董 弘 于敬達

1.內(nèi)蒙古自治區(qū)婦幼保健院 內(nèi)蒙古 呼和浩特 010010;2.包頭醫(yī)學院 內(nèi)蒙古 包頭 014040

染色體倒位是常見的染色體結構畸變之一。倒位指某一染色體同時發(fā)生兩處斷裂,其中間節(jié)段與兩端節(jié)段變位重接。斷裂重接發(fā)生在同一臂內(nèi)稱為臂內(nèi)倒位,發(fā)生在兩臂之間則稱為臂間倒位。由于臂間倒位沒有引起明顯的遺傳物質(zhì)缺失,所以攜帶者大多數(shù)表型正常。目前,世界上有報道的臂間倒位有214種[1],涉及到各條染色體,其中,inv（9）是人群中最為常見的一種,約占人群總數(shù)的1%[2],對于其遺傳效應,目前爭議較多,一般認為9號染色體臂間倒位是一種多態(tài)現(xiàn)象,但越來越多的研究表明,其能夠產(chǎn)生不良的遺傳效應,有可能是導致習慣性流產(chǎn)、死胎、不育等生育異常的原因之一[3]。本研究統(tǒng)計了內(nèi)蒙古自治區(qū)婦幼保健院在2019年1月-2021年10月間因不良孕產(chǎn)史來我院就診的患者,通過外周血淋巴細胞染色體分析,檢測人群中9號臂間倒位攜帶情況,并且探討其與不良孕產(chǎn)史的相關性。

1 對象與方法

1.1 對象

2019年1月-2021年10月間因不良孕產(chǎn)史來內(nèi)蒙古自治區(qū)婦幼保健院就診的2638位患者。

1.2 方法

用肝素抗凝的真空采血管管采集就診者靜脈血2-3ml,無菌接種于5mL外周血淋巴細胞專用培養(yǎng)液（上海樂辰生物科技有限公司）中,置入恒溫箱37℃培養(yǎng)68h,加入20μg/mL秋水仙素100μL,阻斷細胞有絲分裂。繼續(xù)培養(yǎng)至72小時,收獲、制片,制備染色體G顯帶核型分析。采用萊卡GSL-120染色體自動分析系統(tǒng)采集圖像,每例計數(shù)至少30個中期分裂相,G顯帶分析5個核型,若有異常者加倍計數(shù)與分析,懷疑為9號臂間倒位者加做C顯帶以明確診斷。根據(jù)人類遺傳學國際命名體制（An International-System for Human Cytogenetic Nomenclature 2016,ISCN2016）對染色體核型進行描述和報告。

2 結果

2.1 9號染色體臂間倒位檢出率

在2638例就診者中,共檢出9號臂間倒位18例,檢出率為0.68%。其中檢查男性1307例,檢出inv（9）攜帶者9例,檢出率為0.69%;檢查女性1331例,inv（9）患者30例,檢出率為0.68%,二者比例基本相似。

2.2 9號染色體臂間倒位涉及到的染色體區(qū)段

根據(jù)ISCN2016人類細胞遺傳學國際命名體制,本次研究檢出的18例攜帶者,倒位位點均診斷為inv（9）（p12q13）,屬于ISCN界定的染色體多態(tài)區(qū)域。

3 討論

9號染色體臂間倒位是最常見的染色體畸變。目前,普遍認為9號染色體臂間倒位是一種染色體結構的多態(tài)性,本身不具有病理學意義。而也有一部分研究表明inv（9）是導致習慣性流產(chǎn)、死胎、不育等生育異常的原因之一。國外報道的9號染色體臂間倒位在人群中的發(fā)生率在1%[4];夏家輝院士通過研究報道我國的發(fā)生率為0.82%[5]。本文對我院近兩年2683例不良孕產(chǎn)史患者進行外周血染色體檢測,檢出inv（9）攜帶者18例,檢出率為0.68%,與夏家輝院士研究數(shù)據(jù)較為接近,但明顯低于王賀[6]等人1.87%的檢出率。檢出率的差異可能與地區(qū)遺傳背景的差異、檢測人群的選擇或不同實驗室檢驗水平存在差異有關。

因為臂間倒位沒有遺傳物質(zhì)的丟失,攜帶者并無表型異常,但在減數(shù)分裂過程中,會形成倒位環(huán)結構,產(chǎn)生四種配子,其中1/4正常,1/4為倒位,剩余1/2為部分缺失部分重復的重組染色體。影響遺傳效應的因素與倒位片段的長短有直接的關系,倒位片斷越長,重復和缺失的部分就越短,配子和合子正常發(fā)育的可能性越大,娩出畸形兒的可能性越高,流產(chǎn)死胎的比例越小;反之,如果倒位片段小,則發(fā)生流產(chǎn)、死胎的可能性增大,生育異常胎兒的比例較小[7]。

9號染色體的臂間倒位是否具有病理學意義,還與其倒位發(fā)生的區(qū)段有關。倒位會引起部分基因序列發(fā)生位置改變,可能引起不同程度的位置效應,基因的致死效應越強,影響越大。有文獻報道在9號染色體短臂末端到9號長臂一區(qū)二帶之間攜帶松弛素（RLX）基因,RLX會影響女性的卵泡發(fā)育的成熟過程及男性的精子運動和穿卵能力[8],如果斷裂點發(fā)生在這個節(jié)段,很可能導致不良孕產(chǎn)史的產(chǎn)生。本次研究中,所有病例均診斷為inv（9）（p12q13）,不能排除RLX基因的影響。

傳統(tǒng)的細胞遺傳學方法,受限于分辨率及核型分析人員的個人偏好,很難將9號染色體臂間倒位的位點精確定位。斷裂重接的位置是否影響到基因的正常功能,是否存在微缺失或微重復等問題均無法通過核型明確診斷,細胞遺傳學方法已經(jīng)很難滿足臨床需求,需要通過分子遺傳學方法來進一步驗證。

綜上所述,雖然目前我們依然認為9號臂間倒位多為正常變異,但越來越多的研究表明9號臂間倒位所產(chǎn)生的遺傳學效應與習慣性流產(chǎn)、死胎、不育等不良孕產(chǎn)史呈現(xiàn)正相關,因9號染色體臂間倒位引的的不良孕產(chǎn)史也越來越得到臨床醫(yī)生的重視[9]。就目前而言有關9號染色體臂間倒位是否具有臨床遺傳效應是個尚有爭議的問題。但隨著分子遺傳學技術的進一步普及,特別是近年來染色體微陣列技術、二代測序技術等先進方法的廣泛運用,對9號染色體臂間倒位位點進一步精確,從而找出9號染色體臂間倒位不同倒位位點導致的相應臨床癥狀,能夠更好的為臨床咨詢及產(chǎn)前診斷服務。