王浩雨，付偉超，于文穎，梁昊岳

（中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院血液病醫(yī)院，中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院血液學(xué)研究所，實(shí)驗(yàn)血液學(xué)國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，國(guó)家血液系統(tǒng)疾病臨床醫(yī)學(xué)研究中心，天津 300020）

0 引言

急性髓細(xì)胞白血病（acute myelocytic leukemia，AML）是最為常見(jiàn)的一類(lèi)急性白血病，這類(lèi)疾病的發(fā)病機(jī)制十分復(fù)雜，患者預(yù)后情況普遍不理想。探究AML患者骨髓細(xì)胞的組成情況和比例，進(jìn)而分析AML患者的骨髓細(xì)胞代謝情況，對(duì)AML發(fā)病機(jī)制的研究具有重要作用[1]。在目前常用的分析方法中，使用流式細(xì)胞儀可以準(zhǔn)確地檢測(cè)樣本中各種細(xì)胞的組成和比例，因此流式細(xì)胞術(shù)是開(kāi)展AML基礎(chǔ)和臨床研究不可或缺的方法[2-3]。在AML患者骨髓中，正常細(xì)胞和AML細(xì)胞主要以單細(xì)胞形式存在，即為天然單細(xì)胞懸液[4]。研究人員可以使用不同的熒光素耦聯(lián)抗體來(lái)分別標(biāo)記AML患者骨髓中的淋巴細(xì)胞、單核細(xì)胞、粒細(xì)胞和AML細(xì)胞等細(xì)胞群[5]。傳統(tǒng)的流式分析方法以流式散點(diǎn)圖為依據(jù)來(lái)區(qū)分各種細(xì)胞群體，用散點(diǎn)圖的聚群程度來(lái)計(jì)算各細(xì)胞群體的比例[6]。目前，應(yīng)用包括t-分布鄰域嵌入（t-distributed stochastic neighbor embedding，t-SNE）算法、統(tǒng)一流形逼近與投影（uniform manifold approximation and projection，UMAP）算法和基于快速傅里葉變換加速插值的t-SNE（about fast Fourier transform-accelerated interpolation-based t-SNE，F(xiàn)lt-SNE）算法在內(nèi)的3種FlowJo生物信息學(xué)方法，可以直觀地描述淋巴細(xì)胞、單核細(xì)胞、粒細(xì)胞和AML細(xì)胞的分布和比例。與此同時(shí)，利用熱圖分析可以發(fā)現(xiàn)AML患者骨髓中各種細(xì)胞的抗原表達(dá)情況存在差異[7]。在基礎(chǔ)和臨床研究中，因具有快速靈敏、操作便捷、與生物信息學(xué)緊密結(jié)合的技術(shù)優(yōu)勢(shì)，基于流式細(xì)胞儀的多激光多色流式分析和高速高通量流式分選技術(shù)在白血病患者代謝研究中具有一定的應(yīng)用價(jià)值。

AML患者骨髓細(xì)胞代謝與糖代謝相關(guān)基因如醛縮酶B（ALDOB）、異檸檬酸脫氫酶（IDH）、蘋(píng)果酸脫氫酶2（MDH2）和琥珀酸脫氫酶B（SDHB），脂代謝相關(guān)基因如脂蛋白脂肪酶（LPL），酪氨酸激酶如髓過(guò)氧化物酶（MPO），維生素合成相關(guān)基因如視黃酸受體α（RARA）以及腫瘤相關(guān)基因如原癌基因（RET）密切相關(guān)。為了從基因水平探索AML患者骨髓細(xì)胞的代謝情況，本研究基于生物信息學(xué)方法，從美國(guó)國(guó)立生物技術(shù)信息中心（National Center for Biotechnology Information，NCBI）數(shù)據(jù)庫(kù)中獲取通過(guò)細(xì)胞測(cè)序儀采集的健康者和AML患者骨髓細(xì)胞的表達(dá)譜數(shù)據(jù)，使用SeqGeqTM軟件對(duì)測(cè)序數(shù)據(jù)進(jìn)行歸一化并整合分析，用t-SNE算法和UMAP算法降維方法分析各自的細(xì)胞分群情況，并分析骨髓細(xì)胞中與細(xì)胞代謝相關(guān)基因的表達(dá)情況?；诩?xì)胞測(cè)序儀采集的表達(dá)譜數(shù)據(jù)在研究AML患者的遺傳背景、細(xì)胞分化和物質(zhì)代謝等方面具有重要的作用，這些研究體現(xiàn)了以一代、二代和三代測(cè)序技術(shù)為基礎(chǔ)的細(xì)胞測(cè)序儀在白血病患者的精準(zhǔn)診斷、規(guī)范治療和預(yù)后判定方面不可或缺的應(yīng)用價(jià)值。

本研究將AML患者的骨髓細(xì)胞進(jìn)行流式分析，特別是通過(guò)t-SNE算法、UMAP算法和Flt-SNE算法3種降維分析方式，描述AML患者骨髓細(xì)胞的分群情況，彌補(bǔ)了傳統(tǒng)流式分析中因逐級(jí)圈門(mén)而不能直觀呈現(xiàn)細(xì)胞群體檢測(cè)結(jié)果的不足之處。同時(shí)，本研究側(cè)重分析AML患者和健康者骨髓細(xì)胞的代謝相關(guān)基因的表達(dá)水平差異，從而揭示AML患者在骨髓代謝方面的缺陷，為探索AML的發(fā)病機(jī)制和研發(fā)以代謝為靶點(diǎn)的相關(guān)藥物奠定基礎(chǔ)。

1 材料和方法

1.1 材料與儀器

本文涉及的AML患者骨髓細(xì)胞來(lái)自本院病理中心，流式管（貨號(hào)352054）以及CD16-FITC、CD117-PE、CD34-PerCP-Cy5.5、CD38-PE-Cy7等抗體均購(gòu)自美國(guó)碧迪公司。所使用儀器包括CantoⅡ流式細(xì)胞分析儀和LWA自動(dòng)裂解儀，均購(gòu)自美國(guó)碧迪公司。

1.2 流式細(xì)胞檢測(cè)及分析

收集1例AML患者的骨髓2～3 mL。取2支流式管，分別標(biāo)記為對(duì)照管和測(cè)定管，對(duì)照管中加入同型對(duì)照抗體20μL，測(cè)定管分別加入標(biāo)記CD16-FITC、CD117-PE、CD34-PerCP-Cy5.5、CD38-PE-Cy7、CD13-APC、HLA-DR-APC-Cy7、CD11b-BV421和CD45-V500抗體各20μL，每管分別加入AML患者的骨髓100μL；混勻后室溫避光孵育15～20 min；使用LWA自動(dòng)裂解儀裂解細(xì)胞，固定，洗滌；采用流式細(xì)胞儀檢測(cè)；最后，使用FlowJoTMv10.6.1流式細(xì)胞分析軟件（美國(guó)碧迪公司）進(jìn)行流式細(xì)胞分析和生物信息學(xué)分析。

1.3 測(cè)序數(shù)據(jù)來(lái)源及分析

AML患者和健康者的表達(dá)譜數(shù)據(jù)來(lái)自NCBI GEO數(shù)據(jù)庫(kù)，使用SeqGeqTMv1.7分析軟件（美國(guó)碧迪公司）進(jìn)行代謝相關(guān)基因的表達(dá)分析。

2 結(jié)果

2.1 AML患者骨髓細(xì)胞的流式細(xì)胞分析結(jié)果

通過(guò)FlowJoTM軟件對(duì)獲取的AML患者骨髓細(xì)胞的流式數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，發(fā)現(xiàn)CD45陰性區(qū)域細(xì)胞是AML細(xì)胞，占36.8%；CD45陽(yáng)性并且顆粒度較小區(qū)域細(xì)胞是淋巴細(xì)胞，占12.9%；CD45陽(yáng)性并且顆粒度較大區(qū)域細(xì)胞是粒細(xì)胞，占25.3%[如圖1（a）所示]；CD16和CD11b雙陽(yáng)區(qū)域細(xì)胞是單核細(xì)胞，占3.72%[如圖1（b）所示]；CD117陽(yáng)性區(qū)域細(xì)胞是AML細(xì)胞，占36.8%，CD117陰性并且顆粒度較大區(qū)域細(xì)胞是粒細(xì)胞，占25.3%[如圖1（c）所示]；CD34和CD38雙陽(yáng)區(qū)域的細(xì)胞是AML細(xì)胞，占36.5%[如圖1（d）所示]。依據(jù)CD45、CD117、CD34和CD38等表面標(biāo)志圈選的AML細(xì)胞群比例具有一致性。

圖1 AML患者骨髓細(xì)胞的流式細(xì)胞分析

2.2 基于流式細(xì)胞術(shù)的AML患者骨髓細(xì)胞的生物信息學(xué)分析結(jié)果

使用FlowJoTM的生物信息學(xué)分析模塊對(duì)流式數(shù)據(jù)進(jìn)行t-SNE算法、UMAP算法和Flt-SNE算法分析，發(fā)現(xiàn)AML患者細(xì)胞中包含淋巴細(xì)胞、單核細(xì)胞、粒細(xì)胞和AML細(xì)胞4群細(xì)胞，其中AML細(xì)胞群體所占比例最高，表明AML患者骨髓中的腫瘤負(fù)荷較高。t-SNE算法、UMAP算法和Flt-SNE算法分析結(jié)果相近，表明3種生物信息學(xué)方法都可以有效地識(shí)別骨髓細(xì)胞的類(lèi)群，實(shí)現(xiàn)對(duì)流式數(shù)據(jù)的降維分析功能[如圖2（a）～（c）所示]。但與UMAP算法和Flt-SNE算法相比，t-SNE算法分析對(duì)4種類(lèi)群細(xì)胞的分群更為集中，淋巴細(xì)胞（藍(lán)色）和單核細(xì)胞（紅色）的各個(gè)亞群處在相近的位置區(qū)域，表明t-SNE算法可以很好地依據(jù)細(xì)胞亞群的異質(zhì)性對(duì)細(xì)胞類(lèi)群進(jìn)行區(qū)分。在3種分析結(jié)果中，AML細(xì)胞群體聚集性較好，體現(xiàn)出AML細(xì)胞的均一性和較低的異質(zhì)性。這些結(jié)果與AML細(xì)胞在患者骨髓中的分化過(guò)程具有較好的一致性，低分化的AML細(xì)胞對(duì)骨髓微環(huán)境中細(xì)胞代謝產(chǎn)生重要影響。

通過(guò)AML患者骨髓細(xì)胞的熱圖分析發(fā)現(xiàn)，骨髓細(xì)胞被分為Pop0、Pop1、Pop2和Pop3 4群[如圖2（d）所示]。通過(guò)蛋白的表達(dá)情況分析，Pop0這類(lèi)群細(xì)胞主要表達(dá)CD45蛋白，說(shuō)明Pop0主要是淋巴細(xì)胞。Pop1這類(lèi)群細(xì)胞主要表達(dá)CD45蛋白，且高表達(dá)HLA-DR蛋白，說(shuō)明Pop1主要是粒細(xì)胞。Pop2這類(lèi)群細(xì)胞主要表達(dá)CD34、CD38和CD117蛋白，說(shuō)明Pop2主要是AML細(xì)胞。Pop3這類(lèi)群細(xì)胞主要表達(dá)CD45、CD16和CD11b蛋白，說(shuō)明Pop3主要是單核細(xì)胞。因此，Pop0、Pop1、Pop2和Pop3分別代表了淋巴細(xì)胞、粒細(xì)胞、AML細(xì)胞和單核細(xì)胞。

進(jìn)一步通過(guò)FlowSOM聚類(lèi)分析，發(fā)現(xiàn)與熱圖分析結(jié)果相同的Pop0、Pop1、Pop2和Pop3群體中Pop2（AML細(xì)胞）群體所占比例最高，其次為粒細(xì)胞、淋巴細(xì)胞和單核細(xì)胞，如圖2（e）所示，自下而上的細(xì)胞群體比例逐漸降低。FlowSOM聚類(lèi)分析結(jié)果與傳統(tǒng)流式細(xì)胞分析的AML患者骨髓中AML細(xì)胞（36.8%）、粒細(xì)胞（25.3%）、淋巴細(xì)胞（12.9%）和單核細(xì)胞（3.72%）比例分布情況相符。

圖2 基于流式細(xì)胞術(shù)的AML患者骨髓細(xì)胞的生物信息學(xué)分析結(jié)果

2.3 基于測(cè)序技術(shù)的AML患者和健康者的骨髓細(xì)胞生物信息學(xué)分析結(jié)果

基于NCBI數(shù)據(jù)庫(kù)的健康者和AML患者骨髓細(xì)胞的測(cè)序數(shù)據(jù)，將SeqGeqTM測(cè)序分析軟件用于數(shù)據(jù)的歸一化和整合分析。根據(jù)表達(dá)譜得到的基因表達(dá)情況，應(yīng)用t-SNE算法和UMAP算法對(duì)骨髓細(xì)胞進(jìn)行分類(lèi)分析。通過(guò)t-SNE算法分析發(fā)現(xiàn)，與健康者骨髓細(xì)胞群體相比，AML患者骨髓細(xì)胞群體明顯增加了一群細(xì)胞，將二者合并分析后，發(fā)現(xiàn)增加的細(xì)胞群體為AML細(xì)胞，并且所占細(xì)胞群比例較高[如圖3（a）～（c）所示]。UMAP算法分析也得到了類(lèi)似的結(jié)果[如圖3（d）～（f）所示]，可以看出由于AML細(xì)胞擠壓了骨髓微環(huán)境中正常細(xì)胞的生長(zhǎng)空間，正常細(xì)胞群體比例出現(xiàn)了明顯的縮減，這將影響骨髓細(xì)胞代謝和骨髓造血的正常功能。

圖3 基于測(cè)序技術(shù)的AML患者和健康者的骨髓細(xì)胞生物信息學(xué)分析結(jié)果

通過(guò)對(duì)t-SNE算法結(jié)果中的不同細(xì)胞群體的表面標(biāo)志物的識(shí)別，健康者的骨髓細(xì)胞可以被分為明顯的4群細(xì)胞，即紅細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、單核細(xì)胞和粒細(xì)胞[如圖4（a）所示]，并且發(fā)現(xiàn)健康者骨髓細(xì)胞中ALDOB基因不表達(dá)，IDH、MDH2、SDHB、MPO和RARA基因表達(dá)量較高，LPL和RET基因表達(dá)量較低[如圖4（b）所示]。

圖4 基于測(cè)序技術(shù)的健康者骨髓細(xì)胞的代謝相關(guān)基因表達(dá)分析結(jié)果

同時(shí)，AML患者的骨髓細(xì)胞可以被分為明顯的5群細(xì)胞，即紅細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、單核細(xì)胞、粒細(xì)胞和AML細(xì)胞[如圖5（a）所示]。與健康者的骨髓細(xì)胞相比，AML患者的骨髓細(xì)胞中的LPL基因不表達(dá)，IDH、MDH2和SDHB基因的表達(dá)量明顯升高，MPO基因表達(dá)水平明顯降低，ALDOB和RET基因表達(dá)水平升高[如圖5（b）所示]。

圖5 基于測(cè)序技術(shù)的AML患者骨髓細(xì)胞的代謝相關(guān)基因表達(dá)分析結(jié)果

與健康者相比，AML患者的ALDOB、IDH、MDH2和SDHB基因的表達(dá)水平偏高，說(shuō)明AML患者的糖代謝水平發(fā)生了顯著變化，特別體現(xiàn)在細(xì)胞有氧呼吸中的三羧酸循環(huán)反應(yīng)[如圖6（a）～（d）所示]。同時(shí)，AML患者的脂代謝相關(guān)基因LPL的表達(dá)水平明顯低于健康者，說(shuō)明由于LPL不足，AML患者將富含甘油三酯的脂蛋白水解為游離脂肪酸的能力較差，導(dǎo)致患者存在高甘油三酯的風(fēng)險(xiǎn)，不利于患者的生存和預(yù)后[如圖6（e）所示]。作為酪氨酸激酶的一種，MPO的表達(dá)水平影響著參與特定反應(yīng)的氨基酸和蛋白質(zhì)的消費(fèi)速度。AML患者的MPO基因表達(dá)水平明顯低于健康者，反映出AML患者骨髓細(xì)胞潛在的蛋白質(zhì)代謝異常[如圖6（f）所示]。AML患者中低表達(dá)的RARA基因不利于維生素和胡蘿卜素的合成，而較低的維生素水平不利于細(xì)胞的生長(zhǎng)和分化[如圖6（g）所示]。腫瘤相關(guān)基因RET的高表達(dá)不僅影響著AML患者骨髓的糖脂代謝，還在細(xì)胞的分化、生長(zhǎng)、遷移和存活中發(fā)揮作用[如圖6（h）所示]。

圖6 健康者和AML患者骨髓細(xì)胞的代謝相關(guān)基因表達(dá)結(jié)果

3 討論

在AML的傳統(tǒng)診斷方法中，流式細(xì)胞儀發(fā)揮著重要的鑒別作用[8]。傳統(tǒng)流式分析結(jié)果表明，AML細(xì)胞的標(biāo)志蛋白包括CD34、CD38和CD117等。在與正常血細(xì)胞（淋巴細(xì)胞、粒細(xì)胞和單核細(xì)胞）進(jìn)行區(qū)分時(shí)，淋巴細(xì)胞和粒細(xì)胞的主要標(biāo)志蛋白是CD45，但二者可依據(jù)顆粒度來(lái)進(jìn)一步區(qū)分。單核細(xì)胞的標(biāo)志蛋白主要為CD16、CD45和CD11b。本研究中，AML患者骨髓樣本中AML細(xì)胞、粒細(xì)胞、淋巴細(xì)胞和單核細(xì)胞所占比例分別為36.8%、25.3%、12.9%和3.72%，符合AML患者骨髓細(xì)胞分布的規(guī)律，反映了AML細(xì)胞在骨髓中大量增生造成對(duì)其他各系造血細(xì)胞生長(zhǎng)的負(fù)面影響。這些結(jié)果表明，通過(guò)流式細(xì)胞儀可以很好地區(qū)分AML患者骨髓細(xì)胞中的正常和異常造血細(xì)胞群體，在此基礎(chǔ)上，流式細(xì)胞儀為惡性血液腫瘤患者的正常造血和惡性增殖性造血的比較研究提供了技術(shù)保障。

為了探索一種能更好地表征AML患者骨髓細(xì)胞分布情況的方式，基于流式細(xì)胞術(shù)的生物信息學(xué)分析方法（t-SNE算法、UMAP算法和Flt-SNE算法）被用于AML患者骨髓數(shù)據(jù)的分析[9]。結(jié)果表明，AML患者骨髓中AML細(xì)胞的比例最高，導(dǎo)致AML患者骨髓中的正常血細(xì)胞功能受損和血液系統(tǒng)功能紊亂。這一結(jié)果與經(jīng)典流式分析所得到的結(jié)論一致，說(shuō)明基于流式細(xì)胞術(shù)的生物信息學(xué)分析可以彌補(bǔ)逐級(jí)圈門(mén)方式的不足，直觀地呈現(xiàn)骨髓細(xì)胞各群體的分布情況，提升了數(shù)據(jù)的可視化水平，很好地反映了AML患者骨髓異常造血的疾病狀態(tài)。

為了研究AML患者的骨髓代謝情況，本研究分析了與骨髓細(xì)胞代謝相關(guān)的ALDOB、IDH、MDH2、SDHB、LPL、MPO、RARA和RET基因的表達(dá)情況。其中，ALDOB基因表達(dá)醛縮酶B，ALDOB基因變異導(dǎo)致遺傳性果糖不耐受。IDH基因編碼產(chǎn)生異檸檬酸脫氫酶，催化異檸檬酸氧化脫羧為α-酮戊二酸，這是三羧酸循環(huán)的限速步驟。MDH2基因產(chǎn)生的蘋(píng)果酸脫氫酶，在檸檬酸循環(huán)中，催化蘋(píng)果酸轉(zhuǎn)變?yōu)椴蒗Ｒ宜醄10]。SDH是一種位于線粒體內(nèi)膜上的復(fù)合酶，催化琥珀酸氧化為延胡索酸[11]，由4個(gè)核編碼亞基組成。SDHB是琥珀酸脫氫酶的一個(gè)亞基，其基因突變導(dǎo)致副神經(jīng)節(jié)瘤和嗜鉻細(xì)胞瘤[12]。LPL編碼的脂蛋白脂肪酶可將甘油三酯分解為游離脂肪酸和單酸甘油酯。LPL在心肌、骨骼肌、下丘腦等組織中表達(dá)的減少或缺失均可導(dǎo)致機(jī)體出現(xiàn)嚴(yán)重的糖脂代謝紊亂[13]。MPO是一種在髓系分化過(guò)程中合成的血紅素蛋白，是髓細(xì)胞的特異性標(biāo)志[14]，是中性粒細(xì)胞嗜苯胺藍(lán)顆粒中的主要成分。RARA基因產(chǎn)生維甲酸受體，其與早幼粒細(xì)胞白血病基因之間的易位與急性早幼粒細(xì)胞白血病有關(guān)[15-17]。急性早幼粒細(xì)胞白血病是一種經(jīng)全反式維甲酸治療后完全緩解率較高的AML。RET基因編碼的跨膜蛋白R(shí)ET屬于一種受體酪氨酸激酶，其參與的信號(hào)通路包括PI3K-AKT-mTOR途徑[18-19]以及RASRAF-MEK-ERK途徑，而RET基因突變可能導(dǎo)致腫瘤的發(fā)生[20]。

本研究發(fā)現(xiàn)，AML患者骨髓細(xì)胞的ALDOB基因表達(dá)量升高，醛縮酶B異常表達(dá)，導(dǎo)致AML患者骨髓細(xì)胞的糖代謝紊亂。AML患者骨髓細(xì)胞的IDH基因表達(dá)量異常升高，使異檸檬酸更多、更快地氧化脫羧為α-酮戊二酸。同時(shí)，AML患者骨髓細(xì)胞的MDH2和SDHB基因表達(dá)量也出現(xiàn)異常升高，使蘋(píng)果酸和琥珀酸更多、更快地轉(zhuǎn)變?yōu)椴蒗Ｒ宜岷脱雍魉帷＿@些基因的異常表達(dá)導(dǎo)致AML患者出現(xiàn)糖代謝途徑異常。在脂代謝方面，AML患者骨髓細(xì)胞的LPL基因不表達(dá)，使甘油三酯不能被分解為游離脂肪酸和單酸甘油酯，從而導(dǎo)致脂代謝途徑異常。同時(shí)，AML患者骨髓細(xì)胞的MPO基因表達(dá)量顯著下降，說(shuō)明AML患者造血系統(tǒng)髓系細(xì)胞分化發(fā)生明顯異常。AML患者骨髓細(xì)胞的RARA基因表達(dá)異常下降，說(shuō)明AML患者骨髓細(xì)胞中急性早幼粒細(xì)胞白血病誘導(dǎo)風(fēng)險(xiǎn)加劇。AML患者骨髓細(xì)胞的RET基因表達(dá)異常升高，說(shuō)明AML患者骨髓中發(fā)生了腫瘤細(xì)胞的異常擴(kuò)增。這些結(jié)果表明，細(xì)胞測(cè)序儀可以精確地采集AML患者骨髓細(xì)胞的基因表達(dá)信息，為從基因的轉(zhuǎn)錄和表達(dá)水平等角度研究AML患者在代謝方面的缺陷奠定堅(jiān)實(shí)基礎(chǔ)。

綜上所述，本研究基于流式細(xì)胞術(shù)和生物信息學(xué)技術(shù)，對(duì)AML患者的骨髓細(xì)胞分布和代謝情況進(jìn)行分析。AML患者骨髓細(xì)胞與健康者骨髓細(xì)胞的代謝水平存在差異，這種差異可能來(lái)源于糖脂代謝等相關(guān)基因的異常表達(dá)。在未來(lái)的研究中，可以通過(guò)對(duì)骨髓代謝相關(guān)基因的序列進(jìn)行進(jìn)一步研究，探索AML患者骨髓細(xì)胞中與代謝相關(guān)基因的突變方式和數(shù)量，從而為AML等血液系統(tǒng)疾病的治療提供新靶點(diǎn)。因條件所限，本研究中樣本例數(shù)較少，但較好地反映了AML患者的骨髓代謝情況。在未來(lái)的工作中，將擴(kuò)大樣本規(guī)模，進(jìn)一步應(yīng)用流式細(xì)胞術(shù)和生物信息學(xué)分析，從遺傳學(xué)角度探索AML患者的骨髓細(xì)胞代謝情況，為血液學(xué)和細(xì)胞生物學(xué)相關(guān)研究奠定基礎(chǔ)。