張文華，謝 文，侯建波，汪 鵬，徐敦明，姚濱濱，何建敏，嚴(yán)穎鵬

（1.杭州海關(guān)技術(shù)中心，浙江 杭州 310016；2.浙江省檢驗(yàn)檢疫科學(xué)技術(shù)研究院，浙江 杭州 310016；3.廈門海關(guān)技術(shù)中心，福建 廈門 361026）

肉堿的化學(xué)名稱為β-羥基-γ-三甲胺基丁酸，其分子中含有1 個(gè)手性碳原子，有2 個(gè)立體異構(gòu)體：右旋肉堿（D-肉堿）和左旋肉堿（L-肉堿）對(duì)映異構(gòu)體。其中左旋肉堿又稱L-肉堿或卡尼丁，廣泛分布于肝臟器官中，是一種促使脂肪轉(zhuǎn)化為能量的類氨基酸［1］，同時(shí)也是脂肪酸在線粒體內(nèi)代謝的必需物質(zhì)，其缺乏可直接導(dǎo)致能量的合成不足，出現(xiàn)易疲勞、肌無力等癥狀。目前，市售保健食品中所用的L-肉堿主要來源于工業(yè)上的化學(xué)合成法，但該方法生產(chǎn)的L-肉堿純度通常達(dá)不到要求，導(dǎo)致L-肉堿保健品中含有D-肉堿［2］。而D-肉堿不但沒有功效，甚至具有毒性。人攝入D-肉堿，肌肉會(huì)受到損害，造成肌無力、肌疼痛、肌萎縮等癥狀［3］。因此，迫切需要建立一種保健食品中L-肉堿的純度分析與含量測(cè)定的方法。

目前，L-肉堿的檢測(cè)方法主要為分光光度法［4－5］、高效液相色譜法（HPLC）［6－7］、高效液相色譜－串聯(lián)質(zhì)譜法［5，8－10］等。但上述方法基本是針對(duì)L-肉堿進(jìn)行檢測(cè)，而對(duì)D-肉堿和L-肉堿2 種對(duì)映體的拆分以及L-肉堿純度分析的方法報(bào)道較少。翟旭峰［11］和祝偉霞［2］等采用反向高效液相色譜法實(shí)現(xiàn)了L-肉堿和D-肉堿的基線分離，但方法存在分析時(shí)間長（>20 min）、有機(jī)試劑用量大等問題。近年來新推出的超高效合相色譜技術(shù)（UPC2）受到了廣泛關(guān)注，該技術(shù)是將超高效液相色譜（UPLC）與傳統(tǒng)超臨界流體色譜（SFC）的特點(diǎn)相互補(bǔ)充，改進(jìn)了傳統(tǒng)SFC 的各項(xiàng)硬件［12］，利用超臨界二氧化碳與少量有機(jī)溶劑（乙腈、甲醇、異丙醇等）為流動(dòng)相，能精準(zhǔn)調(diào)控待測(cè)物的保留時(shí)間和分離度，提高系統(tǒng)的精密度、穩(wěn)定性和可靠性［13］。研究表明，UPC2技術(shù)更適于分析傳統(tǒng)液相色譜難以處理的結(jié)構(gòu)類似物和同分異構(gòu)體，已被成功應(yīng)用于三唑類農(nóng)藥［14］、酚酸類化合物［15］、色素［16］、酚類精油［17］等。目前，UPC2技術(shù)應(yīng)用于肉堿對(duì)映體的拆分和含量測(cè)定尚未見報(bào)道。

為解決上述常規(guī)液相色譜法拆分對(duì)映體存在的問題，本研究建立了一種超高效合相色譜拆分肉堿對(duì)映體及測(cè)定其在保健食品中含量的方法。實(shí)驗(yàn)考察了2 種肉堿對(duì)映體標(biāo)準(zhǔn)品衍生產(chǎn)物的穩(wěn)定性，優(yōu)化了保健食品中肉堿對(duì)映體的提取方法、衍生條件以及色譜分離條件等，并利用所建立的方法對(duì)肉堿外消旋體標(biāo)準(zhǔn)品和市售保健食品進(jìn)行檢測(cè)。該方法具有分析速度快、分離效果好、有機(jī)溶劑用量少、靈敏度高等特點(diǎn)，為保健食品中L-肉堿含量與純度的測(cè)定提供了參考方法。

1 實(shí)驗(yàn)部分

1.1 儀器、材料與試劑

超高效合相色譜儀（美國沃特世公司）；臺(tái)式離心機(jī)（美國Thermo 公司）；AE260 電子天平（瑞士Mettler公司）；R215旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀（瑞士Buchi公司）；超純水凈化系統(tǒng)（英國Elga公司）；MS2渦旋混勻器（上海醫(yī)大儀器廠）；氮吹儀（日本東京理化公司）；微孔過濾膜（0.22μm，有機(jī)相）。

甲醇、乙腈、無水乙醇（色譜純，西班牙Scharlau 公司）；碳酸氫鈉（廣東光華科技股份有限公司）；氨水（杭州高晶精細(xì)化工有限公司）；三氯甲烷、三乙胺（上海凌峰化學(xué)試劑有限公司）；氯甲酸丁酯（純度≥98%，上海麥克林生化科技有限公司）；L-丙氨酸-β-萘胺（純度≥98%，上海安譜實(shí)驗(yàn)科技股份有限公司）；實(shí)驗(yàn)用水為超純水；除特殊說明外，其他試劑均為分析純。

肉堿外消旋體（純度≥98%，美國Sigma 公司）。2 種對(duì)映體：L-肉堿（純度為99.0%，德國Dr.E 公司）、D-肉堿（純度為99.8%，美國CATO公司）。

1.2 標(biāo)準(zhǔn)溶液及試劑配制

1.2.1 外消旋體標(biāo)準(zhǔn)溶液肉堿儲(chǔ)備液（1.0 g/L）：分別準(zhǔn)確稱取0.01 g（精確至0.1 mg）肉堿外消旋體標(biāo)準(zhǔn)品，用無水乙醇溶解并定容至10 mL，配成1.0 g/L的標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液。

1.2.2 對(duì)映體標(biāo)準(zhǔn)溶液2種肉堿對(duì)映體儲(chǔ)備液（1.0 g/L）：分別準(zhǔn)確稱取0.01 g（精確至0.1 mg）左旋肉堿和右旋肉堿標(biāo)準(zhǔn)品，用無水乙醇溶解并定容至10 mL，配成1.0 g/L的標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液。

2 種肉堿對(duì)映體的混合工作溶液：準(zhǔn)確吸取一定量的標(biāo)準(zhǔn)溶液，用無水乙醇逐級(jí)稀釋成1.00、2.00、4.00、10.00、20.00、40.00 mg/L的混合工作溶液。

1.2.3 衍生試劑溶液及終止液的配制衍生試劑：稱取0.45 gL-丙氨酸-β-萘胺，用乙腈溶解，并定容至100 mL。催化劑Ⅰ：稱取0.50 g 三乙胺，加三氯甲烷混勻并定容至100 mL。催化劑Ⅱ：稱取0.50 g 氯甲酸丁酯，加三氯甲烷混勻并定容至100 mL。反應(yīng)終止液（50 mmol/L 碳酸氫鈉溶液）：稱取0.42 g 碳酸氫鈉，加水溶解定容至100 mL。

1.3 樣品前處理

1.3.1 樣品提取取20 粒保健品片劑、膠囊劑內(nèi)容物或顆粒劑，研細(xì)，準(zhǔn)確稱取1.00 g（精確至0.01 g）樣品置于燒杯中，加入適量無水乙醇，超聲提取20 min，冷卻至室溫后轉(zhuǎn)移至25 mL容量瓶中，加無水乙醇定容，取適量定容液至離心管中，高速離心5 min后，所得上清液待衍生。

1.3.2 衍 生取0.5 mL 上清液至離心管中，加入0.5 mL 衍生試劑（4.5 g/LL-丙氨酸-β-萘胺乙腈溶液），渦旋混勻，依次加入0.5 mL 催化劑Ⅰ（5 g/L 三乙胺三氯甲烷溶液）和0.5 mL 催化劑Ⅱ（5 g/L 氯甲酸丁酯三氯甲烷溶液），渦旋混勻3 min，20 ℃衍生化60 min后，加入2 mL反應(yīng)終止液（50 mmol/L 碳酸氫鈉溶液），渦旋混勻1 min后，5 000 r/min離心5 min。移取上層水相于100 mL圓底燒瓶中，濃縮至近干，向濃縮瓶中加入1 mL無水乙醇，充分渦旋溶解，過0.22μm濾膜于進(jìn)樣小瓶。

1.4 分析條件

色譜柱：Acquity Trefoil CEL1（3.0 mm × 150 mm，2.5 μm，美國Waters 公司），填料為纖維素-三（3，5-二甲基苯基氨基甲酸酯）；流動(dòng)相：A為超臨界CO2，B為氨水甲醇溶液（1∶99，體積比）。梯度洗脫程序：0～7 min，10% B；7～9 min，10%～28% B；9～12 min，28% B；12～13 min，28%～10% B；13～14 min，10%B。系統(tǒng)背壓：13.8 MPa；流速：1.0 mL/min；進(jìn)樣量：5μL；柱溫：40 ℃；檢測(cè)波長：244 nm。

1.5 標(biāo)準(zhǔn)工作溶液的制備

分別精密移取0.5 mL“1.2.2”中2 種肉堿對(duì)映體的混合工作溶液于10 mL 離心管中，按照“1.3.2”方法衍生，制備成質(zhì)量濃度為0.50、1.00、2.00、5.00、10.00、20.00 mg/L的標(biāo)準(zhǔn)溶液，相當(dāng)于樣品中含有25、50、100、250、500、1 000 mg/kg的2種肉堿對(duì)映體。

2 結(jié)果與討論

2.1 提取方法的優(yōu)化

文獻(xiàn)報(bào)道中通常采用乙腈［6－7］、無水乙醇［4］、甲醇［10］對(duì)肉堿進(jìn)行提取。本文考察了上述3 種試劑的提取效果，在3 份不含左旋肉堿和右旋肉堿的保健品樣品中添加肉堿對(duì)映體混合工作溶液，分別采用上述3種試劑進(jìn)行提取，按照“1.3.2”方法衍生后上機(jī)檢測(cè)。結(jié)果表明，采用乙腈、無水乙醇、甲醇的平均提取效率分別為13.4%、98.5%、70.3%。因此，實(shí)驗(yàn)采用無水乙醇進(jìn)行提取。另外，實(shí)驗(yàn)對(duì)振蕩和超聲提取方式進(jìn)行了比較，在2 份空白保健品樣品中添加肉堿對(duì)映體混合工作溶液，分別采用振蕩和超聲提取方式進(jìn)行提取，按照“1.3.2”方法衍生后上機(jī)檢測(cè)。結(jié)果顯示，振蕩提取和超聲提取的平均提取效率分別為54.5%和96.8%，因此選擇超聲提取。同時(shí)還考察了超聲提取時(shí)間分別為10、20、30、60 min 時(shí)的提取效率，在4 份空白保健品樣品中添加肉堿對(duì)映體混合工作溶液，超聲提取不同的時(shí)間，按照“1.3.2”方法衍生后上機(jī)檢測(cè)。結(jié)果表明超聲提取10 min 時(shí)，2種肉堿對(duì)映體的平均提取效率為70.0%；延長提取時(shí)間至20 min時(shí)，平均提取效率為91.0%；超聲提取時(shí)間增至30 min和60 min時(shí)，平均提取效率分別為91.8%和93.2%，2種肉堿對(duì)映體的提取效率并未顯著增加。因此，實(shí)驗(yàn)確定最佳提取條件為超聲提取20 min。

2.2 衍生條件的優(yōu)化

本實(shí)驗(yàn)嘗試用手性色譜柱將L-肉堿和D-肉堿直接分離測(cè)定，結(jié)果顯示未衍生肉堿的儀器響應(yīng)較低，分離度差，因此采用手性試劑衍生化法，生成2 種有極性差異且含紫外基團(tuán)的衍生產(chǎn)物，從而實(shí)現(xiàn)2種肉堿對(duì)映體衍生產(chǎn)物的分離，該實(shí)驗(yàn)結(jié)果與文獻(xiàn)［2，11］報(bào)道相符。氯甲酸乙酯［4］、氯甲酸丁酯［18］均可用作衍生反應(yīng)的催化劑，因氯甲酸乙酯沸點(diǎn)低、毒性較強(qiáng)，且不易購買，故選用氯甲酸丁酯為衍生反應(yīng)的催化劑。采用0.5 mL 催化劑進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)隨著肉堿對(duì)映體質(zhì)量濃度（0.50、1.00、2.00、5.00、10.00、20.00 mg/L）的增加，衍生產(chǎn)物呈線性增加，說明0.5 mL 催化劑對(duì)于高濃度的肉堿對(duì)映體衍生反應(yīng)也是完全的，故采用催化劑用量為0.5 mL。

考察了反應(yīng)溫度（4、20、40、60 ℃）對(duì)衍生反應(yīng)的影響，吸取10 mg/L 肉堿對(duì)映體混合工作溶液0.2 mL于離心管中，反應(yīng)時(shí)間為10 min。結(jié)果顯示，反應(yīng)溫度從4 ℃升至20 ℃時(shí)，衍生產(chǎn)物逐漸增加；而當(dāng)反應(yīng)溫度從20 ℃升至60 ℃時(shí)，衍生產(chǎn)物逐漸減少（見圖1）。說明反應(yīng)溫度為20 ℃時(shí)，衍生產(chǎn)物含量最高，因此選擇衍生反應(yīng)溫度為20 ℃。

圖1 衍生溫度對(duì)衍生反應(yīng)的影響Fig.1 Effects of derivatization temperature on derivative reaction

考察了反應(yīng)時(shí)間（10、30、60、90 min）對(duì)衍生反應(yīng)的影響，吸取10 mg/L 肉堿對(duì)映體混合工作溶液0.2 mL于離心管中，反應(yīng)溫度為20 ℃。結(jié)果顯示，隨著反應(yīng)時(shí)間的延長，衍生產(chǎn)物逐漸增加；當(dāng)反應(yīng)時(shí)間從60 min 增至90 min 時(shí)，衍生產(chǎn)物的增加不顯著。因此選擇衍生反應(yīng)時(shí)間為60 min。實(shí)驗(yàn)比較了肉堿對(duì)映體衍生反應(yīng)終止液（即萃取試劑）萃取次數(shù)對(duì)回收率的影響。向衍生反應(yīng)溶液中依次加入2 mL反應(yīng)終止液進(jìn)行2 次萃取，結(jié)果顯示，相比第1 次萃取的衍生產(chǎn)物，第2 次萃取的2 種肉堿對(duì)映體衍生產(chǎn)物增加不明顯，因此實(shí)驗(yàn)采用2 mL衍生反應(yīng)終止液進(jìn)行1次萃取。

2.3 分離條件的優(yōu)化

2.3.1 流動(dòng)相中助溶劑的優(yōu)化UPC2采用超臨界二氧化碳為主要流動(dòng)相，通常加入少量有機(jī)助溶劑調(diào)節(jié)流動(dòng)相的極性，以增強(qiáng)對(duì)目標(biāo)物的溶解能力和洗脫能力。為獲得良好的峰形和分離效果，實(shí)驗(yàn)對(duì)有機(jī)助溶劑進(jìn)行了考察。選擇Acquity Trefoil CEL1 手性色譜柱（3.0 mm × 150 mm，2.5 μm），在背壓13.8 MPa、柱溫40 ℃條件下，比較了乙腈、甲醇、異丙醇3 種不同極性的助溶劑對(duì)肉堿分離效果的影響。結(jié)果顯示，使用上述3種助溶劑時(shí)，2種肉堿對(duì)映體的分離度均不佳、峰形展寬明顯，但甲醇作為助溶劑的分離度稍好。由于肉堿含有羥基，屬于極性較強(qiáng)的化合物，加入氨水能夠明顯改善2 種肉堿對(duì)映體的峰形。進(jìn)一步考察了不同體積比（0.1∶99.9、0.5∶99.5、1∶99）的氨水甲醇溶液作為助溶劑的分離效果。由圖2可見，隨著氨水含量的增加，2種肉堿對(duì)映體的峰形和分離效果得到明顯改善，因此實(shí)驗(yàn)選擇氨水甲醇溶液（1∶99）作為助溶劑。

圖2 不同助溶劑對(duì)右旋肉堿和左旋肉堿分離效果的影響Fig.2 Effect of cosolvent on separation of D-carnitine and L-carnitine

2.3.2 系統(tǒng)背壓的選擇UPC2中，系統(tǒng)背壓也是影響分離過程的重要因素，其主要作用是控制二氧化碳在整個(gè)操作過程中處于超臨界流體狀態(tài)。由于二氧化碳在溫度超過31 ℃且壓力超過7.38 MPa時(shí)才會(huì)進(jìn)入超臨界狀態(tài)。因此本實(shí)驗(yàn)以氨水甲醇溶液（1∶99）作為助溶劑，在柱溫40 ℃條件下，考察了背壓分別為10.3、13.8、17.2、20.7 MPa 時(shí)2種肉堿對(duì)映體的分離效果。結(jié)果顯示，隨著系統(tǒng)背壓升高，目標(biāo)化合物的保留時(shí)間提前。當(dāng)背壓為10.3 MPa時(shí)，左旋肉堿的峰形展寬明顯；背壓升至13.8 MPa時(shí)，2種肉堿對(duì)映體的峰形良好，且在11 min內(nèi)實(shí)現(xiàn)良好的基線分離；背壓升至17.2 MPa時(shí)，2種肉堿對(duì)映體的分離度降低；背壓繼續(xù)升至20.7 MPa時(shí)，系統(tǒng)出現(xiàn)超壓報(bào)警。綜合考慮分離效果和分析速度，實(shí)驗(yàn)選擇最佳系統(tǒng)背壓為13.8 MPa。

2.3.3 色譜柱溫度的選擇在UPC2系統(tǒng)中，色譜柱溫度主要通過影響流動(dòng)相密度，從而影響目標(biāo)物的分離效果。一般隨著色譜柱溫度升高，超臨界流體密度變小，溶劑化能力降低，超臨界流體對(duì)目標(biāo)化合物的交換及溶解能力可能減弱，使得目標(biāo)物的保留時(shí)間增大?？紤]到Acquity Trefoil CEL1 手性色譜柱的最高推薦運(yùn)行溫度為40 ℃，且二氧化碳需在溫度超過31 ℃且壓力超過7.38 MPa 時(shí)才會(huì)進(jìn)入超臨界狀態(tài)，因此本實(shí)驗(yàn)在系統(tǒng)背壓為13.8 MPa下，考察了色譜柱溫度分別為31、35、40 ℃時(shí)對(duì)目標(biāo)物分離效果的影響。結(jié)果顯示，隨著柱溫的升高，2 種肉堿對(duì)映體的分離度和色譜峰形均有改善，柱溫為40 ℃時(shí)，2種肉堿對(duì)映體可實(shí)現(xiàn)基線分離。因此，實(shí)驗(yàn)確定最佳色譜柱溫度為40 ℃。

按照上述優(yōu)化的色譜條件進(jìn)行拆分，如圖3所示，右旋肉堿和左旋肉堿得到良好的分離。

圖3 最佳條件下右旋肉堿和左旋肉堿的分離色譜圖Fig.3 Separation chromatogram of D-carnitine and Lcarnitine under optimal conditions

2.4 穩(wěn)定性的考察

分別準(zhǔn)確移取7份0.5 mL的4.00 mg/L肉堿對(duì)映體混合工作溶液于7個(gè)離心管中，經(jīng)衍生后轉(zhuǎn)移至7 個(gè)帶鋁蓋密封的進(jìn)樣小瓶中，用封口膜封好后于－20 ℃下保存，上機(jī)檢測(cè)前再逐個(gè)轉(zhuǎn)移至UPC2專用進(jìn)樣小瓶中。按照“1.4”色譜條件測(cè)定剛衍生化的以及已衍生化并分別儲(chǔ)存1、3、5、7、14、30、60 d 的肉堿對(duì)映體標(biāo)準(zhǔn)溶液，30 d 內(nèi)D-肉堿、L-肉堿含量的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）分別為4.4%、3.2%，60 d 內(nèi)D-肉堿、L-肉堿含量的RSD 分別為10%、8.2%。采用T檢驗(yàn)法比較剛衍生化與衍生后儲(chǔ)存不同天數(shù)的肉堿對(duì)映體含量是否存在顯著性差異。結(jié)果顯示，2 種肉堿對(duì)映體衍生化后－20 ℃下放置30 d時(shí)p>0.05，在統(tǒng)計(jì)學(xué)上無顯著性差異，表現(xiàn)良好的穩(wěn)定性；－20 ℃下放置60 d時(shí)p<0.05，說明2種肉堿對(duì)映體衍生化后的溶液在60 d 時(shí)具有顯著性差異。結(jié)果表明，2 種肉堿對(duì)映體標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)衍生化后的溶液在規(guī)定條件下可保存30 d。

2.5 線性關(guān)系與定量下限

將衍生后右旋肉堿和左旋肉堿的系列混合標(biāo)準(zhǔn)溶液按上述色譜條件進(jìn)行測(cè)定。以標(biāo)準(zhǔn)品的峰面積（Y）為縱坐標(biāo)，對(duì)應(yīng)質(zhì)量濃度（X，mg/L）為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。結(jié)果表明，2 種肉堿對(duì)映體在0.50～20.00 mg/L 質(zhì)量濃度范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系，相關(guān)系數(shù)（r2）大于0.999。通過在不含肉堿的保健品樣品中添加標(biāo)準(zhǔn)品，按照本方法進(jìn)行測(cè)定，以10 倍信噪比（S/N=10）計(jì)算定量下限（LOQ），得到右旋肉堿和左旋肉堿的LOQ均為25 mg/kg。

2.6 準(zhǔn)確度與精密度

分別在不含肉堿的固體類和液體類保健食品中添加標(biāo)準(zhǔn)溶液，左旋肉堿和右旋肉堿的加標(biāo)水平均為25、50、250 mg/kg，平行測(cè)定6次，計(jì)算加標(biāo)回收率及RSD。由表1可知，2種肉堿對(duì)映體的回收率為86.0%～110%，RSD 為4.3%～7.0%，符合SN/T 0001－2016［19］的要求，說明準(zhǔn)確度和精密度能夠滿足不同劑型保健食品的分析要求。

表1 保健食品中2種肉堿對(duì)映體的加標(biāo)回收率和相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（n=6）Table 1 Spiked recoveries and relative standard deviations of 2 kinds of carnitine enantiomers in health food（n=6）

2.7 方法應(yīng)用

2.7.1 實(shí)際樣品測(cè)定應(yīng)用本方法對(duì)10 份市售保健食品中D-肉堿和L-肉堿的含量進(jìn)行測(cè)定，其中片劑保健品5份，膠囊保健品2份，液體保健品3份。結(jié)果顯示，10份保健食品中均未檢出D-肉堿，片劑保健品和膠囊保健品中檢出L-肉堿的含量為25.3～270.2 mg/g，液體保健品中L-肉堿的含量分別為144 g/L 和160 g/L，含量均達(dá)到標(biāo)簽值的96%～102%。歐盟規(guī)定L-肉堿的每日限量為1～2 g［20］，中國的L-肉堿用量主要參考?xì)W盟規(guī)定，成人L-肉堿的食用量不應(yīng)超過2 g/d［21］。所采購的10份L-肉堿保健食品的推薦服用量為0.12～1.8 g/d，均符合歐盟和中國規(guī)定的要求。

2.7.2 外消旋體標(biāo)準(zhǔn)品的拆分應(yīng)用本方法對(duì)所采購的肉堿外消旋體標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行拆分及測(cè)定。結(jié)果顯示，肉堿外消旋體含有D-肉堿和L-肉堿2 種對(duì)映體，以兩者的峰面積之和作為100%，計(jì)算2 種肉堿對(duì)映體的占比，其中D-肉堿占肉堿外消旋體的51.2%，L-肉堿占肉堿外消旋體的48.8%。

3 結(jié) 論

本文優(yōu)化了保健食品中肉堿對(duì)映體的前處理方法、衍生條件以及色譜分離條件，建立了超高效合相色譜拆分肉堿2種對(duì)映體及測(cè)定其在保健食品中含量的方法?？疾炝?種肉堿對(duì)映體標(biāo)準(zhǔn)品衍生產(chǎn)物的穩(wěn)定性，同時(shí)還利用所建立的方法對(duì)肉堿外消旋體標(biāo)準(zhǔn)品和市售保健食品進(jìn)行了測(cè)定。研究結(jié)果表明，本方法具有分析速度快、分離效果好、靈敏度高、綠色環(huán)保等特點(diǎn)，能夠滿足保健食品中左旋肉堿的快速定量及純度分析需要。