馮柳娟

（深圳市深業(yè)航天食品與環(huán)境檢測(cè)科技有限公司，廣東深圳 518040）

0 引言

氯蟲苯甲酰胺（Chlorantraniliprole） 是一種雙酰胺類殺蟲劑，于2008年上市，目前已在世界上100多個(gè)國(guó)家銷售，中國(guó)也是氯蟲苯甲酰胺的大市場(chǎng)。氯蟲苯甲酰胺具有高效廣譜的特點(diǎn)，廣泛應(yīng)用于農(nóng)作物中。據(jù)報(bào)道大豆、水稻是氯蟲苯甲酰胺的最大的用藥作物[1]。大豆是中國(guó)重要糧食作物之一，常用于制作各種豆制品、榨取豆油、釀造醬油和提取蛋白質(zhì)。目前，對(duì)大豆中氯蟲苯甲酰胺的研究較少，氯蟲苯甲酰胺常用的檢測(cè)技術(shù)有液相色譜法、液相色譜質(zhì)譜法、氣相色譜質(zhì)譜法。楊森等人[2]利用液相色譜法測(cè)定大豆中的氯蟲苯甲酰胺殘留量。趙軍溪[3]利用LC-MS/MS測(cè)定蔬菜中氯蟲苯甲酰胺殘留量。林毅楠等人[4]利用LC-MS/MS測(cè)定茶葉中氯蟲苯甲酰胺殘留量。國(guó)際《GB 2763—2019食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)食品中農(nóng)藥最大殘留限量》中氯蟲苯甲酰胺的限量為臨時(shí)限量，沒有相應(yīng)的檢測(cè)方法。采用GC-MS/MS法建立大豆中氯蟲苯甲酰胺殘留量測(cè)定的分析方法，為大豆的安全檢測(cè)提供技術(shù)支持。

1 試驗(yàn)部分

1.1 儀器

氣相色譜-三重四極桿質(zhì)譜聯(lián)用儀（TRACE 1300-TSQ 9000），美國(guó)賽默飛公司產(chǎn)品；氮吹儀（可控溫）、電子天平（感量0.01 g）、均質(zhì)器（轉(zhuǎn)速不低于15 000 r/min）、渦旋振蕩器、粉碎機(jī)。

1.2 試劑

乙腈（色譜純）、正己烷（色譜純）、氯化鈉（分析純）、乙二胺-N-丙基硅烷化硅膠（PSA）（40～60 μm）、HC-C18 專用超潔凈填料 （40～63 μm）、100 mg/L氯蟲苯甲酰胺標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)（Anpel）、純度≥95%環(huán)氧七氯標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)（Dr.Ehrenstorfer GmbH）。

1.3 儀器條件

1.3.1 色譜條件

色譜柱：TG-5MS（30 m×0.25 mm×0.25 μm）石英毛細(xì)管柱。

色譜柱溫度程序：初始溫度40℃，保持1.5 min，然后以25℃/min程序升溫至90℃，保持1.5 min，以25℃/min程序升溫至180℃，以5℃/min程序升溫至280℃，以10℃/min程序升溫至300℃，保持5 min。

載氣為氦氣（純度≥99.999%），恒流，流速1.2 mL/min。進(jìn)樣量1 μL，不分流進(jìn)樣。進(jìn)樣口溫度270℃。

1.3.2 質(zhì)譜條件

離子源溫度300℃，傳輸線溫度280℃，掃描方式為SRM，方法模式為Timed，離子化模式為EI。

1.4 測(cè)定方法

1.4.1 提取

取整粒大豆樣品充分混勻，將其粉碎，放入聚乙烯瓶中。用電子天平準(zhǔn)確稱取均勻的試樣5 g（精確至0.01 g）于50 mL塑料離心管中，加入10 mL水混勻，靜置30 min。再加入15 mL乙腈，均質(zhì)2 min，倒入已稱好的NaCl 5 g，劇烈振蕩1 min，以轉(zhuǎn)速5 000 r/min離心5 min。

1.4.2 凈化

取8 mL上清液至400 mg PSA、800 mg C18、1 200 mg無水硫酸鎂的離心管中，充分渦旋混勻1 min后，取凈化后的上清液2 mL于40℃水浴中氮吹至近干，加入正己烷980 μL，環(huán)氧七氯20 μL復(fù)溶后，過0.22 μm疏水性濾膜上機(jī)待測(cè)。同時(shí)，做基質(zhì)空白試驗(yàn)。

2 結(jié)果與分析

2.1 氯蟲苯甲酰胺儀器方法的確定

配制500 μg/mL的氯蟲苯甲酰胺標(biāo)準(zhǔn)工作液，采用Full Scan、AUTOSRM及SRM等方式確定氯蟲苯甲酰胺的保留時(shí)間及特征離子對(duì)，通過調(diào)節(jié)程序升溫得到較優(yōu)的儀器方法。

氯蟲苯甲酰胺和環(huán)氧七氯的離子信息見表1。

表1 氯蟲苯甲酰胺和環(huán)氧七氯的離子信息

2.2 凈化材料的比例選擇

試驗(yàn)方法前處理是采用凈化填料的不同比例（PSA∶C18=1∶1，PSA∶C18=1∶2，PSA∶C18=2∶1）進(jìn)行優(yōu)化，C18主要吸附油脂等弱極性雜質(zhì)，PSA去除有機(jī)酸、色素、金屬離子和酚類等。結(jié)果顯示，3種方式的回收率均能達(dá)到回收率合格范圍（80%～120%），但PSA∶C18=1∶2雜質(zhì)峰的干擾較小，故試驗(yàn)選擇PSA 400 mg，C18 800 mg進(jìn)行凈化。

不同的凈化填料比例對(duì)氯蟲苯甲酰胺試驗(yàn)結(jié)果回收率的影響見表2，不同的凈化填料比例在空白基質(zhì)中對(duì)氯蟲苯甲酰胺的干擾情況見圖1。

表2 不同的凈化填料比例對(duì)氯蟲苯甲酰胺試驗(yàn)結(jié)果回收率的影響

圖1 不同的凈化填料比例在空白基質(zhì)中對(duì)氯蟲苯甲酰胺的干擾情況

2.3 方法的最低檢出限

通過逐級(jí)稀釋確定氯蟲苯甲酰胺的測(cè)定低限為0.01 mg/kg （S/N=10）。

2.4 方法的線性

精確吸取一定量的10 mg/L的標(biāo)準(zhǔn)溶液，用基質(zhì)空白溶液配制標(biāo)準(zhǔn)工作液，加入20 μL內(nèi)標(biāo)，配制成質(zhì)量濃度依次為20，50，100，200，500 μg/L的標(biāo)準(zhǔn)工作溶液，曲線回歸方程為Y=2.433×106X-3.152×104，相關(guān)系數(shù)為0.999，表明該方法線性良好。

空白基質(zhì)配制的氯蟲苯甲酰胺標(biāo)準(zhǔn)曲線見圖2。

圖2 空白基質(zhì)配制的氯蟲苯甲酰胺標(biāo)準(zhǔn)曲線

2.5 方法的準(zhǔn)確度

稱取大豆樣品各6份，按照0.02，0.06，0.10 mg/kg的質(zhì)量濃度進(jìn)行試驗(yàn)。

氯蟲苯甲酰胺試驗(yàn)結(jié)果回收率及重復(fù)性結(jié)果見表3。

表3 氯蟲苯甲酰胺試驗(yàn)結(jié)果回收率及重復(fù)性結(jié)果

結(jié)果顯示，0.02，0.06，0.10 mg/kg質(zhì)量濃度對(duì)氯蟲苯甲酰胺回收率的影響不大，均可以達(dá)到90%以上。

2.6 方法的精密度

將處理好的大豆樣品中的氯蟲苯甲酰胺試樣重復(fù)進(jìn)樣6次，查看峰面積，試驗(yàn)結(jié)果顯示RSD為2.9%。

3 結(jié)論

采用GC-MS/MS進(jìn)行大豆中的氯蟲苯甲酰胺的殘留量的測(cè)定試驗(yàn)可靠性高、準(zhǔn)確度好，可用于日常檢測(cè)工作中，可為消費(fèi)者的食品安全提供保障，可為推動(dòng)相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)的建立提供一份依據(jù)，同時(shí)滿足市場(chǎng)的需求，將大豆中的氯蟲本甲酰胺的研究延伸到多個(gè)領(lǐng)域。