巖 銳

（云南省普洱市孟連縣動物衛(wèi)生監(jiān)督所，云南 普洱 665800）

豬瘟病毒（CSFV）屬于黃病毒科瘟病毒屬，該病原感染豬只后可引發(fā)嚴重的臨床癥狀，其中包括體溫升高、飲食欲廢絕、皮膚發(fā)紺、腹瀉或便秘，且妊娠母豬可出現(xiàn)繁殖障礙性疾?。ㄈ缌鳟a(chǎn)、死胎等），而特征性病理變化則包括有脾臟邊緣梗死、腎臟表面點狀出血、回腸末端等處有紐扣狀潰瘍等[1-2]。豬圓環(huán)病毒2型（PCV2）是導(dǎo)致斷奶仔豬多系統(tǒng)衰竭綜合征的重要病原之一，該病原可感染不同發(fā)育階段豬群，但對仔豬危害更為嚴重，可導(dǎo)致病畜出現(xiàn)淋巴結(jié)腫大、呼吸困難等癥狀，是重要的可引起豬群發(fā)生免疫抑制的病原，對我國養(yǎng)殖業(yè)危害巨大[3]。

目前對于傳染性病原的防控主要依賴于疫苗的免疫接種與加強飼養(yǎng)管理水平等，但部分豬場在對豬群進行疫苗免疫接種時往往存在少打或漏打的情況，或者免疫程序不科學(xué)合理，疫苗運輸保存方法不科學(xué)等原因，都會導(dǎo)致豬群對特定病原存在特定免疫空窗期，極易受到相應(yīng)病原的感染。文章以一例CSFV和PCV2混合感染的案例診斷與治療為切入點，詳細闡述其發(fā)病原因與診斷經(jīng)過，為此類疫病的防控提供科學(xué)參考。

1 發(fā)病情況

孟連某生豬散養(yǎng)戶飼養(yǎng)母豬30余頭，同時在2020年7月中旬從外購入60余頭保育豬進行飼養(yǎng)。8月初，該場新購的部分保育豬開始發(fā)病，主要表現(xiàn)為精神沉郁、采食量下降、體溫升高等，同時伴有腹瀉和發(fā)抖癥狀。養(yǎng)殖戶采用抗生素藥物治療基本無效，期間已有18頭保育豬發(fā)病，6頭發(fā)病死亡。其后，養(yǎng)殖戶于8月20日至孟連縣動物衛(wèi)生監(jiān)督所進行報告并咨詢診斷、治療方法。

2 病理變化

筆者前往該場進行現(xiàn)場診斷，對即將死亡的病豬進行解剖，觀察其病理變化。剖檢發(fā)現(xiàn)病豬喉頭會厭軟骨有點狀出血、全身淋巴結(jié)腫大且充血或出血，腎臟表面有大小不一的出血點，肺臟出血并伴有局部肺小葉肝變，脾臟邊緣有梗死灶；此外，病豬腸道出血，且回盲瓣及空回腸黏膜面有大小不一的紐扣狀潰瘍。

3 實驗室診斷

3.1 樣品采集與處理

采集病豬病變明顯的臟器組織，如腎臟、脾臟、淋巴結(jié)、扁桃體等組織，分別裝入潔凈的封口袋并標記，低溫保存并送至疫病診斷中心進行實驗室診斷。用滅菌鑷子和眼科剪在生物安全柜內(nèi)取適量組織樣品，將組織樣品剪碎后與適量滅菌生理鹽水混合，并充分研磨，將研磨液過濾后，取上清樣品進行實驗室診斷。

3.2 細菌分離培養(yǎng)

用無菌接種針反復(fù)穿刺內(nèi)臟組織樣品后在鮮血瓊脂培養(yǎng)基表面進行平板劃線，其后將培養(yǎng)基平皿倒扣在37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)24～48 h，并每隔12 h拿出觀察培養(yǎng)基表面是否有菌落長出。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，培養(yǎng)基表面未生長出菌落；為進一步確定，筆者將發(fā)病組織新鮮切面直接觸片后進行革蘭氏染色鏡檢，結(jié)果在觸片中也未發(fā)現(xiàn)細菌，提示本次豬群發(fā)病非細菌感染引起。

3.3 病毒核酸檢測

取200μL上述研磨上清用商業(yè)化DNA/RNA提取試劑盒進行核酸提取，采用PCR方法分別檢測豬瘟病毒（CSFV）、豬藍耳病病毒（PRRSV）、圓環(huán)病毒2型（PCV2）和偽狂犬病病毒（PRV）。結(jié)果在病豬內(nèi)臟組織中僅檢測出CSFV和PCV2核酸呈陽性，且進一步測序結(jié)果表明，該場獲得的CSFV毒株與GenBank收錄的HNCS-2011a株（登錄號：JX898523）同源性最高，為2.1c亞型；而PCV2毒株則與GenBank中SX1501株（登錄號：KJ187306）同源性最高，為PCV 2d亞型。

3.4 診斷結(jié)果

通過臨床及實驗室診斷結(jié)果，最終判定該場豬群發(fā)病由CSFV和PCV2混合感染所引起，且均為野毒感染。由于病豬未出現(xiàn)明顯的PCV2感染導(dǎo)致的示病性癥狀，所以可以認為豬群發(fā)病主要由CSFV感染引起。

4 緊急措施

4.1 疫苗免疫接種

據(jù)了解，該批外購保育仔豬的免疫背景不清楚，而本豬場免疫接種過CSFV和PCV2疫苗的豬群均未發(fā)病，故筆者推測該批發(fā)病外購保育豬群可能是由于豬瘟疫苗免疫失?。ㄊ苣冈纯贵w干擾）或未免疫從而導(dǎo)致臨床發(fā)病。因此，馬上對全群外購保育豬緊急免疫接種豬瘟E2亞單位疫苗1頭份/豬。

4.2 其他防控措施

將發(fā)病豬群與健康豬群進行隔離飼養(yǎng)，為提高發(fā)病豬群存活率或免疫力，在每噸飼料中添加茯苓多糖1 kg，均勻攪拌后給豬群飼喂，連續(xù)飼喂2周；在豬群飲水中添加葡萄糖和電解多維。此外，為防止繼發(fā)感染，在飼料中也添加多環(huán)西素（500 g/t），連續(xù)用藥2周。

5 治療效果

緊急防控措施實施1個月后，回訪該養(yǎng)殖場，該場原先發(fā)病豬群基本康復(fù)，新生仔豬未出現(xiàn)疑似感染CSFV相關(guān)癥狀。此外，對采集的20份血清樣品（仔豬、母豬和保育豬分別為5、5和10份）進行CSFV抗體檢測，發(fā)現(xiàn)豬瘟抗體陽性率達95%，平均阻斷率達75%以上。

6 小結(jié)與討論

豬瘟在我國流行歷史悠久，目前該病在我國流行特點以散發(fā)和混合感染為主，雖然該病在我國規(guī)?；i場發(fā)生頻率較低，但該病仍對我國養(yǎng)豬業(yè)的健康發(fā)展具有很大的威脅。對于豬瘟的防控主要依賴于疫苗免疫接種，豬瘟兔化弱毒疫苗推廣應(yīng)用是我國防控豬瘟的主要措施之一，但對發(fā)病豬群免疫接種弱毒疫苗會導(dǎo)致病毒被體內(nèi)中和抗體所清除，影響免疫效果，故不適合對發(fā)病豬群進行弱毒苗緊急免疫[4]。在本案例中雖然診斷結(jié)果表明保育豬群發(fā)病主要是CSFV和PCV2混合感染引起，但病豬未表現(xiàn)出PCV2感染的典型癥狀，因此，推測PCV2感染并非此次案例的主導(dǎo)感染，故而主要對豬瘟進行緊急防控，通過對豬群緊急免疫接種豬瘟E2亞單位疫苗最終使疫情得到控制，E2蛋白可誘導(dǎo)豬群產(chǎn)生針對CSFV的中和抗體，且其中含有的E2蛋白遠高于弱毒疫苗，且其產(chǎn)生的免疫應(yīng)答受母源抗體干擾小，故可取得較好的防控效果。

由于豬群未表現(xiàn)PCV2感染典型癥狀，通過在飼料中添加多糖、維生素等手段提高豬群免疫力，同時對豬群進行抗生素治療防止繼發(fā)感染，使得該場豬群疫情得到有效緩解。值得注意的是，若豬場考慮對豬群CSFV和PCV2進行凈化，需要定期對豬群免疫接種相應(yīng)疫苗，同時結(jié)合抗體監(jiān)測及時補免，對病原陽性豬群進行隔離治療或淘汰等也十分必要。