朱國勝，邱麗影，林立鵬，方小龍

（深圳市福田區(qū)婦幼保健院，廣東 深圳 518048）

0 引言

臨床中，貧血主要指血液紅細(xì)胞總量顯著低于正常水平，屬于一種常見病癥。由于誘發(fā)貧血的原因較多且發(fā)病機(jī)制較為復(fù)雜，所以貧血類型往往存在較大的差異[1]。對貧血患者實施治療時，多需要結(jié)合患者的臨床癥狀和體征，并與貧血的類型特點(diǎn)相結(jié)合，繼而擬定針對性的治療方案。與此同時，不同類型的貧血在實施血常規(guī)檢查時，尤其是地中海貧血和缺鐵性貧血在進(jìn)行檢查時，往往采用血常規(guī)檢測的難度較大，所以積極探尋貧血患者的診斷和鑒別措施具有重要意義[2]。地中海貧血在嬰兒中較為常見，亦被叫做海洋性貧血，屬于溶血性貧血、遺傳性貧血疾病，對患者生命健康有極大威脅[3]。臨床治療地中海貧血患者中，并無特效藥治療，為降低疾病發(fā)病率，主要通過篩查育齡夫婦方式，判斷其有無攜帶情況[4]。而在診斷方面，血紅蛋白疾病的篩查可選擇全自動血紅蛋白電泳方式，這種診斷篩查近年來被廣泛應(yīng)用，可為臨床診療工作提供有效參考[5]。本次研究將采用回顧性分析方法，對醫(yī)院血液檢查者8950 例利用全自動血紅蛋白電泳診斷結(jié)果進(jìn)行總結(jié)。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2019 年1 月至2019 年12 月深圳市福田區(qū)婦幼保健院就診的產(chǎn)前檢查夫婦8950 例，其中男4096 例，女4854 例。所有研究對象同時進(jìn)行血常規(guī)檢測與Hb 電泳檢測，如血常規(guī)檢查結(jié)果紅細(xì)胞容積降低，血紅蛋白成分檢測有異常，則進(jìn)行地中海貧血基因檢測。

1.2 方法

用EDTA-K2 抗凝管采集靜脈血2 管，每管2mL，用于血常規(guī)及血紅蛋白電泳檢測。

血常規(guī)檢測：采用邁瑞B(yǎng)C-6800 全自動血液細(xì)胞分析儀測定。

血紅蛋白電泳：采用全自動血紅蛋白電泳儀（生產(chǎn)廠家為Sebia 公司）及配套試劑。將標(biāo)本離心，去血漿，上電泳儀，分析血紅蛋白組分。正常成人男女參考值為2.5%≤HbA2 ≤3.5%，HbF ≤2.0%，且無異常血紅蛋白條帶。如HbA2<2.5%，則懷疑為α-地中海貧血；如HbA2>3.5%或HbF>2.0%且出現(xiàn)異常條帶，則為疑似β-地中海貧血[6]。對于血紅蛋白電泳篩查疑似地中海貧血樣本則進(jìn)行地貧基因檢測，測試主要通過α-地中海貧血基因檢測試劑盒（缺失型）以及β-地中海貧血檢測試劑盒實現(xiàn)。

2 結(jié)果

2.1 全自動血紅蛋白電泳篩查結(jié)果

8950 例樣本中，血紅蛋白電泳檢驗呈陽性結(jié)果的共942 例，占10.53%，疑似α-地中海貧血767 例（8.57%），疑似β-地中海貧血175 例（1.96%）。

2.2 基因診斷結(jié)果

對767例疑似α-地中海貧血患者和175例疑似β-地中海貧血患者進(jìn)行基因診斷，確診α-地中海貧血患者388 例（4.34%），Hb 電泳與基因檢測的符合率為50.59%；確診β-地中海貧血175 例（1.96%），Hb電泳與基因檢測的符合率為100%。見表1。

3 討論

地中海貧血是一組遺傳性血液病，由一個或多個血紅蛋白鏈合成缺陷引起。α-地貧是由α 珠蛋白鏈合成減少或缺乏引起的，β-地貧是由β 珠蛋白鏈合成減少或缺乏引起的[7]。球蛋白鏈的不平衡引起溶血，損害紅細(xì)胞生成。地中海貧血的沉默攜帶者和具有地中海貧血特征的人是無癥狀的，不需要治療。中間型-地中海貧血，或血紅蛋白H 病，會引起溶血性貧血；伴有巴特血紅蛋白的大地中海貧血通常會導(dǎo)致致命的胎兒水腫[8]。主要的地中海貧血在嬰兒期會引起溶血性貧血、生長不良和骨骼異常，受影響的兒童需要終身定期輸血。中間型地中海貧血病比重度地中海貧血病輕，可能需要間歇輸血[9]。輸血依賴的患者會出現(xiàn)鐵超載，需要進(jìn)行螯合治療以清除多余的鐵。骨髓移植可以治愈一些患有嚴(yán)重地中海貧血的兒童。地中海貧血患者應(yīng)接受孕前遺傳咨詢，具有α-地中海貧血特征的人應(yīng)考慮進(jìn)行絨毛膜絨毛取樣，以診斷嬰兒是否患有血紅蛋白巴特氏綜合征，這增加了毒血癥和產(chǎn)后出血的風(fēng)險。具有地中海貧血特征的人有正常的預(yù)期壽命[10]，但重度地中海貧血患者通常在30 歲前死于鐵超載引起的心臟并發(fā)癥。為此，為了減少地中海貧血的影響，提高患者生存率，需要采用一種有效的方式進(jìn)行疾病篩查，及時、準(zhǔn)確地發(fā)現(xiàn)地中海貧血疾病病例，并進(jìn)行準(zhǔn)確的病情預(yù)測，制定有效治療方案。

臨床中，血液珠蛋白產(chǎn)生出現(xiàn)障礙而導(dǎo)致的貧血性疾病被稱之為地中海貧血，其中多為遺傳學(xué)貧血。換言之，地中海貧血是由于基因缺陷而導(dǎo)致的貧血性疾病，具有復(fù)雜性和多樣性等特點(diǎn)，所以導(dǎo)致合成血紅蛋白過程中珠蛋白肽鏈也存在著一定的差異性，且患者發(fā)病時均無顯著臨床癥狀[11]。具體而言，地中海貧血是臨床常見的常染色體隱性遺傳病，發(fā)病原因歸結(jié)于珠蛋白基因突變、基因缺失等，造成珠蛋白肽鏈一種或幾種合成減少或不能合成，使形成血紅蛋白的α 鏈和非α 鏈比例失衡，從而引發(fā)溶血性貧血，危及患者身心健康，且嚴(yán)重影響生活質(zhì)量[12]。我國廣西、廣東、海南等省區(qū)為高發(fā)地區(qū)，廣東省戶籍人群地貧基因平均攜帶率為16.8%，其中13.31%為α-地貧突變，4.53%為β-地貧突變[4]。由于地貧的高發(fā)生率及治療困難，故把握婚檢、孕檢、產(chǎn)檢的地貧篩查與診斷三道關(guān)是控制地貧的有效措施。目前，地中海貧血基因檢測是診斷該病的金標(biāo)準(zhǔn)，由于基因檢測的成本明顯高于其他檢測方法，不適用于常規(guī)檢查，也無法對人群進(jìn)行普查，因此，常用方便、耗時短、成本低的血常規(guī)與血紅蛋白電泳檢測進(jìn)行地中海貧血篩查[13]。全自動血清蛋白電泳(automatic serum albumen electrophoresis),蛋白因分子大小和表面電荷的差別而以不同速度在直流電場泳動分離稱蛋白電泳,而結(jié)果主要是根據(jù)其各類蛋白組分的高低變化，提示內(nèi)容主要包括：低γGlb 血癥的可能、低蛋白血癥的可能、肝功能障礙、肝臟疾病、高γGlb血癥的可能、急性炎癥、慢性炎癥、營養(yǎng)不良和M 蛋白等項[14-15]。使用全自動血清蛋白電泳定量分析并檢測地中海貧血可以從蛋白質(zhì)的方面進(jìn)行檢測和分型，因為蛋白質(zhì)屬于良性電解質(zhì)，具有等電點(diǎn)，因此，蛋白質(zhì)在ph 值高于等電點(diǎn)時會帶上負(fù)電，ph 值低于等電點(diǎn)時則會帶上正電，具有差異的蛋白質(zhì)存在不一樣的等電點(diǎn)，在電泳作用下會在等電點(diǎn)處聚集，使得蛋白質(zhì)被分離出不同的種類。如此可在電泳作用后出現(xiàn)具有差異性的條帶，在進(jìn)行完條帶脫色后就可從顏色深淺上去進(jìn)行蛋白質(zhì)含量的判斷。

通過血紅蛋白電泳能夠定量分析血紅蛋白成分包括HbF、HbA 與Hb A2,還可篩查出異常血紅蛋白，根據(jù)Hb A2 含量與是否出現(xiàn)異常血紅蛋白，可對地中海貧血進(jìn)行初步分類，為地中海貧血的基因診斷與遺傳咨詢提供基礎(chǔ)[16]。

本文通過回顧8950 例樣本血紅蛋白電泳篩查結(jié)果顯示,在我院育齡人群中地中海貧血初篩陽性率為10.53%，血紅蛋白電泳檢驗呈陽性結(jié)果的共942例，疑似α-地中海貧血767 例（8.57%），疑似β-地中海貧血175 例（1.96%），與陳忠領(lǐng)[17]關(guān)于深圳育齡人群地中海貧血初篩陽性率相近。本研究的基因診斷結(jié)果顯示，α-地貧的初篩符合率只有50.6%，β-地貧的初篩符合率達(dá)到100%。這是由于β-地中海貧血患者中，β 珠蛋白基因缺陷，β 鏈合成減少，而δ 珠蛋白基因表達(dá)產(chǎn)物相對增多，與α 珠蛋白鏈結(jié)合形成Hb A2(α2δ2)，Hb A2 含量增高明顯。α-地貧的初篩符合率低，可能是因為缺鐵使Hb A2 含量降低，或本研究只檢測缺失型α-地貧，未檢測突變型α-地貧。值得注意的是，在研究過程中，發(fā)現(xiàn)有部分樣本血常規(guī)MCV、MCH 指標(biāo)下降，但血紅蛋白電泳篩查中Hb A2 正常，這說明血紅蛋白電泳對α-地貧的篩查存在漏診的可能，王玉霞[18]的研究探討血紅蛋白A2 在靜止型和標(biāo)準(zhǔn)型α-地中海貧血篩查中的價值，也表明MCV 和MCH 兩項指標(biāo)篩查陽性的可疑地貧患者中靜止型和標(biāo)準(zhǔn)型α-地貧陽性率為39.96%，其中Hb A2 正常者達(dá)83.05%。血紅蛋白電泳對α-地貧，尤其是靜止型和標(biāo)準(zhǔn)型α-地貧的篩查存在假陰性或假陽性。

綜上所述，地中海貧血篩查中，全自動血紅蛋白電泳結(jié)合血常規(guī)檢測成本低、操作簡單，可對地中海貧血進(jìn)行初步分類，為地中海貧血的診斷提供了重要依據(jù)，同時也可為婚前、產(chǎn)前優(yōu)生優(yōu)育指導(dǎo)的開展奠定基礎(chǔ)；但其對α-地貧存在一定漏診，必要時應(yīng)進(jìn)行基因檢測。