褚璐璐 袁 博 邢 偉

臨床上上皮性卵巢腫瘤的發(fā)病風(fēng)險較高，在具有相關(guān)家族史或者合并有癌基因攜帶的群體中，上皮性卵巢腫瘤的發(fā)生風(fēng)險可進(jìn)一步上升[1-2]。臨床上通過對于上皮性卵巢腫瘤的診斷或者鑒別診斷，能夠在卵巢腫瘤的手術(shù)治療或者治療方案的制定等方面發(fā)揮作用。人蛋白DJ-1蛋白是近年來新發(fā)現(xiàn)的腫瘤基因，其對于卵巢上皮細(xì)胞的異常增殖具有一定的調(diào)控作用，還可以顯著促進(jìn)癌細(xì)胞核DNA的異常分裂過程[3]；哥本哈根指數(shù)(Copenhagen index，CPH-1)能夠通過結(jié)合CA125及HE4，對癌細(xì)胞的異常分化增殖過程反應(yīng)，進(jìn)而具有評估卵巢惡性腫瘤的發(fā)生風(fēng)險作用。目前為止，相關(guān)背景研究已經(jīng)探討了CPH-1在卵巢惡性腫瘤鑒別診斷過程中的價值，認(rèn)為其能夠顯著提高卵巢腫瘤的鑒別效能，但對于CPH-1或者DJ-1蛋白的表達(dá)與卵巢癌臨床病理特征的關(guān)系分析不足，本文對此進(jìn)行研究，現(xiàn)將結(jié)果報告如下。

1 材料與方法

1.1 對象

本文選取我院2016年1月至2019年7月經(jīng)病理學(xué)檢查確診的上皮性卵巢癌患者66例作為惡性組、80例卵巢良性腫瘤患者作為良性組，所有患者符合中華醫(yī)學(xué)會制定關(guān)于上皮性卵巢癌患者的診斷參考標(biāo)準(zhǔn)[4]。惡性組的年齡范圍(37～67)歲，平均年齡(55.2±8.6)歲；根據(jù)國際婦產(chǎn)聯(lián)盟(FIGO)分期包括：Ⅰ期13例、Ⅱ期25例、Ⅲ期12例、Ⅳ期6例；組織學(xué)分化：高分化16例、中分化31例、低分化19例；病理學(xué)類型：漿液性癌患者53例、非漿液性癌患者13例。良性組，年齡范圍(35～65)歲，平均(54.2±10.0)歲；病理學(xué)類型：卵巢囊腫患者22例、卵巢漿液性腺瘤患者34例、卵巢黏液性腺瘤患者24例。惡性組與良性組在上述一般資料上比較，無統(tǒng)計(jì)學(xué)上的差異(P>0.05)，可進(jìn)行比較。

1.2 方法

1.2.1 血清DJ-1蛋白的檢測方法 樣本采集與提?。河貌裳苋』颊叩那宄恐獠快o脈血，搖勻，并離心，其上清液為樣本。血清DJ-1蛋白的檢測：經(jīng)過孵育、洗滌等反復(fù)處理后，加入TMB顯色底液并避光36 ℃孵育15 min，最后加入100 μl的終止液并在3 min內(nèi)檢測OD450值。BioTek酶標(biāo)儀(由美國伯騰儀器有限公司生產(chǎn))。

1.2.2 CPH-I評測方法 取患者外周靜脈血3～5 ml，放置室溫下5～10 min，在自然分層后，抽取上層清亮液體進(jìn)行檢測。使用化學(xué)發(fā)光免疫分析儀(由貝克曼庫爾特UniCel DxI 800生產(chǎn))對HE4、CA125檢測，EasyBlot ECL化學(xué)發(fā)光顯色試劑盒(由賽默飛公司生產(chǎn))。CPH-I=-14.0647+1.0649×LOG2(HE4)+0.6050×LOG2(CA125)+0.2672×年齡/10。

1.3 統(tǒng)計(jì)方法

2 結(jié)果

2.1 2組患者的DJ-1蛋白、CPH-1對比

經(jīng)2組獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)分析，惡性組患者的DJ-1蛋白、CPH-1均高于良性組，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05)，見表1。

表1 2組患者的DJ-1蛋白、CPH-1對比

2.2 卵巢上皮性惡性腫瘤的病理學(xué)特征與DJ-1蛋白、CPH-1的關(guān)系

在不同F(xiàn)IGO分期、不同病理學(xué)類型、不同分化程度的卵巢上皮性惡性腫瘤患者血清中DJ-1蛋白水平均無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)；見表2。

表2 卵巢上皮性惡性腫瘤的病理學(xué)特征與DJ-1蛋白的關(guān)系

不同F(xiàn)IGO分期、不同分化程度的上皮性卵巢惡性腫瘤患者的CPH-1指數(shù)具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05)，見表3。

表3 卵巢上皮性惡性腫瘤的病理學(xué)特征與CPH-1的關(guān)系

2.3 血清DJ-1蛋白、CPH-1鑒別診斷上皮性卵巢腫瘤良惡性的價值

血清中DJ-1蛋白鑒別診斷上皮性卵巢腫瘤良惡性的靈敏度為66.03%、特異度為78.14%、ROC曲線下面積AUC值為0.745；CPH-1鑒別診斷上皮性卵巢腫瘤良惡性的靈敏度為94.28%、特異度為84.57%、ROC曲線下面積AUC值為0.909；見表4、圖1。

表4 血清DJ-1蛋白、CPH-1鑒別診斷上皮性卵巢腫瘤良惡性的價值

圖1 血清DJ-1蛋白、CPH-1鑒別診斷上皮性卵巢腫瘤良惡性的ROC曲線

3 討論

臨床上卵巢惡性腫瘤的發(fā)病率或者年發(fā)病人數(shù)均維持在較高的水平，在卵巢生發(fā)上皮細(xì)胞異常病變的過程中，不同來源惡性腫瘤細(xì)胞的發(fā)生風(fēng)險越高，其遠(yuǎn)期臨床結(jié)局的惡化越為顯著[5]。上皮性卵巢腫瘤的早期診斷水平較低，鑒于卵巢屬于中空性器官，其早期發(fā)生惡性腫瘤病變時多數(shù)患者可無明顯的臨床癥狀。對于上皮性卵巢腫瘤的早期診斷或者鑒別診斷，能夠在提高卵巢癌根治性手術(shù)切除率、降低卵巢癌的遠(yuǎn)期復(fù)發(fā)率、改善卵巢腫瘤患者的生存預(yù)后方面發(fā)揮作用。影像學(xué)檢查雖然能夠在上皮性卵巢腫瘤的診斷過程中發(fā)揮作用，但婦科超聲檢查對于部分早期卵巢腫瘤的漏診率較高，其早期鑒別的陽性預(yù)測值較低。血清中糖鏈蛋白125(CA125)或者附睪蛋白(HE4)雖然能夠在上皮性卵巢腫瘤的鑒別過程中發(fā)揮作用，但其單獨(dú)檢測的鑒別價值較低，單獨(dú)檢測對于卵巢惡性腫瘤的鑒別靈敏度不足40%[6-7]。

DJ-1是新發(fā)現(xiàn)的腫瘤標(biāo)志物，其作為癌基因相關(guān)家族成員，可以對卵巢上皮細(xì)胞上游轉(zhuǎn)錄的激活程度產(chǎn)生影響，加劇癌細(xì)胞的異常分化過程。DJ-1蛋白作為腫瘤信號通路調(diào)控蛋白，其對于癌細(xì)胞內(nèi)效應(yīng)因子或者第二信使的激活，能夠加劇癌細(xì)胞核基因錯配的風(fēng)險[8]；CPH-1是結(jié)合CA125及HE4的風(fēng)險預(yù)測模型，其能夠在不同年齡段的卵巢惡性腫瘤的鑒別過程中發(fā)揮作用[9]。多數(shù)研究者單獨(dú)探討了CPH-1在卵巢腫瘤診斷過程中的作用，認(rèn)為其能夠提高卵巢惡性腫瘤的早期篩查價值[10-13]，但對于DJ-1蛋白的分析較少。

本文通過對于卵巢腫瘤患者中DJ-1蛋白、CPH-1的表達(dá)分析可見，在卵巢惡性組患者中，DJ-1蛋白的表達(dá)濃度明顯上升，而CPH-1評分也明顯的上升，高于卵巢良性腫瘤組，統(tǒng)計(jì)學(xué)差異顯著，這一結(jié)果說明DJ-1蛋白、CPH-1的高表達(dá)或者高評分都可以對卵巢惡性腫瘤的病情進(jìn)展過程產(chǎn)生影響。這主要由于DJ-1蛋白的表達(dá)上升，能夠加劇卵巢卵泡上皮細(xì)胞癌基因的激活，提高下游MAPK信號通路的激活，最終促進(jìn)癌細(xì)胞的異常發(fā)生；CPH-1評分的上升，能夠反應(yīng)體內(nèi)CA125或者HE4蛋白的波動情況，CPH-1評分越高，患者體內(nèi)腫瘤指標(biāo)的波動越為明顯，惡性腫瘤的發(fā)生風(fēng)險越高。其他相關(guān)研究也表明，在卵巢惡性腫瘤患者中，DJ-1蛋白的水平平均可上升40%，而且在多發(fā)轉(zhuǎn)移或者合并有明顯腹水的患者中，其上升更為顯著[14-15]。在探討DJ-1蛋白、CPH-1與卵巢惡性腫瘤患者臨床病理特征的關(guān)系中，得知DJ-1蛋白的表達(dá)與卵巢惡性腫瘤臨床病理特征并無密切的關(guān)系，提示DJ-1蛋白的異常表達(dá)并不會影響到癌細(xì)胞的生物學(xué)行為，不會影響到癌細(xì)胞的特征。在臨床分期較晚或者卵巢癌細(xì)胞分化程度較差的患者中，CPH-1評分明顯上升，表明CPH-1評分的改變能夠影響到卵巢癌細(xì)胞的浸潤或者癌細(xì)胞分化成熟。這主要由于CPH-1能夠反應(yīng)CA125或者HE4的表達(dá)，而CA125或者HE4的表達(dá)又直接與癌細(xì)胞的浸潤和分化過程有關(guān)。診斷學(xué)方面的分析可見，DJ-1蛋白、CPH-1在單獨(dú)診斷卵巢惡性腫瘤的過程中均具有一定的價值，但CPH-1診斷的靈敏度及特異度相對較高，臨床上可以通過CPH-1預(yù)測風(fēng)險模型，進(jìn)而評估卵巢惡性腫瘤的發(fā)生風(fēng)險。

綜上所述，在卵巢惡性腫瘤患者中，DJ-1蛋白、CPH-1明顯上升，在鑒別診斷上皮性卵巢腫瘤良惡性中的應(yīng)用價值上，CPH-1優(yōu)于血清DJ-1蛋白，能夠反應(yīng)出卵巢惡性腫瘤的惡性程度。