陳袁園 袁伯穩(wěn) 張海濤 賁秀鸞 劉媛媛

(南通大學(xué)附屬海安醫(yī)院 1.兒科；2.檢驗(yàn)科，江蘇 海安 226600)

過(guò)敏性紫癜是一種多系統(tǒng)性血管炎，與免疫球蛋白A介導(dǎo)的免疫反應(yīng)有關(guān)，主要影響皮膚、關(guān)節(jié)、腸道和腎臟[1]，是兒童非血小板減少性皮膚紫癜的最常見原因之一[2]。S100鈣結(jié)合蛋白A9(S100A9)在炎癥過(guò)程和免疫應(yīng)答的調(diào)節(jié)中起重要作用[3]。S100A9可用于鑒定過(guò)敏性紫癜患兒疾病嚴(yán)重程度[4]。正五聚素蛋白3(Pentraxin protein 3，PTX3)促進(jìn)纖維細(xì)胞分化并參與調(diào)節(jié)炎癥和補(bǔ)體激活[5]。PTX3在過(guò)敏性紫癜的多系統(tǒng)性血管炎中具有重要作用，參與紫癜性腎炎的發(fā)展，并可作為早期生物標(biāo)志物預(yù)測(cè)過(guò)敏性紫癜[6]。中期因子(midkine,MK) 促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)，遷移和血管生成[7-8]。Su等[9]發(fā)現(xiàn)血清MK水平在過(guò)敏性紫癜患兒中顯著升高。因此，本研究旨在探討血清中MK、S100A9、PTX3水平與過(guò)敏性紫癜患兒腎臟受累的相關(guān)性以及診斷價(jià)值。

1 資料與方法

1.1 一般資料 納入2015年3月～2019年3月我院收治的過(guò)敏性紫癜患兒118例為觀察組。納入標(biāo)準(zhǔn)：均經(jīng)我院病理科依照歐洲風(fēng)濕病聯(lián)盟和兒科風(fēng)濕病歐洲學(xué)會(huì)定義的標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行確診[10]。排除標(biāo)準(zhǔn)：①患有精神疾病者。②長(zhǎng)期使用皮質(zhì)類固醇激素及免疫抑制劑者。③患有其他腎臟疾病者。④患有癌癥者。納入同期至我院進(jìn)行健康體檢的兒童118例為對(duì)照組?；純杭覍倬炇鹬橥鈺⒔?jīng)醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。

1.2 指標(biāo)檢測(cè) 采集觀察組和對(duì)照組清晨肘前靜脈血6 mL，進(jìn)行酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)。MK的ELISA試劑盒購(gòu)自上海遠(yuǎn)慕生物科技有限公司(貨號(hào)：YM-QP11653)。S100A9的ELISA試劑盒購(gòu)自上海群己生物科技有限公司(貨號(hào)：KA1050)。PTX3的ELISA試劑盒購(gòu)自上海古朵生物科技有限公司(貨號(hào)：GD-G10815)。根據(jù)試劑盒的說(shuō)明書進(jìn)行ELISA檢測(cè)。采用生化檢測(cè)儀測(cè)定血尿或蛋白尿水平。

2 結(jié)果

2.1 兩組小兒的年齡、性別、體質(zhì)量指數(shù)等一般資料比較 兩組小兒的年齡、性別、體質(zhì)量指數(shù)等一般資料比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，見表1。

表1 兩組基礎(chǔ)臨床資料

2.2 兩組受試人員血清中MK、S100A9、PTX3的表達(dá)量 觀察組患兒血清中MK、S100A9、PTX3的表達(dá)量均顯著高于對(duì)照組兒童(P<0.05)，見表2。

表2 兩組小兒血清中MK、S100A9、PTX3的表達(dá)量

2.3 兩組受試人員血清中MK、S100A9、PTX3的ROC曲線、AUC、靈敏度、特異度和截?cái)嘀?以MK的陽(yáng)性臨界值為268.32(pg/mL)，其診斷靈敏度為89.35%，特異度為86.32%；以S100A9的陽(yáng)性臨界值為24.53(μg/ mL)，其診斷靈敏度為94.26%，特異度為94.21%；以PTX3的陽(yáng)性臨界值為1.97 (ng/mL)，其診斷靈敏度為90.18%，特異度為91.42%。見表3、圖1。

表3 兩組受試人員血清中MK、S100A9、PTX3的AUC、靈敏度、特異度和截?cái)嘀?/p>

圖1 兩組受試人員血清中MK、S100A9、PTX3的ROC曲線

2.4 血清中MK、S100A9、PTX3聯(lián)合診斷過(guò)敏性紫癜患兒 患有過(guò)敏性紫癜的為真陽(yáng)性，未患有過(guò)敏性紫癜的為真陰性。以MK的陽(yáng)性臨界值為268.32(pg/mL)，S100A9的陽(yáng)性臨界值為24.53(μg/mL)，PTX3的陽(yáng)性臨界值為1.97 (ng/mL)為診斷標(biāo)準(zhǔn)，三者滿足其一者為聯(lián)合診斷陽(yáng)性，反之則為聯(lián)合診斷陰性；三者聯(lián)合對(duì)過(guò)敏性紫癜的診斷的的靈敏度為97.46%(115/118)，特異度為87.28%(103/118)，準(zhǔn)確度為92.37%(218/236)，見表4。

表4 血清中MK、S100A9、PTX3水平聯(lián)合診斷過(guò)敏性紫癜患兒[n(×10-2)]

2.5 血清中MK、S100A9、PTX3水平與過(guò)敏性紫癜患兒腎臟受累的相關(guān)性 血清中MK、S100A9、PTX3水平均與過(guò)敏性紫癜患兒腎臟受累存在正相關(guān)(P<0.05)，見表5。

表5 血清中MK、S100A9、PTX3水平與過(guò)敏性紫癜患兒腎臟受累的相關(guān)性

3 討論

過(guò)敏性紫癜是影響兒童最常見的系統(tǒng)性小血管炎之一[11]。近年來(lái)過(guò)敏性紫癜的發(fā)病率有所增加，每10萬(wàn)名17歲以下兒童中有10～30例。臨床表現(xiàn)為可觸及的紫癜，關(guān)節(jié)炎或關(guān)節(jié)痛，胃腸道癥狀和腎臟疾病。因此，盡早對(duì)過(guò)敏性紫癜進(jìn)行診斷迫在眉睫。

PTX3可以通過(guò)促炎細(xì)胞因子在外周組織中由幾種細(xì)胞產(chǎn)生[12]。據(jù)報(bào)道，血管性血管炎，肺動(dòng)脈高壓和免疫相關(guān)疾病患者血漿PTX3濃度較高[13]。過(guò)敏性紫癜是一種典型的免疫相關(guān)疾病，伴有多系統(tǒng)性小血管炎。在本研究中，觀察組兒童血清PTX3濃度高于對(duì)照組。PTX3的過(guò)量產(chǎn)生可能與血管壁周圍的炎性細(xì)胞浸潤(rùn)和促炎因子激活有關(guān)[14]。Bussolati等[15]發(fā)現(xiàn)PTX3在IgA腎病患者腎活檢系膜區(qū)域的腎小球系膜和內(nèi)皮細(xì)胞上有致密染色；相反，來(lái)自其他腎小球腎病患者的正常腎組織和活組織檢查顯示PTX3表達(dá)低。在本研究中，PTX3水平與過(guò)敏性紫癜患兒腎臟受累存在正相關(guān)。PTX3可能通過(guò)產(chǎn)生二次介質(zhì)如血小板活化因子和組織因子而導(dǎo)致腎損傷[16]。因此，腎小球系膜細(xì)胞可用作PTX3的產(chǎn)生者和靶標(biāo)，且PTX3可能參與腎損傷。

S100A9是一種鈣結(jié)合細(xì)胞溶質(zhì)蛋白，主要存在于中性粒細(xì)胞和巨噬細(xì)胞中。S100A9在患有多種炎癥的患者中升高[17]。S100A9在胃腸系統(tǒng)炎癥期間釋放并在非炎癥條件下幫助分化[18]。腎臟受累是過(guò)敏性紫癜患者的重要預(yù)后因素，大約30%的病例有腎臟受累。在本研究中，S100A9與過(guò)敏性紫癜患兒腎臟受累存在正相關(guān)。體內(nèi)研究結(jié)果表明，高S100A9水平可能是過(guò)敏性紫癜患兒腎臟受累的間接指標(biāo)。由于腎臟受累可能發(fā)生在從發(fā)病開始的前幾天[19]，因此可以更密切地監(jiān)測(cè)具有升高S100A9水平的病例以分析其在腎臟受累中的作用。然而，這需要在更大的樣本量中進(jìn)一步研究。

MK是一種13 kDa肝素結(jié)合生長(zhǎng)因子，最初被鑒定為參與胚胎發(fā)育協(xié)調(diào)的分子。在健康成人中，MK蛋白的檢測(cè)水平非常低[20]。MK是Treg細(xì)胞擴(kuò)增的關(guān)鍵抑制因子，并且增加了自身反應(yīng)性Th1和Th17細(xì)胞的數(shù)量[21]。過(guò)敏性紫癜患者的Th17細(xì)胞高于健康對(duì)照組，但過(guò)敏性紫癜患者Treg細(xì)胞的頻率低于健康對(duì)照組[22]。過(guò)敏性紫癜患者中存在Th17/Treg細(xì)胞失衡，并且似乎與疾病活動(dòng)密切相關(guān)。因此，MK可能通過(guò)促進(jìn)炎癥細(xì)胞的聚集而參與過(guò)敏性紫癜的發(fā)病機(jī)制，也可能參與細(xì)胞因子的調(diào)節(jié)。MK參與腎臟的發(fā)育，在腎臟器官發(fā)生過(guò)程中，被認(rèn)為可調(diào)節(jié)后腎間充質(zhì)的上皮和間質(zhì)祖細(xì)胞群之間的平衡[23]。本研究發(fā)現(xiàn)血清中MK水平與過(guò)敏性紫癜患兒腎臟受累存在正相關(guān)。研究[24]表明，MK在腎臟缺血性損傷后直接增強(qiáng)炎癥細(xì)胞的遷移，并通過(guò)誘導(dǎo)趨化因子促進(jìn)缺血性組織損傷的增加。本研究檢測(cè)兩組血清中MK、S100A9、PTX3的表達(dá)量并評(píng)價(jià)其聯(lián)合診斷過(guò)敏性紫癜的價(jià)值，發(fā)現(xiàn)血清中MK、S100A9、PTX3水平均與過(guò)敏性紫癜患兒腎臟受累存在正相關(guān)(P<0.05)，而血清中MK、S100A9、PTX3聯(lián)合對(duì)過(guò)敏性紫癜的診斷的的靈敏度為97.46%，特異度為87.28%，準(zhǔn)確度為92.32%。

4 結(jié)論

血清MK、S100A9、PTX3的表達(dá)水平與過(guò)敏性紫癜患兒腎臟受累存在正相關(guān)，其表達(dá)量檢測(cè)可作為診斷過(guò)敏性紫癜患兒的潛在標(biāo)志。