梁靜 王巖

（河南科技大學(xué)第一附屬醫(yī)院病理科，河南 洛陽 471003）

胃癌是我國常見的消化道惡性腫瘤之一，主要由胃內(nèi)壁細(xì)胞生長失控引起。早期胃癌患者通常無任何癥狀或者癥狀不明顯，故早期確診率低。由于大多數(shù)患者發(fā)現(xiàn)時已處于胃癌中晚期，因而治療難度大、預(yù)后較差，急需尋找有效的分子標(biāo)記物[1]。由于簇分化抗原 133（Cluster of differentiation 133，CD133）在促進(jìn)下消化道腫瘤細(xì)胞增殖、轉(zhuǎn)移中發(fā)揮重要作用；而人類表皮生長因子受體 2蛋白（Human epidermal growth factor receptor-2，HER2）在胃癌患者中也存在表達(dá)異常，研究發(fā)現(xiàn)這種異常表達(dá)可能與胃癌患者的病情發(fā)展以及預(yù)后有關(guān)[2]，因此本文對CD133、HER2蛋白與胃癌臨床病理特征的關(guān)系進(jìn)行探討，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

回顧性分析2018年1月至2020年1月我院腫瘤科收治的96例胃癌患者的臨床資料，其中男63例，女性 33例，年齡 35～66歲，平均年齡48.87±7.62歲。根據(jù)胃癌TNM分期：I～Ⅱ期28例；Ⅲ～Ⅳ期 68例。納入標(biāo)準(zhǔn)：所有患者均符合胃癌的相關(guān)診斷標(biāo)準(zhǔn)[3]并經(jīng)術(shù)后病理活檢確診；入院前未經(jīng)過相關(guān)治療；患者臨床資料完整且自愿簽署知情同意書。排除標(biāo)準(zhǔn)：合并其他重要器官嚴(yán)重疾病；合并其他惡性腫瘤；患有精神疾病，無法配合。

同時，收集所有患者術(shù)中切除的胃癌組織以及距胃癌組織＞5 cm的癌旁組織進(jìn)行后續(xù)試驗。

1.2 方法

1.2.1 試劑

鼠抗人 CD133單克隆抗體購自杭州華安生物科技有限公司；兔抗人HER2單克隆抗體購自上澤葉生物科技有限公司；SP系列免疫組化通用型工作液試劑盒、DAB顯色劑均購自北京欣興唐生物科技有限公司。

1.2.2 免疫組化法測定CD133、HER2

所有標(biāo)本于手術(shù)切除后立即用10%甲醛溶液固定，4.0 μm厚度連續(xù)切片后脫蠟、水化。采用鏈霉素抗生物素蛋白-過氧化物酶（Streptomycin avidin- peroxidase，S-P）免疫組化染色法對CD133、HER2進(jìn)行檢測，具體操作嚴(yán)格按照試劑盒上的說明進(jìn)行。每批切片染色均以PBS代替一抗做陰性對照，CD133、HER2用已知陽性表達(dá)的組織切片作陽性對照。一抗稀釋比例均為1：100。

根據(jù)陽性細(xì)胞百分比、染色強(qiáng)度判定不同部位組織CD133、HER2蛋白表達(dá)水平[4]。陽性細(xì)胞百分比評分：0分：無陽性細(xì)胞；1分：陽性細(xì)胞低于10%，2分：陽性細(xì)胞在11%～15%的范圍內(nèi)，3分：陽性細(xì)胞超過50%。染色強(qiáng)度判定：0分：未見染色，1分：淡黃色，弱陽性；2分：棕黃色，中等陽性；3分：棕褐色，高陽性。總積分：上述2項評分的乘積。低表達(dá)水平為3分及以下，高表達(dá)水平為4分及以上。

1.2.3 CD133、HER2蛋白與臨床病理特征分析

根據(jù)胃癌組織中CD133、HER2蛋白不同表達(dá)水平，分析二者與胃癌臨床病理特征的關(guān)系。

1.3 統(tǒng)計學(xué)處理

所有數(shù)據(jù)采用SPSS18.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計分析，計量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±SD）表示，采用t檢驗；CD133及HER2高表達(dá)、低表達(dá)情況采用例或率（n（%））表示，行χ2檢驗；以P＜0.05表示差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 CD133、HER2蛋白在胃癌組織和癌旁組織的表達(dá)水平比較

胃癌組織中CD133和HER2高表達(dá)率均明顯高于癌旁組織 (P＜0.05)，見表1。

表1 CD133、HER2蛋白在胃癌組織和癌旁組織的表達(dá)水平比較（例（%），n=96）

2.2 胃癌組織CD133、HER2蛋白水平與患者臨床病理特征的差異

胃癌組織CD133高表達(dá)與腫瘤直徑、分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移以及癌癥TNM分期有關(guān) (P＜0.05)；HER2高表達(dá)與腫瘤直徑、分化程度以及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān) (P＜0.05)，見表2。

表2 胃癌組織CD133、HER2蛋白在水平與患者臨床病理特征的差異（n=96）

3 討論

隨著現(xiàn)代醫(yī)療技術(shù)的發(fā)展，胃癌的治療水平逐漸提升，但仍有大部分患者死于復(fù)發(fā)與轉(zhuǎn)移[5]。因此，早期診斷和尋找合適的生物標(biāo)志物，對患者預(yù)后具有重要意義。CD133是分子量為120 kDa的五次跨膜糖蛋白，是目前廣泛應(yīng)用的腫瘤干細(xì)胞表面標(biāo)記物，研究發(fā)現(xiàn)結(jié)直腸癌患者CD133高表達(dá)率是低生存率的獨立預(yù)后因素[6]。本研究通過比較胃癌組織與癌旁組織中 CD133蛋白水平發(fā)現(xiàn)，胃癌組織中的高表達(dá)率明顯高于癌旁組織；進(jìn)一步分析發(fā)現(xiàn)，CD13的高表達(dá)與腫瘤直徑、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、TNM分期及分化程度有關(guān)，即中高分化，伴隨淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移，高TNM分期以及腫瘤直徑大的患者CD133的表達(dá)水平高。

HER2屬于表皮生長因子受體，也是腫瘤的重要生物標(biāo)記物之一，在肺癌、結(jié)腸癌、乳腺癌、胃癌等多種癌組織中高表達(dá)。然而既往研究發(fā)現(xiàn)，由于樣本量、檢測方法及評分標(biāo)準(zhǔn)的差異，HER2高表達(dá)率具有顯著的差異性[7-8]。本研究發(fā)現(xiàn)，胃癌組織HER2高表達(dá)率為25.00%，明顯高于癌旁組織，且與腫瘤直徑、分化程度以及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相關(guān)。

綜上所述，胃癌組織中CD133、HER2高表達(dá)可能與胃癌組織增殖、分化及轉(zhuǎn)移有關(guān)；可作為評估患者病情嚴(yán)重程度的指標(biāo)。