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        膠體金免疫層析技術(shù)在食品快速檢測中的應(yīng)用

        2022-01-01 05:25:45何婷婷齊冬琴
        現(xiàn)代食品 2022年21期
        關(guān)鍵詞:倫特羅膠體金層析

        ◎ 宋 姣,何婷婷 ,齊冬琴

        (1.新正檢驗檢測有限公司,新疆 烏魯木齊 830000;2.烏魯木齊海關(guān)技術(shù)中心,新疆 烏魯木齊 830063)

        隨著時代的發(fā)展,食品安全已經(jīng)成為社會各界高度重視的問題。就目前食品安全現(xiàn)狀來看,世界各國均存在不同程度的食品安全問題,造成嚴重的經(jīng)濟損失。為提高食品安全性,保障人們的身體健康,各種食品安全檢測技術(shù)被廣泛應(yīng)用于食品檢測中。通過快速且便捷的食品安全檢測技術(shù),人們能在最短時間內(nèi)實現(xiàn)對食品的檢測,減少食品安全事故的發(fā)生。免疫層析技術(shù)屬于獨特的免疫分析方法,最早出現(xiàn)于20世紀80年代初。膠體金是氯金酸在檸檬酸三鈉及白磷共同作用下聚合成金顆粒,受靜電作用形成的穩(wěn)定膠體溶液。膠體金免疫層析方法的操作簡單,有較強的靈敏性。

        1 膠體金免疫層析技術(shù)的原理及特征

        1.1 膠體金免疫層析技術(shù)原理

        隨著科學(xué)技術(shù)的發(fā)展,多種檢測技術(shù)被應(yīng)用于食品檢測中。其中,膠體金免疫層析是一種新穎的技術(shù)手段。膠體金在學(xué)術(shù)領(lǐng)域中,也稱之為氯金酸水溶液。是將膠體金與檸檬酸三鈉、白磷相結(jié)合,基于還原和聚合反應(yīng),形成大小合適的顆粒。在靜電作用下,顆粒性質(zhì)會發(fā)生改變,形成電子密度高、穩(wěn)定性比較好的膠體溶液[1]。顆粒聚集的密度若超過規(guī)定閾值上限,表面會形成直徑較大的紅色斑點。檢測人員通過肉眼即可觀察到紅色斑點的數(shù)量,從而得出相應(yīng)的檢測結(jié)論。

        1.2 膠體金免疫層析技術(shù)特征

        通過對膠體金免疫層析的分析,發(fā)現(xiàn)該技術(shù)具有鮮明的特征。①檢測范圍廣泛[2]。該技術(shù)作為新穎技術(shù),能夠檢測食品中的農(nóng)藥、真菌霉素及微生物情況,對各種動物流感性疾病可進行快速診斷,檢測范圍廣泛。②操作簡單快捷。膠體金免疫層析的操作流程簡化,并不需要使用特殊或是大型設(shè)備,只需要定量分析被檢測食品的樣品,綜合處理數(shù)據(jù)資料,便可獲取藥物檢測的結(jié)果。③檢測靈敏度高。在應(yīng)用膠體金免疫層析時,多以單抗體克隆美酶原抗體方式,對酶實施抗原標記。通過對酶抗原決定簇的作用,可提高靈敏度。④攜帶方便。膠體金免疫層析檢測時,以試紙為主。試紙的化學(xué)穩(wěn)定性良好,檢測卡的重量較小,方便攜帶。

        2 食品快速檢測中膠體金免疫層析技術(shù)的應(yīng)用

        2.1 檢測食品農(nóng)藥殘留

        隨著人們生活質(zhì)量的改善,食品類型日益多樣[3]。部分生產(chǎn)養(yǎng)殖者為獲取更多效益,未能合理控制用藥量,導(dǎo)致不少深加工食品中也存在農(nóng)藥或獸藥殘留,威脅消費者的身體健康。膠體金免疫層析技術(shù)可應(yīng)用于食品農(nóng)藥殘留檢測中,該方法操作簡單快捷。在檢測牛奶中的氟喹諾酮類藥物殘留時,應(yīng)用膠體金免疫層析技術(shù)檢測時間短、效率高。膠體金免疫層析技術(shù)與三聚氰胺藥物無交叉反應(yīng),檢測準確性較高。在溫度為4 ℃的環(huán)境中,測試紙的保存期限為1年。膠體金免疫層析預(yù)處理內(nèi)容簡單方便,特異性和靈敏性均較強?;前奉愃幬镏饕糜谥委焺游锔腥?,該藥物會殘留在動物體內(nèi),提高細菌耐藥性。消費者若長期食用該藥物殘留的動物食品,可能會出現(xiàn)白細胞減少的癥狀,或引發(fā)皮炎疾病。以牛初乳為例,采用膠體金免疫層析技術(shù)檢測牛初乳時,可將IgG 作為檢測的依據(jù)。通過檢測結(jié)果中的IgG 含量,對牛初乳中生物活性物質(zhì)的含量加以評估。通常來說,IgG 與生物活性物質(zhì)的含量呈正相關(guān)[4]。檢測時,檢測人員可將IgG作為競爭抗原,利用膠體金對IgG 進行標記,于紙條捆扎墊完成涂層,同時固化自制的免疫抗牛IgG 抗體,通過比較得到牛初乳的IgG 水平。

        2.2 檢測非食品添加成分

        在食品生產(chǎn)加工中,不少食品生產(chǎn)商家為了牟取暴利,并未遵守國家食品衛(wèi)生安全法律規(guī)定,將各種非食品添加成分添加到食品中,對消費者的身體健康和生命安全造成較大威脅。對于非食品添加成分如羅丹明的檢測,一般可采用高效液相色譜法[5-6]。高效液相色譜法檢測精準度較高,但檢測范圍相對狹窄,設(shè)備比較昂貴,且操作流程相對復(fù)雜。在此種情況下,應(yīng)用膠體金免疫層析技術(shù)可有效解決上述問題。①在檢測乳制品中的三聚氰胺過程中,可主要采用的是競爭抑制免疫層析原理。具體來說,是將帶有膠體金標記的檢測試劑融入含有三聚氰胺的樣品溶液中,使三聚氰胺樣品溶液與特異性抗體結(jié)合,實現(xiàn)對抗體、試紙條檢測線上抗原結(jié)合的抑制,致使檢測線顏色發(fā)生變化。通過比較質(zhì)控線的顏色深淺程度,對樣品中的三聚氰胺含量加以判斷,明確乳制品中含有的三聚氰胺含量是否與國家標準相符,以此降低乳制品中的非食品添加成分的添加分風(fēng)險。一般來說,在常溫的狀態(tài)下,生鮮奶容易發(fā)生酸敗,因而最好在12 h 內(nèi)完成檢測。對于保存到冰箱中的生鮮奶,可在48 h 內(nèi)完成檢測。②對食物中的克倫特羅進行檢測時,可采用克倫特羅快速檢測試劑卡。在檢測時,可采用勻漿和離心的方式處理樣品,在樣品孔中滴入上清液,促使膠體金標記抗體與克倫特羅相結(jié)合,將其抗原結(jié)合位點封閉,避免金標抗體與克倫特羅蛋白偶聯(lián)物結(jié)合。若樣品中的克倫特羅含量超出檢測的限定值時,檢測線無紅色條帶,結(jié)果提示為陽性。若含量未超出檢測的限定值,檢測線有紅色條帶,結(jié)果提示為陰性。③在對動物組織中的沙丁胺醇檢測時,其檢測原理與克倫特羅的檢測原理基本相同。只不過沙丁胺醇含量超出檢測的限定值,則檢測線不顯色,結(jié)果提示為陽性,反之則顯色,提示為陰性。綜上所述,通過定性檢測,膠體金免疫層析技術(shù)可判別食品中是否含有非添加劑成分。

        2.3 檢測食品霉菌毒素

        膠體金免疫層析技術(shù)還能被應(yīng)用于食品霉菌毒素檢測中。霉菌會產(chǎn)生霉菌毒素,危害動物和人體健康[7]。霉菌毒素的毒性較強,且污染范圍相對廣泛。采用膠體金免疫層析對食品中的霉菌毒素進行檢測,其檢測準確率與高效液相色譜法的檢測結(jié)果一致率較高。由此可以看出,膠體金免疫層析可有效應(yīng)用到食品霉菌毒素檢測中。在檢測豆腐乳、黃豆醬等食品中的黃曲霉素時,發(fā)現(xiàn)鑒定結(jié)果準確性較高[8]。為了有效實現(xiàn)對不同物質(zhì)中黃曲霉素的檢測,膠體金免疫層析技術(shù)下,毒素的檢出限是10 ng·mL-1,檢測時間在15 min左右。若在單克隆抗體中應(yīng)用銀顯影液增強標記,能夠使限值降低至1.25 ng·mL-1。從實驗結(jié)果來看,膠體金免疫層析的交叉反應(yīng)率偏低。

        2.4 檢測食品致病菌

        食品中常見的致病菌有沙門氏菌、大腸桿菌和布魯氏菌。對此類致病菌進行檢查時,通常以生化鑒定和分離為主[9]。但是,生化鑒定與分離的操作流程復(fù)雜,特異性和靈敏性也相對偏低。氣相色譜法、高效液相色譜法在食品致病菌檢測中的效果較好,但是檢測設(shè)備成本較高,檢測速度較慢。而膠體金免疫層析技術(shù)應(yīng)用于食品致病菌檢測,則能夠有效避免上述問題。膠體金免疫層析技術(shù)可及時對金黃色葡萄球菌進行檢測,檢測的靈敏度相對較高,可將其應(yīng)用于食品致病菌檢測中。

        2.5 檢測食品中的違禁藥品

        嗎啡、可卡因等均是常見的違禁藥品,屬于小分子物質(zhì),嚴禁添加到食品中[10]。但在食品生產(chǎn)加工過程中,存在部分不良商家將違禁藥品添加其中,威脅消費者的生命安全。調(diào)查發(fā)現(xiàn),部分餐飲店為了提高自身營業(yè)額,吸引消費者,通常會在出售的食品中添加使人上癮的罌粟殼等,威脅消費者的身體健康。例如,不良商家會將嗎啡或可卡因等違禁藥品添加到麻辣燙、米線中,使消費者上癮,提升購買次數(shù)。因而在檢測食品中的違禁藥品時,可應(yīng)用膠體金免疫層分析法,判斷出違禁藥品在食品中的添加量。具體檢測時,可利用檸檬酸三鈉制備膠體金,確定磺胺甲嗪含量。若檢測結(jié)果超過正常含量,提示食品中有嗎啡可卡因等違禁藥品,應(yīng)要求商家停止售賣,責(zé)令其整改。從整體角度來看,膠體金免疫層析技術(shù)的檢測準確性較高。

        3 結(jié)語

        在食品安全快速檢測中,應(yīng)用膠體金免疫層析技術(shù)可取得顯著效果。膠體金免疫層析技術(shù)操作快捷,結(jié)果顯示比較直觀,且不會產(chǎn)生污染,適用于大批量的食品檢測。但就我國膠體金免疫層析的應(yīng)用現(xiàn)狀來看,其尚處于初級階段,有待未來的進一步發(fā)展。

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