袁曉菲，夏兆芳，孫 慶

海螵蛸始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》，別名烏賊魚骨。主要來源于烏賊科海洋動物無針烏賊 ( sepiella maindroni de sochebrune) 或金烏賊( sepia esculenta hoyle) 的干燥內(nèi)殼?！侗静菥V目》有載：“背骨名海螵蛸，形似樗蒲子而長，兩頭尖，色白，脆如通草，重重有紋，以指甲可刮為末”，“研末外敷，治療小兒疳瘡、痘疹臭爛、水火燙傷及外傷出血。燒存性，和雞蛋黃一同研成末外涂，治療小兒鵝口瘡；同蒲黃末外涂治療舌體腫脹及出血；同槐花末一同吹入鼻，止鼻血”；《世醫(yī)得效方》：“治鼻血不止:烏賊魚骨（海螵蛸）、槐花等分。半生半炒，為末吹鼻”。其性咸、澀、溫，歸脾、腎經(jīng)，有制酸止痛、收斂止血、澀精止帶、收濕斂瘡等功效。內(nèi)服治療吐血衄血、崩漏便血、遺精滑精、赤白帶下、胃痛吞酸； 外治創(chuàng)傷出血、濕疹濕瘡、潰瘍難斂等[1]。海螵蛸屬于收澀藥，兼具收斂止血藥的特性，是治療皮膚創(chuàng)傷的常用中藥。現(xiàn)代藥理學(xué)研究表明，海螵蛸含有碳酸鈣、蛋白多肽、海螵蛸多糖、甲殼素/殼聚糖等多種活性成分，具有止血凝血、抗炎抗菌、表皮修復(fù)等多種藥理作用?，F(xiàn)就海螵蛸在創(chuàng)面修復(fù)中的作用機制進行綜述。

1 海螵蛸對創(chuàng)面修復(fù)的直接作用

1.1 對生長因子的作用

1.1.1 對表皮細胞生長因子（epidermal growth factor，EGF）、血小板衍生生長因子（platelet derived growth factor，PDGF）和腫瘤壞死因子（tumor necrosis factor-α，TNF-α）的影響 海螵蛸中的甲殼素（chitin）可經(jīng)不同程度的脫乙?；磻?yīng)產(chǎn)生天然陽離子高分子氨基酸多糖——殼聚糖（chitosan, CS）。廖紅等[2]對大鼠Ⅲ度燒傷創(chuàng)面應(yīng)用不同濃度的殼聚糖溶液，檢測到4%殼聚糖組能明顯提高燒傷后創(chuàng)面EGF、EGFmRNA的表達以及PDGF的活性，發(fā)現(xiàn)殼聚糖有促進EGF的表達和PDGF活性的作用。EGF能夠直接刺激表皮生長和角化，能通過自分泌、旁分泌等途徑作用于細胞，激活MAPK、AKT等信號通路，促進多種組織來源的上皮細胞的分裂和增殖，從而促進肉芽組織形成和加快上皮細胞再生[3]。而PDGF是重要的促有絲分裂原，既能促進成纖維細胞、成骨細胞、神經(jīng)膠質(zhì)細胞、血管內(nèi)皮細胞等間葉來源的細胞分化增殖，又能誘導(dǎo)單核巨噬細胞、成纖維細胞、中性粒細胞、和血管平滑肌細胞等聚集到損傷區(qū)域并進行局部增殖和高濃度表達。張?zhí)m芳等[4]研究發(fā)現(xiàn)，對燒傷后大面積瘢痕患者應(yīng)用復(fù)合皮移植技術(shù)治療后，血清中EGF水平可明顯升高，TNF-α水平降低，創(chuàng)面的愈合進展良好。

TNF-α是體內(nèi)重要的炎癥因子，由單核-巨噬細胞分泌，也是潰瘍炎癥程度的標(biāo)志細胞因子。傷口處局部炎癥反應(yīng)有助于創(chuàng)面?zhèn)谟?，但過度的炎癥反應(yīng)會導(dǎo)致愈合遲緩性皮膚傷口，而高濃度 TNF-α對皮膚成纖維細胞增殖遷移以及膠原蛋白表達有抑制作用[5]。羅江[6]研究發(fā)現(xiàn)用海螵蛸多糖CPS-1外涂治療復(fù)發(fā)性口腔潰瘍患者時，能降低TNF-α表達，減少白細胞介素-6產(chǎn)生，減輕炎癥反應(yīng)，縮短用藥時間及疼痛持續(xù)時長、減輕疼痛程度、加速潰瘍的愈合以及創(chuàng)面的修復(fù)。魏江洲等[7]采用葡聚糖硫酸鈉誘導(dǎo)法建立小鼠潰瘍性結(jié)腸炎（ulcerative colitis,UC）簡模型，注射濃度不同的海螵蛸多糖CPS-1溶液，觀察臨床癥狀、體質(zhì)量改變、局部腸黏膜情況等指標(biāo)，發(fā)現(xiàn)海螵蛸多糖CPS-1 能抑制UC小鼠血液中TNF-α的表達，提高EGF和PDGF的表達水平，利于炎癥緩解，加速潰瘍組織愈合修復(fù)。

1.1.2 對β-轉(zhuǎn)化生長因子（transforming growth factorβ,TGF-β）、血管內(nèi)皮細胞生長因子（vascular endothelial growth factor ,VEGF）的影響 俞立新等[8]對脛骨骨折小鼠采用海螵蛸配伍雞內(nèi)金提取液治療，結(jié)果發(fā)現(xiàn)治療組中小鼠血清的VEGF、TGF-β1水平均明顯高于對照組（P<0.05），且愈合效果顯著。TGF-β 是具有多種功能的蛋白多肽，能促進細胞的增殖分化、細胞外基質(zhì)的合成、血管的形成、膠原的沉積以及調(diào)節(jié)機體免疫，在創(chuàng)面愈合過程中起重要調(diào)控作用，影響創(chuàng)面愈合的速度和質(zhì)量[9-10]。VEGF是一種能特異性地促進血管內(nèi)皮細胞生長的糖蛋白，使新生血管能及時恢復(fù)養(yǎng)料的運輸及廢物的代謝，從而利于創(chuàng)面的修復(fù)。骨形態(tài)發(fā)生蛋白（bone morphogenetic protein, BMP）為骨折愈合的啟動因子，能促進成骨細胞分化增殖并刺激膠原合成。董?；鄣萚11]研究發(fā)現(xiàn)，海螵蛸能促進Ⅰ、Ⅲ型前膠原m RNA、VEGF mRNA 以及BMP-2 mRNA 在骨折早期時的表達，抑制后期的Ⅱ、Ⅲ型前膠原mRNA 產(chǎn)生，但VEGF mRNA、TGF-β1 mRNA仍維持較高水平，加速血管的生成、膠原的沉積，從而促進創(chuàng)面的愈合。另外，TGF-β1在BMP誘導(dǎo)成骨過程中有促進骨膠原生成的作用，TGF-β1能促進成骨細胞生成，從而激活Ⅰ型膠原的分泌，同時抑制Ⅱ型膠原縮短軟骨期，提前損傷修復(fù)[12]。

2 海螵蛸對創(chuàng)面修復(fù)的間接作用

創(chuàng)面修復(fù)包括止血、炎癥反應(yīng)、組織的增殖與重構(gòu)四個過程。止血與炎癥反應(yīng)是機體進行止血、清除壞死組織的時期。其順利進行能夠促進創(chuàng)面血管新生，改善創(chuàng)面氧氣與養(yǎng)分的供給情況，進而利于細胞的增殖分化以及創(chuàng)面的愈合。

2.1 止血與凝血作用 創(chuàng)面損傷后，血管中活性物質(zhì)及血液成分滲出并浸入周圍組織內(nèi)，進而激活凝血系統(tǒng)產(chǎn)生級聯(lián)反應(yīng)，導(dǎo)致凝血發(fā)生，即創(chuàng)面止血階段。止血與凝血機制的正常進行，取決于血管壁、血液成分、纖溶系統(tǒng)、血流等。海螵蛸中的碳酸鈣、甲殼素、殼聚糖成分均有止血的功效[13]。海螵蛸的主要化學(xué)成分為碳酸鈣，而鈣離子一方面作為凝血過程中的凝血因子Ⅳ，能夠激活其他凝血因子，影響血液有效成分，將其覆蓋于創(chuàng)面出血的部位，能激活凝血酶原，促使纖維蛋白的加速析出，發(fā)揮止血作用；另一方面鈣離子能激活并加速血小板聚集，進而凝血[14]。有資料顯示[15]，檸檬酸鹽可減少血漿中的鈣離子，防止血液凝固，是臨床上廣泛應(yīng)用的抗凝血成分，間接說明鈣離子的止血作用。陳全等[16]對肝臟損傷的大鼠應(yīng)用甲殼素溫敏水凝膠止血，并設(shè)立對照組和空白組，結(jié)果發(fā)現(xiàn)使用甲殼素溫敏水凝膠大鼠肝臟止血迅速，炎癥反應(yīng)較輕。殼聚糖能與帶陰離子的紅細胞吸附聚集一起，促進血液凝固，又具有較強的促血小板粘附聚集以及通過活化補體系統(tǒng)促凝止血的作用[17]。譚云友等[18]發(fā)現(xiàn)在宮頸活檢術(shù)后創(chuàng)面應(yīng)用殼聚糖宮頸貼，可安全有效地縮短術(shù)后創(chuàng)面流血及陰道排液持續(xù)時間。Logun等[19]實驗研究顯示，不使用其他止血藥物時，殼聚糖能縮短接受部分肝臟切除術(shù)后大鼠的止血時間，并且處理后的親水性殼聚糖止血效果會更加顯著。

2.2 抗菌消炎作用 細菌的大量增殖不僅可以導(dǎo)致創(chuàng)面的污染，甚至?xí)咕植考毎M織壞死，延長并阻礙創(chuàng)面的修復(fù)過程。帶陽離子的殼聚糖在電荷引力的作用下能覆蓋于陰離子細菌表面成膜，阻礙傳輸養(yǎng)分與代謝的通道，從而抑制細菌的生長繁殖。Davydova等[20]發(fā)現(xiàn)，高分子殼聚糖在體外能抑制抗炎細胞因子、TNF-α的合成；體內(nèi)能提高小鼠血清中抗炎細胞因子IL-10的合成。聶帥等[21]研究發(fā)現(xiàn)慢性牙齦炎患者在使用含有殼聚糖的牙膏四周后，牙齦溝出血情況顯著改善，牙齦炎癥有效降低。Harkins等[22]研究表明將殼聚糖-纖維復(fù)合材料作為傷口敷料，能夠抑制切口革蘭氏陽性和陰性微生物的增長。王茜等[23]發(fā)現(xiàn)對潰瘍性結(jié)腸炎修復(fù)過程中的小鼠聯(lián)合應(yīng)用鴨油甘油二酯與殼聚糖治療，腸道炎癥癥狀得到有效緩解。

2.3 減輕脂質(zhì)過氧化作用 在創(chuàng)面的修復(fù)過程中，細胞產(chǎn)生適量活性氧有助于抗炎殺菌，但當(dāng)氧化應(yīng)激打破促氧化劑和抗氧化劑的平衡時，過多的氧自由基產(chǎn)生的活性氧反而會損害細胞和組織，因此，抗氧化劑的合理應(yīng)用可以加速創(chuàng)面的愈合。林芳花等[24]通過測定氧化時間、超氧陰離子清除率和總還原力，對比海螵蛸等8種常用海洋中藥體外抗氧化活性，發(fā)現(xiàn)海螵蛸等6種中藥抗氧化活性較高。郭一峰等[25]通過動物實驗發(fā)現(xiàn)，用不同劑量的海螵蛸多糖進行預(yù)處理，5天后,小鼠胃黏膜的超氧化物歧化酶（superoxide dismutase, SOD）活性均有明顯提高且超過正常組，能有效清除氧自由基、減輕脂質(zhì)過氧化反應(yīng)及黏膜細胞的損傷，參與并調(diào)節(jié)黏膜炎癥反應(yīng)。另外殼聚糖及其通過羧甲基化反應(yīng)、?；磻?yīng)、季銨化反應(yīng)、接枝共聚反應(yīng)改性得到的衍生物均有清除自由基的作用，且改性后衍生物的抗氧化活性都高于殼聚糖本身[26]。

2.4 免疫調(diào)節(jié)作用 機體免疫系統(tǒng)與創(chuàng)面愈合密切相關(guān)，中性粒細胞、巨噬細胞和淋巴細胞等免疫細胞具有抗感染，清除壞死組織、釋放炎性因子的作用，促進創(chuàng)面的愈合。劉睿等[27]從海螵蛸中共鑒定出16個蛋白質(zhì)類成分，168個多肽類成分，328個多肽類成分。其中蛋白質(zhì)類成分主要為血藍蛋白、烯醇化酶、肌球蛋白、肌動蛋白、鈣調(diào)蛋白等。血藍蛋白是軟體動物和節(jié)肢動物的含銅呼吸蛋白，具有抗病毒、抑菌、凝血以及抗腫瘤等多種免疫活性，可通過多種路徑調(diào)節(jié)免疫防御系統(tǒng)，是蝦蟹等水產(chǎn)養(yǎng)殖動物中的一種重要的多功能免疫因子[28]。陶夢圓等[29]發(fā)現(xiàn)將源于凡納濱對蝦血藍蛋白的肽段B1刺激對蝦24h后，五個免疫相關(guān)基因的表達水平顯著性上升，并對相應(yīng)的免疫蛋白表達調(diào)控一致。郭睿等[30]發(fā)現(xiàn)鑰孔戚血藍蛋白免疫原性較高，作為抗原可以誘導(dǎo)金魚血清中特異性抗體的產(chǎn)生，具有增強免疫功能的作用。

綜上，海螵蛸作為外科創(chuàng)面修復(fù)的常用止血斂創(chuàng)藥，能調(diào)節(jié)多種生長因子、促進膠原合成,并具有止血凝血、抗炎抗菌、增強免疫功能、抗脂質(zhì)過氧化的作用。目前臨床上對外用海螵蛸治療創(chuàng)面修復(fù)病例研究較少，大多運用復(fù)方內(nèi)服結(jié)合治療內(nèi)科疾病，并且大多數(shù)研究主要集中在觀察海螵蛸的臨床止血作用，因此還需要對海螵蛸在創(chuàng)面修復(fù)中的多種作用成分進行進一步的深入分離和研究。為臨床合理有效地在修復(fù)創(chuàng)面中應(yīng)用海螵蛸提供更多參考依據(jù)。