奴爾蘭·阿克亞孜

（新疆昭蘇縣畜牧獸醫(yī)發(fā)展中心，新疆 昭蘇 835600）

寄生蟲是一種低等真核生物，具有強(qiáng)烈的致病性［1］，通過(guò)動(dòng)物進(jìn)行傳播。寄生蟲通過(guò)附著在動(dòng)物宿主的身體內(nèi)部或者是外部汲取宿主養(yǎng)分從而滿足自身生存、發(fā)育或者繁殖［2］。在種類眾多的寄生蟲疾病中消化道寄生蟲疾病是最為常見(jiàn)且最容易感染動(dòng)物的疾病，其寄宿在動(dòng)物的腸胃中。羊消化道寄生蟲侵入到羊消化道后，會(huì)像“小偷”一樣竊取羊體內(nèi)的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)發(fā)展壯大自己，當(dāng)羊消化道內(nèi)的寄生蟲發(fā)展繁殖到一定的數(shù)量后，會(huì)嚴(yán)重影響宿主本身的生長(zhǎng)、發(fā)育和繁殖，甚者導(dǎo)致宿主貧血或因不能及時(shí)醫(yī)治而死亡［3，4］。

新疆牧區(qū)是我國(guó)五大牧區(qū)之一，該牧區(qū)有優(yōu)越的畜牧養(yǎng)殖環(huán)境，其最大的不同是其地理環(huán)境復(fù)雜，野生動(dòng)物種類和數(shù)量豐富，這就增加了家畜感染消化道寄生蟲類疾病風(fēng)險(xiǎn)。該病若不及時(shí)關(guān)注、防范和控制，將會(huì)對(duì)新疆牧區(qū)畜牧業(yè)良好的發(fā)展造成阻礙［5］。目前，昭蘇縣還有很多村在進(jìn)行“最后一公里”的脫貧攻堅(jiān)戰(zhàn)，由于該縣家畜養(yǎng)殖戶較多，畜牧業(yè)規(guī)模相對(duì)較大，因此，做好動(dòng)物防疫工作意義重大［6］。本次調(diào)查采用寄生蟲病原（糞便）常規(guī)檢測(cè)方法，制定計(jì)劃，走訪轄區(qū)內(nèi)相關(guān)的養(yǎng)殖場(chǎng)和養(yǎng)殖戶，以期厘定該區(qū)域內(nèi)羊消化道內(nèi)感染的寄生蟲的種類、感染率、受感染程度等，從而制定該區(qū)域內(nèi)可行的羊消化道寄生蟲病防治措施。

1 材料與方法

1.1 樣品采集

在2019年開(kāi)展采樣工作，隨機(jī)采取昭蘇縣某鄉(xiāng)各養(yǎng)殖區(qū)牧場(chǎng)綿羊新鮮糞便共805份，其中春季198份、夏季201份，秋季196份、冬季210份。

1.2 主要試劑

500 g袋裝食鹽、蒸餾水、75%乙醇。

1.3 主要儀器與用具

主要儀器：家畜糞便收集蟲卵計(jì)數(shù)器、冰柜、稱、生物顯微鏡等。主要用具：一次性乳膠手套、防護(hù)服、醫(yī)用口罩、冰袋、泡沫盒、顯微鏡實(shí)驗(yàn)耗材等（以上材料均由葉城縣畜牧局獸醫(yī)站檢驗(yàn)室提供）。

1.4 方法

1.4.1 樣品采集 采用直腸取糞法進(jìn)行樣品采集，在太陽(yáng)剛升起時(shí)進(jìn)入養(yǎng)殖區(qū)，通過(guò)刺激羊的肛門括約肌使其排便，取樣約10 g，放入裝有冰袋的泡沫盒帶回獸醫(yī)站，于4℃冰柜保存，等待檢驗(yàn)。

1.4.2 飽和鹽水的配制 將實(shí)驗(yàn)所需的蒸餾水和食鹽準(zhǔn)備好，用電磁爐加熱，蒸餾水沸騰后加入稱量好的食鹽，溶解后冷卻、過(guò)濾，按照實(shí)驗(yàn)要求分裝［7］。

1.4.3 分辨檢查 球蟲卵囊、線蟲及絳蟲卵可以用飽和鹽水漂浮法檢查，其原理是漂浮液和飽和鹽水比重高于蟲卵，從而可將采集的羊糞中的蟲卵分離出來(lái)，之后再對(duì)采集的蟲卵進(jìn)行檢查。操作流程：配置好檢測(cè)所需的飽和鹽水，取5 g羊糞樣品放進(jìn)燒杯，先加入鹽水淹沒(méi)羊糞，將其充分搗碎，之后增添羊糞10倍量的飽和鹽水充分?jǐn)嚢?，攪拌均勻后用銅篩把樣品過(guò)濾到小廣口瓶中，液面需稍高于管口，蓋上蓋玻片，靜置20 min，之后將蓋玻片以30°斜角覆置于載玻片之上，用生物顯微鏡進(jìn)行觀察［8］。

采用離心沉淀法鏡檢吸蟲卵，其原理是利用蟲卵比重大于水的特點(diǎn)，通過(guò)離心法使蟲卵沉積于容器底部，再對(duì)其進(jìn)行檢查。具體的操作方法如下：取5 g樣品，加入10～15 mL蒸餾水，充分?jǐn)嚢?；?0目篩過(guò)濾至15 mL離心管內(nèi)，2 000 r/min離心2 min；棄上清，再加入蒸餾水，用吸管反復(fù)吹打至充分混勻，再離心；如此重復(fù)3次，至上清變?yōu)榍辶?；棄上清，管底留?倍于上清的沉淀物，用吸管反復(fù)吹打重懸沉淀物；取1滴進(jìn)行鏡檢［9］。

1.4.4 蟲卵檢查 在顯微鏡下觀察蟲卵，按照參考文獻(xiàn)［10-12］的方法進(jìn)行蟲卵種屬鑒別。消化道寄生蟲常見(jiàn)蟲卵形態(tài)有：①毛圓線蟲卵。大小為68～100μm×34～48μm，呈長(zhǎng)卵圓形，一頭大一頭小，兩邊不對(duì)稱，卵細(xì)胞多且顏色淡。②食道口線蟲卵。大小為73～89μm×34～45μm，呈橢圓形，卵細(xì)胞一端有空隙，細(xì)胞間界限明顯。③細(xì)頸線蟲卵。大小為220～280μm×100～130μm，兩端較窄呈橢圓形。此類蟲卵個(gè)體較大，顏色較深。④捻轉(zhuǎn)血矛線蟲卵。大小為80～85μm×40～45μm，多呈橢圓形，此類蟲卵的外殼較薄，呈淡灰色。⑤球蟲卵。大小為0.5～1.6μm，呈橢圓形、卵圓形、亞球形或壇狀，顏色為淡黃色或黃紅色。⑥莫尼茨絳蟲卵。大小為50～60μm，呈三角形、方形或圓形，顏色為灰色。1.4.5 蟲卵計(jì)數(shù)法 使用麥克馬斯特氏法進(jìn)行羊消化道內(nèi)蟲卵感染強(qiáng)度檢測(cè)，具體操作步驟為：取58 mL飽和鹽水和2 g樣品均勻攪拌，之后用一次性吸管慢慢注入計(jì)數(shù)器空隙至溢出，在生物顯微鏡下觀察計(jì)數(shù)室內(nèi)蟲卵數(shù)，根據(jù)公式計(jì)算每千克糞便所包含的蟲卵數(shù)，根據(jù)蟲卵數(shù)判斷感染強(qiáng)度。

計(jì)算公式：感染強(qiáng)度（EPG）=2個(gè)計(jì)數(shù)室內(nèi)蟲卵數(shù)平均值×200；感染率=感染動(dòng)物數(shù)/檢驗(yàn)動(dòng)物總數(shù)×100%［13］。

1.5 數(shù)據(jù)分析

利用SPSS21.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 糞便檢查結(jié)果

采用鹽水漂浮法和離心沉淀法對(duì)采集的805份樣品進(jìn)行檢測(cè)。結(jié)果在樣品中檢測(cè)出線蟲卵、絳蟲卵和球蟲卵囊等寄生蟲，總感染率為41.6%（335/805），其中線蟲為26.2%（211/805）、絳蟲為11.9%（96/805）、球蟲為6.5%（52/805）；出現(xiàn)線蟲和絳蟲混合感染的樣品有18份，線蟲和球蟲混合感染的樣品有6份。

對(duì)檢測(cè)出的寄生蟲用生物顯微鏡進(jìn)行形態(tài)學(xué)鑒定，其形態(tài)見(jiàn)圖1。樣品中主要存在的寄生蟲為毛圓線蟲卵、細(xì)頸線蟲卵、捻轉(zhuǎn)血矛線蟲卵和食道口線蟲卵，樣品中的絳蟲卵大部分為莫尼茨絳蟲卵。

圖1 顯微鏡觀察到的蟲卵（×400）

2.2 EPG檢測(cè)結(jié)果

對(duì)所檢測(cè)到的陽(yáng)性糞便進(jìn)行EPG調(diào)查，結(jié)果見(jiàn)圖2。從圖2可知，糞便中線蟲蟲卵、絳蟲蟲卵和球蟲蟲卵的EPG分別為163～253個(gè)/g、54～102個(gè)/g、48～101個(gè)/g；平均EPG分別為193個(gè)/g、84個(gè)/g和79個(gè)/g。線蟲的EPG顯著高于其他2種寄生蟲（P＜0.05）。

圖2 EPG結(jié)果

2.3 不同季節(jié)羊消化道寄生蟲感染率檢測(cè)結(jié)果

由表1可見(jiàn)，在一年中，某鄉(xiāng)各養(yǎng)殖區(qū)牧場(chǎng)綿羊消化道寄生蟲的感染率冬季最高，顯著高于其他3個(gè)季節(jié)；春、夏、秋三季之間陽(yáng)性率無(wú)顯著差異。

表1 某鄉(xiāng)各養(yǎng)殖區(qū)牧場(chǎng)不同季節(jié)羊消化道寄生蟲感染情況

3 小結(jié)與討論

在養(yǎng)羊業(yè)中，造成羊死亡的原因很多，其中寄生蟲感染常被人忽視［14］。家畜感染寄生蟲后，寄生蟲會(huì)對(duì)其身體部位及組織器官造成嚴(yán)重破壞；尤其感染一些個(gè)體較大的寄生蟲時(shí)，一旦大量繁殖，將對(duì)家畜生產(chǎn)繁殖造成嚴(yán)重阻礙，從而對(duì)養(yǎng)殖業(yè)經(jīng)濟(jì)造成嚴(yán)重影響。因此，需要正確了解家畜體內(nèi)外寄生蟲生長(zhǎng)繁殖模式，對(duì)癥下藥，這對(duì)家畜養(yǎng)殖業(yè)健康發(fā)展意義深遠(yuǎn)［15］。

本試驗(yàn)通過(guò)飽和鹽水漂浮法和離心沉淀法對(duì)805份新鮮羊糞便進(jìn)行蟲卵檢查，結(jié)果發(fā)現(xiàn)羊群中有線蟲、絳蟲和球蟲等寄生蟲感染，其中線蟲感染率最高，同時(shí)發(fā)現(xiàn)混合感染情況。從EPG結(jié)果看，線蟲的感染強(qiáng)度最強(qiáng)。線蟲病是由線形動(dòng)物門線蟲綱的多種線蟲所致［16］，該寄生蟲對(duì)宿主身體健康危害相當(dāng)大，其可以鉆入宿主腸黏膜，在侵入家畜的腸道后能夠刺激腸胃，從而引發(fā)腸壁潰爛，繼而引發(fā)腸炎，腸壁潰瘍、腹膜炎等病癥。目前，該病已在世界范圍流行，嚴(yán)重影響各國(guó)畜牧業(yè)健康發(fā)展［17］。因此，養(yǎng)羊戶對(duì)羊消化道線蟲應(yīng)重點(diǎn)防治。本試驗(yàn)結(jié)果說(shuō)明昭蘇縣某鄉(xiāng)養(yǎng)殖區(qū)羊消化道寄生蟲感染非常普遍，且存在混合感染現(xiàn)象。該病多發(fā)于環(huán)境衛(wèi)生較差的牧場(chǎng)。蟲卵隨著羊糞便排出，健康羊會(huì)通過(guò)采食和飲用帶有病原體的草料和水而感染［18］。

在本次調(diào)查的基礎(chǔ)上，結(jié)合當(dāng)?shù)貧v年來(lái)羊消化道寄生蟲病流行情況，制定了有效的預(yù)防和控制措施。對(duì)于已患病的羊，制定詳細(xì)的驅(qū)蟲計(jì)劃及時(shí)治療。選擇療效好的藥物，且適當(dāng)增加用藥次數(shù)，以每年3次（隔4個(gè)月1次）為宜。本次調(diào)查結(jié)果顯示該病冬季感染率較高，因此在冬季要尤為重視。要進(jìn)一步加強(qiáng)羊群的飼養(yǎng)管理，定期打掃羊圈和消毒，可以有效降低感染率。此外，在寄生蟲繁殖活躍期要盡量減少放牧次數(shù)，使羊群多在干燥地帶進(jìn)食［19］。

腸道寄生蟲是各類動(dòng)物發(fā)病和致死的一項(xiàng)重要誘因，在家畜飼養(yǎng)和管理過(guò)程中，科學(xué)有效的防控措施能夠避免家畜感染消化道寄生蟲疾病，為提高生產(chǎn)效益保駕護(hù)航。本試驗(yàn)結(jié)果為昭蘇縣各養(yǎng)殖區(qū)今后羊群消化道寄生蟲病針對(duì)性地綜合防治和養(yǎng)羊業(yè)的健康發(fā)展提供了科學(xué)依據(jù)。