張虎平 馬艷品

原發(fā)性肝癌(primary hepatic cancer,PHC)是世界范圍內(nèi)常見惡性腫瘤之一[1]，死亡率高，其在男性惡性腫瘤死亡率中居第2位，女性中居第6位[2]，早期診斷、早期發(fā)現(xiàn)并采取積極的預(yù)防干預(yù)措施，對(duì)于延長(zhǎng)患者生存時(shí)間、降低死亡率具有重要的意義[3-4]。血清異常凝血酶原(DCP)在一定程度上反映了患者的肝臟損傷情況[5]，NK細(xì)胞和CD4+、CD8+水平則反映了患者的免疫功能，對(duì)于原發(fā)性肝癌患者的疾病進(jìn)展具有一定的指示性作用[6]。本研究對(duì)血清DCP、NK細(xì)胞和CD4+、CD8+水平與PHC發(fā)生發(fā)展的關(guān)系進(jìn)行研究，為臨床治療以及病情判斷提供科學(xué)依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2017年1月至2020年4月診斷的125例原發(fā)性肝癌患者作為研究對(duì)象，其中男性患者60例，女性患者65例，年齡55～65歲，平均年齡為(59.25±2.36)歲，體重指數(shù)平均為(24.52±2.59)kg/cm2，根據(jù)TNM分期標(biāo)準(zhǔn)：Ⅰ～Ⅱ期患者69例，Ⅲ～Ⅳ期患者56例。另選取乙肝潛伏期患者、肝硬化患者以及表觀健康者各125例作為對(duì)照。4組對(duì)象的性別、年齡、體重指數(shù)之間的差異不存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，見表1。所有入選研究對(duì)象均簽署知情同意書，并經(jīng)醫(yī)院倫理委員會(huì)論證通過(guò)。

表1 4組患者的基線資料比較

原發(fā)性肝癌納入標(biāo)準(zhǔn)：①符合原發(fā)性肝癌診斷標(biāo)準(zhǔn)[7]；②預(yù)計(jì)生存時(shí)間在6個(gè)月以上；③KPS評(píng)分均≥70分；④對(duì)本次研究使用藥物無(wú)用藥禁忌；⑤患者均采取手術(shù)聯(lián)合化療治療。

肝硬化患者納入標(biāo)準(zhǔn)：①均符合肝硬化標(biāo)準(zhǔn)[8]；②均為肝硬化穩(wěn)定期，排除急性發(fā)作患者。

乙肝患者納入標(biāo)準(zhǔn)：①均符合慢性乙型肝炎診斷標(biāo)準(zhǔn)[9]；②入組前2周未使用抗病毒或免疫抑制劑。

排除標(biāo)準(zhǔn)：①心、肝、腎功能嚴(yán)重不全者；②存在交流障礙的患者；③血常規(guī)異?；颊?；④不配合本研究方案患者。

1.2 研究方法

對(duì)所有研究對(duì)象入組后進(jìn)行血樣采集4 ml，運(yùn)用流式細(xì)胞儀進(jìn)行T淋巴細(xì)胞亞群CD4+、CD8+水平以及NK細(xì)胞數(shù)量檢測(cè)。同時(shí)對(duì)上述樣本進(jìn)行離心，取上清液，采取化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)DCP水平。

1.3 觀察指標(biāo)

1.3.1 4組研究對(duì)象的DCP、NK細(xì)胞和CD4+、CD8+水平比較 分別比較原發(fā)性肝癌組患者、乙肝患者、肝硬化患者以及健康組的DCP、NK細(xì)胞和CD4+、CD8+水平之間的差異。

1.3.2 PHC不同病理患者的DCP、NK細(xì)胞和CD4+、CD8+水平比較 分別對(duì)不同TNM分期、肝內(nèi)轉(zhuǎn)移、組織分化、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者的DCP、NK細(xì)胞和CD4+、CD8+水平比較。

1.3.3 相關(guān)性分析 采用spearman相關(guān)性分析，比較PHC病理狀態(tài)與患者的DCP、NK細(xì)胞和CD4+、CD8+水平之間的相關(guān)性。

1.3.4 聯(lián)合診斷效能比較 分別對(duì)DCP、NK細(xì)胞和CD4+、CD8+水平及其聯(lián)合的診斷效能進(jìn)行分析，同時(shí)采用ROC曲線分析其診斷效能。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

2 結(jié)果

2.1 4組研究對(duì)象的DCP、NK細(xì)胞和CD4+、CD8+水平比較

4組研究對(duì)象的DCP、NK細(xì)胞和CD4+、CD8+水平之間的差異存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。通過(guò)兩兩比較，4組研究對(duì)象的DCP、CD8+表達(dá)水平從高到低依次為原發(fā)性肝癌組、肝硬化組、乙肝組、健康組，4組研究對(duì)象的NK細(xì)胞、CD4+表達(dá)水平從低到高依次為原發(fā)性肝癌組、肝硬化組、乙肝組、健康組(P<0.05)，見表2。

表2 4組研究對(duì)象的DCP、NK細(xì)胞和CD4+、CD8+水平比較

2.2 PHC不同病理患者的DCP、NK細(xì)胞和CD4+、CD8+水平比較

組織高分化以及TNM分期越高，患者的DCP、CD8+表達(dá)水平越高，NK細(xì)胞、CD4+水平越低；隨著患者的淋巴結(jié)以及肝內(nèi)轉(zhuǎn)移，患者的DCP、CD8+表達(dá)水平越高，NK細(xì)胞、CD4+水平越低(P<0.05)，見表3。

表3 PHC不同病理患者的DCP、NK細(xì)胞和CD4+、CD8+水平比較

2.3 相關(guān)性分析

通過(guò)相關(guān)性分析，原發(fā)性肝癌患者的組織分化、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、TNM分期、肝內(nèi)轉(zhuǎn)移情況與患者的DCP、CD8+表達(dá)水平呈現(xiàn)正相關(guān)，與患者的NK細(xì)胞、CD4+水平呈現(xiàn)負(fù)相關(guān)，見表4。

表4 相關(guān)性分析

2.4 聯(lián)合診斷效能比較

通過(guò)對(duì)早期肝癌的聯(lián)合診斷分析，DCP、NK細(xì)胞和CD4+、CD8+水平具有降耗的診斷效能，通過(guò)ROC曲線分析，早期肝癌的DCP、NK細(xì)胞和CD4+、CD8+水平臨界值分別為2049.11 mAU/ml，32.67%，24.19%，16.71%。詳見表5。

表5 聯(lián)合診斷效能比較

3 討論

原發(fā)性肝癌的早期診斷、早期治療對(duì)于延長(zhǎng)患者生存時(shí)間、降低死亡率具有十分重要的意義，如果采取積極的預(yù)防干預(yù)措施，則可降低患癌的最大可能[10]。T淋巴細(xì)胞亞群不僅可以從細(xì)胞水平反映疾病病情，還可以幫助探討疾病的發(fā)病機(jī)制，從而為臨床疾病的診斷、治療及預(yù)后判斷提供有效的參考。NK細(xì)胞和CD4+、CD8+水平可能參與腫瘤免疫的調(diào)節(jié)，這類細(xì)胞具有免疫功能和免疫抑制特性，目前，肝癌患者的T淋巴細(xì)胞的數(shù)量與患者的疾病進(jìn)展的相關(guān)性研究較少[11]。DCP已經(jīng)被證實(shí)為原發(fā)性肝癌患者重要的腫瘤標(biāo)志物，本研究通過(guò)相關(guān)性分析[12]，旨在提出疾病進(jìn)展與患者的DCP、NK細(xì)胞和CD4+、CD8+水平之間的相關(guān)性。

本研究中，4組研究對(duì)象的DCP、CD8+表達(dá)水平從高到低依次為原發(fā)性肝癌組、肝硬化組、乙肝組、健康組，4組研究對(duì)象的NK細(xì)胞、CD4+表達(dá)水平從低到高依次為原發(fā)性肝癌組、肝硬化組、乙肝組、健康組，且隨著患者的病理狀態(tài)的不斷惡化，患者的DCP、NK細(xì)胞和CD4+、CD8+水平顯著發(fā)生異常變化，分析認(rèn)為，在肝臟細(xì)胞發(fā)生癌變的過(guò)程中，癌細(xì)胞對(duì)于凝血酶原前體的合成具有一定的抑制性作用。在癌細(xì)胞的抑制性作用下，患者的凝血酶原前體的羧化程度的嚴(yán)重不足，從而導(dǎo)致患者產(chǎn)生大量DCP,在以往的報(bào)道中[13]，DCP聯(lián)合甲胎蛋白，對(duì)于原發(fā)性肝癌的鑒別具有積極的意義，在原發(fā)性肝癌的診斷中，DCP可提高對(duì)于甲胎蛋白含量較小患者的檢出率，對(duì)于臨床診斷具有重要意義。王晴晴等[14]通過(guò)對(duì)患者的DCP研究顯示，原發(fā)性肝癌患者的DCP水平顯著升高，對(duì)于原發(fā)性肝癌患者的診斷以及疾病病情的分析具有積極的意義，與本研究一致。

以往的研究顯示，在腫瘤患者的發(fā)病期間，其免疫狀態(tài)處于顯著的抑制狀態(tài)，主要表現(xiàn)為患者的NK細(xì)胞和CD4+、CD8+水平的變化。CD4+具有顯著的輔助以及誘導(dǎo)其前體細(xì)胞的功能，在對(duì)腫瘤的抵抗性作用中起到重要的意義，CD8+具有負(fù)性調(diào)節(jié)作用，可以輔助T細(xì)胞受體識(shí)別抗原并參與T細(xì)胞活化信號(hào)的轉(zhuǎn)導(dǎo)，從而特異性地殺傷靶細(xì)胞。兩者的平衡能力對(duì)于患者的免疫反應(yīng)調(diào)控意義重大。NK細(xì)胞則主要體現(xiàn)了患者的機(jī)體自身的吞噬作用，本研究中，通過(guò)對(duì)患者的血清以上免疫指標(biāo)的分析顯示，隨著患者的疾病的進(jìn)展，患者的NK細(xì)胞和CD4+、CD8+水平的異常程度顯著升高，提示在疾病的進(jìn)展過(guò)程中，患者的免疫功能顯著抑制。而張洪昌等[15]通過(guò)對(duì)原發(fā)性肝癌患者的以上免疫指標(biāo)的分析中指出，隨著患者的疾病進(jìn)展，患者的免疫功能顯著抑制，與本研究相互印證。另外，本研究的相關(guān)性顯示，在疾病的進(jìn)展過(guò)程中，患者的DCP、NK細(xì)胞和CD4+、CD8+水平與疾病的不同病理狀態(tài)呈現(xiàn)顯著相關(guān)，也在一定程度上印證了以上理論研究。

綜上所述，血清DCP、NK細(xì)胞和CD4+、CD8+水平與PHC發(fā)生發(fā)展顯著相關(guān)，可作為疾病進(jìn)展以及治療效果的重要依據(jù)。