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        UCH-L1 和S100B 蛋白在癲癇患兒外周血中的表達(dá)及意義

        2021-12-26 10:41:54李樹華賈玉鳳
        中國醫(yī)藥導(dǎo)報(bào) 2021年32期
        關(guān)鍵詞:局灶持續(xù)時(shí)間癲癇

        張 雙 閆 凱 李樹華 張 靜 賈玉鳳

        河北省唐山市婦幼保健院兒科,河北唐山 063000

        癲癇是一種具有持久性的產(chǎn)生癲癇發(fā)作的傾向?yàn)樘卣鞯穆阅X部疾病,是兒童最常見的神經(jīng)系統(tǒng)疾病,我國發(fā)病率為35/10 萬[1]。長期、頻繁或嚴(yán)重的發(fā)作會導(dǎo)致進(jìn)一步的腦損傷,給患者的生活、學(xué)習(xí)等帶來很大的影響。癲癇持續(xù)狀態(tài)有可能造成致命的風(fēng)險(xiǎn),如猝死,給患兒家庭造成沉重的打擊[2-3]。癲癇病因包括結(jié)構(gòu)性、遺傳基因、感染、代謝與免疫及未知因素[4]。神經(jīng)影像學(xué)如CT、MRI 等有助于發(fā)現(xiàn)癲癇的結(jié)構(gòu)性病因,但是其相對于較輕微腦損傷的陽性檢出率比較低。近年來,癲癇的神經(jīng)生物標(biāo)志物的研究已成為熱點(diǎn)關(guān)注課題。泛素羧基末端水解酶L1(ubiquitin carboxy-terminal hydrolase-l1,UCH-L1)、S100B 蛋白以往被較多的研究于各種病因造成的中樞神經(jīng)系統(tǒng)損傷性疾病,近年來有研究[5]發(fā)現(xiàn),UCH-L1 在成人癲癇患者的血清中表達(dá)升高,但在兒童領(lǐng)域鮮有報(bào)道。本研究通過分析癲癇患兒外周血UCH-L1、S100B 蛋白的表達(dá)情況,探討二者在癲癇發(fā)病機(jī)制中的作用及意義。

        1 對象與方法

        1.1 研究對象

        選擇河北省唐山市婦幼保健院(以下簡稱“我院”)2018 年10 月至2019 年10 月初診的,且入院前24 h內(nèi)有癲癇發(fā)作的癲癇患兒80 例為病例組。選取同期門診體檢的健康兒童80 名為對照組。納入標(biāo)準(zhǔn):①符合國際抗癲癇聯(lián)盟2017 年操作性定義及分類標(biāo)準(zhǔn)[6];②年齡<14 歲;③入組前3 個(gè)月內(nèi)癲癇發(fā)作2 次以上,入院前24 h 內(nèi)有癲癇發(fā)作;④生長發(fā)育基本正常。排除標(biāo)準(zhǔn):①遺傳代謝性、腦血管性、免疫性及感染性疾??;②合并器官功能障礙或外傷。對照組排除既往有驚厥史及家族癲癇遺傳病史的健康兒童。本研究經(jīng)我院倫理學(xué)委員會審核批準(zhǔn),受試對象監(jiān)護(hù)人知情同意并簽署知情同意書。

        病例組男39 例,女41 例;年齡3~97 個(gè)月;體重7.2~48.0 kg。對照組男34 例,女46 例;年齡3~97 個(gè)月;體重6.0~49.0 kg。兩組性別、年齡、體重比較,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P >0.05),具有可比性,見表1。按發(fā)作持續(xù)時(shí)間將病例組分為癲癇持續(xù)時(shí)間<5 min 組(58 例)、癲癇持續(xù)時(shí)間≥5 min 組(22 例);按發(fā)作類型將病例組分為局灶性發(fā)作組(41 例)、全面性發(fā)作組(39 例)。

        表1 兩組一般資料比較

        1.2 研究方法

        1.2.1 標(biāo)本的采集 兩組于清晨空腹?fàn)顟B(tài)采集外周靜脈血3 ml 至抗凝試管,3000 r/min 離心10 min(離心半徑為47.5 cm),取上清液檢測。收集血清放入EP 管中,靜置5 min,將血清置于-80℃冰箱中保存?zhèn)溆谩?/p>

        1.2.2 標(biāo)本的檢測 雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)檢測UCH-L1、S100B 蛋白的表達(dá)水平,試劑盒購于上海仁捷生物科技有限公司(06112019)。

        1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

        采用SPSS 16.0 軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析,符合正態(tài)分布的計(jì)量資料用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差()表示,兩組間比較采用t 檢驗(yàn);不符合正態(tài)分布的采用中位數(shù)(M)和四分位數(shù)(P25,P75)表示,兩組間比較采用秩和檢驗(yàn)。計(jì)數(shù)資料用例數(shù)表示,組間比較采用χ2檢驗(yàn)。以P <0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

        2 結(jié)果

        2.1 兩組UCH-L1、S100B 蛋白水平比較

        病例組UCH-L1、S100B 蛋白水平高于對照組,差異有高度統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P <0.01)。見表2。

        表2 兩組UCH-L1、S100B 蛋白水平比較(ng/L,)

        表2 兩組UCH-L1、S100B 蛋白水平比較(ng/L,)

        注:UCH-L1:泛素羧基末端水解酶L1

        2.2 癲癇持續(xù)時(shí)間不同的患兒UCH-L1、S100B 水平比較

        癲癇持續(xù)時(shí)間≥5 min 組UCH-1、S100B 蛋白水平高于癲癇持續(xù)時(shí)間<5 min 組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P <0.05 或P <0.01)。見表3。

        表3 癲癇持續(xù)時(shí)間不同的患兒UCH-L1、S100B 蛋白水平比較(ng/L,)

        表3 癲癇持續(xù)時(shí)間不同的患兒UCH-L1、S100B 蛋白水平比較(ng/L,)

        注:UCH-L1:泛素羧基末端水解酶L1

        2.3 不同發(fā)作類型患兒UCH-L1、S100B 蛋白水平比較

        全面性發(fā)作組UCH-1、S100B 蛋白水平高于局灶性發(fā)作組,差異有高度統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P <0.01)。見表4。

        表4 不同發(fā)作類型患兒UCH-L1、S100B 蛋白水平比較(ng/L,)

        表4 不同發(fā)作類型患兒UCH-L1、S100B 蛋白水平比較(ng/L,)

        注:UCH-L1:泛素羧基末端水解酶L1

        3 討論

        癲癇發(fā)病機(jī)制復(fù)雜,目前尚未完全明確,可能與分子遺傳、免疫炎癥因子、神經(jīng)遞質(zhì)失衡及內(nèi)分泌等因素有關(guān)[7-10]?;谝陨蠈W(xué)說,近年來,癲癇神經(jīng)生物標(biāo)志物的研究逐漸成為熱點(diǎn)關(guān)注課題,并且經(jīng)過大量的研究證實(shí),部分對中樞神經(jīng)系統(tǒng)具有特異性的蛋白質(zhì)能夠作為癲癇具有潛力的生物標(biāo)志物。UCH-L1、S100B 蛋白以往被較多的研究用于各種病因造成的中樞神經(jīng)系統(tǒng)損傷性疾病中[11-15],而在癲癇的研究中較為少見,同時(shí)UCH-L1 和S100B 蛋白的聯(lián)合檢測在癲癇患兒中的研究更加少見[16]。本研究分析比較癲癇患兒與健康兒童外周血中UCH-L1 和S100B蛋白的表達(dá)水平以及二者與癲癇發(fā)作持續(xù)時(shí)間、發(fā)作類型的關(guān)系,探討其表達(dá)水平在兒童癲癇臨床中的意義。

        S100B 蛋白是一種鈣結(jié)合蛋白,通過Ca2+信號傳導(dǎo),在細(xì)胞增殖、分化、基因表達(dá)及細(xì)胞凋亡過程中發(fā)揮了重要的作用[17-21]。Seifert 等[22]研究支持了S100B在星形膠質(zhì)細(xì)胞信號傳導(dǎo)的過程,以及與癲癇發(fā)作的關(guān)系。當(dāng)大腦處于缺血缺氧的狀態(tài)時(shí)神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞最先遭到破壞,S100B 游離到細(xì)胞外,然后穿過受損的血腦屏障入血。Liang 等[23]對18 項(xiàng)研究(包括1057 例參與者)進(jìn)行的固定效應(yīng)薈萃分析顯示,癲癇患者外周血S100B 水平顯著升高,提示S100B 可以作為癲癇的生物標(biāo)志物,有助于癲癇的臨床診斷和預(yù)后判斷。本研究結(jié)果顯示癲癇發(fā)作24 h 后S100B 蛋白表達(dá)明顯升高,與相關(guān)研究[24-25]得出的結(jié)果具有一致性,可能是S100B 蛋白從神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞釋放出來,并且通過血腦屏障進(jìn)入到外周血液循環(huán)之中,為S100B 在小兒癲癇中的應(yīng)用提供了依據(jù)。

        UCH-L1 是一種能分解泛素化蛋白的硫醇蛋白酶,是神經(jīng)元中含量最豐富的蛋白質(zhì)成分,分子量約為24 kD,容易穿過受損細(xì)胞膜[26-27]。被認(rèn)為是神經(jīng)元特異性的生物標(biāo)志物。UCH-L1 具有相對較長的半衰期及穩(wěn)定性,促使其能夠從被損害的神經(jīng)元細(xì)胞膜和血腦屏障中順利通過。本研究結(jié)果顯示,病例組UCH-L1 水平高于對照組,推測在患兒癲癇發(fā)作后UCH-L1 從大腦神經(jīng)元細(xì)胞中大量釋放出來。

        郝偉紅等[28]研究結(jié)果提示抽搐時(shí)間>5 min 的患兒S100B 表達(dá)高于抽搐時(shí)間≤5 min,本研究與其結(jié)果一致,并進(jìn)行了UCH-L1 的監(jiān)測,得到了相同的結(jié)論。但本研究尚存不足之處,癲癇持續(xù)時(shí)間≥5 min 的組別樣本量較小,且家屬提供的驚厥持續(xù)時(shí)間可能存在偏差,故未來的研究,還需進(jìn)一步擴(kuò)大樣本量,監(jiān)測驚厥持續(xù)的具體時(shí)間。

        Li 等[27]比較了全面性癲癇與局灶性癲癇患者的腦脊液中UCH-L1 水平,發(fā)現(xiàn)在全面性癲癇的表達(dá)高于局灶性癲癇。劉迪輝等[29]在對82 例癲癇患兒的一項(xiàng)研究中發(fā)現(xiàn),S100B 蛋白水平在全面性發(fā)作組明顯高于局灶性發(fā)作組。與本結(jié)果基本一致,提示大腦兩側(cè)半球同時(shí)放電對癲癇患兒UCH-L1、S100B 蛋白表達(dá)水平升高的影響明顯高于局灶性異常放電。

        綜上所述,本研究結(jié)果顯示,癲癇患兒外周血中UCH-L1、S100B 蛋白水平升高。癲癇患兒血清UCHL1、S100B 水平升高程度與癲癇持續(xù)時(shí)間、發(fā)作類型有一定關(guān)系。神經(jīng)生物標(biāo)志物UCH-L1、S100B 為早期輕微腦損傷診斷提供了一條有前途的新方法,具有檢測癲癇后導(dǎo)致的腦損傷以及腦損傷嚴(yán)重程度的潛力。

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