◎ 尹浩哲，賀西西，李 舒，李雪姣

（1.新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院三全學(xué)院，河南 新鄉(xiāng) 453003；2.新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院三全學(xué)院基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院病原生物學(xué)與免疫學(xué)教研室，河南 新鄉(xiāng) 453003）

隨著生活質(zhì)量的提升，人們高品質(zhì)的物質(zhì)需求不斷突顯，以食品業(yè)、醫(yī)藥業(yè)為代表的行業(yè)領(lǐng)域持續(xù)優(yōu)化自身產(chǎn)品的品質(zhì)，并不斷推出獨(dú)特的新產(chǎn)品。紫甘薯花色苷作為一種純天然安全無(wú)毒且具有抗氧化、抑制細(xì)菌生長(zhǎng)等獨(dú)特優(yōu)點(diǎn)的色素，具有巨大的發(fā)展前景和利用價(jià)值，本文將紫甘薯花色苷目前的研究進(jìn)行總結(jié)和分類，對(duì)目前紫甘薯花色苷在提取工藝、抑制及調(diào)節(jié)細(xì)菌、抗氧化和防治癌癥的研究進(jìn)展進(jìn)行概述。

1 紫甘薯花色苷的提取工藝

紫甘薯花色苷有多種提取方法，歸納文獻(xiàn)中所涉及到的方法，包括溶劑浸提法、酶水解法、超聲波輔助技術(shù)、微波輔助法、高壓脈沖電場(chǎng)輔助等，方法各有優(yōu)劣，見表1。溶劑浸提法憑借操作簡(jiǎn)單、設(shè)備條件要求不高等特點(diǎn)成為實(shí)驗(yàn)人員主要的提取方法，其原理是利用紫甘薯花色苷是水溶性黃酮類化合物且在酸性條件下比較穩(wěn)定的特性，以水或者醇類為提取劑加入酸性物質(zhì)使花色苷溶解在提取劑中得到粗提液。所用提取劑包括酸類和乙醇等，我國(guó)學(xué)者李玲[1]提供了最佳的工藝參數(shù)：檸檬酸濃度4%，提取時(shí)間1 h，提取溫度50 ℃，料液比1∶6，經(jīng)兩次提取獲得率為2.843 mg·g-1。雖然溶劑浸提法操作簡(jiǎn)單，對(duì)設(shè)備要求較低，但粗提液內(nèi)仍有大量雜質(zhì)，這些雜質(zhì)對(duì)花色苷的品質(zhì)有極大的影響，且使用的大部分有機(jī)溶劑會(huì)對(duì)人體產(chǎn)生一定副作用，對(duì)環(huán)境有一定的污染，溶劑殘留也較難去除。

表1 紫甘薯花色苷提取方法及優(yōu)劣表

微波輔助和超聲波輔助技術(shù)能根據(jù)組分不同、吸收微波的能力不同而有選擇性地將其中的某部分進(jìn)行加熱，達(dá)到分離提取的效果。在此技術(shù)下，細(xì)胞壁及細(xì)胞膜被破壞后，溶劑滲透性得以提高，同時(shí)縮短浸提時(shí)間，提高花色苷得率，最終獲得相對(duì)高質(zhì)量的產(chǎn)品。但此法耗能多，對(duì)設(shè)備要求較高，孫文娟[2]確定了微波輔助溶劑萃取（Microwave-Assisted Solvent Extraction，MASE）的最佳工藝，同時(shí)，通過(guò)正交實(shí)驗(yàn)，確定了超聲波輔助提取紫甘薯花色苷的最佳工藝。李曉嬌等[3]等人也是采用微波輔助法，提取了粗梗稠李成熟果實(shí)中的花色苷，并且優(yōu)化了提取工藝。劉瑋[4]用微波輔助連續(xù)萃取紫甘薯花色苷，以響應(yīng)面法優(yōu)化了其提取紫甘薯花色苷的條件：液料比3∶1（mL∶g）、乙醇濃度30%、微波功率320 W、時(shí)間8.5 min。

為了獲得更高品質(zhì)的紫甘薯花色苷，可采用樹脂吸附法、超濾法、醋酸鉛沉淀法、分解醇沉法等多種方法進(jìn)行純化。其中大孔樹脂作為高分子聚合物可濃縮并分離有機(jī)物，其工藝流程簡(jiǎn)單、容易操作、價(jià)格低廉，可避免花色苷高溫氧化。關(guān)于樹脂吸附法研究眾多，利用樹脂經(jīng)離子交換可以將粗提液中的雜質(zhì)除去，再經(jīng)過(guò)烘干濃縮可以獲得高品質(zhì)的紫甘薯花色苷，產(chǎn)率極高可達(dá)89.4%。李玲[1]指出AB-8大孔樹脂有著良好的花色苷純化效果，大孔樹脂純化提取物可以使花色苷得到有效富集，紫甘薯花色苷色價(jià)可達(dá)到27.7。朱洪梅[5]對(duì)4種大孔樹脂（包括AB-8型、S-8型、NKA-II型和NKA-9型）進(jìn)行研究實(shí)驗(yàn)，結(jié)果表明紫甘薯花色苷的最佳吸附劑是AB-8型大孔樹脂。顧紅梅[6]等的試驗(yàn)結(jié)果顯示：色素初提液pH=3.0，上樣濃度為35.0 μg·mL-1，流速2.0 mL·min-1，解吸過(guò)程中，乙醇溶液pH=2.0，濃度為70%時(shí)，解吸速度最佳。大孔樹脂的解析率隨時(shí)間延長(zhǎng)而下降，因此需控制解析時(shí)間在30 min左右即可。

紫甘薯花色苷在實(shí)驗(yàn)室的提取有較多的方法，提取方法各有優(yōu)劣，但由于缺乏所有方法的比較研究，且在不同實(shí)驗(yàn)室影響因素下，很難單憑提取率得出哪種方法更好的結(jié)論，其中溶劑浸提法和樹脂吸附法分別為主流的提取和純化方式。各科研人員可根據(jù)本自身設(shè)備以及技術(shù)條件選擇適宜的提取方式。

2 紫甘薯花色苷對(duì)細(xì)菌的作用

2.1 抑制細(xì)菌生長(zhǎng)

胡林子[7]分析紫甘薯花青素化學(xué)結(jié)構(gòu)，發(fā)現(xiàn)其分子結(jié)構(gòu)上有較多的酚羥基，這些酚羥基以氫鍵方式與蛋白質(zhì)或酶結(jié)合，破壞蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)，導(dǎo)致蛋白質(zhì)變性或失去活性，進(jìn)而引起細(xì)胞質(zhì)的固縮和解體。郭城等[8]采用牛津杯法測(cè)定了紫甘薯花色苷色素對(duì)大腸桿菌和金黃色葡萄球菌的抑制作用。在實(shí)驗(yàn)濃度范圍內(nèi)，最高清除率分別為55.83%、62.14%和83.21%。紫甘薯花色苷色素對(duì)大腸桿菌和金黃色葡萄球菌的最小抑菌濃度分別為1 000 μg·mL-1、250 μg·mL-1，抑菌效果具有劑量依賴性。蔣麗施等[9]發(fā)現(xiàn)薯花色苷色素能夠抑制傷寒沙門氏菌和福氏志賀氏菌的生長(zhǎng)，最小抑菌濃度為0.55 mg·mL-1，對(duì)鼠李糖乳桿菌、植物乳桿菌、酵母菌、黑曲霉生長(zhǎng)無(wú)影響。同時(shí)發(fā)現(xiàn)當(dāng)pH＜3時(shí)，紫薯花色苷抑菌效果最好；經(jīng)過(guò)高溫處理后可減弱紫薯花色苷的抑菌作用；紫外光照射對(duì)紫薯花色苷的抑菌作用沒有影響；微波短時(shí)處理可以增強(qiáng)紫薯花色苷的抑菌作用。雖然眾多研究表明紫甘薯花色苷具有較強(qiáng)的抑菌作用，但是在分子水平的抗菌機(jī)理研究不夠徹底，仍需投入研究以開發(fā)其利用價(jià)值。

2.2 調(diào)節(jié)腸道菌群

如今有大量學(xué)者投入到腸道菌群的研究，過(guò)去13年之中，腸道菌群的研究在菌群相關(guān)的研究中所占比例可達(dá)60%，腸道菌群紊亂可以造成胃腸道功能的紊亂，而胃腸道功能的紊亂又可以加重腸道菌群的紊亂，如此形成惡性循環(huán)。腸道紊亂菌群調(diào)節(jié)的常規(guī)治療以微生態(tài)制劑為主[10]，微生態(tài)制劑可由微生物、微生物代謝產(chǎn)物或者非消化性食物成分制成，從不同角度有多種分類方式，本文根據(jù)微生態(tài)制劑的組成物質(zhì)進(jìn)行分類并論述其功能，如表2所示。隨著腸道菌群紊亂者的不斷涌現(xiàn)，臨床之中需求高效微生態(tài)制劑。

表2 微生態(tài)制劑類別表

已有研究表明紫甘薯花色苷可作為微生態(tài)制劑調(diào)節(jié)紊亂的腸道菌群，李靜[11]使用頭孢克肟誘導(dǎo)小鼠腸道菌群的紊亂后設(shè)立空白對(duì)照組、陰性對(duì)照組、陽(yáng)性對(duì)照組、花色苷干預(yù)組，發(fā)現(xiàn)了頭孢克肟可以明顯減少腸道菌群的豐富度和種群多樣性。使用Real-time PCR檢測(cè)出在花色苷干預(yù)后小鼠腸道內(nèi)擬桿菌和乳桿菌的數(shù)量大幅度上升，而大腸桿菌和腸球菌的數(shù)量大幅度下降，由此說(shuō)明紫甘薯花色苷對(duì)抗生素頭孢克肟引起的腸道菌群紊亂具有調(diào)節(jié)作用。王艷麗[12]體外分別培養(yǎng)大腸桿菌、腸球菌、雙歧桿菌和乳桿菌4種腸道菌群中的優(yōu)勢(shì)菌，探究紫甘薯花色苷和這4種細(xì)菌的相互作用，其結(jié)果表明紫甘薯花色苷對(duì)大腸桿菌和腸球菌（中性菌）有抑制作用，且抑菌作用跟花色苷濃度成正比，對(duì)乳桿菌和雙歧桿菌（有益菌）有促進(jìn)生長(zhǎng)的作用，而對(duì)于乳桿菌的作用更大。李靜和王艷麗分別研究了紫甘薯花色苷在體內(nèi)和體外對(duì)腸道菌群的作用，然而目前關(guān)于紫甘薯花色苷對(duì)腸道菌群的研究很少，紫甘薯花色苷對(duì)腸道菌群的作用機(jī)制尚不明確。人體腸道菌群復(fù)雜，個(gè)別菌群難以培養(yǎng)，甘薯花色苷對(duì)腸道菌群的作用有待更近一步的研究。

3 紫甘薯花色苷的抗氧化作用

有研究表明紫甘薯花色苷具有一定的抗氧化作用，同時(shí)紫甘薯花色苷的這種特性也是其抑菌作用的基礎(chǔ)，與其主要成分矢車菊素-3-葡萄糖苷有關(guān)，矢車菊素-3-葡萄糖苷的B環(huán)上4’，5’位有兩個(gè)相鄰的酚羥基，酚羥基數(shù)目跟氫離子的提供能力成正比，而氫離子可以清除自由基，且鄰二酚羥基的自由基可因形成鄰苯醌型結(jié)構(gòu)的共振作用而穩(wěn)定，從而進(jìn)一步提高其抗氧化性。[13]。

呂曉玲[14]等人采用魯米諾化學(xué)發(fā)光法測(cè)定，紫甘薯花色苷清除O2-、·OH和H2O2自由基的能力，結(jié)果表明紫甘薯花色苷具有消除超氧陰離子O2-、羥基自由基·OH和H2O2自由基的能力，且均具有量效關(guān)系。孫健等[15]發(fā)現(xiàn)不同品種的紫甘薯體外抗氧化能力差異顯著，其中徐紫薯8號(hào)體外抗氧化能力最強(qiáng)，對(duì)高脂質(zhì)飲食飼養(yǎng)的小鼠有較強(qiáng)的抗氧化能力，減少小鼠肝臟內(nèi)丙二醛的提高，提升抗氧化酶的作用。易軍鵬[16]采用蒸汽爆破預(yù)處理紫甘薯花色苷，發(fā)現(xiàn)紫甘薯花色苷的DPPH自由基清除能力和羥自由基清除能力增強(qiáng)，但是還原性基本保持不變。

關(guān)于紫甘薯花色苷的抗氧化性目前有較多的研究，集中在體外自由基的清除率方面，有足夠證據(jù)證明紫甘薯花色苷具有強(qiáng)抗氧化性，其抗氧化性是應(yīng)用在抑菌、食品業(yè)、抑制肝損傷、抗腫瘤等其他方面的基礎(chǔ)。

4 紫甘薯花色苷對(duì)癌癥的影響

紫甘薯花色苷對(duì)多種癌細(xì)胞如乳腺癌細(xì)胞、膀胱癌細(xì)胞和肝癌細(xì)胞等多種癌細(xì)胞都有不同程度的抑制作用，有眾多學(xué)者對(duì)其作用效果和機(jī)制進(jìn)行試驗(yàn)研究。

在乳腺癌中，紫甘薯花青素可以抑制HER-2蛋白的過(guò)度表達(dá)，減少乳腺癌細(xì)胞自發(fā)二聚化和自磷酸化，抑制局部黏附激酶（FAK）活化，進(jìn)而抑制乳腺癌細(xì)胞遷移和轉(zhuǎn)移，因此紫甘薯花色苷具有抗乳腺癌的潛在活性[17]。馬建萍[18]發(fā)現(xiàn)紫甘薯花色苷通過(guò)circ_0003998/miR-145軸能夠降低乳腺癌MDAMB-231細(xì)胞的增殖程度、遷移力和侵襲力。兩種作用之間是否存在聯(lián)系暫無(wú)相關(guān)研究。同時(shí)，李衛(wèi)林[19]發(fā)現(xiàn)高濃度紫甘薯花色苷可改變BIU87膀胱癌細(xì)胞形態(tài)學(xué)結(jié)構(gòu)，可使BIU87膀胱癌細(xì)胞大小不一、無(wú)法貼壁生長(zhǎng)、生長(zhǎng)稀疏以及細(xì)胞結(jié)構(gòu)缺損，且采用CCK-8法檢測(cè)出了紫甘薯花色苷對(duì)膀胱癌細(xì)胞具有抑制作用，這種抑制作用具有劑量依賴性，但未對(duì)紫甘薯花色苷抑制腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)的機(jī)制進(jìn)行研究。

紫甘薯花色苷對(duì)肝癌細(xì)胞的生長(zhǎng)有一定的抑制作用，曹東旭[20]通過(guò)MTT實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)高濃度紫甘薯花色苷可以抑制HepG2人肝癌細(xì)胞的生長(zhǎng)，此抗癌功能可能與發(fā)酵紫薯中的多酚有關(guān)。經(jīng)HE（蘇木素-伊紅）染色，在顯微鏡觀察下，人肝癌HepG2細(xì)胞出現(xiàn)凋亡的特征，表現(xiàn)為細(xì)胞核固縮，胞膜不規(guī)則，出現(xiàn)新月形致密小體等，這種抑制作用同樣具有劑量依賴性。至于紫甘薯花色苷的作用機(jī)制，李佳睿[21]對(duì)其進(jìn)行了研究，以體外培養(yǎng)的人肝癌細(xì)胞SNU-387為模型，發(fā)現(xiàn)紫甘薯花色苷是通過(guò)影響MAPK信號(hào)通路誘導(dǎo)肝細(xì)胞凋亡抑制癌細(xì)胞生長(zhǎng)的，另外一方面可以促進(jìn)Caspase-8大量產(chǎn)生，發(fā)生級(jí)聯(lián)反應(yīng)，誘導(dǎo)肝細(xì)胞凋亡。李泓燁[22]發(fā)現(xiàn)紫甘薯花色苷通過(guò)抑制肝SNU-387癌細(xì)胞內(nèi)超氧化物歧化酶（SOD）水平上調(diào)活性氧含量，導(dǎo)致NF-kB通路、MAPK信號(hào)通路激活參與介導(dǎo)癌細(xì)胞凋亡。此外，幾乎所有慢性肝病可向肝硬化、肝癌發(fā)展，其中肝纖維化是一個(gè)共同的基本病理表現(xiàn)。隨著紫甘薯花色苷的深入研究，其抗氧化、抗炎、降低酒精肝損傷時(shí)降低谷草轉(zhuǎn)氨酶（AST）和谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT）活性水平及改善激活肝星狀細(xì)胞（HSC）表型的作用也被證實(shí)，這些對(duì)治療肝纖維化以及肝損傷都有著臨床應(yīng)用價(jià)值[22-25]。

紫甘薯花色苷可以促進(jìn)癌癥細(xì)胞（如乳腺癌細(xì)胞、膀胱癌細(xì)胞和肝癌細(xì)胞）的凋亡，主要是通過(guò)其抗氧化作用、抗炎、直接或通過(guò)影響細(xì)胞因子間接影響NF-kB、MAPK信號(hào)通路介導(dǎo)癌細(xì)胞凋亡。目前對(duì)紫甘薯花色苷即使有較多的研究，但是其作用并未被公眾所熟知和開發(fā)，其藥理機(jī)制的研究未有系統(tǒng)化的開展。紫甘薯花色苷作為天然產(chǎn)物與主流治療方式相比是否具有更小的毒副反應(yīng)、較好的治療效果以及如何應(yīng)用在臨床之中尚無(wú)定論，有待相關(guān)學(xué)者進(jìn)一步探究。

5 結(jié)語(yǔ)

紫甘薯花色苷在實(shí)驗(yàn)室的提取方面有較多的方法，提取方法各有優(yōu)劣，但由于缺乏對(duì)所有方法的統(tǒng)一比較和研究，且在不同實(shí)驗(yàn)室的影響因素下，很難單憑提取率得出哪種方法更好的結(jié)論，其中溶劑浸提法和樹脂吸附法分別為主流的提取和純化方式，各大科研人員也應(yīng)根本自身設(shè)備以及技術(shù)條件選擇適宜的提取方式。眾多研究表明紫甘薯花色苷具有較強(qiáng)的抑菌作用，但對(duì)分子水平的抗菌機(jī)理研究不夠徹底，仍需進(jìn)一步投入研究以開發(fā)其利用價(jià)值。

關(guān)于紫甘薯花色苷的抗氧化性目前有較多的研究，集中在體外自由基的清除率方面，有足夠證據(jù)證明紫甘薯花色苷的強(qiáng)抗氧化性，其抗氧化性是應(yīng)用在抑菌、食品業(yè)、抑制肝損傷、抗腫瘤等其他方面的基礎(chǔ)。紫甘薯花色苷可以促進(jìn)癌癥細(xì)胞（如乳腺癌細(xì)胞、膀胱癌細(xì)胞和肝癌細(xì)胞）的凋亡，主要是通過(guò)其抗氧化作用和抗炎作用直接或通過(guò)影響細(xì)胞因子間接影響信號(hào)通路介導(dǎo)癌細(xì)胞凋亡。目前對(duì)紫甘薯花色苷研究較多，但其作用并未被公眾所熟知和開發(fā)，其藥理機(jī)制的研究缺少系統(tǒng)化地開展。紫甘薯花色苷作為天然產(chǎn)物與主流治療方式相比是否具有更小的毒副反應(yīng)、較好的治療效果以及如何應(yīng)用在臨床之中尚無(wú)定論，有待進(jìn)一步研究。