王家東，白 建

（1.信陽農(nóng)林學(xué)院，河南信陽 464000；2.呂梁學(xué)院，山西呂梁 033001）

雖然豆粕是一種優(yōu)良的蛋白質(zhì)原料，但在世界許多地區(qū)，其供應(yīng)和價(jià)格往往存在波動(dòng)。因此，在肉仔雞日糧中，用全脂大豆替代豆粕不僅可以作為蛋白原料，還可以作為能量補(bǔ)充原料。全脂豆粕既可以用高溫處理，也可以用原大豆種子制備，雖然原大豆種子含有抗?fàn)I養(yǎng)因子（Erdaw等，2016）。在生大豆中影響最大的抗?fàn)I養(yǎng)因子是胰蛋白酶抑制因子（谷春梅等，2012）。大豆中的胰蛋白酶抑制因子是一種能顯著降低蛋白質(zhì)和氨基酸消化利用率的蛋白質(zhì)，其可通過多方面的作用降低蛋白質(zhì)消化率，如結(jié)合各種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，增加腸道黏度（馮敏山等，2003）。大豆去皮或研磨均可降低豆粕中抗?fàn)I養(yǎng)因子的含量，飼喂前對(duì)大豆進(jìn)行加熱處理也可降低抗?fàn)I養(yǎng)因子風(fēng)險(xiǎn)，但熱處理取決于溫度、壓力和持續(xù)時(shí)間，可能會(huì)對(duì)產(chǎn)品質(zhì)量產(chǎn)生負(fù)面影響（Capri?a等，2010）。在家禽飼料中添加外源酶可能是非反芻動(dòng)物利用大豆?fàn)I養(yǎng)物質(zhì)的一種可選且有效的策略。雖然在動(dòng)物飼料工業(yè)中利用外源微生物酶來提高飼料營(yíng)養(yǎng)價(jià)值的概念已經(jīng)確立，但利用飼料酶來減少蛋白酶抑制劑和凝集素對(duì)非反芻動(dòng)物負(fù)面影響的研究有限。微生物蛋白酶是一種蛋白質(zhì)消化酶，用于分解各種植物原料中儲(chǔ)存的蛋白質(zhì)和蛋白質(zhì)類抗?fàn)I養(yǎng)物質(zhì)（Ao，2011）。因此，本研究旨在評(píng)估全脂大豆日糧補(bǔ)充蛋白酶對(duì)肉雞生長(zhǎng)性能、養(yǎng)分消化及腸道健康的影響。

1 材料與方法

1.1 日糧設(shè)計(jì)與動(dòng)物分組 試驗(yàn)將800只初始體重為（58.98±1.02）g的1日齡商品肉雞隨機(jī)分為4組，每組4個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)50只。試驗(yàn)日糧采用2×2因子設(shè)計(jì)，即2個(gè)全脂大豆水平（0和4.5%）及2個(gè)酶水平（0和0.5 g/kg蛋白酶）。蛋白酶購自廣東溢多利生物股份有限公司。

1.2 數(shù)據(jù)記錄 在試驗(yàn)開始和結(jié)束后按照重復(fù)對(duì)肉雞進(jìn)行稱重，每天觀察肉雞的死淘情況。每周記錄1次飼料用量，試驗(yàn)結(jié)束后計(jì)算平均日增重、平均日采食量和料重比。

1.3 樣品采集與分析 在試驗(yàn)結(jié)束的前4 d，在所有日糧中添加0.3%氧化鉻作為外源指示劑，連續(xù)收集4 d的糞便，糞便樣品混合后稱重，在55℃下干燥72 h，粉碎后用于分析干物質(zhì)、粗蛋白質(zhì)、粗脂肪和氨基酸含量，參考杜恒裔等（2019）的方法計(jì)算養(yǎng)分表觀消化率。試驗(yàn)第42天早上肉雞禁食12 h后每個(gè)重復(fù)隨機(jī)選擇體重接近的肉雞進(jìn)行屠宰，分離空腸和回腸，參考寇濤等（2014）方法分析絨毛高度和隱窩深度，并計(jì)算絨毛高度與隱窩深度比值。

表1 不同蛋白質(zhì)水平日糧原料組成及營(yíng)養(yǎng)水平

1.4 數(shù)據(jù)分析 試驗(yàn)數(shù)據(jù)使用SAS軟件多因素方差分析模型進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，以日糧蛋白質(zhì)水平和酶水平為主效應(yīng)，同時(shí)研究其交互作用，采用Turkey法進(jìn)行多重比較，P＜0.05表示差異顯著。

2 結(jié)果與分析

2.1 全脂大豆添加蛋白酶對(duì)肉雞生長(zhǎng)性能的影響 由表2可知，日糧處理對(duì)肉雞平均日增重和死亡率的影響均無顯著差異（P＞0.05）。T3組肉雞末重和平均日采食量顯著低于T1和T2組（P＜0.05），而T3組料重比顯著高于其他組（P＜0.05）。4.5%全脂大豆組肉雞的末重顯著低于0%組（P＜0.05），同時(shí)0.5 g/kg蛋白酶組肉雞末重也顯著高于0 g/kg酶組（P＜0.05）。全脂大豆和酶添加水平對(duì)肉雞平均日采食量和料重比的影響具有顯著交互作用（P＜0.05）。

表2 全脂大豆日糧添加蛋白酶對(duì)肉雞生長(zhǎng)性能的影響

2.2 全脂大豆添加蛋白酶對(duì)肉雞養(yǎng)分表觀消化率的影響 由表3可知，日糧處理對(duì)肉雞干物質(zhì)、粗脂肪表觀消化率的影響均無顯著差異（P＜0.05）。T3組肉雞粗蛋白質(zhì)、賴氨酸、蛋氨酸和丙氨酸表觀消化率顯著低于T1和T2組（P＜0.05）。4.5%全脂大豆組肉雞賴氨酸表觀消化率顯著低于0%組（P＜0.05）。全脂大豆和酶添加水平對(duì)肉雞粗蛋白質(zhì)和蛋氨酸表觀消化率的影響具有顯著交互作用（P＜0.05）。

表3 全脂大豆日糧添加蛋白酶對(duì)肉雞養(yǎng)分表觀消化率的影響

2.3 全脂大豆添加蛋白酶對(duì)肉雞養(yǎng)分表觀消化率的影響 由表4可知，日糧處理對(duì)肉雞空腸隱窩深度及回腸絨毛高度、隱窩深度和絨毛高度/隱窩深度值的影響均無顯著差異（P＞0.05），而T3組肉雞空腸絨毛高度和絨毛高度/隱窩深度值均顯著低于其他組（P＜0.05）。4.5%全脂大豆組肉雞空腸絨毛高度顯著低于0%組（P＜0.05），同時(shí)0.5 g/kg蛋白酶組肉雞空腸絨毛高度顯著高于0 g/kg酶組（P＜0.05）。日糧全脂大豆和酶添加水平對(duì)空腸絨毛高度與隱窩深度比值的影響均具有顯著交互作用（P＜0.05）。

表4 不同蛋白質(zhì)水平日糧添加蛋白酶對(duì)肉雞小腸絨毛形態(tài)的影響

3 討論

本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，4.5%全脂大豆組（無蛋白酶）肉雞末重和平均日采食量顯著低于豆粕型日糧組，同時(shí)，該組飼料效率也顯著低于其他組。在整個(gè)飼喂期（1～42 d），雖然肉雞平均日增重?zé)o顯著差異，但補(bǔ)充蛋白酶后改善了肉雞的平均日采食量，這與Palacios等（2004）的研究結(jié)果一致。Barletta等（2011）發(fā)現(xiàn)，日糧添加微生物蛋白酶可分解日糧中儲(chǔ)存的蛋白質(zhì)和蛋白質(zhì)類抗?fàn)I養(yǎng)物質(zhì)，這些結(jié)果表明，肉仔雞對(duì)大豆抗?fàn)I養(yǎng)因子敏感，而外源酶可能無法在生理上被吸收以分解肉類中的抗?fàn)I養(yǎng)物質(zhì)，酶的效果可能表現(xiàn)在生長(zhǎng)后期。

本研究發(fā)現(xiàn)各處理組對(duì)大多數(shù)氨基酸都無顯著影響，因此，試驗(yàn)只列出了幾種數(shù)據(jù)顯著的氨基酸結(jié)果。不添加蛋白酶的全脂大豆組肉雞粗蛋白質(zhì)、賴氨酸、蛋氨酸和丙氨酸表觀消化率顯著低于豆粕組。雖然在全脂大豆日糧中添加蛋白酶對(duì)肉雞粗蛋白質(zhì)表觀消化率無顯著影響，但也降低了對(duì)蛋白質(zhì)表觀消化的負(fù)面影響，這一結(jié)果與Marsman等（1997）報(bào)道的結(jié)果一致。此外，補(bǔ)充酶也無法使氨基酸表觀消化率達(dá)到顯著，說明全脂大豆盡管降低了蛋白質(zhì)和氨基酸表觀消化率，但在成本角度補(bǔ)充蛋白酶可以降低全脂大豆中抗?fàn)I養(yǎng)因子的負(fù)面影響。

小腸絨毛形態(tài)分析結(jié)果顯示，不添加蛋白酶的全脂大豆組肉雞空腸絨毛高度和絨毛高度/隱窩深度均顯著低于其他組，同時(shí)，日糧全脂大豆和酶添加水平對(duì)絨毛高度與隱窩深度比值的影響具有顯著交互作用。Yuan等（2008）研究發(fā)現(xiàn)，日糧添加微生物蛋白酶可提高大部分胰腺消化酶活性，其中在淀粉酶和胰蛋白酶的活性更高，進(jìn)而可以改善養(yǎng)分消化率。同時(shí)，微生物蛋白酶對(duì)肉雞絨毛高度和絨毛表觀表面積有積極作用，但形態(tài)學(xué)參數(shù)值與肉雞生長(zhǎng)和消化酶功能之間的關(guān)系還有待進(jìn)一步研究。

4 結(jié)論

日糧添加4.5%全脂大豆替代豆粕會(huì)降低肉雞體重、賴氨酸表觀消化率及空腸絨毛高度，添加5 g/kg蛋白酶可改善全脂大豆對(duì)上述指標(biāo)的負(fù)面影響。