李麗霞，員曉慶，唐甜，梁曉彤，陳盛楠，張浩吉，黃良宗，司興奎，劉昊

（佛山科學(xué)技術(shù)學(xué)院，廣東 佛山 528200）

巴泰病毒（Batai virus,BATV）屬于布尼亞病毒科（Bnuyaviridae）布尼亞病毒屬（Bunyavirus）布尼亞姆韋拉（Bunyamwera）血清組病毒成員[1]。該病毒在自然界中主要以“蚊蟲(chóng)-脊椎動(dòng)物-蚊蟲(chóng)”的方式循環(huán)，涉及的地區(qū)和宿主十分廣泛，例如歐洲、亞洲以及非洲中部地區(qū)的很多國(guó)家，都先后分離到該病毒[2]。BATV最早是從馬來(lái)西亞的吉隆坡地區(qū)捕獲的庫(kù)蚊體中分離到，隨后在非洲流行造成數(shù)萬(wàn)人感染，部分感染者出現(xiàn)死亡現(xiàn)象。經(jīng)研究發(fā)現(xiàn)該次流行的病原體是由BATV發(fā)生基因重配（genetic reassortment）形成的新毒株Ngari病毒而引起，給當(dāng)?shù)氐墓残l(wèi)生安全帶來(lái)嚴(yán)重威脅[3]。我國(guó)科學(xué)家于1998年從云南省思茅地區(qū)按蚊體中首次分離到BATV（YN92-4）株[4]。2012年從內(nèi)蒙古牛血清中分離到1株牛源BATV（NM/12）株[5]。2014年從浙江某鴨場(chǎng)送檢的成年番鴨體中分離得到1株鴨源BATV（ZJ2014）株，以上研究表明了BATV在中國(guó)不同的宿主動(dòng)物中廣泛存在[6]，并且國(guó)外科學(xué)家也在多個(gè)地區(qū)的牛、豬和猴等哺乳動(dòng)物體中檢測(cè)到BATV陽(yáng)性抗體，甚至在嚙齒動(dòng)物體中也分離到該病毒[7-12]。2016年，在德國(guó)死亡的海豹體內(nèi)分離到1株BATV，感染海豹表現(xiàn)出嚴(yán)重的腦膜炎等臨床癥狀，海豹對(duì)BATV特別敏感，加上高齡、并發(fā)癥和免疫缺陷等問(wèn)題導(dǎo)致病情尤為嚴(yán)重。因此，推測(cè)免疫功能低下的人類或其他哺乳動(dòng)物會(huì)增加患神經(jīng)源性BATV感染的風(fēng)險(xiǎn)[13]。

1 病原學(xué)特性

1.1 基因特征

布尼亞病毒科是最大的RNA病毒家族成員之一，而布尼亞病毒屬是布尼亞病毒科中最大的屬，至少有260種病毒。目前該病毒科在我國(guó)發(fā)現(xiàn)的病毒主要有克里米亞-剛果出血熱病毒（CCHFV）、Tahyna病毒和BATV等[14]。BATV病毒粒子呈現(xiàn)圓形，電鏡下觀察有包膜，與同病毒組的布尼安姆韋拉病毒大小相似，直徑約為80 nm左右[15,16]。BATV為單股負(fù)鏈RNA病毒，由?。⊿）、中（M）和大（L）3個(gè)片段組成，在我國(guó)首次分離的YN92-4毒株S片段長(zhǎng)947 nt，5'非編碼區(qū)長(zhǎng)68 nt，編碼區(qū)含兩個(gè)開(kāi)放閱讀框（第69～770 nt和第88～393nt），分別編碼含核衣殼蛋白N和非結(jié)構(gòu)蛋白NS，3'非編碼區(qū)長(zhǎng)177 nt。M片段長(zhǎng)度為4 371 nt，3'非編碼區(qū)為35 nt，5'非編碼區(qū)長(zhǎng)31 nt，可編碼前體蛋白。L片段長(zhǎng)度為6 860 nt，5'非編碼區(qū)長(zhǎng)含35 nt，開(kāi)放閱讀為第36～6 752 nt，共6 717 nt，編碼含2 239個(gè)氨基酸，3'非編碼區(qū)長(zhǎng)108 nt[1]。

1.2 基因重配

據(jù)報(bào)道，BATV MM2222株、ON-1/E/94株、ON-7/B/01株與Bunyamwera和Ngari的S和L片段同源性較低，而Ngari與Bunyamwera同源性較高；BATV M片段與Ngari同源性較高（88.0%～95.0%），顯著高于Bunyamwera病毒（64.0%～64.9%）。因此推測(cè)BATV可能與Bunyamwera病毒M片段發(fā)生基因重配形成致病力更強(qiáng)的Ngari，該病毒曾在東非多個(gè)地區(qū)暴發(fā)和流行，引起人群嚴(yán)重發(fā)熱性疾病甚至死亡[17-19]?？茖W(xué)家通過(guò)分子克隆互補(bǔ)DNA探針斑點(diǎn)雜交技術(shù)證實(shí)，布尼亞病毒屬中的病毒M片段能自由分離，可能會(huì)與同種屬的病毒發(fā)生重配[20]，因此，BATV可能成為潛在的基因庫(kù)，隨時(shí)可能產(chǎn)生新基因重配病毒。所以關(guān)注BATV流行情況及基因重配現(xiàn)象，有助于及時(shí)應(yīng)對(duì)公共衛(wèi)生方面的潛在風(fēng)險(xiǎn)。

2 臨床癥狀

BATV可感染脊椎動(dòng)物、嚙齒動(dòng)物和鳥(niǎo)類等，宿主范圍十分廣泛，并在多種哺乳動(dòng)物中檢查出陽(yáng)性抗體。目前已在發(fā)熱伴有神經(jīng)癥狀的牛的血清中檢測(cè)到病毒核酸和抗體，而且反芻動(dòng)物感染嚴(yán)重的可能會(huì)引起流產(chǎn)、死胎和先天性異常等癥狀，綿羊和山羊感染會(huì)引起輕微疾病[21-23]。番鴨感染后可引起采食量和產(chǎn)蛋量下降、排稀便甚至死亡等癥狀，病理解剖發(fā)現(xiàn)其卵巢有不同程度地出血、充血且子宮內(nèi)充滿干酪樣分泌物[24]。海豹感染會(huì)出現(xiàn)嚴(yán)重的神經(jīng)癥狀，其腦部的病理分析顯示有淋巴組織細(xì)胞性腦膜腦脊髓炎[13]；人感染后多以流感樣癥狀為主，包括發(fā)熱、肌肉酸痛和厭食等癥，易與其他發(fā)熱性疾病混淆，重癥患者可發(fā)展成無(wú)菌性腦膜炎[25,26]。通過(guò)小鼠攻毒實(shí)驗(yàn)證明BATV（NM/12）可引起乳鼠死亡，3周齡小鼠出現(xiàn)神經(jīng)癥狀，如行走困難、厭食和被毛凌亂等[5]。

3 巴泰病毒檢測(cè)方法

3.1 分子生物學(xué)檢測(cè)方法

目前已確定BATV可感染人、家畜和鳥(niǎo)類等并引起明顯的臨床癥狀甚至死亡，因此，盡早確定病毒的感染對(duì)疫病的治療和防控至關(guān)重要。隨著分子生物學(xué)技術(shù)的快速發(fā)展，科學(xué)家已經(jīng)研制出BATV的快速準(zhǔn)確臨床檢測(cè)方法。如劉昊等[27]研發(fā)的環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增（RT-LAMP）檢測(cè)方法僅需要水浴鍋就可在60 min內(nèi)完成病原檢測(cè)。該RT-LAMP檢測(cè)方法是一種靈敏度好、特異性強(qiáng)且成本低的檢測(cè)方法，既可用于現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)，也可用于實(shí)驗(yàn)室診斷[27]。萬(wàn)春和等[28]研制出用于鴨BATV的SYBR Green I熒光定量PCR檢測(cè)方法，該方法特異性強(qiáng)靈敏度高，可用于鴨群中BATV的臨床診斷。傅光華等[29]基于病毒的M基因建立了一種BATV一步RT-PCR法檢測(cè)方法。曹玉璽等[30]也建立了一步Taq-Man Real-time PCR檢測(cè)方法，具有較高的特異性、穩(wěn)定性和敏感性。已建立的分子檢測(cè)方法均具有操作簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確、快速的優(yōu)勢(shì)，能滿足今后該病的早期監(jiān)測(cè)及流行病學(xué)調(diào)查需求。

3.2 血清學(xué)檢測(cè)

血清學(xué)檢測(cè)方法主要是針對(duì)BATV的特異性抗體來(lái)進(jìn)行檢測(cè)，目前血清學(xué)檢測(cè)方法主要有Hofmann等[31]建立的間接免疫熒光法和血清中和試驗(yàn)相結(jié)合的檢測(cè)方法，該方法可有效地監(jiān)測(cè)牛群中BATV的抗體水平。章域震等[32]也建立了BATV免疫熒光和空斑減少中和試驗(yàn)。劉榮昌等[33]通過(guò)純化病毒鴨BATV ZJ-01作為包被抗原，建立了可用于鴨BATV抗體檢測(cè)的間接ELISA方法，該方法僅與BATV陽(yáng)性血清發(fā)生特異性反應(yīng)，而對(duì)禽流感病毒等8種常見(jiàn)鴨病毒陽(yáng)性血清無(wú)交叉反應(yīng)，特異性強(qiáng)、敏感性高。劉昊等[34]將牛BATV NM/12株濃縮純化病毒作為包被抗原，建立了用于診斷牛BATV抗體水平的間接ELISA方法。此外，通過(guò)純化的NM/12株免疫小鼠制備和篩選出的特異性強(qiáng)、效價(jià)高的BATV單克隆抗體用于病毒特異性檢測(cè)。單克隆抗體的制備將為膠體金試紙條等診斷方法的研發(fā)以及病毒感染和致病機(jī)制的研究奠定基礎(chǔ)[35]。

4 疾病預(yù)防

目前還沒(méi)有關(guān)于BATV的特效疫苗和治療方法，但對(duì)該病原應(yīng)采取以下方法進(jìn)行防控：首先，BATV主要傳播媒介是不同種類的庫(kù)蚊、按蚊和伊蚊[22]，因此需要采用化學(xué)和物理的方法控制家養(yǎng)動(dòng)物（包括羊、牛和豬等）被蚊蟲(chóng)的叮咬，從而降低人和動(dòng)物感染BATV的機(jī)會(huì)；其次，要做好自身防護(hù)，在野外區(qū)域時(shí)應(yīng)該穿緊身服、戴防護(hù)帽，減少在樹(shù)叢茂密區(qū)域的活動(dòng)；另外，應(yīng)加強(qiáng)病原檢測(cè)，采用多種檢測(cè)方法加大對(duì)不同地區(qū)易感動(dòng)物的血清學(xué)和分子生物學(xué)檢測(cè)，及時(shí)了解BATV分子生物學(xué)特征及病毒毒株之間的變異情況；最后，還要對(duì)其他布尼亞病毒進(jìn)行檢測(cè)，防止新的重組病原的出現(xiàn)。

5 展望

由于BATV可感染多種動(dòng)物且臨床癥狀易與其他疾病混淆，如不及時(shí)診斷和治療將會(huì)出現(xiàn)神經(jīng)系統(tǒng)疾病甚至死亡。目前關(guān)于BATV的研究較少，其病毒感染和致病機(jī)制尚不明確，傳播途徑也未完全了解，也沒(méi)有有效的疫苗和治療方法能對(duì)該病進(jìn)行防控。因此有必要加強(qiáng)對(duì)BATV的研究，開(kāi)展多地區(qū)多物種的病原監(jiān)測(cè)，同時(shí)加強(qiáng)對(duì)BATV的分離、基因特性以及毒株的抗原性研究，進(jìn)一步了解其致病機(jī)制，研發(fā)安全有效的疫苗，為BATV的科學(xué)防控提供科學(xué)支撐。