王運(yùn)盛，戴春闊，楊勝記，國(guó)欣欣，陳 靖，李祥翔，普天春，范晰琳，盧 巖，張成林，

（1.北京動(dòng)物園，北京 100044；2.圈養(yǎng)野生動(dòng)物技術(shù)北京市重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，北京 100044；3.梵凈山國(guó)家級(jí)自然保護(hù)區(qū)管理局，貴州江口 5544002）

疾病防治是野生動(dòng)物飼養(yǎng)管理工作中重要的組成部分，在眾多的致病因素中，腫瘤較為少見(jiàn)但不容忽視［1］。近年來(lái)，隨著國(guó)內(nèi)圈養(yǎng)野生動(dòng)物數(shù)量的增加及野生動(dòng)物診療工作的深入，野生動(dòng)物腫瘤發(fā)病率呈現(xiàn)逐年上升的跡象。而野生動(dòng)物腫瘤疾病發(fā)生后如何快速確診成為了現(xiàn)階段需要關(guān)注的問(wèn)題。金絲猴（Golden monkey），又名仰鼻猴（Snub.nosed monkey）、藍(lán)面猴、金線狨等，被列為國(guó)家I級(jí)重點(diǎn)保護(hù)動(dòng)物，也被譽(yù)為我國(guó)的第二國(guó)寶［2-5］。北京動(dòng)物園獸醫(yī)院于2019年收到1例梵凈山保護(hù)區(qū)川金絲猴死亡樣本，通過(guò)組織病理學(xué)方法對(duì)其進(jìn)行了病理學(xué)診斷，現(xiàn)報(bào)道如下，以期為今后野生動(dòng)物腫瘤病理學(xué)診療提供思路和方案。

1 材料與方法

1.1 病例

川金絲猴，雌性，2005年出生于梵凈山保護(hù)站，臨床表現(xiàn)為腹部腫大，觸診疑似有腹水，聽(tīng)診心律不齊，口色蒼白，精神狀態(tài)差，沒(méi)有食欲，死前2 d未見(jiàn)排便。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 血樣化驗(yàn)室診斷 金絲猴發(fā)病后進(jìn)行血樣采集，采血前1 d進(jìn)行隔離觀察，禁食16 h，采血后進(jìn)行外周血生化常規(guī)檢測(cè)。

1.2.2 病理樣本采集 金絲猴死后立即解剖，取材后將內(nèi)臟組織立即投入10%的福爾馬林液，進(jìn)行病理組織切片前處理。

1.2.3 HE染色 石蠟切片分別經(jīng)二甲苯I、II脫蠟5 min，之后在無(wú)水乙醇/二甲苯（1∶1）混合液中浸泡5 min，依次經(jīng)無(wú)水乙醇I、無(wú)水乙醇II、95%乙醇、85%乙醇、75%乙醇、50%乙醇梯度復(fù)水，下行至去離子水中，蘇木精染色10 min，1%鹽酸酒精分色數(shù)秒，水洗返藍(lán)15 min，再依次通過(guò)50%乙醇、75%乙醇、85%乙醇、95%乙醇梯度脫水后，伊紅染色1 min，95%乙醇洗滌3次，再經(jīng)無(wú)水乙醇I、II各5 min，二甲苯I、II各透明5 min，最后用中性樹(shù)膠封片。切片放置于37℃溫箱內(nèi)過(guò)夜烘干后鏡檢。光學(xué)顯微鏡下觀察金絲猴組織病理學(xué)變化情況。

2 結(jié)果與分析

2.1 金絲猴血液生化指標(biāo)檢測(cè)結(jié)果與分析

經(jīng)化驗(yàn)室診斷發(fā)現(xiàn)金絲猴堿性磷酸酶（598 U/L）、總蛋白（8 100.00 g/L）、白蛋白（52.00 g/L）、球蛋白（43.20 g/L）指標(biāo)均顯著高于參考范圍，其余指標(biāo)基本在參考范圍上下浮動(dòng)。結(jié)合動(dòng)物臨床癥狀，該金絲猴疑似出現(xiàn)淋巴瘤與慢性肝炎。

2.2 金絲猴臨床剖檢病理觀察

金絲猴尸重11 kg，皮下較濕潤(rùn)，血凝正常。心臟橫徑較正常，心室塌陷，質(zhì)地較軟，心室內(nèi)血凝塊聚集。腎臟萎縮，色澤灰白，兩側(cè)腎大小不一。十二指腸、空腸段腸肉眼無(wú)明顯病理變化。結(jié)腸至盲腸段有大量斑塊、結(jié)節(jié)狀腫物（圖1A）。其余臟器肉眼無(wú)明顯病理變化。盲腸至結(jié)腸腫物經(jīng)固定后可見(jiàn)剖面呈深棕色，大小見(jiàn)圖1B。

圖1 川金絲猴腸道腫物

表1 川金絲猴生化指標(biāo)檢測(cè)

2.3 金絲猴腸道腫物病理變化

低倍鏡下可觀察到腸道腫物內(nèi)原有組織結(jié)構(gòu)被大量破壞，無(wú)正常結(jié)構(gòu)，大量淋巴樣細(xì)胞聚集使之呈現(xiàn)彌散樣藍(lán)染（圖2A），高倍鏡下可見(jiàn)大量淋巴樣細(xì)胞層層疊疊，細(xì)胞核呈圓形或橢圓形，藍(lán)色深染，細(xì)胞質(zhì)少。腫物內(nèi)除淋巴樣細(xì)胞外還充斥大量紅細(xì)胞（圖2B），油鏡下可見(jiàn)新生小淋巴樣細(xì)胞3～5個(gè)聚集到一起（圖2C、圖2D）。

圖2 川金絲猴腸道腫物病理學(xué)觀察

3 診斷

經(jīng)臨床特征觀察、化驗(yàn)室分析以及組織病理學(xué)診斷，金絲猴腸道腫物為淋巴瘤（Intestinal lymphoma）。

4 小結(jié)與討論

腸道淋巴瘤是一種影響腸道淋巴結(jié)的腫瘤，很少與癌、平滑肌瘤共存。其也可以由胃、肝臟、脾臟、淋巴結(jié)或淋巴管等器官的腫瘤細(xì)胞經(jīng)淋巴系統(tǒng)蔓延到腸道而引發(fā)［7］?；疾?dòng)物在臨床上常表現(xiàn)出食欲減退、嘔吐、腹瀉、貧血、精神萎頓、嗜睡、體重減輕等癥狀。此外，還會(huì)出現(xiàn)淋巴結(jié)腫大、腹部腫大、糞便帶血等癥狀。

該金絲猴病例由于腸道淋巴瘤的持續(xù)作用，最終導(dǎo)致死亡。該病例生前的臨床表現(xiàn)（腹部腫脹、食欲降低）、化驗(yàn)室診斷結(jié)果（堿性磷酸酶、總蛋白、白蛋白、球蛋白指標(biāo)的顯著升高）表明其可能患有腫瘤疾病，經(jīng)病理學(xué)診斷最終診斷為腸道淋巴瘤，除結(jié)腸外，其余組織器官未見(jiàn)淋巴瘤，表明該病例的淋巴瘤只發(fā)生于結(jié)腸，未出現(xiàn)轉(zhuǎn)移。

腫瘤是人類(lèi)的常發(fā)病，但動(dòng)物領(lǐng)域此項(xiàng)工作起步較晚。而在圈養(yǎng)野生動(dòng)物中，由于缺乏相應(yīng)的病理診斷平臺(tái)，嚴(yán)重制約了腫瘤診斷技術(shù)的完善。關(guān)于野生動(dòng)物腫瘤疾病的研究報(bào)道極為少見(jiàn)。本研究采用病理學(xué)技術(shù)，結(jié)合臨床病理變化及系統(tǒng)病理學(xué)觀察，對(duì)川金絲猴腸道腫物進(jìn)行病理學(xué)診斷，分析得出此腫物為淋巴瘤，本報(bào)道為今后野生動(dòng)物腫瘤的診斷以及治療工作提供了較為可靠的經(jīng)驗(yàn)和方案。