徐曉玲,殷明剛,劉智勇(.四川省自貢市第三人民醫(yī)院,四川 自貢 64020;2.四川省自貢市第一人民醫(yī)院,四川 自貢 64000;.四川省攀枝花市中心醫(yī)院,四川 攀枝花 67067)
新生兒溶血病(HDN)主要是母嬰間血型不合所致同族血型免疫反應(yīng),胎兒遺傳母體缺少的紅細胞血型抗原,抗原經(jīng)胎盤侵入母體,刺激母體出現(xiàn)免疫抗體,抗體經(jīng)胎盤絨毛進入胎兒血循環(huán),可導(dǎo)致出現(xiàn)免疫應(yīng)答反應(yīng),對紅細胞造成破壞,引發(fā)溶血病[1-2]。ABO-HDN是一種常見HDN類型,通常母親血型為O型,患兒血型為A或B型[3-4]。輸血為臨床常用ABO-HDN治療方法,為防止輸血時血型不恰當導(dǎo)致溶血反應(yīng)加重,需在輸血前加強交叉配血檢測[5]。目前,臨床常用交叉配血方法包括MPT、MGT,但臨床就其在ABO-HDN患兒輸血前交叉配血中作用研究仍較少。本研究選擇156例ABO-HDN患兒,重點分析輸血前采用MPT、MGT進行交叉配血的效果,報道如下。
1.1 一般資料 隨機抽樣法選取2015年1月-2019年6月本院156例ABO-HDN患兒。納入標準:①符合《新編兒科疾病臨床診療學(xué)》[6]中ABO-HDN診斷標準,經(jīng)溶血三項[改良直接抗人球蛋白試驗(DAT)、游離抗體試驗、抗體釋放試驗]檢查確診;②血清間接膽紅素水平異常升高;③Rh D血型陽性;④家屬知情同意。排除標準:①孕婦合并嚴重肝腎功能不全;②自身免疫性溶血性疾病或其他原因所致各種溶血??;③家屬不愿參與本研究。本組患兒中,男90例,女66例;日齡1-5d,平均(2.69±0.79)d;體質(zhì)量2.5-3.7kg,平均(3.16±0.37)kg。
1.2 方法 取患兒血樣,2000r/min離心,持續(xù)10min,分離血清、紅細胞。紅細胞以0.9%氯化鈉注射液洗滌,配制3%細胞懸液。取1mL紅細胞懸液,加入等體積0.9%氯化鈉注射液,水浴7min,56℃下,2000r/min離心,持續(xù)3min,收集放散液。分別采用MPT、MGT進行主側(cè)交叉配血。MPT:取試管1只,加入血清2滴或紅細胞放散液2滴,配型紅細胞懸液1滴。以0.7mL低離子介質(zhì)混勻,加入2滴凝聚胺溶液。專用離心機離心,持續(xù)10s,棄上清液,試管輕輕搖動,紅細胞凝集后,加入2滴重懸液,混勻,觀察結(jié)果。MGT:收集血樣,準備微柱凝膠試劑卡,分別將血樣置入凝膠試管內(nèi),專用離心機離心,900r/min,持續(xù)2min,1500r/min,持續(xù)3min,共5min。取出,觀察結(jié)果。
1.3 觀察指標 ①分析MPT、MGT進行交叉配血與溶血三項試驗結(jié)果,計算不合格率;②分析直抗類型與血清、放散液交叉配血結(jié)果,計算MPT、MGT檢測不合格率;③采用Kappa一致性檢驗評估血清及放散液中MPT、MGT配血結(jié)果一致性。
1.4 統(tǒng)計學(xué)分析 以SPSS20.0軟件分析。計數(shù)資料以“n,%”表示,以χ2檢驗。計量資料以(±s)表示。P<0.05表示差異有統(tǒng)計學(xué)意義。
2.1 血清、放散液交叉配血與溶血三項試驗結(jié)果 本組采用MPT、MGT進行主側(cè)游離血清及紅細胞放散液交叉配血次數(shù)為480次。MGT檢測不合格率為70.83%(340/480),高于MPT的11.25%(54/480),差異有統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=352.119,P=0.000)。見表1。
表1 血清交叉配血與溶血三項試驗結(jié)果對比(n)
2.2 直抗類型與血清交叉配血結(jié)果 直抗陽性患兒MGT檢測不合格率為59.82%(134/224),高于MPT的19.20%(43/224),差異有統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=77.342,P=0.000);直抗陰性患兒M G T檢測不合格率為4 6.0 9%(1 1 8/2 5 6),高于M P T的3.91%(10/256),差異有統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=121.500,P=0.000)。見表2。
表2 直抗類型與血清交叉配血結(jié)果分析(n)
2.3 直抗類型與放散液交叉配血結(jié)果 直抗陽性患兒MGT檢測不合格率為48.21%(108/224),高于MPT的17.86%(40/224),差異有統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=46.656,P=0.000);直抗陰性患兒MGT檢測不合格率為35.94%(92/256),高于MPT的2.34%(6/256),差異有統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=93.334,P=0.000)。見表3。
表3 直抗類型與放散液交叉配血結(jié)果分析(n)
2.4 血清MPT、MGT配血結(jié)果 血清MPT檢測陽性者MGT檢測結(jié)果均為陽性,Kappa值為0.225,P<0.05,兩種技術(shù)配血結(jié)果一致性較差。見表4。
表4 血清MPT、MGT配血結(jié)果分析(n)
2.5 放散液MPT、MGT配血結(jié)果 放散液MPT檢測陽性者MGT檢測結(jié)果均為陽性,Kappa值為0.303,P<0.05,兩種技術(shù)配血結(jié)果一致性較差。見表5。
表5 放散液MPT、MGT配血結(jié)果分析(n)
ABO-HDN在臨床上較為常見,病情復(fù)雜,且危險因素較多,包括孕婦妊娠次數(shù)、妊娠年齡、血型抗體效價等[7-10]。ABO-HDN可導(dǎo)致出現(xiàn)貧血、黃疸等癥狀,部分患兒還可繼發(fā)膽紅素腦病,危害性較大,需加強早期診治[11-13]。此類患兒體內(nèi)存在母源溶血性免疫球蛋白抗體,部分與紅細胞結(jié)合,故臨床多采用溶血三項(DAT、游離抗體試驗、抗體釋放試驗)診斷[14-15]。輸血為ABO-HDN常用治療方法,但輸血時血型不適,可影響輸血效果,導(dǎo)致出現(xiàn)較多嚴重并發(fā)癥,不利于康復(fù),故需在輸血前加強交叉配血[16-17]。既往臨床多采用酶法、鹽水法等傳統(tǒng)交叉配血方法,但這些方法也存在較大局限性,影響檢驗準確性。近年來,隨著醫(yī)學(xué)技術(shù)快速發(fā)展,一些新型交叉配血檢驗方法在臨床上得到應(yīng)用,如MPT、MGT等。其中,MPT具有操作簡單、方便快捷、檢測迅速等特點,效果確切,但該方法應(yīng)用時也存在一定不足之處,如抗體濃度偏低時易出現(xiàn)假陽性,影響檢驗準確性、有效性。
而MGT除操作簡單、方便快捷等特性外,還具有所需標本少、特異性高、敏感度高等優(yōu)勢,在臨床交叉配血中發(fā)揮越來越重要作用[18-19]。具體來說,MGT原理為將符合條件的稀釋液配制為凝膠,實施微管柱灌注,以專用離心機離心,通過微柱內(nèi)凝膠顆粒的分子篩,對凝集的紅細胞進行截留,獲得凝集反應(yīng)結(jié)果[20-21]。而且,MGT具有較好重復(fù)性,檢測結(jié)果較穩(wěn)定,可直接觀察,無需顯微鏡,對儀器設(shè)備要求較低,可在基層醫(yī)院開展。但MGT應(yīng)用也存在一定不足之處,如操作耗時較長、較難準確識別紅細胞的不完全抗體等[22-24]。本研究重點分析了ABO-HDN患兒輸血前MGT進行交叉配血檢驗的效果,并對比MPT。調(diào)查發(fā)現(xiàn),MGT檢測不合格率為70.83%,MPT檢測不合格率11.25%,差異顯著(P<0.05)。而且,自表2、表3可以看出,直抗陽性患兒血清、放散液中MGT檢測不合格率分別為59.82%、48.21%,明顯高于MPT的19.20%、17.86%(P<0.05),直抗陰性患兒血清、放散液中MGT檢測不合格率分別為46.09%、35.94%,明顯高于MPT的3.91%、2.34%(P<0.05)。這說明ABO-HDN患兒輸血前采用MGT進行交叉配血,可獲得較MPT檢驗更為理想的效果,可提升不合格檢出率,有效發(fā)現(xiàn)體內(nèi)可溶性抗體。但MGT中仍存在陰性,考慮是因為患兒紅細胞抗原表達強度不同,機體代謝變化存在差異,在一定程度干擾了交叉配血結(jié)果準確性。這同時也說明,ABO-HDN患兒輸血方案制定中不能單一以交叉配血陰性為標準,需配合其他檢查方法進行綜合評估,最終確定輸血方案。此外,本組患兒血清及放散液中MPT、MGT配血結(jié)果一致性較差(Kappa值分別為0.225、0.303),這說明MGT可作為ABO-HDN患兒輸血前交叉配血有效手段應(yīng)用于臨床。
綜上所述,ABO-HDN患兒輸血前采用MGT進行交叉配血的效果理想,有利于提升交叉配血有效性、安全性,值得進行深入研究。