鄒鶴群

（廣東省云浮生態(tài)環(huán)境監(jiān)測(cè)站，廣東 云浮 527300）

酚類在我們?nèi)粘Ｉ畹沫h(huán)境中能被分解。但當(dāng)酚類濃度含量超過(guò)自然的自凈能力時(shí)，會(huì)污染自然界，而且會(huì)對(duì)各種生物的生長(zhǎng)和繁殖產(chǎn)生危害，甚至對(duì)人體健康產(chǎn)生威脅。揮發(fā)酚是指沸點(diǎn)在230 ℃以下的有毒物質(zhì)，污染來(lái)源主要為燃煤企業(yè)的洗滌、煉焦、氨的合成、造紙業(yè)、木材加工和化工行業(yè)的工業(yè)廢水。

為進(jìn)一步提高實(shí)驗(yàn)室揮發(fā)酚的檢測(cè)能力，應(yīng)用新方法新儀器，開(kāi)展實(shí)驗(yàn)室方法驗(yàn)證試驗(yàn)，對(duì)技術(shù)指標(biāo)逐一分析，質(zhì)控結(jié)果符合要求，說(shuō)明實(shí)驗(yàn)室具備該方法所需技術(shù)能力。

1 目的

通過(guò)本實(shí)驗(yàn)，驗(yàn)證本實(shí)驗(yàn)室具備使用標(biāo)準(zhǔn)《水質(zhì) 揮發(fā)酚的測(cè)定 流動(dòng)注射-4-氨基安替比林分光光度法》HJ 825-2017測(cè)定水質(zhì)中揮發(fā)酚的能力。

2 方法原理

在酸性介質(zhì)中，水樣經(jīng)過(guò)蒸餾，溫度達(dá)到160 ℃±2 ℃時(shí)釋放出酚。在弱堿性及鐵氰化鉀作為催化劑的條件下，蒸餾出來(lái)的酚類化合物，會(huì)與4-氨基安替比林溶液發(fā)生反應(yīng)，生成橙黃色的安替比林染料，在500 nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度。

3 適用范圍

本驗(yàn)證試驗(yàn)測(cè)定水中揮發(fā)酚的量，水樣范圍包括地表水、地下水、生活污水和工業(yè)廢水。

試驗(yàn)過(guò)程中檢測(cè)光程為10 mm時(shí)，方法檢出限為0.002 mg/ L，測(cè)定范圍為0.008 mg/L～0.200 mg/L。

4 實(shí)驗(yàn)儀器

（1）全自動(dòng)流動(dòng)注射分析儀（揮發(fā)酚模塊）：包括揮發(fā)酚分析儀、自動(dòng)進(jìn)樣器、iFIA7全自動(dòng)流動(dòng)注射分析儀數(shù)據(jù)處理工作站。

（2）分析天平：感量為0.0 001 g。實(shí)驗(yàn)室配置了3臺(tái)感量為0.0 001 g的電子天平和1臺(tái)感量為0.00 001 g的電子天平，檢定并在有效期內(nèi)[1]。

（3）超聲波儀：頻率40 kHz。

（4）循環(huán)水泵：抽氣量：10 L/min，頻率50 Hz。

（5）一般實(shí)驗(yàn)室常用儀器和設(shè)備。

本次試驗(yàn)配備的實(shí)驗(yàn)儀器均符合《水質(zhì) 揮發(fā)酚的測(cè)定 流動(dòng)注射-4-氨基安替比林分光光度法》（HJ 825-2017）中的有關(guān)要求。

5 實(shí)驗(yàn)試劑

（1）硼酸（H3BO3），優(yōu)級(jí)純。

（2）磷酸：ρ（H3PO4）=1.69 g/ml，優(yōu)級(jí)純。

（3）氫氧化鈉（NaOH）：優(yōu)級(jí)純。

（4）4-氨基安替比林（C11H13N3O）。

（5）鐵氰化鉀[K3Fe(CN)6]。

（6）氯化鉀（KCl）。

上述試劑及耗材均符合《水質(zhì) 揮發(fā)酚的測(cè)定 流動(dòng)注射-4-氨基安替比林分光光度法》（HJ 825-2017）中的有關(guān)要求。

6 實(shí)驗(yàn)條件

（1）環(huán)境條件：室溫26 ℃，濕度50%；

（2）所用試劑：均按《水質(zhì) 揮發(fā)酚的測(cè)定 流動(dòng)注射-4-氨基安替比林分光光度法》HJ 825-2017的要求配制。

（3）儀器及相關(guān)輔助設(shè)施使用正常。

本次試驗(yàn)的試驗(yàn)條件均符合《水質(zhì) 揮發(fā)酚的測(cè)定 流動(dòng)注射-4-氨基安替比林分光光度法》（HJ 825-2017）中的有關(guān)要求。

7 樣品采集

樣品的采集按照HJ/T91、HJ/T164的有關(guān)規(guī)范進(jìn)行操作。樣品采集用玻璃瓶盛裝，同時(shí)用磷酸調(diào)至pH2，4 ℃避光保存，24 h內(nèi)測(cè)定。

8 操作步驟

8.1 儀器的調(diào)試

按儀器規(guī)定的順序開(kāi)機(jī)后，將儀器的進(jìn)樣管和所有試劑的毛細(xì)管全部浸入干凈的純水中，選擇清洗按鈕，用純水清洗管路5 min，期間觀察整個(gè)分析流路的密閉性和液體流動(dòng)的順暢性，排干凈比色皿中的氣泡。清洗結(jié)束后將毛細(xì)管放入相應(yīng)的試劑瓶?jī)?nèi)待測(cè)，每次樣品檢測(cè)開(kāi)始前插入三個(gè)載流位觀察基線是否穩(wěn)定，基線穩(wěn)定后方可往下操作[2]。

8.2 校準(zhǔn)曲線

取6個(gè)干凈的200 mL容量瓶，從苯酚儲(chǔ)備液中移取對(duì)應(yīng)的體積溶液至容量瓶?jī)?nèi)，定容至200 mL后的濃度為：0.000 mg/L、0.005 mg/L、0.01 mg/L、0.02 mg/L、0.05 mg/L、0.1 mg/L。

移取適量體積溶液置于樣品管中，上機(jī)測(cè)量順序?yàn)閺母邼舛鹊降蜐舛?，不同水樣測(cè)得出不同濃度的信號(hào)值（峰面積）。橫坐標(biāo)為揮發(fā)酚濃度（以苯酚計(jì)，mg/L），縱坐標(biāo)為信號(hào)值（峰面積），得出信號(hào)值與濃度校準(zhǔn)曲線。校準(zhǔn)曲線的相關(guān)系數(shù)r≥0.995。詳見(jiàn)表1。

表1 校準(zhǔn)曲線

根據(jù)數(shù)據(jù)可以確定此次校準(zhǔn)曲線合格。

8.3 測(cè)定

水樣的測(cè)定與校準(zhǔn)曲線的測(cè)定步驟相同，水樣測(cè)定的信號(hào)值（峰面積），通過(guò)校準(zhǔn)曲線計(jì)算出水樣濃度，如果濃度高于校準(zhǔn)曲線的最高濃度點(diǎn)，那么需要對(duì)水樣進(jìn)行適當(dāng)?shù)南♂尅?/p>

8.4 空白試驗(yàn)

空白水樣的測(cè)定步驟與校準(zhǔn)曲線相同，不同之處是用純水替代水樣進(jìn)行測(cè)定。

9 實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)評(píng)價(jià)

9.1 檢出限

根據(jù)《環(huán)境監(jiān)測(cè)分析方法標(biāo)準(zhǔn)制訂技術(shù)導(dǎo)則》（HJ 168-2020）規(guī)定，各實(shí)驗(yàn)室確定的方法檢出限為：按附錄A.1.1方法計(jì)算得到的檢出限數(shù)值，與儀器檢出限進(jìn)行比較，取較大值[3]。

本次方法檢出限的確定方法：空白試驗(yàn)中檢測(cè)出目標(biāo)物。

空白試驗(yàn)步驟是：測(cè)定水樣相同程序用純水測(cè)定，重復(fù)n（n≥7）次空白試驗(yàn)，將各測(cè)定結(jié)果根據(jù)校準(zhǔn)曲線，計(jì)算出空白樣中被測(cè)物的含量，并算出n次平行樣品測(cè)定的標(biāo)準(zhǔn)偏差，按公式（1）算出方法的檢出限。

式中：

MDL——方法的檢出限；

t——自由度為n-1，置信度99%時(shí)t的分布值（單側(cè)）；

n——測(cè)定樣品的平行次數(shù)；

S——測(cè)定n次平行的標(biāo)準(zhǔn)偏差。

其中，當(dāng)自由度為n-1，置信度為99%時(shí)的t值可根據(jù)《環(huán)境監(jiān)測(cè)分析方法標(biāo)準(zhǔn)制訂技術(shù)導(dǎo)則》（HJ 168-2020）附錄A中表A.1取值。詳見(jiàn)表2。

表2 空白平行樣品測(cè)定結(jié)果表

此次試驗(yàn)將已計(jì)算出的方法檢出限0.000 7 mg/L與儀器檢出限0.000 21 mg/L作對(duì)比取最大值，故方法檢出限為0.000 7 mg/L。

9.2 精密度和正確度

9.2.1 精密度

根據(jù)《環(huán)境監(jiān)測(cè)分析方法標(biāo)準(zhǔn)制訂技術(shù)導(dǎo)則》（HJ 168-2020）規(guī)定，標(biāo)準(zhǔn)樣品或者是有證標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的測(cè)定，樣品濃度要包括曲線的低、中、高三個(gè)不同濃度點(diǎn)，高濃度范圍為曲線最高濃度點(diǎn)的90%左右、中間濃度范圍為曲線中間濃度點(diǎn)左右，低濃度范圍為方法測(cè)定下限左右的濃度點(diǎn)。這3個(gè)不同濃度點(diǎn)，每個(gè)樣品全流程測(cè)定6次平行，分別計(jì)算出各濃度點(diǎn)的平均值、標(biāo)準(zhǔn)偏差、相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差。

本次采用的三個(gè)濃度點(diǎn)分別為2.50 μg/L、25.9 μg/L和80.0 μg/L。詳見(jiàn)表3。

表3 精密度

9.2.2 正確度

根據(jù)《環(huán)境監(jiān)測(cè)分析方法標(biāo)準(zhǔn)制訂技術(shù)導(dǎo)則》HJ 168-2020規(guī)定，標(biāo)準(zhǔn)樣品或者是有證標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的測(cè)定，樣品濃度要包括曲線的低、中、高三個(gè)不同濃度點(diǎn)，高濃度范圍為曲線最高濃度點(diǎn)的90%左右、中間濃度范圍為曲線中間濃度點(diǎn)左右，低濃度范圍為方法測(cè)定下限左右的濃度點(diǎn)。這3個(gè)不同濃度點(diǎn)，每個(gè)樣品全流程測(cè)定6次平行，分別計(jì)算出各濃度點(diǎn)的相對(duì)誤差[4]。

本次采用的三個(gè)濃度點(diǎn)分別為2.50 μg/L、25.9 μg/L和80.0 μg/L。詳見(jiàn)表4。

表4 正確度

9.2.3 實(shí)際樣品

根據(jù)《環(huán)境監(jiān)測(cè)分析方法標(biāo)準(zhǔn)制訂技術(shù)導(dǎo)則》HJ 168-2020和《環(huán)境監(jiān)測(cè)質(zhì)量管理技術(shù)導(dǎo)則》HJ 630-2011規(guī)定，實(shí)際樣品的測(cè)定包含適用范圍內(nèi)每個(gè)樣品類型的1～3個(gè)濃度或含量的樣品，每個(gè)樣品全流程測(cè)定6次平行，計(jì)算出各平行樣品的平均值、標(biāo)準(zhǔn)偏差、相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差。正確度的測(cè)定是在樣品中加入一定量的已知濃度標(biāo)準(zhǔn)樣品，如果水樣的濃度能夠檢測(cè)出，那么水樣的加標(biāo)量一般為水樣濃度的0.5至3倍。如果水樣濃度未能檢測(cè)出，那么樣品的加標(biāo)濃度應(yīng)在曲線的低濃度范圍內(nèi)。每個(gè)樣品全流程測(cè)定6次平行，分別計(jì)算出各水樣的加標(biāo)回收率。試驗(yàn)結(jié)果顯示，加標(biāo)回收率均在70%～120%之間，符合要求。

由于所采樣品均為未檢出，為使樣品具有代表性，生活污水和工業(yè)廢水均相應(yīng)進(jìn)行污染，同時(shí)對(duì)污染后的生活污水和工業(yè)廢水進(jìn)行加標(biāo)，每個(gè)樣品全流程測(cè)定6次平行，計(jì)算加標(biāo)回收率。試驗(yàn)結(jié)果顯示，加標(biāo)回收率均在70%～120%之間，符合要求。

10 結(jié)論

試驗(yàn)結(jié)果表明，實(shí)驗(yàn)室實(shí)驗(yàn)儀器、實(shí)驗(yàn)試劑、實(shí)驗(yàn)條件和實(shí)驗(yàn)人員等均符合《水質(zhì) 揮發(fā)酚的測(cè)定 流動(dòng)注射-4-氨基安替比林分光光度法》（HJ 825-2017）中的有關(guān)要求。實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)評(píng)價(jià)也表明，對(duì)標(biāo)準(zhǔn)樣品的準(zhǔn)確度、正確度的試驗(yàn)，檢出限和實(shí)際水樣的試驗(yàn)均符合《水質(zhì) 揮發(fā)酚的測(cè)定 流動(dòng)注射-4-氨基安替比林分光光度法》（HJ 825-2017）、《環(huán)境監(jiān)測(cè)分析方法標(biāo)準(zhǔn)制訂技術(shù)導(dǎo)則》（HJ 168-2020）和《環(huán)境監(jiān)測(cè)質(zhì)量管理技術(shù)導(dǎo)則》（HJ 630-2011）中的有關(guān)要求。