許瀚仁 王繼納 楊 橙 張 潮 戎瑞明 朱同玉 許 明△

（1復(fù)旦大學(xué)附屬中山醫(yī)院泌尿外科 上海 200032；2上海市器官移植重點實驗室 上海 200032）

腎移植術(shù)后BK 病毒（BK virus，BKV）感染導(dǎo)致的BKV 相關(guān)腎?。˙KV nephropathy，BKVAN）已成為移植腎功能丟失的重要原因之一[1］。BKV在人群中普遍易感，可潛伏在泌尿系統(tǒng)（尤其是腎小管）上皮細胞中。在免疫抑制狀態(tài)，腎移植患者體內(nèi)潛伏的BKV 被激活并進入腎小管上皮細胞的細胞核內(nèi)進行復(fù)制，大量病毒釋放到尿液中，引起B(yǎng)K 病毒尿癥[2］。BKV 在血液中持續(xù)高載量表達可進一步損傷移植腎組織，導(dǎo)致腎小管萎縮和間質(zhì)纖維化，最終形成BKVAN，而目前臨床上對于BKVAN 尚無確切有效的治療手段。

從BK 病毒尿癥到BKVAN 是一個BKV 感染逐步進展的病程，目前臨床上對BKV 感染進行免疫抑制劑減量干預(yù)的時機是BKV 血癥或尿液中BKV-DNA 載量持續(xù)升高[3］。研究顯示，BK 病毒尿癥對BKVAN 的陽性預(yù)測值為27.3%，而BKV 血癥則為54.5%[4］。雖然BK 病毒尿癥對BKVN 的陽性預(yù)測值較BKV 血癥低，然而卻是BKV 在腎移植患者體內(nèi)開始復(fù)制的初始階段，如果能夠在BK 病毒尿癥的階段即予以密切監(jiān)測甚至及早干預(yù)治療，將有助于控制BKV 感染進展到BKVAN。

目前臨床上診斷BK 病毒尿癥主要通過聚合酶鏈式反應(yīng)（polymerase chain reaction，PCR）來檢測尿液中BKV-DNA 的載量，當尿液中BKV-DNA 載量＞107copies/mL 時診斷為BK 病毒尿癥[5］。然而，目前國內(nèi)絕大多數(shù)醫(yī)院（包括作者所在的醫(yī)院）在臨床上并未常規(guī)開展BKV-DNA PCR 檢測的項目，通常是器官移植科室的實驗室或委托院外的檢測公司開展此項檢測業(yè)務(wù)，因而限制了這項檢測的便利性。因此，如果能夠利用臨床上已經(jīng)普遍開展的檢測方法及指標來預(yù)測BK 病毒尿癥，將有助于BK病毒尿癥的早期診斷及病程監(jiān)測。

腎小管上皮細胞在BKV 感染時的壞死和凋亡會引起炎癥反應(yīng)，損傷周圍的正常腎小管上皮細胞并導(dǎo)致其脫落，形成臨床尿常規(guī)檢測報告中的尿小圓上皮細胞（small round epithelial cells，SREC）。SREC 細胞核小呈圓形，核膜厚，胞質(zhì)內(nèi)常見顆粒，與Decoy 細胞在形態(tài)上有明顯差異[6］。 尿液中SREC 的檢測方便易行，可以通過全自動尿沉渣分析儀檢測，目前國內(nèi)大多數(shù)醫(yī)院已經(jīng)在臨床普遍開展，尿常規(guī)的項目中已包含SREC 的指標項。臨床使用的尿沉渣分析儀有高度準確性、便利性，可大量篩查疑似患者的尿液標本。正常人的尿液罕見SREC，大量的SREC 常見于急性腎小管壞死和腎小管間質(zhì)炎癥的患者[7］。此外，腎病綜合征、大量蛋白尿、腎移植術(shù)后1 周內(nèi)或移植腎發(fā)生排斥反應(yīng)，均可在患者的尿液標本中檢測到SREC。腎移植術(shù)后1 周內(nèi)，尿中可出現(xiàn)較多的SREC，隨后可逐漸減少而消失。SREC 還常見于女性月經(jīng)或是女性正常脫落細胞、尿路感染和腎炎腎損傷情況，主要以排除尿路感染的常見因素為主[8］。

本研究擬通過診斷評價方法探索采用尿常規(guī)中的SREC（即脫落的腎小管上皮細胞）指標來預(yù)測和輔助診斷腎移植術(shù)后BK 病毒尿癥的可行性和準確性，為探索采用臨床上已存在的、簡便易行的方法來診斷、監(jiān)測腎移植術(shù)后BK 病毒尿癥提供新的思路。

資料和方法

臨床資料回顧性分析2017年1月—2019年10月在復(fù)旦大學(xué)附屬中山醫(yī)院接受腎移植及隨訪的152例患者，隨訪截至2020年10月，患者隨訪時間最長為40 個月，最短為12 個月，平均隨訪時間為（18±6）個月。納入標準：（1）行1 次及以上的尿液樣本BKV-DNA 載量PCR 檢測；（2）術(shù)后穩(wěn)定長期門診隨訪、行尿常規(guī)檢測。排除標準：（1）年齡超過75歲或小于18歲；（2）移植腎功能喪失或伴有嚴重并發(fā)癥。本回顧性臨床研究方案經(jīng)復(fù)旦大學(xué)附屬中山醫(yī)院倫理委員會批準（編號：B2019-320），所有受檢者均簽署了知情同意書。臨床數(shù)據(jù)統(tǒng)計中包含腎移植患者的年齡、受者性別、免疫抑制方案、隨訪時間、HLA 匹配、血清肌酐、尿白細胞（urine white blood cells，UWBC）、尿 紅 細 胞（urine red blood cells，URBC）、SREC 陽性指標、SREC 持續(xù)陽性時間段。本研究中所有腎移植患者術(shù)后均接受鈣調(diào)磷酸酶抑制劑+麥考酚鈉/嗎替麥考酚酯+糖皮質(zhì)激素的三聯(lián)免疫抑制方案。

儀器與試劑UF-1000i 全自動尿沉渣分析儀及其配套的試劑和質(zhì)控品均購自日本希森美康株式 會 社；7500 型 定 量PCR 儀（ 美 國Applied Biosystems 公司）；BKV 核酸定量檢測試劑盒（PCR-熒光探針法，北京鑫諾美迪基因檢測技術(shù)有限公司）；OLYMPUS CKX31 倒置顯微鏡、OLYMPUS FLUOVIEW FV3000 激光共聚焦顯微鏡（日本奧林巴斯株式會社）；anti-BKV VP1（MAB3204-M02，一抗，亞諾法生技股份有限公司）；重組人細胞角蛋白18（Cytokeratin 18 antibody，CK18，ab668，一 抗），DyLight 488 Goat Anti-Mouse IgG（H+L）（二抗），山羊抗小鼠IgG H&L（Cy3 ）（二抗，艾博抗上海貿(mào)易有限公司）；DAPI 染色液（上海睿寶和生物科技有限公司）；尿沉渣染色液（S-M 方法，珠海貝索生物技術(shù)有限公司）。

尿液標本收集和實驗室檢查尿液標本留取收集依患者隨診時進行?；颊咭浦残g(shù)后1 周、2 周，1、2、3、6、12、18、24 個月常規(guī)進行尿常規(guī)檢測，以首次BKV-DNA 定量檢測為觀察期間的開始時間，觀察兩組患者在腎移植術(shù)后常規(guī)隨訪的尿常規(guī)化驗單中SREC 陽性指標，出現(xiàn)SREC 指標陽性的起始時間點和結(jié)束時間點，并計算出時間段，將持續(xù)3 周及以上的持續(xù)陽性時間視為SREC 持續(xù)陽性時間段。其中有36 名患者在隨訪期間內(nèi)BKV-DNA 載量＞1.0×107拷貝/mL，即納入BK 病毒尿癥組，101名患者在隨訪期間內(nèi)BKV-DNA 載量＜1.0×107拷貝/mL，則納入非BK 病毒尿癥組。

尿沉渣涂片及S‐M染色留取腎移植術(shù)后BKV 感染患者的晨尿10 mL，1006.3×g離心5 min，取0.1 mL 的尿沉淀成分并均勻涂在防滑玻片，放置到倒置顯微鏡下加入尿沉淀染色液（S-M 染色）后觀察。

尿沉渣免疫熒光染色收集腎移植術(shù)后BKVDNA 載量＞1.0×107拷貝/mL 患者的晨尿100 mL，1006.3×g離心10 min，倒出上清液，將底部沉淀物以同樣條件再離心10 min，取0.1 mL 的尿沉淀成分加入4% 多聚甲醛后石蠟包埋切片，使用一抗anti-BKV VP1（1∶300）和一抗CK18（1：300）染色過夜，PBS 洗滌3 次，與適當?shù)亩笽gG H&L（488）（1∶1000）和二抗IgG H&L（Cy3）（1∶1000）在室溫下孵育1 h。PBS 洗滌3 次，將載玻片用抗褪色試劑和DAPI（藍色）固定。

BKV‐DNA實時熒光定量檢測實時熒光定量聚合酶鏈式反應(yīng)檢測腎移植患者尿液或者血液中BKV-DNA 載量是目前主要診斷BKV 感染的方法[9］。臨床尿液和血漿標本送至荻碩貝肯臨床檢驗實驗室（上海）檢測并出具檢測報告，使用BKV 核酸定量檢測試劑盒（PCR-熒光探針法，北京鑫諾美迪基因檢測技術(shù)有限公司）檢測尿液中的BKV-DNA載量。 當尿液BKV-DNA 測定值≥1.0×107拷貝/mL 時定義為BK 病毒尿癥，測定值的范圍為2.0×103～5.0×108拷貝/mL，測定值＞5.0×108拷貝/mL 時，等同為5.0×108拷貝/mL。

尿流式細胞結(jié)果檢測分析尿液標本留取收集依患者隨診時進行。患者移植術(shù)后1 天，1、2、6、9、12、18 周進行常規(guī)的尿常規(guī)檢測，同時收集患者中段晨尿10 mL 分裝2 管標本，送至中山醫(yī)院檢驗科的UF-1000i 全自動尿液有形成分分析儀進行全尿液流式細胞學(xué)SREC 細胞定量指標的檢測。觀察兩組患者在腎移植術(shù)后常規(guī)隨訪的尿常規(guī)化驗單中SREC 陽性指標，出現(xiàn)SREC 指標陽性的起始時間點和結(jié)束時間點，計算出時間段，將持續(xù)3 周及以上的持續(xù)陽性時間視為SREC 持續(xù)陽性時間段。

統(tǒng)計學(xué)方法采用SPSS 22.0 統(tǒng)計分析軟件。計量資料以±s表示，符合正態(tài)分布的資料采用t檢驗，偏態(tài)分布的資料采用Mann-Whitney U 檢驗，配對四格表數(shù)據(jù)比較兩者相關(guān)性采用Kappa 檢驗。將影響因素和P＜0.05 因素納入Logistic 回歸模型計算預(yù)測腎移植術(shù)后出現(xiàn)BK 病毒尿癥感染的獨立預(yù)測因素，用ROC 曲線評估獨立預(yù)測因素對于BK病毒尿癥的診斷效能。P＜0.05 為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

結(jié)果

患者的一般臨床資料本研究中BK 病毒尿癥患者與非BK 病毒尿癥患者在年齡、性別、免疫抑制方案、隨訪時間、血清肌酐、尿白細胞和尿紅細胞的差異均無統(tǒng)計學(xué)意義，尿小圓上皮細胞陽性及其持續(xù)陽性時間段差異有統(tǒng)計學(xué)意義（表1）。

表1 腎移植患者病例資料Tab 1 The clinical data of kidney transplant recipients[±s or n（%）］

表1 腎移植患者病例資料Tab 1 The clinical data of kidney transplant recipients[±s or n（%）］

CsA：Cyclosporine A；Tac：Tacrolimus；MMF：Mycophenolate mofetil；Pred：Prednisolone；HLA：Human leukocyte antigen；SREC：Small round epithelial cell；DSRECP：Duration of SREC positivity.

Item Sex（males/females）Age（years）Follow-up duration（years）Scr（μmol/L）Postoperative immune suppressive regimen CsA+MMF+Pred Tac+MMF+Pred HLA match number URBC（+/-）UWBC（+/-）SREC（+/-）DSRECP（+/-）BK Viruria（n=36）25/1143.33±12.402.83±1.20176.63±12.8612（33.3）24（66.6）4（4，4）14/227/2934/234/2 non-BK Viruria（n=166）81/3540.78±11.393.03±1.37170.06±10.6236（31.1）80（68.9）4（4，4）66/5021/9544/7217/99 P 0.9650.4390.8350.3750.7950.2930.4700.230＜0.001＜0.001

SREC 持續(xù)陽性時間段預(yù)測BK 病毒尿癥從臨床數(shù)據(jù)分析，SREC 陽性指標與BK 病毒尿癥有明顯相關(guān)性，陽性預(yù)測值為68.97%，陰性預(yù)測值為72.68%；而多次檢測出的SREC 持續(xù)陽性時間段與BK 病毒尿癥也有相關(guān)性，陽性預(yù)測值為94.44%，陰性預(yù)測值為85.34%（表2）；單次和多次檢測的SREC 持續(xù)陽性時間段與BKV 血癥無明顯特異性，陽性預(yù)測值為11.60%，陰性預(yù)測值為98.10%。根據(jù)SREC 持續(xù)陽性時間段的出現(xiàn)與BK 病毒尿癥確診的時間節(jié)點進行比較，SREC 持續(xù)陽性時間段能提前（1.5±0.5）個月預(yù)測BK 病毒尿癥的發(fā)生。

表2 BK 病毒尿癥和多種檢測指標的預(yù)測效果Tab 2 The correlation between BK viruria and multiple clinical indicators （%）

尿SREC 中BKV 顆粒的鑒定本實驗在BK 病毒尿癥患者尿沉淀涂片直接觀察可見SREC 與Decoy 細胞同時存在，S-M 法染色后細胞形態(tài)有明顯的差異（圖1、2）。尿沉淀制成的石蠟切片免疫熒光結(jié)果顯示，VP1 僅在SREC 的細胞質(zhì)和Decoy 細胞的細胞核上表達，證明SREC 有BKV 感染，與Decoy 細胞同為BK 病毒尿癥的診斷依據(jù)（圖3）。本研究同時將不同BKV-DNA 載量、SREC 定量值的尿沉淀切片進行免疫熒光染色處理，再用Image J軟件分析圖片，從該結(jié)果可推測SREC 的數(shù)量是與尿液BKV-DNA 載量呈正比，而當尿液BKV-DNA載量越大，SREC 內(nèi)存在BKV 顆粒的細胞比例越高（圖4）。

圖1 BK 病毒尿癥患者的尿沉渣細胞涂片（鏡下，40×）Fig 1 Urine sediment cell smear of patients with BK viruria disease（light microscope，40×）

圖3 BK 病毒尿癥患者免疫熒光染色的尿沉渣切片（40×）Fig 3 Immunofluorescence staining for the BK viruria patient’s urine sediments sections（40×）

圖4 不同時間節(jié)點BKV‐DNA 載量的BK 病毒尿癥患者免疫熒光染色的尿沉渣切片（5×）Fig 4 Different BKV‐DNA loads of the BK viruria patient’s urine sediments tissue sections at various time points（5×）

尿SREC 持續(xù)陽性時間段預(yù)測BK 病毒尿癥的Logistic 回歸模型分析考慮到SREC 與尿液中存在的影響因素的相關(guān)性，使用URBC、UWBC、SREC 陽性指標和SREC 持續(xù)陽性時間段與BK 病毒尿癥作Logistic 回歸分析。結(jié)果顯示，BK 病毒尿癥與SREC陽性指標和SREC 持續(xù)陽性時間段有明顯相關(guān)性，而與URBC 和UWBC 無明顯相關(guān)性，這兩項指標對于SREC 和SREC 持續(xù)陽性時間段的預(yù)測效能沒有影響（表3）。此結(jié)果證明SREC 持續(xù)陽性時間段與BK病毒尿癥的相關(guān)性最佳。SREC 陽性指標同樣與BK病毒尿癥顯著相關(guān)。

表3 BK 病毒尿癥相關(guān)Logistic 回歸分析Tab 3 Logistic regression analysis of BK viruria

圖2 BK 病毒尿癥患者的尿沉渣涂片（S‐M 法染色，40×）Fig 2 Urine sediment smear of a patient with BK viruria（S‐M method staining，40×）

尿SREC 定量指標與尿液BKV‐DNA 定量指標成正比線性關(guān)系將BK 病毒尿癥患者術(shù)后1 天，6周、9 周、12 周定期檢測的SREC 定量指標和BKVDNA PCR 定量指標進行長期多次對比觀察，發(fā)現(xiàn)在不同患者的相同隨訪周期內(nèi)，SREC 與BKV 載量存在相似的變化趨勢且成正比關(guān)系，SREC 每增加1個/μL，BKV-DNA PCR 定量指標約增加1.1×108拷貝/mL，反之亦然。將SREC 定量指標與當日患者的尿液BKV-DNA 載量做Logistic 線性回歸模型分 析。 117 份SREC 定量 指標中，與BKV-DNA 的載 量 的 線 性 系 數(shù) 為1.1×108（95%CI：7.81×107～2.5×108，P=0.0004），由此可知SREC 的定量指標與高BKV-DNA 載量呈正相關(guān)。BK 病毒尿癥患者尿液樣本的SREC 定量指標和BKV-DNA 定量PCR 指標能擬合出一趨勢線，此結(jié)果證明SREC 的定量指標與BK 病毒尿癥的高BKV-DNA 載量有線性正相關(guān)（圖5）。

圖5 小圓上皮細胞定量值與BK 病毒尿癥患者BKV‐DNA載量的Logistic 線性回歸分析Fig 5 Logistic linear regression analysis of SRECs and BKV‐DNA load in patients with BK viruria

尿SREC 持續(xù)陽性時間段與BK 病毒尿癥的ROC 曲線本研究的腎移植患者術(shù)后發(fā)現(xiàn)BK 病毒尿癥的中位數(shù)時間在2.5 個月，而BK 病毒尿癥患者在術(shù)后（1.0±0.5）個月檢測到SREC 陽性指標，根據(jù)SREC 持續(xù)陽性時間段的出現(xiàn)與BK 病毒尿癥確診的時間節(jié)點進行比較，SREC 持續(xù)陽性時間段可能提前（1.0±0.5）個月預(yù)測BK 病毒尿癥的發(fā)生。

根據(jù)Logistic 回歸分析的結(jié)果，以SREC 持續(xù)陽性時間段來預(yù)測BK 病毒尿癥，AUC 為0.872，95%CI：0.77～0.974，cut-off 值為85.5 天，對BK 病毒尿癥有臨床預(yù)測價值（圖6）。此結(jié)果證明尿SREC持續(xù)陽性時間段預(yù)測BK 病毒尿癥發(fā)生的效能較佳，可很好降低術(shù)后BK 相關(guān)腎病的發(fā)生。

圖6 尿小圓上皮細胞持續(xù)陽性時間段預(yù)測BK 病 毒尿 癥的ROC 曲 線Fig 6 ROC curve analysis of urine DSRECP for predicting BK viruria infection

討論

BKV 的感染在健康人群中普遍存在，成年人中BKV 血清抗體陽性可達到90%[5］，平時在泌尿系統(tǒng)的腎小管上皮細胞和尿路上皮細胞里休眠潛伏。由于正常人群免疫功能正常，絕大多數(shù)被感染者終生不會出現(xiàn)BKV 感染的臨床癥狀。腎移植患者處于免疫抑制狀態(tài)，休眠狀態(tài)的BKV 可發(fā)生復(fù)制、增殖，導(dǎo)致BKV 感染。國內(nèi)文獻報道腎移植術(shù)后BK病毒尿癥、BKV 血癥和BKVAN 的發(fā)生率分別是45.6%、22.2% 和5.6%[10］。如果可以早期預(yù)測及診斷BKV 感染，則可以密切監(jiān)測并及時進行干預(yù)，從而降低BKVAN 的發(fā)生率，提高移植腎的長期存活率。

據(jù)國外文獻報道，腎移植術(shù)后BK 病毒尿癥主要發(fā)生在術(shù)后1～3月，從BK 病毒尿癥進展至BKV血癥及移植腎損傷有4～12 周的窗口期[11］。國內(nèi)的報道顯示，腎移植術(shù)后BK 病毒尿癥多發(fā)生在術(shù)后2個月左右[4］。本研究也發(fā)現(xiàn)，腎移植患者BK 病毒尿癥主要發(fā)生在術(shù)后（2.5±0.5）個月，而SREC 持續(xù)陽性時間段能提前（1.5±0.5）個月預(yù)測病毒的發(fā)生。根據(jù)2019年版美國移植學(xué)會的臨床建議，尿液細胞學(xué)檢測只有Decoy 細胞陽性才能診斷為腎移植術(shù)后多瘤病毒感染，在腎移植術(shù)后每2 周進行一次尿液細胞學(xué)檢查Decoy 細胞直到術(shù)后3 個月。而對尿BKV-DNA 載量檢測是術(shù)后每個月1 次，直到術(shù)后9 個月，再每3 個月檢測一次直到術(shù)后2年[3］。

通過尿液細胞學(xué)檢查尋找Decoy 細胞，需要經(jīng)驗豐富的技術(shù)人員，而且主觀性較強，臨床上應(yīng)用有較大局限性。基于PCR 方法的尿液BKV-DNA載量檢測是目前臨床常用方法，但是檢測過程相對比較繁瑣，而且大多數(shù)醫(yī)院未常規(guī)開展，對患者而言頻繁檢測也增加了醫(yī)療支出。如果能夠利用目前臨床上尿常規(guī)檢測項目中的某些指標，來早期預(yù)測甚至診斷BK 病毒尿癥，將有助于密切隨訪BKV的感染病程，從而有針對性地指導(dǎo)BKV 血癥和BKVAN 的檢測及監(jiān)測。SREC 指標在臨床上多出現(xiàn)于腎臟的急性腎小管壞死、腎小管間質(zhì)炎癥、尿路細菌感染、腎病綜合征和移植腎排斥等，在BKV感染方面未見文獻報道。已有研究證實，潛伏在尿路上皮中的BKV 增殖性感染可導(dǎo)致腎小管上皮細胞核損傷、細胞破碎溶解，細胞內(nèi)過氧化氫酶釋放過氧化氫氧化各類細胞器碎片[12］，釋放大量炎癥因子導(dǎo)致周圍正常腎小管上皮細胞脫落，進而從尿液中排除。然而，尚未有研究對SREC 與BKV 感染的相關(guān)性進行研究和報道。

本研究以醫(yī)院檢驗科的尿常規(guī)結(jié)果為數(shù)據(jù)，研究全自動尿沉渣檢測儀檢測SREC 指標用于臨床預(yù)測BK 病毒尿癥。由于全自動尿沉渣檢測儀可以大量、準確地測出尿液中的細胞指標，而且尿常規(guī)項目是腎移植患者術(shù)后常規(guī)的檢查項目，應(yīng)用此臨床指標診斷BK 病毒尿癥能提供更加便捷、經(jīng)濟實惠的無創(chuàng)臨床診斷方案。

我們的研究發(fā)現(xiàn)，SREC 陽性指標、定量指標、持續(xù)陽性時間段均與BK 病毒尿癥有明顯的相關(guān)性。雙重免疫熒光標記法和S-M 尿沉淀染色法同時證明SREC 細胞質(zhì)內(nèi)存在BKV 顆粒，且在該細胞核內(nèi)未發(fā)現(xiàn)BKV 顆粒，由此可知SREC 與Decoy 細胞并非相同細胞類型，而且與BK 病毒尿癥有直接相關(guān)性。由此可得出：（1）SREC 持續(xù)陽性時間段的指標能提前1 個月預(yù)測BK 病毒尿癥的發(fā)生；（2）如果SREC 陽性指標持續(xù)的時間在85 天左右，預(yù)測BK 病毒尿癥的效能最佳，陽性預(yù)測值為100%；（3）SREC 在BK 病 毒 尿 癥 中 同 樣 感 染BKV，與Decoy 細胞來源自相同的脫落腎小管上皮細胞，可能為潛在的早期Decoy 細胞的形態(tài)；（4）即使混雜了與SREC 相關(guān)性較高的尿液干擾因素，也不影響SREC 持續(xù)陽性時間段對BK 病毒尿癥的診斷效能；（5）SREC 的定量指標與BK 病毒尿癥的BKV 載量有正比關(guān)系，此研究結(jié)果可進一步探究SREC 指標診斷BK 病毒尿癥的優(yōu)化方案。

綜上所述，腎移植患者SREC 陽性指標可預(yù)測早期BKV 感染的發(fā)生，SREC 陽性時間段在預(yù)測BK 病毒尿癥方面的準確性更高，可能為本研究中最優(yōu)化的輔助診斷早期BKV 感染的臨床指標。

本研究結(jié)果尚有不足之處，如病例數(shù)不足、缺乏前瞻性研究設(shè)計、指標的特異性尚未在其他研究中驗證過，仍需進一步深入研究。

作者貢獻聲明許瀚仁 探索研究方向，數(shù)據(jù)采集，論文撰寫和修訂。 王繼納 論文構(gòu)思和指導(dǎo)，實驗設(shè)計，數(shù)據(jù)分析。楊橙 實驗設(shè)計，實證與驗證數(shù)據(jù)分析在臨床上的可行性。張潮 數(shù)據(jù)統(tǒng)計和分析，模型運算，修訂論文。戎瑞明 論文審閱和指導(dǎo)。 朱同玉 論文框架設(shè)計，調(diào)整研究計劃。許明 論文修訂和終審。

利益沖突聲明所有作者均聲明不存在利益沖突。