巖 銳

（云南省普洱市孟連縣動(dòng)物衛(wèi)生監(jiān)督所，云南 普洱 665800）

豬瘟病毒（CSFV）屬于黃病毒科瘟病毒屬，該病原感染豬只后可引發(fā)嚴(yán)重的臨床癥狀，其中包括體溫升高、飲食欲廢絕、皮膚發(fā)紺、腹瀉或便秘，且妊娠母豬可出現(xiàn)繁殖障礙性疾病（如流產(chǎn)、死胎等），而特征性病理變化則包括有脾臟邊緣梗死、腎臟表面點(diǎn)狀出血、回腸末端等處有紐扣狀潰瘍等[1-2]。豬圓環(huán)病毒2型（PCV2）是導(dǎo)致斷奶仔豬多系統(tǒng)衰竭綜合征的重要病原之一，該病原可感染不同發(fā)育階段豬群，但對(duì)仔豬危害更為嚴(yán)重，可導(dǎo)致病畜出現(xiàn)淋巴結(jié)腫大、呼吸困難等癥狀，是重要的可引起豬群發(fā)生免疫抑制的病原，對(duì)我國(guó)養(yǎng)殖業(yè)危害巨大[3]。

目前對(duì)于傳染性病原的防控主要依賴于疫苗的免疫接種與加強(qiáng)飼養(yǎng)管理水平等，但部分豬場(chǎng)在對(duì)豬群進(jìn)行疫苗免疫接種時(shí)往往存在少打或漏打的情況，或者免疫程序不科學(xué)合理，疫苗運(yùn)輸保存方法不科學(xué)等原因，都會(huì)導(dǎo)致豬群對(duì)特定病原存在特定免疫空窗期，極易受到相應(yīng)病原的感染。文章以一例CSFV和PCV2混合感染的案例診斷與治療為切入點(diǎn)，詳細(xì)闡述其發(fā)病原因與診斷經(jīng)過，為此類疫病的防控提供科學(xué)參考。

1 發(fā)病情況

孟連某生豬散養(yǎng)戶飼養(yǎng)母豬30余頭，同時(shí)在2020年7月中旬從外購(gòu)入60余頭保育豬進(jìn)行飼養(yǎng)。8月初，該場(chǎng)新購(gòu)的部分保育豬開始發(fā)病，主要表現(xiàn)為精神沉郁、采食量下降、體溫升高等，同時(shí)伴有腹瀉和發(fā)抖癥狀。養(yǎng)殖戶采用抗生素藥物治療基本無效，期間已有18頭保育豬發(fā)病，6頭發(fā)病死亡。其后，養(yǎng)殖戶于8月20日至孟連縣動(dòng)物衛(wèi)生監(jiān)督所進(jìn)行報(bào)告并咨詢?cè)\斷、治療方法。

2 病理變化

筆者前往該場(chǎng)進(jìn)行現(xiàn)場(chǎng)診斷，對(duì)即將死亡的病豬進(jìn)行解剖，觀察其病理變化。剖檢發(fā)現(xiàn)病豬喉頭會(huì)厭軟骨有點(diǎn)狀出血、全身淋巴結(jié)腫大且充血或出血，腎臟表面有大小不一的出血點(diǎn)，肺臟出血并伴有局部肺小葉肝變，脾臟邊緣有梗死灶；此外，病豬腸道出血，且回盲瓣及空回腸黏膜面有大小不一的紐扣狀潰瘍。

3 實(shí)驗(yàn)室診斷

3.1 樣品采集與處理

采集病豬病變明顯的臟器組織，如腎臟、脾臟、淋巴結(jié)、扁桃體等組織，分別裝入潔凈的封口袋并標(biāo)記，低溫保存并送至疫病診斷中心進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室診斷。用滅菌鑷子和眼科剪在生物安全柜內(nèi)取適量組織樣品，將組織樣品剪碎后與適量滅菌生理鹽水混合，并充分研磨，將研磨液過濾后，取上清樣品進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室診斷。

3.2 細(xì)菌分離培養(yǎng)

用無菌接種針反復(fù)穿刺內(nèi)臟組織樣品后在鮮血瓊脂培養(yǎng)基表面進(jìn)行平板劃線，其后將培養(yǎng)基平皿倒扣在37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)24～48 h，并每隔12 h拿出觀察培養(yǎng)基表面是否有菌落長(zhǎng)出。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，培養(yǎng)基表面未生長(zhǎng)出菌落；為進(jìn)一步確定，筆者將發(fā)病組織新鮮切面直接觸片后進(jìn)行革蘭氏染色鏡檢，結(jié)果在觸片中也未發(fā)現(xiàn)細(xì)菌，提示本次豬群發(fā)病非細(xì)菌感染引起。

3.3 病毒核酸檢測(cè)

取200μL上述研磨上清用商業(yè)化DNA/RNA提取試劑盒進(jìn)行核酸提取，采用PCR方法分別檢測(cè)豬瘟病毒（CSFV）、豬藍(lán)耳病病毒（PRRSV）、圓環(huán)病毒2型（PCV2）和偽狂犬病病毒（PRV）。結(jié)果在病豬內(nèi)臟組織中僅檢測(cè)出CSFV和PCV2核酸呈陽性，且進(jìn)一步測(cè)序結(jié)果表明，該場(chǎng)獲得的CSFV毒株與GenBank收錄的HNCS-2011a株（登錄號(hào)：JX898523）同源性最高，為2.1c亞型；而PCV2毒株則與GenBank中SX1501株（登錄號(hào)：KJ187306）同源性最高，為PCV 2d亞型。

3.4 診斷結(jié)果

通過臨床及實(shí)驗(yàn)室診斷結(jié)果，最終判定該場(chǎng)豬群發(fā)病由CSFV和PCV2混合感染所引起，且均為野毒感染。由于病豬未出現(xiàn)明顯的PCV2感染導(dǎo)致的示病性癥狀，所以可以認(rèn)為豬群發(fā)病主要由CSFV感染引起。

4 緊急措施

4.1 疫苗免疫接種

據(jù)了解，該批外購(gòu)保育仔豬的免疫背景不清楚，而本豬場(chǎng)免疫接種過CSFV和PCV2疫苗的豬群均未發(fā)病，故筆者推測(cè)該批發(fā)病外購(gòu)保育豬群可能是由于豬瘟疫苗免疫失敗（受母源抗體干擾）或未免疫從而導(dǎo)致臨床發(fā)病。因此，馬上對(duì)全群外購(gòu)保育豬緊急免疫接種豬瘟E2亞單位疫苗1頭份/豬。

4.2 其他防控措施

將發(fā)病豬群與健康豬群進(jìn)行隔離飼養(yǎng)，為提高發(fā)病豬群存活率或免疫力，在每噸飼料中添加茯苓多糖1 kg，均勻攪拌后給豬群飼喂，連續(xù)飼喂2周；在豬群飲水中添加葡萄糖和電解多維。此外，為防止繼發(fā)感染，在飼料中也添加多環(huán)西素（500 g/t），連續(xù)用藥2周。

5 治療效果

緊急防控措施實(shí)施1個(gè)月后，回訪該養(yǎng)殖場(chǎng)，該場(chǎng)原先發(fā)病豬群基本康復(fù)，新生仔豬未出現(xiàn)疑似感染CSFV相關(guān)癥狀。此外，對(duì)采集的20份血清樣品（仔豬、母豬和保育豬分別為5、5和10份）進(jìn)行CSFV抗體檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)豬瘟抗體陽性率達(dá)95%，平均阻斷率達(dá)75%以上。

6 小結(jié)與討論

豬瘟在我國(guó)流行歷史悠久，目前該病在我國(guó)流行特點(diǎn)以散發(fā)和混合感染為主，雖然該病在我國(guó)規(guī)模化豬場(chǎng)發(fā)生頻率較低，但該病仍對(duì)我國(guó)養(yǎng)豬業(yè)的健康發(fā)展具有很大的威脅。對(duì)于豬瘟的防控主要依賴于疫苗免疫接種，豬瘟兔化弱毒疫苗推廣應(yīng)用是我國(guó)防控豬瘟的主要措施之一，但對(duì)發(fā)病豬群免疫接種弱毒疫苗會(huì)導(dǎo)致病毒被體內(nèi)中和抗體所清除，影響免疫效果，故不適合對(duì)發(fā)病豬群進(jìn)行弱毒苗緊急免疫[4]。在本案例中雖然診斷結(jié)果表明保育豬群發(fā)病主要是CSFV和PCV2混合感染引起，但病豬未表現(xiàn)出PCV2感染的典型癥狀，因此，推測(cè)PCV2感染并非此次案例的主導(dǎo)感染，故而主要對(duì)豬瘟進(jìn)行緊急防控，通過對(duì)豬群緊急免疫接種豬瘟E2亞單位疫苗最終使疫情得到控制，E2蛋白可誘導(dǎo)豬群產(chǎn)生針對(duì)CSFV的中和抗體，且其中含有的E2蛋白遠(yuǎn)高于弱毒疫苗，且其產(chǎn)生的免疫應(yīng)答受母源抗體干擾小，故可取得較好的防控效果。

由于豬群未表現(xiàn)PCV2感染典型癥狀，通過在飼料中添加多糖、維生素等手段提高豬群免疫力，同時(shí)對(duì)豬群進(jìn)行抗生素治療防止繼發(fā)感染，使得該場(chǎng)豬群疫情得到有效緩解。值得注意的是，若豬場(chǎng)考慮對(duì)豬群CSFV和PCV2進(jìn)行凈化，需要定期對(duì)豬群免疫接種相應(yīng)疫苗，同時(shí)結(jié)合抗體監(jiān)測(cè)及時(shí)補(bǔ)免，對(duì)病原陽性豬群進(jìn)行隔離治療或淘汰等也十分必要。