李會(huì)儉, 付 軍, 趙 敏, 程文俊

(1. 江蘇省無(wú)錫市婦幼保健院 婦產(chǎn)科, 江蘇 無(wú)錫, 214000; 2. 江蘇省無(wú)錫市婦幼保健院 婦科, 江蘇 無(wú)錫, 214000; 3. 南京醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院 婦科, 江蘇 南京, 210000)

現(xiàn)階段，卵巢癌的手術(shù)治療效果顯著，可有效延緩患者病情進(jìn)展，延長(zhǎng)患者生存時(shí)間[1], 但仍有部分患者因分期和惡性程度高，治療效果不理想，影響后續(xù)治療的順利進(jìn)行，增高預(yù)后不良風(fēng)險(xiǎn)[2]。因此，根據(jù)卵巢癌患者的臨床病理特征進(jìn)行早期預(yù)測(cè)并及時(shí)實(shí)施合理干預(yù)，更有利于后續(xù)優(yōu)化治療方案，提高治療效果。血清絲氨酸蛋白酶A3(HtrA3)能夠參與細(xì)胞生長(zhǎng)、凋亡等一系列病理、生理過(guò)程[3]。研究[4]指出，HtrA3在子宮內(nèi)膜、卵巢等女性生殖系統(tǒng)腫瘤中均存在不同程度的表達(dá)，且與子宮內(nèi)膜癌、卵巢癌等癌癥的發(fā)生、發(fā)展存在一定關(guān)聯(lián)。本研究重點(diǎn)分析血清HtrA3表達(dá)與卵巢癌患者臨床病理特征的相關(guān)性，現(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2016年1月—2021年1月100例卵巢癌患者為研究對(duì)象，全部患者及家屬對(duì)研究?jī)?nèi)容知情同意，并簽署知情同意書。納入標(biāo)準(zhǔn): ① 卵巢癌符合《婦產(chǎn)科學(xué)(第9版)》[5]中相關(guān)診斷標(biāo)準(zhǔn)，且經(jīng)手術(shù)病理檢查結(jié)果明確診斷者; ② 患者首次發(fā)病; ③ 國(guó)際婦產(chǎn)科協(xié)會(huì)(FIGO)病理分期為Ⅰ～Ⅲ期者; ④ 患者意識(shí)水平正常，可配合研究和接受量表評(píng)估。排除標(biāo)準(zhǔn): ① 入院前已接受過(guò)放化療、手術(shù)等治療的患者; ② 合并其他惡性腫瘤的患者; ③ 合并自身免疫性疾病的患者。100例患者年齡51～67歲，中位年齡59.00歲(54.00, 63.00); FIGO分期為Ⅰ期17例, Ⅱ期28例, Ⅲ期55例; 腫瘤直徑為3.0～12 cm, 中位腫瘤直徑8.00 cm(5.50, 10.00)。研究實(shí)施獲得了醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)同意。

1.2 方法

1.2.1 臨床病理特征判定方法: 以手術(shù)病理檢查結(jié)果為準(zhǔn)，主要臨床病理特征包括腫瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)移和擴(kuò)散、病理分級(jí)和病理分期情況，其中病理分期依據(jù)FIGO分期分為Ⅰ～Ⅲ期; 病理分級(jí)包括高級(jí)別、低級(jí)別; 病理類型包括漿液性腺癌、黏液性腺癌、透明細(xì)胞癌、子宮內(nèi)膜樣腺癌。

1.2.2 實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)檢測(cè)方法: ① 糖類抗原(CA)125。采集患者入院當(dāng)天空腹靜脈血2 mL, 使用長(zhǎng)沙英泰儀器有限公司生產(chǎn)的TD4A型低速醫(yī)用離心機(jī)進(jìn)行離心處理，以8 000轉(zhuǎn)/min的離心速度離心6 min, 離心半徑16 cm, 離心完畢后取上清液待檢。選用羅氏診斷有限公司生產(chǎn)的cobas e411電化學(xué)發(fā)光全自動(dòng)免疫分析系統(tǒng)測(cè)定血清CA125水平。CA125正常范圍為0～35 U/mL。② 血清HtrA3表達(dá)。采集患者入院當(dāng)天空腹靜脈血2 mL, 經(jīng)離心機(jī)進(jìn)行離心處理，以3 000轉(zhuǎn)/min的離心速度離心15 min, 離心半徑15 cm, 離心完畢后取上清液待檢。使用上海江萊生物科技有限公司生產(chǎn)的試劑盒并采用酶聯(lián)免疫分析法測(cè)定血清HtrA3表達(dá)情況。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

2 結(jié) 果

2.1 卵巢癌患者臨床病理特征分布情況

100例患者中, 52例高級(jí)別, 48例低級(jí)別, 58例轉(zhuǎn)移擴(kuò)散, 17例為Ⅰ期, 28例為Ⅱ期, 55例為Ⅲ期，見表1。

表1 卵巢癌患者臨床病理特征分布情況

2.2 不同臨床病理特征的卵巢癌患者血清HtrA3、CA125表達(dá)情況

腫瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)移、擴(kuò)散、Ⅲ期、高級(jí)別患者的血清HtrA3表達(dá)水平低于腫瘤細(xì)胞未轉(zhuǎn)移、擴(kuò)散、Ⅰ～Ⅱ期和低級(jí)別患者，CA125表達(dá)水平高于腫瘤細(xì)胞未轉(zhuǎn)移、擴(kuò)散、Ⅰ～Ⅱ期和低級(jí)別患者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05); 不同病理類型、年齡、腫瘤直徑患者血清HtrA3和 CA125表達(dá)水平比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05), 見表2。

2.3 血清HtrA3、CA125表達(dá)影響卵巢癌患者臨床病理特征的回歸分析

將上述分析結(jié)果得到有意義的變量(均為連續(xù)變量)作為自變量，分別將卵巢癌患者臨床病理特征作為因變量[腫瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)移、擴(kuò)散(1=有, 0=無(wú)), FIGO分期(1=Ⅲ期, 0=Ⅰ～Ⅱ期)、病理分級(jí)(1=高級(jí)別, 0=低級(jí)別)]，經(jīng)二元回歸分析后，將P值放寬至<0.2, 將符合條件的因素同時(shí)納入作為自變量，多元Logistic回歸分析結(jié)果顯示，卵巢癌患者入院當(dāng)天血清CA125表達(dá)高是卵巢癌患者腫瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)移和擴(kuò)散FIGO分期高、高級(jí)別的危險(xiǎn)因素(OR>1,P<0.05), 血清HtrA3高表達(dá)是卵巢癌患者腫瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)移和擴(kuò)散、FIGO分期高、高級(jí)別的保護(hù)因素(OR<1,P<0.05)，見表3。

表2 不同臨床病理特征的卵巢癌患者血清HtrA3、CA125表達(dá)情況

2.4 血清HtrA3表達(dá)情況預(yù)測(cè)卵巢癌患者臨床病理特征風(fēng)險(xiǎn)的效能分析

將卵巢癌患者入院當(dāng)天的血清HtrA3表達(dá)情況作為檢驗(yàn)變量，卵巢癌患者臨床病理特征作為狀態(tài)變量[腫瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)移、擴(kuò)散(1=有 ,0=無(wú)); FIGO分期(1=Ⅲ期, 0=Ⅰ～Ⅱ期); 病理分級(jí)(1=高級(jí)別, 0=低級(jí)別)]繪制ROC曲線。結(jié)果顯示，卵巢癌患者入院當(dāng)天血清HtrA3表達(dá)水平預(yù)測(cè)腫瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)移、擴(kuò)散、FIGO高分期、高級(jí)別風(fēng)險(xiǎn)的AUC>0.70, 預(yù)測(cè)價(jià)值較理想，見圖1、表4。

3 討 論

惡性腫瘤病理分期、腫瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)移、擴(kuò)散等臨床病理特征情況與患者預(yù)后、療效等密切相關(guān)。

表3 血清HtrA3、CA125表達(dá)影響卵巢癌患者臨床病理特征的回歸分析

A: 血清HtrA3表達(dá)情況預(yù)測(cè)卵巢癌患者腫瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)移、擴(kuò)散風(fēng)險(xiǎn); B: 血清HtrA3表達(dá)情況預(yù)測(cè)卵巢癌患者FIGO高分期風(fēng)險(xiǎn);

表4 血清HtrA3表達(dá)情況預(yù)測(cè)卵巢癌患者臨床病理特征風(fēng)險(xiǎn)的效能分析

研究[6]指出，卵巢癌發(fā)病過(guò)程及機(jī)制復(fù)雜，早期診斷存在一定難度，部分患者確診時(shí)已存在腫瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)移、擴(kuò)散及病理分期較高等現(xiàn)象，且治療效果不佳，生存率不理想。因此，早期預(yù)測(cè)、評(píng)估卵巢癌的病情進(jìn)展，并及時(shí)實(shí)施干預(yù)方案，對(duì)延長(zhǎng)患者生存時(shí)間，促進(jìn)良性預(yù)后具有積極意義。

既往臨床常采用CA125對(duì)卵巢癌患者進(jìn)行早期診斷并根據(jù)其水平變化監(jiān)測(cè)腫瘤治療效果[7]。本研究結(jié)果顯示，卵巢癌患者入院當(dāng)天的血清CA125高表達(dá)是卵巢癌患者腫瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)移和擴(kuò)散FIGO分期高、高級(jí)別的危險(xiǎn)因素，證實(shí)了CA125與卵巢癌患者臨床病理特征有關(guān)，但CA125存在非特異性，在某些正常組織、良性腫瘤及炎癥反應(yīng)中也存在輕度升高現(xiàn)象，干擾結(jié)果的準(zhǔn)確性，因而本研究并未將其作為主要研究指標(biāo)。

研究[8]指出，腫瘤的發(fā)生是由于細(xì)胞進(jìn)入失控性生長(zhǎng)與分裂的狀態(tài)，腫瘤細(xì)胞增殖活性增強(qiáng)是腫瘤細(xì)胞發(fā)生并形成侵襲和轉(zhuǎn)移的前提。HtrA家族是一類具有蛋白酶和分子伴侶雙重功能的熱休克蛋白，與細(xì)胞凋亡、炎癥反應(yīng)及腫瘤等過(guò)程密切相關(guān)[9-10]。近年來(lái)，研究[11-12]指出, HtrA與生殖系統(tǒng)腫瘤密切相關(guān)，在較多的生殖系統(tǒng)腫瘤進(jìn)展中可見其表達(dá)明顯下調(diào)，并且HtrA能夠增強(qiáng)化療藥物細(xì)胞毒性作用，誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞程序性凋亡，與腫瘤發(fā)生、發(fā)展及療效密切關(guān)聯(lián)。HtrA3是HtrA家族中的一個(gè)成員，最早臨床認(rèn)為其是一種妊娠相關(guān)的HtrA, 在胚胎植入和胎盤發(fā)育等過(guò)程中會(huì)被調(diào)節(jié)[13-14]。研究[15-16]指出, HtrA3在乳腺癌、宮頸癌等多種婦科惡性腫瘤中呈低表達(dá)，且其表達(dá)情況能夠影響腫瘤的惡性程度，腫瘤惡性程度越高，其表達(dá)降低程度越明顯，因而認(rèn)為HtrA3具有腫瘤抑制效應(yīng)。結(jié)合上述血清HtrA3與腫瘤的關(guān)系，推測(cè)血清HtrA3與卵巢癌患者臨床病理特征存在相關(guān)性。

本研究結(jié)果顯示，腫瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)移、擴(kuò)散、Ⅲ期、高級(jí)別患者的血清HtrA3表達(dá)低于腫瘤細(xì)胞未轉(zhuǎn)移、擴(kuò)散、Ⅰ～Ⅱ期和低級(jí)別患者，初步推測(cè)血清HtrA3表達(dá)與卵巢癌患者臨床病理特征有關(guān)系，且經(jīng)回歸分析證實(shí)，說(shuō)明血清HtrA3表達(dá)與卵巢癌患者臨床病理特征存在一定關(guān)系。HtrA3表達(dá)下調(diào)時(shí)，腫瘤細(xì)胞的抑制效應(yīng)被大幅減弱，腫瘤持續(xù)性增殖和分化，繼而促使腫瘤細(xì)胞的轉(zhuǎn)移擴(kuò)散，提高病理分期。HtrA3表達(dá)降低時(shí)，大量腫瘤間質(zhì)中存在高密度微血管，其能夠加強(qiáng)腫瘤細(xì)胞的轉(zhuǎn)移擴(kuò)散能力，提高病理分期，導(dǎo)致惡性程度高[17]。ROC曲線分析結(jié)果顯示，血清HtrA3的表達(dá)預(yù)測(cè)卵巢癌患者腫瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)移、擴(kuò)散、TNM高分期、高級(jí)別風(fēng)險(xiǎn)的AUC均>0.70, 預(yù)測(cè)價(jià)值較理想，表明血清HtrA3可能是卵巢癌患者臨床病理特征的風(fēng)險(xiǎn)因子，也可作為卵巢癌患者臨床病理特征的預(yù)測(cè)標(biāo)志物。上述結(jié)果也表明，早期可動(dòng)態(tài)檢測(cè)卵巢癌患者血清HtrA3表達(dá)情況，若發(fā)現(xiàn)異常變化，建議可提前為患者實(shí)施中西醫(yī)結(jié)合治療、絲氨酸蛋白酶抑制劑等干預(yù)措施，以改善患者血清HtrA3表達(dá)情況，可能對(duì)降低卵巢癌患者腫瘤細(xì)胞擴(kuò)散、轉(zhuǎn)移和高病理分期風(fēng)險(xiǎn)有一定價(jià)值。

本研究也存在一定局限性，如本研究結(jié)果顯示卵巢癌患者病理類型與血清HtrA3表達(dá)無(wú)相關(guān)性，可能與患者病情嚴(yán)重程度、漿液性腺癌患者居多等有關(guān)，未來(lái)還需開展更多的研究進(jìn)一步探討分析血清HtrA3表達(dá)與卵巢癌病理特征、病理類型等之間的關(guān)系與作用機(jī)制，以證實(shí)血清HtrA3在評(píng)估卵巢癌療效、監(jiān)測(cè)病情等方面的作用。