秦平偉

(黑龍江省農(nóng)業(yè)科學(xué)院畜牧獸醫(yī)分院 ， 黑龍江 齊齊哈爾 161005)

乳房炎是奶牛生產(chǎn)中最常見、最多發(fā)的疾病之一。奶牛一旦發(fā)生乳房炎，牛奶品質(zhì)下降，奶產(chǎn)量減少，奶牛發(fā)情和妊娠的時間延長，繁殖力降低，情況嚴重的奶牛會遭到淘汰；乳房炎奶中的細菌及抗生素治療帶來的殘留，嚴重影響奶及其制品的食品安全和消費者身體健康，因此，奶牛乳房炎無論對奶牛生產(chǎn)，還是對食用者危害都相當嚴重，是困擾奶牛業(yè)發(fā)展的一大難題。目前世界上仍沒有一種高效、低殘留的方法可治療乳房炎。乳癰康復(fù)膏是根據(jù)中醫(yī)理論采用純中草藥研制的一種治療乳房炎的膏藥制劑，具有消炎、鎮(zhèn)痛、活血、化淤、消腫、散癰等功效，為了觀察其對奶牛乳房炎的臨床使用效果，本試驗應(yīng)用乳癰康復(fù)膏對乳房炎奶牛進行了治療試驗。

1 材料與方法

1.1 藥物 乳癰康復(fù)膏是由金銀花、蒲公英、紫花地丁等幾味中草藥組成，每1 g膏藥所含生藥量為0.497 g，由黑龍江省農(nóng)業(yè)科學(xué)院畜牧獸醫(yī)分院奶牛疾病研究項目組研制，批號：201900312，規(guī)格：150 g/袋。 用法與用量：取適量乳癰康復(fù)膏均勻涂在乳房腫脹部位或整個乳房，隔日1次。加州乳房炎檢測法(CMT)指示劑：由黑龍江省農(nóng)業(yè)科學(xué)院畜牧獸醫(yī)分院奶牛疾病研究項目組配制，十二烷基硫酸鈉45 g，氫氧化鈉13 g，溴甲酚紫0.1 g，溶于適量蒸餾水中配成1 000 mL溶液。

1.2 儀器 MilkoScan FT2多功能乳成分分析儀(丹麥生產(chǎn))，Nikon生物顯微鏡(日本生產(chǎn))。

1.3 試驗動物 2019年5月中旬至9月末，在黑龍江省齊齊哈爾市周圍的6個中小型奶牛場進行試驗。試驗選擇隱性乳房炎、輕度和重度臨床型乳房炎的患病奶牛共278頭。

1.4 奶牛乳房炎的診斷方法及判定標準 根據(jù)乳房和乳汁有無肉眼可見變化將乳房炎分為隱性乳房炎、臨床型乳房炎和慢性乳房炎。隱性乳房炎的奶牛乳房和乳汁肉眼看不出如何變化，但是奶的品質(zhì)下降、奶產(chǎn)量減少，是奶牛乳房炎中發(fā)病率最高、造成的損失最嚴重的一種；臨床型乳房炎患牛主要表現(xiàn)乳房發(fā)生炎癥反應(yīng)、產(chǎn)奶量降低或停止、乳汁變性等癥狀；慢性乳房炎多是因?qū)毙耘R床型乳房炎病例沒有得到及時治療或治療不當造成乳腺組織持續(xù)感染，而使乳腺組織漸進性發(fā)炎，這類乳房炎通常沒有明顯的臨床癥狀或看不出炎癥反應(yīng)，但也可導(dǎo)致乳腺組織纖維化，造成乳房萎縮變小。

1.4.1 隱性乳房炎的診斷 采用CMT分乳區(qū)診斷，檢測乳汁中體細胞數(shù)，在每個測試盤中倒入2 mL乳樣，加入等量CMT指示劑后，均勻搖動約8 s，根據(jù)有無絮狀物的形成及沉淀程度來判定結(jié)果，判斷標準分為陰性(-)、可疑(±)、弱陽性(+)、陽性(++)、強陽性(+++)5個級別。取判斷結(jié)果為可疑級別以上的奶樣，用改進的顯微鏡計數(shù)方法進行顯微鏡檢測，根據(jù)國際乳業(yè)聯(lián)合會(IDF)牛乳體細胞數(shù)推薦分級標準的具體規(guī)定，每毫升奶在50萬個以上者可判斷為隱性乳房炎。

1.4.2 臨床型乳房炎的診斷 乳房出現(xiàn)紅、腫、熱、痛等炎癥反應(yīng)。乳房皮膚出現(xiàn)紅腫變化，用手觸摸乳房感覺較硬并且有灼熱的感覺，手觸時奶牛出現(xiàn)強烈不安寧的疼痛反應(yīng)，乳汁中出現(xiàn)凝乳塊以及帶血或帶膿性分泌物，乳汁變稀呈水樣變化。

1.5 試驗方法 首先對6個牛場的所有健康奶牛進行隱性乳房炎檢測，選擇年齡、胎次、奶產(chǎn)量、體況相近的隱性乳房炎陽性奶牛，根據(jù)隱性乳房炎的發(fā)生程度隨機平均分成為2個組，即對照組和治療組，試驗共選出奶牛182頭，對照組和治療組各91頭。 對照組奶牛不給藥物，不進行任何治療；治療組奶牛用乳癰康復(fù)膏治療，將乳房洗凈擦干、剪毛，乳癰康復(fù)膏加熱溶化后均勻地涂布于患病乳區(qū)表面1.5～2 mm厚，每頭奶牛的每個乳區(qū)根據(jù)患病乳房腫脹面積進行涂抹，每2天涂抹1次，連續(xù)涂抹4次， 仔細觀察給藥后奶牛乳房的變化，詳細記錄臨床癥狀，并于涂藥前、涂藥第7、14天和第21天分別采集奶樣進行CMT檢測、顯微鏡體細胞計數(shù)(SCC)和乳品質(zhì)量檢測。

首先選擇年齡、胎次、奶產(chǎn)量、體況相近的臨床型乳房炎奶牛，根據(jù)乳房炎的發(fā)生程度隨機平均分成2個組，即對照組和治療組，試驗共選擇試驗牛96頭，對照組和治療組各48頭。對照組奶牛不給藥物，不進行任何治療；治療組奶牛用乳癰康復(fù)膏治療，將乳房洗凈擦干、剪毛，乳癰康復(fù)膏加熱溶化后均勻地涂布于患病乳房表面1.5～2 mm厚，每頭奶牛的每個乳區(qū)根據(jù)患病乳房腫脹面積進行涂抹，每2天涂抹1次，連續(xù)涂抹4次，仔細觀察給藥后奶牛乳房的變化，詳細記錄臨床癥狀，并于涂藥前、涂藥第7、14天和第21天分別采集奶樣進行CMT檢測、顯微鏡體細胞計數(shù)(SCC)和乳品質(zhì)量檢測。

1.6 飼養(yǎng)管理 所有奶牛場均為全封閉式飼養(yǎng)管理，單獨飼喂，專人管理，嚴格消毒，全混合日糧(TMR)全價飼料配比，每天2次投喂精料，自由采食粗飼料，自由飲水，按擠奶操作程序機械榨奶，每天3次。

1.7 治療判定標準

1.7.1 隱性判斷標準 判斷標準為CMT檢測陰性，每1 mL奶中體細胞數(shù)降至50萬個以下后，乳品質(zhì)量恢復(fù)至正常。3周達不到上述指標視為治療失敗。

1.7.2 臨床型乳房炎 (1)痊愈：病牛乳房炎炎癥癥狀消失，乳汁性狀、顏色、氣味正常，產(chǎn)奶量恢復(fù)，精神、食欲等恢復(fù)至正常，CMT檢測陰性，每1 mL奶中體細胞數(shù)50萬個以下。(2)有效：臨床炎癥癥狀減輕，乳汁眼見異常變輕，產(chǎn)奶量回升，乳品質(zhì)量上升。CMT檢測陽性程度減弱、變好，為可疑(±)和弱陽性(+)，SCC在50萬～100萬個/mL。(3)無效：病牛乳房炎癥癥狀加重或轉(zhuǎn)為慢性炎癥，乳腺完全失去泌乳能力不產(chǎn)奶，奶牛發(fā)熱、食欲減退、無精打采等全身癥狀明顯。

1.8 乳房炎病原菌檢測 取隱性乳房炎以及臨床型乳房炎奶樣在無菌操作下放于15 mL離心管中，3 000 r/min離心10 min，棄去管中的上層液體，留取底部沉淀物，無菌操作吸取沉淀物100 μL，分別接種于綿羊鮮血瓊脂培養(yǎng)基、麥康麥培養(yǎng)基、營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基、改良愛德華瓊脂培養(yǎng)基。37 ℃培養(yǎng)24 h后，挑取生長的單菌落進行連續(xù)傳代純化。純化完畢后進行測序，確定是何種細菌導(dǎo)致的乳房炎。

2 結(jié)果

2.1 乳房炎病原菌的分離鑒定 結(jié)果如表1所示，在本試驗中金黃色葡萄球菌引起的乳房炎病例數(shù)最多，出現(xiàn)率達到了32.87%，其次為表皮葡萄球菌，出現(xiàn)率達到了28.76%，大腸桿菌的出現(xiàn)率達到了24.65%。無乳鏈球菌、停乳鏈球菌、乳房鏈球菌引起的乳房炎數(shù)較少。

表1 乳房炎病原菌分離鑒定結(jié)果Table 1 Isolation and identification of mastitis pathogens

2.2 乳癰康復(fù)膏治療隱性奶牛乳房炎效果觀察 乳癰康復(fù)膏對隱性奶牛乳房炎治療效果如表2所示，體細胞數(shù)變化如表3所示。從表2可以看出，涂藥后治療組奶牛陽性乳區(qū)數(shù)逐漸減少，涂藥第7天陽性乳區(qū)數(shù)從治療前的352個減少到137個，乳區(qū)治愈率達到61.08%；涂藥第14天陽性乳區(qū)數(shù)繼續(xù)減少到22個，治愈率達到93.75%；涂藥第21天陽性乳區(qū)數(shù)減少到13個，治愈率達到96.31%，說明停藥后治愈率在93.75%～96.31%。對照組奶牛陽性乳區(qū)數(shù)在治療前后基本上沒有變化。用統(tǒng)計學(xué)軟件分析，涂藥第7天，治療組與對照組治愈率差異顯著(P<0.05)，而涂藥第14天和第21天，治療組與對照組治愈率差異極其顯著(P<0.01)。從表3可以看出，涂抹藥物后，治療組中的體細胞數(shù)隨著使用天數(shù)的增加呈下降趨勢，在用藥后的第7天，與對照組相比差異顯著(P<0.05)；在用藥后的第14天和第21天，與對照組相比，差異極其顯著(P<0.01)。

表2 乳癰康復(fù)膏對隱性奶牛乳房炎的治療效果Table 2 Therapeutic effect of breast carbuncle rehabilitation ointment on cows with subclincal mastitis

表3 隱性乳房炎奶牛治療前后的體細胞數(shù)變化Table 3 Changes of somatic cell number in cows with subclincal mastitis before and after treatment (×104/mL)

2.3 乳癰康復(fù)膏治療臨床型奶牛乳房炎效果觀察 乳癰康復(fù)膏對臨床型奶牛乳房炎的治療效果見表4，體細胞計數(shù)變化如表5所示。從表4可以看出，涂藥后治療組奶牛陽性乳區(qū)數(shù)逐漸減少，涂藥第7天陽性乳區(qū)數(shù)從治療前的76個減少到32個，乳區(qū)治愈率達到57.89%；涂藥第14天陽性乳區(qū)數(shù)繼續(xù)減少到8個，治愈率達到89.47%；涂藥第21天陽性乳區(qū)數(shù)減少到7個，治愈率達到90.79%，說明停藥后治愈率在89.47%～90.79%。對照組奶牛陽性乳區(qū)數(shù)在治療前后沒有變化。用統(tǒng)計學(xué)軟件分析，涂藥第7天，治療組與對照組治愈率差異顯著(P<0.05)，而涂藥第14天和第21天，治療組與對照組治愈率差異極其顯著(P<0.01)。從表5可以看出，治療組中的體細胞數(shù)隨著使用天數(shù)的增加呈下降趨勢，在用藥后的第7天，與對照組相比差異顯著(P<0.05)；在用藥后的第14天和第21天，與對照組相比，差異極其顯著(P<0.01)。

表4 乳癰康復(fù)膏對臨床型奶牛乳房炎的治療效果Table 4 Therapeutic effect of breast carbuncle rehabilitation ointment on cows with clinical mastitis

表5 臨床型乳房炎奶牛治療前后的體細胞數(shù)變化Table 5 Changes of somatic cell count in cows with clinical mastitis before and after treatment (×104/mL)

2.4 乳癰康復(fù)膏對乳房炎奶牛乳品質(zhì)量的影響 乳癰康復(fù)膏對乳房炎奶牛乳品質(zhì)量的影響如表6所示。隨著治療用藥以及治療后天數(shù)的增加，治療組奶牛乳汁中乳脂、乳糖和干物質(zhì)的含量逐漸升高；乳脂從治療前的2.43%到用藥第7、14天和第21天的3.17%、3.49%和3.89%，乳糖從治療前的3.53%到用藥第7、14天和第21天的3.97%、5.26%和4.57%，干物質(zhì)從治療前的10.26%到用藥第7、14天和第21天的11.21%、11.35%和11.69%，而對照組奶牛乳汁中乳脂和乳糖的含量逐漸下降；治療組奶牛乳汁中乳蛋白含量都在逐漸下降，對照組奶牛乳汁中乳蛋白含量都在逐漸上升。用統(tǒng)計學(xué)軟件分析，用藥后與用藥前相比治療組奶牛乳汁中乳脂、乳蛋白、乳糖和干物質(zhì)的含量差異顯著(P<0.05)，治療組與對照組相比奶牛乳汁中乳脂、乳蛋白、乳糖和干物質(zhì)的含量差異顯著(P<0.05)。

表6 乳癰康復(fù)膏對乳房炎奶牛乳品質(zhì)量的影響Table 6 Effect of breast carbuncle rehabilitation ointment on milk quality of cows with mastitis

3 討論

乳癰康復(fù)膏具有消炎、鎮(zhèn)痛、活血、化淤、消腫、散癰等功效，適用于對各種類型奶牛乳房炎的治療。本試驗結(jié)果表明，乳癰康復(fù)膏不管是對隱性奶牛乳房炎還是對臨床型乳房炎治療效果均顯著，隱性奶牛乳房炎的治愈率達95%左右、臨床型奶牛乳房炎的治愈率達90%左右，而且奶牛乳汁中乳脂、乳糖和干物質(zhì)的含量逐漸升高，同時，隨著用藥后時間的延長效果越顯著，治愈率越高、奶的品質(zhì)越好，這與乳癰康復(fù)膏對乳腺的作用有關(guān)，乳癰康復(fù)膏消除了乳腺炎癥，使乳腺細胞恢復(fù)正常生理功能，達到正常的泌乳功能。

乳癰康復(fù)膏對于隱性奶牛乳房炎的治療效果要好于臨床型乳房炎，這與隱性奶牛乳房炎的病情較輕、炎癥反應(yīng)較弱有關(guān)，乳腺組織在乳癰康復(fù)膏的作用下其生理機能恢復(fù)速度快于病情較重、炎癥反應(yīng)較強的臨床型乳房炎。本試驗由于檢測時間較短才出現(xiàn)這樣的結(jié)果，但隨著愈后時間的延長，不管是隱性奶牛乳房炎還是臨床型乳房炎都會痊愈，到達正常狀態(tài)。對于奶牛乳房炎的治療，應(yīng)用抗生素治療雖然可以快速殺菌、消除病因，卻起不到促進乳腺損傷組織恢復(fù)的作用，得靠自身慢慢恢復(fù)。應(yīng)用乳癰康復(fù)膏對奶牛乳房炎進行治療，除了抑菌和抗炎作用、清除致病因素、恢復(fù)機體的正常狀態(tài)，還能通過改善乳房局部的血液循環(huán)，調(diào)節(jié)乳腺細胞的血液供應(yīng)，進而修復(fù)受損害的乳腺細胞，能夠促進乳腺損傷組織快速恢復(fù)作用，達到徹底治愈乳房炎的目的，治愈后患病乳區(qū)產(chǎn)奶量明顯增多、奶的品質(zhì)明顯提高。分析其主要原因是中藥成分發(fā)揮的藥效作用所致，在對乳房發(fā)病部位涂抹給藥后，藥物直達患處發(fā)揮藥效，進而修復(fù)受損乳腺細胞而達到徹底治愈乳房炎、提高治愈率目的。但是該產(chǎn)品是否對乳腺中的致病菌有直接殺菌作用還需要進一步的研究。

乳癰康復(fù)膏不但使用方便，還可降低注射、口服、乳池給藥等對奶牛的不良刺激反應(yīng)，同時，局部乳房皮膚涂抹給藥直達患處，也避免了口服給藥的肝臟“首過效應(yīng)”和奶牛瘤胃對藥物的破壞以及注射對機體的副作用。本試驗表明，乳癰康復(fù)膏治療奶牛后，隨著陽性乳區(qū)康復(fù)，奶牛泌乳量上升，乳汁質(zhì)量也大大改善。乳癰康復(fù)膏對隱性乳房炎和臨床型乳房炎均有很好的療效，治療效果顯著。從治療短時間看乳癰康復(fù)膏對隱性隱性乳房炎的治療效果要好于對臨床型乳房炎。本試驗治療的乳房炎奶牛有的是病癥較嚴重，病史較長，難以治愈的病例，還有的乳房腫脹較嚴重已形成很大的膿包，還有的乳腺組織已纖維化或增生、形成硬性腫塊，給治療帶來很大困難，在一定程度上影響了治愈率，治療效果不能達到100%，在試驗中發(fā)現(xiàn)，乳癰康復(fù)膏對這些頑固性病例的治療要好于其他方法。