亚洲免费av电影一区二区三区,日韩爱爱视频,51精品视频一区二区三区,91视频爱爱,日韩欧美在线播放视频,中文字幕少妇AV,亚洲电影中文字幕,久久久久亚洲av成人网址,久久综合视频网站,国产在线不卡免费播放

        ?

        離心分配色譜法對(duì)達(dá)烏里芯芭中毛蕊花糖苷和異毛蕊花糖苷的分離純化

        2021-12-21 08:47:50張明旭李旻輝
        關(guān)鍵詞:分配

        夏 瑩,張明旭,秦 玲,高 冰,李旻輝,

        (1.內(nèi)蒙古自治區(qū)中醫(yī)藥研究所,內(nèi)蒙古 呼和浩特 010020;2.包頭醫(yī)學(xué)院)

        達(dá)烏里芯芭(Cymbaria dahurica L.)是一種多年生草本,別名芯芭、大黃花和白蒿茶,蒙名興安奈-哈吞-額布斯,主要生于典型草原、荒漠草原和山地草原上,在內(nèi)蒙古呼倫貝爾市、赤峰市、烏蘭察布、包頭市等地區(qū)廣泛分布。達(dá)烏里芯芭是一種傳統(tǒng)蒙藥材,蒙藥名為韓琴色日高,以全草入藥,具有祛風(fēng)濕、止血利尿等功效,主治風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、月經(jīng)過多、吐血、腎炎水腫、黃水瘡等病癥[1]。

        目前對(duì)于達(dá)烏里芯芭化學(xué)成分的研究主要集中于環(huán)烯醚萜等成分[2]。在課題組的前期研究中,首次發(fā)現(xiàn)達(dá)烏里芯芭中含有毛蕊花糖苷(Acteoside)和異毛蕊花糖苷(Isoacteoside)[3],其化學(xué)結(jié)構(gòu)式如圖1所示。毛蕊花糖苷具有廣泛的藥理活性,如腎功能保護(hù)、免疫調(diào)節(jié)、抗氧化、抗細(xì)胞凋亡、抗高血壓等作用[4]。異毛蕊花糖苷也在體內(nèi)體外實(shí)驗(yàn)中展現(xiàn)出了防止神經(jīng)紊亂和認(rèn)知障礙等作用[5]。

        圖1 毛蕊花糖苷(Acteoside)和異毛蕊花糖苷(Isoacteoside)的化學(xué)結(jié)構(gòu)式

        離心分配色譜法(centrifugal partition chromatography, CPC)是現(xiàn)代逆流色譜法中的一種液-液分配色譜技術(shù)。物質(zhì)分離的原理是基于其在兩種不相容的溶液中不同的分配系數(shù)而實(shí)現(xiàn)的,其簡(jiǎn)單、重復(fù)性好、適合分離天然產(chǎn)物中活性成分的特性受到研究人員的青睞[6]。雖然在以往的研究中,已有對(duì)其他植物中毛蕊花糖苷和異毛蕊花糖苷的分離,如曹馨元等人使用中壓柱色譜技術(shù)分離制備毛蕊花糖苷和異毛蕊花糖苷單體[7]、常敬娟使用制備液相色譜分離了北美車前草中的毛蕊花糖苷[8]。而離心分配色譜可以實(shí)現(xiàn)更高的生產(chǎn)效率和更低的生產(chǎn)成本,對(duì)毛蕊花糖苷和異毛蕊花糖苷的開發(fā)具有重要意義。

        本研究旨在探索一種使用離心分配色譜法對(duì)達(dá)烏里芯芭中的毛蕊花糖苷和異毛蕊花糖苷進(jìn)行分離純化的方法,為進(jìn)一步實(shí)現(xiàn)達(dá)烏里芯芭產(chǎn)業(yè)化的開發(fā)利用和毛蕊花糖苷、異毛蕊花糖苷的廣泛應(yīng)用提供途徑。

        1 材料與試劑

        1.1藥材來源 達(dá)烏里芯芭藥材于2018年6月采集于內(nèi)蒙古自治區(qū)錫林郭勒盟東烏珠穆沁旗賀斯格烏拉農(nóng)牧場(chǎng)馬希拉哈達(dá)。樣品由包頭醫(yī)學(xué)院生藥教研室張春紅教授鑒定為玄參科(Scrophulariaceae)芯芭屬(Cymbaria L.)的植物達(dá)烏里芯芭(Cymbaria daurica L.)。

        1.2試劑與儀器 毛蕊花糖苷標(biāo)準(zhǔn)品(批號(hào): HE141730198)、異毛蕊花糖苷標(biāo)準(zhǔn)品(批號(hào): HA141444298)采購于成都普菲德生物技術(shù)有限公司;乙醇、石油醚、乙酸乙酯、正丁醇等試劑均為分析純,甲醇和乙腈為色譜純。十萬分之一電子天平(上海精密科學(xué)儀器有限公司);IKA RV 10型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀(上海焓佩機(jī)電設(shè)備有限公司);XJB-40-B型純水儀(沈陽欣潔科技有限公司);PLC 2050離心分配色譜設(shè)備(北京吉爾森科技有限公司);UltiMate 3000型高效液相色譜儀(美國熱電公司);分液漏斗、燒杯等玻璃儀器產(chǎn)于四川屬牛玻璃儀器有限公司。

        2 方法與結(jié)果

        2.1毛蕊花糖苷和異毛蕊花糖苷的提取 稱取干燥達(dá)烏里芯芭全草1 450 g,將其粉碎成中細(xì)粉(過四號(hào)篩)。采用加熱回流法,用70 %乙醇提取1 h(物料比1∶10),靜置冷卻后過濾提取液。按照上述方法反復(fù)提取3次。合并提取液,使用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀進(jìn)行減壓濃縮,得到醇提取物粗浸膏362.5 g。將醇提取物粗浸膏加水溶解后,依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇進(jìn)行萃取,各部分萃取液分別用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀減壓濃縮成浸膏,最終得到石油醚部位浸膏55.91 g,乙酸乙酯部位浸膏21.47 g,正丁醇部位浸膏110.77 g和水部位浸膏174.26 g。經(jīng)高效液相色譜法檢測(cè),毛蕊花糖苷和異毛蕊花糖苷主要存在于正丁醇部分。

        2.2毛蕊花糖苷和異毛蕊花糖苷的分離 將乙酸乙酯、正丁醇和超純水按照體積比4∶1∶5的比例充分混合,配備離心分配色譜溶劑系統(tǒng)[9]。溶劑系統(tǒng)在分液漏斗中靜置過夜,取上相作為固定相,下相為流動(dòng)相。將固定相和流動(dòng)相分別在常溫,80W的條件下,超聲15 min除氣泡備用。稱取萃取得到的正丁醇浸膏樣品101.3 mg溶解在10 mL下相中,經(jīng)0.45 μm微孔濾膜過濾,作為樣品備用。

        高速離心分配色譜儀器設(shè)置為降相模式,以10 mL/min的流速和500 r/min的轉(zhuǎn)速將固定相泵入色譜柱中;12 min后,調(diào)節(jié)流速為3 mL/min,轉(zhuǎn)速為1500 r/min后再注入流動(dòng)相,18 min達(dá)到平衡狀態(tài),即可進(jìn)樣。

        將樣品由進(jìn)樣閥注入,設(shè)定高速離心分配色譜儀器運(yùn)轉(zhuǎn)時(shí)間90 min,用紫外檢測(cè)器在320 nm波長(zhǎng)下檢測(cè),自動(dòng)收集到樣品管中(每管10 mL)。收集液均經(jīng)高效液相色譜法(HPLC)鑒定,將組分相同部分進(jìn)行合并。合并后的組分再次注入進(jìn)樣閥,高速離心分配色譜儀器設(shè)定運(yùn)轉(zhuǎn)時(shí)間90 min,用紫外檢測(cè)器在320 nm波長(zhǎng)下檢測(cè),自動(dòng)收集到樣品管中(每管10 mL),收集液經(jīng)高效液相色譜法(HPLC)鑒定,將相同部分合并。最終將合并液進(jìn)行減壓濃縮至干,得到目標(biāo)化合物毛蕊花糖苷和異毛蕊花糖苷,并計(jì)算得率。得率計(jì)算公式如下:

        2.3結(jié)果 所得樣品均為白色粉末,與標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行HPLC檢測(cè)對(duì)比,樣品1為毛蕊花糖苷4.41 mg,純度為95.49 %, 得率為0.33 %;樣品2為異毛蕊花糖苷0.89 mg,純度為94.83 %,得率為0.07 %。如圖2所示。

        圖2 毛蕊花糖苷和異毛蕊花糖苷高效液相色譜圖

        3 討論

        苯乙醇苷類化合物毛蕊花糖苷和異毛蕊花糖苷在自然界中分布廣泛,可以從肉蓯蓉、地黃等多種植物中提取分離得到[10-11]。這兩種化合物均展現(xiàn)出多種藥理作用且具有低毒,穩(wěn)定性好的優(yōu)點(diǎn),但是傳統(tǒng)的提取分離方法相對(duì)困難、繁瑣,給其深入研究帶來了很大困難。離心分配色譜法因其快速、高效、低浪費(fèi)的特性,有助于化合物大量分離純化時(shí)獲得更大經(jīng)濟(jì)效益。因此將該種方法應(yīng)用于芯芭中化合物的分離純化,對(duì)于促進(jìn)達(dá)烏里芯芭資源利用開發(fā)具有重要意義。本實(shí)驗(yàn)首次采用了一種離心分配色譜法對(duì)達(dá)烏里芯芭中毛蕊花糖苷和異毛蕊花糖苷進(jìn)行分離純化且純度較高。相比其他方法,該方法高效便捷,為達(dá)烏里芯芭藥用植物的工業(yè)化發(fā)展提供一種途徑。

        猜你喜歡
        分配
        分配正義:以弱勢(shì)群體為棱鏡
        基于可行方向法的水下機(jī)器人推力分配
        應(yīng)答器THR和TFFR分配及SIL等級(jí)探討
        Crying Foul
        遺產(chǎn)的分配
        一種分配十分不均的財(cái)富
        你知道電壓的分配規(guī)律嗎
        績(jī)效考核分配的實(shí)踐與思考
        收入分配視閾下的共享發(fā)展思考
        浙江績(jī)效分配改革觀察
        国产午夜精品理论片| 性做久久久久久久| 国产成年女人特黄特色毛片免| 亚洲国产精品久久久久秋霞1| 精品一区二区三区女同免费| 偷拍一区二区盗摄视频| 人妻少妇乱子伦精品| 正在播放一区| 精品国产又大又黄又粗av| 中文字幕色偷偷人妻久久一区| 国产免费一区二区三区免费视频| 99亚洲精品久久久99| 91久久精品一二三区蜜桃| 91色区在线免费观看国产| 日日碰狠狠添天天爽五月婷| 怡春院欧美一区二区三区免费| 国产黄片一区视频在线观看| 国产91成人精品高潮综合久久| 亚洲国产精品无码久久98| 欧美亚洲日本在线| 国内自拍视频在线观看h| 亚洲精品视频在线一区二区| 国产精品综合一区二区三区| 女高中生自慰污免费网站| 久久久国产精品首页免费| 国产精品理论片在线观看| 欧美日本国产va高清cabal| 国产精品美女久久久久浪潮AVⅤ| 日韩免费精品在线观看| 国产福利精品一区二区| 亚洲成人观看| 蜜臀精品一区二区三区| 国产精品理论片在线观看| 欧美xxxx黑人又粗又长精品| 国产在线高清无码不卡| 亚洲第一幕一区二区三区在线观看| a级毛片无码久久精品免费| 国产一区二区三区小说| 亚洲熟女少妇精品久久| 亚洲国产日韩欧美综合a| 狠狠久久久久综合网|