6歲，平均(3.38±0.79)歲；病程1～5 d，平均(2.32±0.51)d；大便5～10次/d，平均(8.02±1.93)次/d。兩組患兒性別、年齡、病程及大便頻次等一般資料比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。本研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。

1.2 方法

兩組患兒入院后均給予物理或藥物降溫退熱治療、常規(guī)補(bǔ)液治療糾正電解質(zhì)紊亂、止吐治療等。常規(guī)組患兒行蒙脫石散(維奧制藥有限公司)聯(lián)合枯草桿菌二聯(lián)活菌(韓美藥品有限公司)口服治療。蒙石脫散用法：<1歲患兒1袋/d；1～2歲患兒1～2袋/d；>2歲患兒2～3袋/d，所有患兒均分3次服用?？莶輻U菌二聯(lián)活菌用法：<2歲患兒1袋/d；>2歲患兒1～2袋/d，所有患兒均1～2次/d。觀察組在常規(guī)組的基礎(chǔ)上加用羅伊氏乳桿菌(拜奧生物科技公司)，劑量為1×108CFU，持續(xù)治療7 d[7]。

1.3 觀察指標(biāo)

(1)治療效果評(píng)估：記錄患兒治療3 d后大便次數(shù)、性狀變化情況及發(fā)熱、腹痛、嘔吐等癥狀改善情況。根據(jù)患兒病情進(jìn)行療效評(píng)估[8]：大便次數(shù)、性狀恢復(fù)正常，發(fā)熱、腹痛、嘔吐等癥狀消失，糞便常規(guī)檢測(cè)結(jié)果正常為顯效；大便次數(shù)、性狀改善，發(fā)熱、腹痛、嘔吐等癥狀好轉(zhuǎn)，糞便常規(guī)檢測(cè)結(jié)果趨向正常為有效；大便次數(shù)、性狀及發(fā)熱、腹痛、嘔吐等癥狀無(wú)改善或加重，糞便常規(guī)檢測(cè)結(jié)果異常為無(wú)效。(2)免疫功能、炎性因子水平：比較患兒治療前后血清免疫球蛋白G(IgG)、免疫球蛋白A(IgA)、T淋巴細(xì)胞亞群CD4+/CD8+比值、腫瘤壞死因子-α(TNF-α)、白細(xì)胞介素-6(interleukin-6，IL-6)、IL-10水平，兩組患兒治療前及治療7 d后的外周靜脈血4 mL并分離其血清，3 000 rpm，離心10 min，采用酶聯(lián)免疫試劑盒(晶抗生物工程有限公司，上海，JKSJ-2095)對(duì)IgG、IgA、TNF-α、IL-6、IL-10進(jìn)行吸附試驗(yàn)檢測(cè)含量，對(duì)CD4+、CD8+進(jìn)行免疫熒光法檢測(cè)。(3)腸道菌群：兩組患兒均于治療前及治療7 d后采集糞便進(jìn)行糞便菌群分析。糞便腸道菌群檢測(cè)[9]：將患兒自然排出且未污染的新鮮糞便進(jìn)行涂片及革蘭氏染色。依據(jù)鏡下觀察腸道菌群形態(tài)、數(shù)目及桿菌/球菌比例，對(duì)所有患兒腸道菌群失調(diào)情況分級(jí)，糞便菌群數(shù)目、形態(tài)及比例輕微改變，革蘭氏陽(yáng)性桿菌數(shù)量降低，革蘭氏陰性桿菌增多，革蘭氏陽(yáng)性球菌正?；蛟龆?，梭菌屬、酵母菌屬略微增多為Ⅰ級(jí)；糞便腸道菌群數(shù)目、形態(tài)及比例明顯改變，革蘭氏陽(yáng)性桿菌數(shù)量明顯降低，革蘭氏陰性桿菌明顯增多且超過(guò)九成，革蘭氏陽(yáng)性球菌數(shù)量增多，球菌/桿菌比例紊亂或倒置，梭菌屬、酵母菌屬明顯增多為Ⅱ級(jí)；糞便菌群明顯減少，一種細(xì)菌或真菌占優(yōu)勢(shì)為Ⅲ級(jí)。(4)胃腸激素水平：比較患兒治療前后胃泌素(GAS)、胃動(dòng)素(MOT)、血管活性腸肽(VIP)水平。對(duì)GAS、MOT、VIP進(jìn)行放射免疫分析法檢測(cè)。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

2 結(jié)果

2.1 兩組治療效果比較

觀察組患兒顯效及有效的例數(shù)均高于常規(guī)組，觀察組治療效果的總體有效率高于常組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=4.400,P=0.035)。見(jiàn)表1。

表1 兩組手術(shù)前后性激素水平比較[n(%)]

2.2 兩組治療前后免疫功能及炎性因子水平比較

治療后，兩組患兒血清IgG、IgA、CD4+/CD8+水平均高于治療前(P<0.05)，而TNF-α、IL-6、IL-10水平則低于治療前(P<0.05)；觀察組患兒IgG、IgA、CD4+/CD8+水平均比常規(guī)組高(P<0.05)，而TNF-α、IL-6、IL-10水平均比常規(guī)組低(P<0.05)。見(jiàn)表2。

表2 兩組治療前后免疫功能及炎性因子水平對(duì)比

2.3 兩組治療前后腸道菌群比較

治療前，兩組患兒腸道菌群比較，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；治療7 d后，兩組患兒正常腸道菌群占比均高于治療前(P<0.05)，兩組患兒Ⅰ級(jí)、Ⅱ級(jí)腸道菌群占比均低于治療前(P<0.05)，觀察組正常及Ⅰ級(jí)腸道菌群患兒占比高于常規(guī)組(P<0.05)。見(jiàn)表3。

表3 兩組治療前后腸道菌群對(duì)比[n(%)]

2.4 兩組治療前后胃腸激素水平比較

治療后，兩組患兒GAS、MOT、VIP水平均比治療前低(P<0.05)，且觀察組GAS、MOT、VIP水平低于常規(guī)組(P<0.05)。見(jiàn)表4。

表4 兩組治療前后胃腸激素水平對(duì)比

3 討論

輪狀病毒是一種雙鏈核糖核酸病毒，可感染腸黏膜細(xì)胞產(chǎn)生腸毒素，對(duì)小腸上皮細(xì)胞及腸道菌群造成損傷，影響腸黏膜的吸收功能，從而導(dǎo)致機(jī)體水、電解質(zhì)紊亂，嚴(yán)重者可出現(xiàn)脫水、酸中毒、心肌炎等[10]。輪狀病毒感染是引起小兒感染性腸炎的單一主因，起病急，主要表現(xiàn)為腹瀉、排黃色水樣便，量多且5～10次/d，常伴發(fā)熱及呼吸道癥狀，免疫缺陷患兒可引起慢性癥狀性腹瀉，嚴(yán)重影響患兒的健康成長(zhǎng)[11]。

臨床常采用腸黏膜保護(hù)劑聯(lián)合益生菌制劑的治療手段避免小腸上皮細(xì)胞受損，改善腸道微生態(tài)。蒙脫石散可抑制輪狀病毒產(chǎn)生腸毒素，覆蓋于小腸黏膜上形成防御屏障，是治療因病菌感染引起腹瀉的常規(guī)藥物，枯草桿菌二聯(lián)活菌是由屎腸球菌和枯草桿菌組成的細(xì)菌類(lèi)微生物制劑，兩種細(xì)菌存在于正常小兒腸道中，能抑制腸道有害菌種的過(guò)度繁殖，調(diào)整腸道微生態(tài)，可作為止瀉策略[12]。羅伊氏乳桿菌隸屬于乳酸菌，可分泌廣譜抗菌物質(zhì)羅伊氏菌素，進(jìn)而有效抑制有害菌種的生長(zhǎng)，提高機(jī)體免疫力[13]。本研究顯示，觀察組患兒的治療總體有效率高于對(duì)照組，IgG、IgA、CD4+/CD8+水平上升，炎性因子TNF-α、IL-6、IL-10水平降低，說(shuō)明羅伊氏乳桿菌可有效治療小兒輪狀病毒感染腸炎，且治療效果優(yōu)于蒙石脫散聯(lián)合枯草桿菌二聯(lián)活菌。分析原因可能為：羅伊氏乳桿菌DSM17938進(jìn)入人體后可產(chǎn)生乙酸及羅伊氏菌素，乙酸可降低腸道PH值，破壞有害菌的生長(zhǎng)環(huán)境，抑制病原體的產(chǎn)生，阻止病毒的繼續(xù)入侵及炎癥信號(hào)的傳導(dǎo)；羅伊氏菌素則引起病原體氧化應(yīng)激，激活機(jī)體CD4+細(xì)胞，誘導(dǎo)IgG、IgA等免疫球蛋白的產(chǎn)生，增強(qiáng)患兒免疫功能。

腸道菌群參與機(jī)體微生態(tài)系統(tǒng)，保持腸道功能的正常運(yùn)作，輪狀病毒侵襲腸道后造成腸道菌群失調(diào)，腸道運(yùn)化功能減弱可致腹瀉[14]。本研究表明，治療7 d后，觀察組正常及Ⅰ級(jí)腸道菌群患兒占比高于常規(guī)組，說(shuō)明羅伊氏乳桿菌具有促進(jìn)正常腸道菌群重建的作用，短時(shí)間內(nèi)恢復(fù)腸道微生態(tài)平衡的效果更佳。分析原因可能為：羅伊氏乳桿菌進(jìn)入腸道后迅速定居增殖，修正腸道菌群失調(diào)，阻止輪狀病毒對(duì)腸道上皮細(xì)胞的損傷，且羅伊氏乳桿菌與枯草桿菌二聯(lián)活菌同為微生態(tài)制劑，可加速腸蠕動(dòng)，促進(jìn)腸道吸收功能的恢復(fù)，聯(lián)合使用具有協(xié)同作用[15]。

消化道黏膜釋放的胃腸激素可調(diào)節(jié)胃腸功能，臨床通常將胃腸激素GAS、MOT、VIP水平作為疾病診斷的指標(biāo)之一[16]。GAS水平過(guò)高可引起胃腸道過(guò)度運(yùn)動(dòng)而導(dǎo)致消化道潰瘍伴腹瀉；MOT分泌過(guò)多可產(chǎn)生移行性運(yùn)動(dòng)綜合波，致腸黏膜水、電解質(zhì)分泌增多而引發(fā)腹瀉；VIP水平升高可加強(qiáng)腸道神經(jīng)應(yīng)激反應(yīng)，加重腹瀉[17]。本研究中觀察組治療后血清GAS、MOT、VIP水平低于對(duì)照組，提示羅伊氏乳桿菌可能降低患兒胃腸激素水平，有效控制患兒腹瀉癥狀，促使胃腸激素水平恢復(fù)正常。分析原因可能為：羅伊氏乳桿菌作為健康機(jī)體正常腸道菌群之一的乳酸桿菌，與枯草桿菌二聯(lián)活菌共生會(huì)加速宿主腸道微生物群的恢復(fù)，維持腸道正常蠕動(dòng)及水、電解質(zhì)平衡，有效緩解腹瀉癥狀，胃腸激素水平降低[18]。

綜上所述，羅伊氏乳桿菌聯(lián)合蒙脫石散、枯草桿菌二聯(lián)活菌治療小兒輪狀病毒感染腸炎的療效較顯著，可增強(qiáng)患兒免疫力，降低炎性因子水平，促進(jìn)正常腸道菌群及胃腸激素水平的恢復(fù)。