劉雪梅，夏 偉

1.四川省醫(yī)學(xué)科學(xué)院·四川省人民醫(yī)院 門診部(成都 610072)；2.四川省醫(yī)學(xué)科學(xué)院·四川省人民醫(yī)院 內(nèi)分泌科(成都 610072)

冠狀動脈粥樣硬化性心臟病(coronary atherosclerotic heart disease，CHD)是一種常見的慢性進展性疾病，病理生理基礎(chǔ)為血管內(nèi)皮功能受損、脂質(zhì)沉積、血小板黏附和聚集，導(dǎo)致冠狀動脈粥樣硬化及管腔狹窄或閉塞，死亡風(fēng)險大[1]。CHD患者體內(nèi)為慢性低度炎癥狀態(tài)[2]，常伴有糖脂代謝紊亂[3]。目前大量研究[4-6]表明，遺傳、吸煙、年齡、血脂異常、高血壓、高血糖、慢性炎癥為CHD的主要危險因素，但具體發(fā)病機制尚不完全清楚。白細(xì)胞衍生趨化因子2(leukocyte cell-derived chemotaxin 2，LECT2)是新近發(fā)現(xiàn)的一種細(xì)胞因子，主要在肝臟分泌及表達(dá)[7]。既往有關(guān)LECT2的研究[8-10]主要集中在腫瘤和免疫反應(yīng)方面；近年研究[11-12]表明，LECT2還在糖脂代謝調(diào)節(jié)及內(nèi)皮細(xì)胞炎癥因子的表達(dá)中扮演重要角色。因此，推測LECT2可能參與了CHD的發(fā)生發(fā)展。目前國內(nèi)外尚無LECT2在CHD患者中發(fā)揮作用的相關(guān)研究報道。本研究旨在分析CHD患者血清LECT2水平的變化及其影響因素，并探討LECT2在CHD發(fā)生中的病理生理意義。

1 資料與方法

1.1 臨床資料

選取2019年5月至2020年5月就診于四川省人民醫(yī)院的100例CHD患者為CHD組。納入標(biāo)準(zhǔn)：符合CHD診斷[13]，即冠狀動脈造影發(fā)現(xiàn)心外膜下的冠狀動脈直徑狹窄程度>50%，或無創(chuàng)性檢查提示存在心肌缺血。選取同期66例年齡和性別與CHD組匹配的健康體檢者為對照組。排除標(biāo)準(zhǔn)：1)近1個月內(nèi)有胸痛發(fā)作或在胸痛發(fā)作期；2)合并傳染性疾病、自身免疫性疾病、糖尿病、嚴(yán)重肝腎功能或心功能不全；3)近期有急性感染、手術(shù)、創(chuàng)傷等應(yīng)激情況或使用糖皮質(zhì)激素、非甾體類抗炎藥。本研究得到四川省人民醫(yī)院臨床試驗倫理委員會批準(zhǔn)，研究對象均簽署知情同意書。

1.2 方法

1.2.1 基本資料收集 采集研究對象現(xiàn)病史、既往史和近期用藥情況，清晨空腹下測量身高、體重、血壓，計算體重指數(shù)(body mass index,BMI)。

1.2.2 生化指標(biāo)測定 采集研究對象空腹靜脈血樣，常溫下以3 000 r/min，離心10 min，離心半徑10 cm，分離上層血清保存于-80 ℃冰箱待用。應(yīng)用己糖激酶法測定空腹血糖(FPG)；酶學(xué)法測定空腹血脂，包括甘油三脂(TG)、總膽固醇 (TC)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-c)和低密度脂蛋白膽固醇(LDL-c)；化學(xué)發(fā)光法測定空腹胰島素(FINS)；散射比濁法測定超敏C反應(yīng)蛋白(hs-CRP)。血清LECT2的檢測采用酶聯(lián)免疫吸附試驗，試劑盒來源于日本MBL公司，實驗各步驟嚴(yán)格按照說明書進行。利用穩(wěn)態(tài)模型胰島素抵抗指數(shù)(HOMA2-IR)計算軟件(https://www.dtu.ox.ac.uk/homacalculator/ download.php)計算HOMA2-IR(評價胰島素抵抗程度優(yōu)于HOMA-IR)。

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法

采用SPSS 20.0統(tǒng)計軟件進行數(shù)據(jù)分析。定性資料采用例數(shù)(%)表示，組間比較采用2檢驗。定量資料如符合正態(tài)分布，以表示，組間比較采用t檢驗；如不符合正態(tài)分布(TG、hs-CRP、HOMA2-IR)，則以M(P25,P75)表示，統(tǒng)計分析前需進行對數(shù)轉(zhuǎn)換。采用Spearman相關(guān)、偏相關(guān)和逐步多元線性回歸分析LECT2的影響因素。檢驗水準(zhǔn)α除特別說明外均設(shè)定為0.05。

2 結(jié)果

2.1 兩組臨床資料及代謝特征比較

兩組年齡和性別構(gòu)成比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。CHD組LECT2、BMI、收縮壓(SBP)、舒張壓(DBP)、FPG、FINS、TC、TG、LDL-c、hs-CRP和HOMA2-IR均高于對照組(P<0.05)；HDL-c水平則低于對照組(P<0.05)(表1)。

表1 兩組臨床資料及代謝特征比較

2.2 CHD組血清LECT2與其他指標(biāo)簡單相關(guān)分析

Spearman相關(guān)分析提示，CHD組血清LECT2與BMI(r=0.313)、SBP(r=0.279)、FPG(r=0.208)、FINS(r=0.318)、TG(r=0.263)、LDL-c(r=0.232)、hs-CRP(r=0.388)和HOMA2-IR(r=0.425)呈正相關(guān)(P<0.05)；與HDL-c呈負(fù)相關(guān)(r=-0.453，P<0.05)；LECT2與年齡、性別、DBP和TC比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。偏相關(guān)分析顯示，在進一步校正年齡、性別和BMI的影響后，CHD組血清LECT2仍與SBP(r=0.221)、FINS(r=0.261)、hs-CRP(r=0.276)、HOMA2-IR(r=0.302)呈正相關(guān)，與HDL-c呈負(fù)相關(guān)(r=-0.335，P<0.05)(表2)。

表2 CHD組以LECT2為自變量進行Spearman相關(guān)分析

2.3 CHD組血清LECT2多元線性回歸分析

以LECT2為應(yīng)變量，以表2相關(guān)變量中BMI、SBP、FPG、FIN、TG、HDL-c、LDL-c、hs-CRP、HOMA2-IR為自變量進行逐步多元線性回歸分析。結(jié)果顯示，BMI、HDL-c、hs-CRP和HOMA2-IR是LECT2的獨立影響因素(R2=0.384，P<0.05)，回歸方程為：YLECT2=0.633XBMI-4.316XHDL-c+1.204Xhs-CRP+4.612XHOMA2-IR+10.165(表3)。

表3 CHD組LECT2的逐步線性回歸分析

3 討論

CHD是一種代謝性疾病，常伴有血糖、血脂和體脂分布異常[3]。以上異常代謝指標(biāo)會直接或間接破壞血管內(nèi)皮細(xì)胞功能和完整性，促進內(nèi)膜脂質(zhì)沉積，導(dǎo)致冠狀動脈粥樣硬化及管腔狹窄或閉塞，是CHD發(fā)生和發(fā)展的重要危險因素[4-5]。本研究中，與正常對照組比較，CHD患者BMI更高，并存在FPG、TC、TG、LDL-c、HDL-c紊亂和胰島素抵抗，符合一般CHD人群的代謝特征。

LECT2最早是從植物血球凝集素激活的人類T細(xì)胞白血病SKW3細(xì)胞培養(yǎng)液中分離出來的一種蛋白，對中性粒細(xì)胞具有趨化作用[14]。既往對LECT2研究[8-10]主要集中在腫瘤和免疫方面，近年來發(fā)現(xiàn)LECT2是一種肝臟因子，主要由肝細(xì)胞分泌[7]，與肥胖、脂肪肝、糖尿病等代謝性疾病關(guān)系密切。Okumura[15]在日本人群中發(fā)現(xiàn)，血清LECT2是一種肥胖相關(guān)蛋白，在肥胖和脂肪肝患者中明顯升高。曾惠嫻等[16]研究提示，初診2型糖尿病血漿LECT2水平較正常人高，合并脂肪肝時更為明顯，且與BMI、TG、HOMA-IR呈正相關(guān)；與HDL-c、HOMA-β(評估胰島β細(xì)胞功能的指標(biāo))呈負(fù)相關(guān)。本研究發(fā)現(xiàn)，CHD組LECT2水平較對照組明顯升高，且與BMI、HDL-c和HOMA2-IR獨立相關(guān)。這與Okumura[15]和曾惠嫻等[16]的臨床研究結(jié)果基本一致，說明LECT2與CHD患者的糖脂代謝異常關(guān)系密切。

目前，尚不清楚LECT2與CHD患者糖脂代謝異常的因果關(guān)系，但可從一些基礎(chǔ)研究中得到啟示。高脂喂養(yǎng)的肥胖大鼠模型血漿LECT2升高，而減輕體重后LECT2降低[17]。在C2C12肌管中，LECT2可激活c-Jun氨基末端激酶和干擾胰島素信號的傳導(dǎo)，進而降低骨骼肌胰島素敏感性；而敲除LECT2基因后，小鼠骨骼肌的胰島素抵抗明顯改善[11,18]。此外，LECT2還可誘導(dǎo)雷帕霉素靶點(mTOR)磷酸化，促進固醇調(diào)節(jié)元件結(jié)合蛋白-1(SREBP-1)分裂，導(dǎo)致肝臟和循環(huán)中的脂質(zhì)異常增多[12]。以上研究提示，LECT2在CHD的糖脂代謝紊亂中可能起到了重要作用。

CHD患者體內(nèi)為慢性低度炎癥狀態(tài)。慢性炎癥也是CHD的危險因素之一，可通過氧化應(yīng)激和炎癥反應(yīng)，損傷血管內(nèi)皮細(xì)胞，促進動脈粥樣硬化的進程[19]，但具體機制尚不完全清楚。近年研究[12]發(fā)現(xiàn)，LECT2具有一定的促炎作用。LECT2可提髙內(nèi)皮細(xì)胞和巨噬細(xì)胞中腫瘤壞死因子(TNF-α)、白細(xì)胞介素(IL-1β)的表達(dá)，而LECT2敲除可減輕脂多糖誘導(dǎo)的小鼠肝臟炎癥反應(yīng)，降低TNF-α和γ-干擾素的產(chǎn)生。hs-CRP也是一種重要的炎性因子，主要在肝臟產(chǎn)生，CHD、糖尿病、感染性疾病、自身免疫性疾病等患者血清中hs-CRP會有不同程度升高[2,20-22]。正常人群LECT2與hs-CRP水平呈正相關(guān)[15]，膿毒血癥患者血清LECT2水平升高，并與機體炎癥反應(yīng)程度有關(guān)[23]，但在糖尿病和肥胖患者中并未發(fā)現(xiàn)二者相關(guān)關(guān)系，可能與不同種族、年齡和樣本量大小有關(guān)[16]。本研究為避免對CHD慢性炎癥的干擾，故排除合并感染、自身免疫性疾病、應(yīng)激狀態(tài)和使用抗炎藥物的CHD患者。本研究發(fā)現(xiàn)，CHD患者血清hs-CRP水平明顯升高，且為LECT2的獨立影響因素。因而，推測LECT2可能參與了CHD的冠狀動脈粥樣硬化炎癥作用過程。 但本研究尚存在一定局限性：1)樣本量偏小，結(jié)果可能存在偏倚，今后將擴大樣本量進一步驗證；2)只檢測炎癥因子hs-CRP，未評估LECT2與其他炎癥指標(biāo)如TNF-α、IL-1β的相關(guān)關(guān)系；3)為觀察性研究，無法得出LECT2與其他影響因素的因果關(guān)系。

綜上所述，本研究發(fā)現(xiàn)CHD患者血清LECT2水平升高，且與CHD的危險因素如糖脂代謝紊亂、慢性炎癥密切相關(guān)，提示LECT2可能參與了CHD發(fā)生發(fā)展的病理生理過程。更多的基礎(chǔ)和臨床干預(yù)研究證據(jù)將有助于進一步了解CHD患者LECT2升高的臨床意義，并為CHD的治療提供新的方向。