畢天林 安麗萍 王凱旋 梁德娟 趙建國③

（1海南大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院 海南 ?？?570228；2海南大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院 海南 海口 570228）

泰勒蟲（Theileria spp.）是梨形蟲的一種，主要由蜱傳播，可感染多種宿主，因其多為隱形感染，容易被飼養(yǎng)管理人員忽視。牛泰勒蟲病是由泰勒蟲屬原蟲感染紅細(xì)胞或白細(xì)胞所致，嚴(yán)重時(shí)會(huì)引起宿主表現(xiàn)發(fā)熱、貧血、黃疸和淋巴結(jié)腫大等臨床癥狀［1］。流行病學(xué)調(diào)查顯示，泰勒蟲在中國許多地區(qū)均有感染病例存在［2‐4］，且有多種泰勒蟲同時(shí)感染的情況［5‐11］。血常規(guī)與血液生化指標(biāo)是評(píng)估畜禽健康的重要評(píng)價(jià)指標(biāo)，篩選特征性血常規(guī)與血液生化參數(shù)可以有助于牛泰勒蟲病初步診斷，在泰勒蟲病早期診斷中具有重要的示病意義。

1 材料與方法

1.1 樣品采集

采集和牛血液樣本合計(jì)73份，樣本來源于海南和牛養(yǎng)殖戶，年齡為1～2歲，雌性33頭，雄性40頭。牛舍結(jié)構(gòu)為對(duì)頭飼養(yǎng)的雙坡式牛欄，房頂保溫性好。在不同牛舍隨機(jī)選擇發(fā)育正常、健康無病的海南和牛備選采樣。試驗(yàn)和牛飼養(yǎng)規(guī)范，早晚補(bǔ)飼精料，設(shè)有自動(dòng)飲水器，牛群自由飲水。

1.2 儀器與試劑

獸用全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀：Vetscan HM5790‐0000型，Abaxis Inc；受用全自動(dòng)生化分析儀：美國艾貝斯Vetscan2；生物安全柜：HR40‐II A2型，青島海爾特種電器有限公司；立式自動(dòng)壓力蒸汽滅菌鍋：G154TW型，致微（廈門）儀器有限公司。75%酒精，批號(hào)：20200206，天津市津東天正精細(xì)化學(xué)試劑廠。

1.3 試驗(yàn)方案

隨機(jī)選擇73頭和牛并人工采集靜脈血2 mL用于泰勒蟲病原分子生物學(xué)檢測(cè)和檢測(cè)血常規(guī)和血生化指標(biāo)。血常規(guī)備用血液樣品用EDTA抗凝管采集后，在4 h內(nèi)完成血常規(guī)檢測(cè)；血液樣品用不含EDTA的采血管收集，放于冰盒中帶回實(shí)驗(yàn)室，置于4℃冰箱中保存并在48 h內(nèi)完成生化指標(biāo)檢測(cè)。

1.4 檢測(cè)指標(biāo)

血液生理指標(biāo)：白細(xì)胞總數(shù)（WBC）、紅細(xì)胞計(jì)數(shù)（RBC）、血紅蛋白（HGB）、血細(xì)胞比容（HCT）、血小板計(jì)數(shù)（PLT）、嗜酸性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)（EOS）、淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)（LYM）、單核細(xì)胞百分比（MON）、中性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)（NEU）、嗜堿性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)（BAS）、平均紅細(xì)胞體積（MCV）、平均紅細(xì)胞血紅蛋白（MCH）、平均紅細(xì)胞血紅蛋白濃度（MCHC）；血液生化指標(biāo)：白蛋白（ALB）、堿性磷酸酶（ALP）、天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（AST）、鈣（CA）、谷氨酰轉(zhuǎn)移酶（GGT）、總蛋白（TP）、球蛋白（GLOB）、血尿素氮（BUN）、肌酸激酶（CK）、磷（PHOS）、鎂（MG）。

1.5 數(shù)據(jù)處理

采用SPSS 25.0對(duì)試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行獨(dú)立性t檢驗(yàn)，數(shù)據(jù)以平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤表示。p＞0.05表示無顯著差異，p＜0.05表示差異顯著，p＜0.01表示差異極顯著。

2 結(jié)果與分析

2.1 血常規(guī)

海南和牛感染泰勒蟲血常規(guī)指標(biāo)詳見表1。泰勒蟲感染和牛血常規(guī)指標(biāo)中WBC、RBC、PLT、LYM、MON、NEU、MCHC和未感染泰勒蟲陰性和牛比較，有下降趨勢(shì)，但差異不顯著（p＞0.05）；HGB、HCT、EOS、BAS、MCV、MCH呈現(xiàn)升高趨勢(shì)，但差異同樣不顯著（p＞0.05），且均在正常參考范圍內(nèi)。

表1 血常規(guī)陽性組、陰性組統(tǒng)計(jì)結(jié)果

2.2 血生化

海南和牛感染泰勒蟲血液生化指標(biāo)詳見表2。與陰性牛比較，陽性牛AST、PHOS的含量呈現(xiàn)下降趨勢(shì)，但差異不顯著（p＞0.05）；ALB、GGT、TP、GLOB、BUN、MG的含量有升高趨勢(shì)，但差異不顯著（p＞0.05）；另外，ALP、CK的含量有下降趨勢(shì)，與陰性牛比較差異顯著（p＜0.05），但各項(xiàng)檢測(cè)指標(biāo)均位于正常參考范圍內(nèi)。

表2 血生化統(tǒng)計(jì)結(jié)果

3 討論與結(jié)論

感染泰勒蟲的山羊和綿羊RBC計(jì)數(shù)呈現(xiàn)下降趨勢(shì)，這主要是因?yàn)樘├障x感染并破壞紅細(xì)胞引起，臨床上會(huì)表現(xiàn)貧血癥狀［12］。本研究中，感染泰勒蟲和牛并未表現(xiàn)明顯臨床癥狀，并且，各項(xiàng)血液理化指標(biāo)與陰性組比較，變化規(guī)律不明顯。巴西學(xué)者M(jìn)ahoney和Ross在1972年就巴貝斯蟲在動(dòng)物體內(nèi)長(zhǎng)期感染而動(dòng)物沒有表現(xiàn)出相應(yīng)的臨床癥狀時(shí)提出“動(dòng)物地方性疾病適應(yīng)性”概念。即被感染的宿主和巴貝斯蟲之間存在一個(gè)平衡，被感染的動(dòng)物并沒有表現(xiàn)出相應(yīng)的臨床癥狀［13‐14］。之后，巴西學(xué)者又把動(dòng)物地方性疾病適應(yīng)性的概念用于邊緣無形體中。由于動(dòng)物地方性疾病適應(yīng)性的存在，邊緣無形體感染牛之后大多數(shù)時(shí)候并不會(huì)表現(xiàn)出相應(yīng)的臨床癥狀，這會(huì)促進(jìn)邊緣無形體在宿主體內(nèi)的長(zhǎng)期存在和持續(xù)傳播。泰勒蟲屬于血液寄生原蟲的一種，在海南熱帶地方環(huán)境，可能與海南和牛建立了一種相互適應(yīng)關(guān)系，即動(dòng)物地方性疾病適應(yīng)性。

所以，泰勒蟲感染后海南和牛的血液生理生化指標(biāo)未表現(xiàn)明顯異常，且未見特征臨床癥狀，這可能與動(dòng)物地方性疾病適應(yīng)性有關(guān)。