董慧 占建麗 謝靜
武夷山市立醫(yī)院檢驗(yàn)科 福建武夷山 354300
Fbg 也稱凝血因子I,是在肝臟中合成的一種大分子球蛋白,后主要分布于血漿中,正常血漿濃度為2.0~4.0g/L,是血液纖溶系統(tǒng)的一項(xiàng)重要指標(biāo)[1]。Fbg在凝血過程中,經(jīng)機(jī)體內(nèi)外凝血途徑產(chǎn)生的凝血酶作用下生成纖維蛋白單體,后者再在XIII 因子與鈣離子的作用下轉(zhuǎn)化交聯(lián)成穩(wěn)定的纖維蛋白多聚體(纖維蛋白),形成包羅紅細(xì)胞、血小板和白細(xì)胞等的纖維蛋白網(wǎng)[2]。同時(shí),F(xiàn)bg 也是任何基于凝固法檢測(cè)原理的血凝試驗(yàn)的核心,其結(jié)果決定了其他血凝項(xiàng)目檢測(cè)結(jié)果的可靠性[3]。本研究分析了不同血凝分析儀纖維蛋白原檢出限及原因,現(xiàn)將結(jié)果報(bào)告如下。
抽取2019 年4 月~2019 年5 月于武夷山市立醫(yī)院就診的80 例患者作為研究對(duì)象,抽取患者清晨空腹靜脈血制為無菌標(biāo)本,由檢驗(yàn)科同一醫(yī)師進(jìn)行檢驗(yàn)。置于按1:9 配置的0.109 mmol/L 枸櫞酸鈉抗凝液的試管(成品)中,3000 r/min 常溫離心10 分鐘,分離血漿。標(biāo)本應(yīng)避免溶血、黃疸、脂血及藥物等干擾,濃度盡可能覆蓋檢測(cè)項(xiàng)目線性范圍。
1.2.1 主要儀器與試劑
采用Sysmex 公司生產(chǎn)的CS5100 全自動(dòng)血凝分析儀與CA1500 全自動(dòng)血凝分析儀。購買CS5100 與CA1500 型Sysmex 系列全自動(dòng)血凝分析儀原裝配套試劑,包括配套的校準(zhǔn)品(LOT503259B)、質(zhì)控品(①548265A-異常血漿;②548068B-正常血漿)、試劑及洗液。
1.2.2 檢測(cè)方法
Thrombin Reagent 試劑冰箱取出后蒸餾水復(fù)溶,平衡室溫15 分鐘。采用CS5100 型全自動(dòng)血凝分析儀,進(jìn)行相應(yīng)校準(zhǔn)、線性、檢測(cè)限試驗(yàn)及攜帶污染率檢測(cè)(Fbg 值的誤差EA 在CLIA’88 的允許誤差范圍內(nèi))。采用Von Clauss 法對(duì)標(biāo)本進(jìn)行檢測(cè),另將所有標(biāo)本置于CA1500 血凝分析儀上測(cè)量Fbg 含量原倍值及1/2 稀釋值。
1.2.3 分析方法
Fbg 在正常血漿濃度為2.0~4.0g/L,所有標(biāo)本檢測(cè)完成后按FIB 含量分為三組:小于2.0g/L(29 例)、2.0g/L~4.0g/L(36 例)、大于4.0g/L(15 例)。分別對(duì)兩種儀器的Fbg 標(biāo)本檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。
所有數(shù)據(jù)均用SPSS22.0 統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,組間比較采用配對(duì)t 檢驗(yàn),并進(jìn)行相關(guān)性分析,P<0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
(1)當(dāng)血漿內(nèi)Fbg 含量小于2.0g/L 時(shí),不同機(jī)型與是否稀釋無顯著性差異(P >0.05);(2)當(dāng)血漿內(nèi)Fbg 含量在2.0~4.0g/L 時(shí),不同機(jī)型原倍值測(cè)定結(jié)果無顯著差異(P >0.05),不同機(jī)型與1/2 稀釋測(cè)定結(jié)果、同一機(jī)型與1/2 稀釋測(cè)定結(jié)果比較存在顯著差異(P<0.05);(3)當(dāng)血漿內(nèi)Fbg 含量大于4.0g/L 時(shí),不同機(jī)型原倍值測(cè)定結(jié)果與同一機(jī)型與1/2 稀釋測(cè)定結(jié) 果比較存在顯著性差異(P <0.05)。見表
表 不同血凝分析儀測(cè)定的Fbg 含量比較()
表 不同血凝分析儀測(cè)定的Fbg 含量比較()
纖維蛋白原(Fbg)作為急性時(shí)相反應(yīng)蛋白(APRP),其增加往往是機(jī)體的一種非特異反應(yīng)表現(xiàn)。在機(jī)體發(fā)生炎癥感染、組織損傷、心梗及腫瘤時(shí),其血漿濃度會(huì)顯著上升,會(huì)使血液處于高凝狀態(tài),易產(chǎn)生血栓,發(fā)生心梗/猝死,普遍認(rèn)為Fbg 升高是冠心病的獨(dú)立危險(xiǎn)因素[4]。而Fbg 水平越高,危險(xiǎn)性亦越大。如在心肌梗死病程中,再梗死多發(fā)生在Fbg 水平超過7g/L的患者。腎病綜合征患者因低蛋白血癥刺激肝臟代償性合成Fbg,甚至可高達(dá)10.0g/L。
近年來隨著全自動(dòng)血凝分析儀器在臨床試驗(yàn)中的廣泛應(yīng)用,檢測(cè)Fbg 最常用的是Von Clauss 法(國際標(biāo)準(zhǔn)定量法)[5]。Von Clauss 法的原理是:將足量的凝血酶加到乏血小板的待測(cè)血漿中,促使血漿中的纖維蛋白原轉(zhuǎn)變成纖維蛋白,從而使血漿凝固,結(jié)果較目前的其他方法也更為準(zhǔn)確,因而將其運(yùn)用到了本研究中Fbg 的檢測(cè)中。
本科室在過去的幾年均采用SysmexCA1500 全自動(dòng)血凝分析儀對(duì)患者的Fbg 進(jìn)行檢測(cè),科室對(duì)Fbg 的線性范圍無深入了解,且未對(duì)高Fbg 含量進(jìn)行稀釋重測(cè)的情況,臨床上也鮮有對(duì)高纖維蛋白原血癥的重視,所以導(dǎo)致多年未出現(xiàn)高Fbg 含量檢測(cè)值的情況。所以血凝儀能否檢測(cè)出高值Fbg 含量對(duì)臨床的意義也顯得越來越重要。
在本次研究中用到的CS5100 血凝分析儀與CA1500 血凝分析儀都是全自動(dòng)的,相較于大部分基層醫(yī)院使用的不能直接進(jìn)行機(jī)內(nèi)自動(dòng)稀釋的自動(dòng)或半自動(dòng)血凝檢測(cè)儀性能更為優(yōu)越,根據(jù)研究結(jié)果顯示,CS5100 全自動(dòng)血凝分析儀比CA1500 全自動(dòng)血凝分析儀更易檢出血漿原倍值的高值Fbg 含量,但CA1500全自動(dòng)血凝分析儀檢驗(yàn)稀釋后的血漿高值Fbg 含量較同機(jī)型原倍值更高。因CA1500 血凝分析儀無法自動(dòng)對(duì)高纖維蛋白原標(biāo)本進(jìn)行稀釋,當(dāng)Fbg 超出其線性范圍時(shí),則無法獲得實(shí)際的高Fbg 濃度值。所以當(dāng)在CA1500 上做的纖維蛋白原濃度檢測(cè)值大于4g/L 時(shí),建議機(jī)外稀釋再做一遍或放到CA5100血凝儀上復(fù)查,以減低實(shí)驗(yàn)過程中的檢測(cè)誤差。
綜上所述,在使用不同血凝分析儀檢測(cè)Fbg 所以要明確了解本科室血凝儀的線性范圍,明確哪些值需要進(jìn)行手工稀釋復(fù)查,制定針對(duì)該血凝儀的復(fù)查標(biāo)準(zhǔn),以保證檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,為臨床提供準(zhǔn)確、及時(shí)的檢測(cè)結(jié)果。