吳廷瑞,魏波
(廣東醫(yī)科大學(xué)附屬醫(yī)院骨科中心,廣東 湛江 524001)
骨肉瘤是兒童和青少年最常見的原發(fā)性惡性骨腫瘤,好發(fā)于長(zhǎng)骨的干骺端,以股骨遠(yuǎn)端和脛骨近端最為常見[1]。據(jù)報(bào)道,骨肉瘤的年發(fā)病率為(1~4)/100萬,且男性發(fā)病率略高于女性[2]。生長(zhǎng)迅速和早轉(zhuǎn)移是骨肉瘤預(yù)后差的主要因素[3-5]。目前,手術(shù)與新輔助化療藥物的聯(lián)合應(yīng)用已成為臨床絕大部分骨肉瘤患者的標(biāo)準(zhǔn)治療策略,患者的生存率(60%~70%)也顯著提高[6-7]。但仍有許多骨肉瘤患者對(duì)化療藥物不敏感或產(chǎn)生耐藥性,且腫瘤的復(fù)發(fā)和廣泛轉(zhuǎn)移也嚴(yán)重影響患者的臨床療效和遠(yuǎn)期生存率。雖然骨肉瘤相關(guān)的分子生物學(xué)研究為其發(fā)病機(jī)制提供了一定理論依據(jù),但有關(guān)骨肉瘤增殖凋亡、侵襲轉(zhuǎn)移以及化學(xué)耐藥性的分子機(jī)制仍未明確。隨著新一代測(cè)序技術(shù)的發(fā)展,非編碼RNA逐漸成為研究熱點(diǎn)。研究認(rèn)為,至少有90%的人類基因組轉(zhuǎn)錄成RNA,但其中只有約2%的基因轉(zhuǎn)錄并翻譯合成蛋白質(zhì);不編碼蛋白質(zhì)的RNA曾被認(rèn)為是轉(zhuǎn)錄過程中的“垃圾”序列,被定義為非編碼RNA,包括微RNA(microRNA,miRNA)、環(huán)狀RNA和長(zhǎng)鏈非編碼RNA(long non-coding RNA,lncRNA)[8-9]。研究發(fā)現(xiàn),多種lncRNA的異常表達(dá)與骨肉瘤的增殖、凋亡、遷移、侵襲等惡性生物學(xué)行為有密切聯(lián)系;同時(shí),部分lncRNA在骨肉瘤診療與預(yù)后中扮演腫瘤生物標(biāo)志物的角色[10]?,F(xiàn)就骨肉瘤相關(guān)lncRNA的研究進(jìn)展予以綜述。
lncRNA是一類定位于細(xì)胞核或細(xì)胞質(zhì)中、長(zhǎng)度>200 nt且不具有開放閱讀編碼區(qū)的RNA序列分子。目前l(fā)ncRNA的來源尚未明確,但普遍認(rèn)為可能有5個(gè)來源途徑:①編碼蛋白質(zhì)序列的開放閱讀編碼區(qū)獲得結(jié)構(gòu)性改變轉(zhuǎn)化為lncRNA;②染色體重新排列,兩個(gè)非轉(zhuǎn)錄片段并列產(chǎn)生具有多個(gè)外顯子的lncRNA;③非編碼基因逆轉(zhuǎn)座復(fù)制形成功能性逆基因或非功能性逆假基因;④兩個(gè)復(fù)制子串聯(lián)引起非編碼RNA內(nèi)的相鄰重復(fù);⑤插入轉(zhuǎn)座子形成lncRNA[11]。根據(jù)與鄰近的具有蛋白質(zhì)編碼功能的基因片段的位置關(guān)系,lncRNA又可分為5類:①反義lncRNA;②正義lncRNA;③內(nèi)含子lncRNA;④雙向lncRNA;⑤基因間lncRNA[11-13]。研究發(fā)現(xiàn),lncRNA既可參與染色體表觀遺傳學(xué)修飾或通過與轉(zhuǎn)錄因子的相互作用在轉(zhuǎn)錄水平調(diào)節(jié)靶基因,也可參與轉(zhuǎn)錄后信使RNA的修飾等多水平調(diào)控,從而發(fā)揮促癌或抑癌作用[10]。
許多l(xiāng)ncRNA在骨肉瘤中異常表達(dá),與骨肉瘤發(fā)生、發(fā)展中大量基因及轉(zhuǎn)錄水平的顯著改變密切相關(guān)。Li等[14]通過微陣列芯片技術(shù)分析了9對(duì)人的骨肉瘤組織和對(duì)應(yīng)的瘤旁組織樣本,結(jié)果發(fā)現(xiàn)了25 733個(gè)lncRNA,其中403個(gè)lncRNA上調(diào),798個(gè)lncRNA下調(diào)(≥2.0倍,P<0.05);且通過生物信息學(xué)進(jìn)一步分析存在差異表達(dá)的lncRNA,發(fā)現(xiàn)了34條與轉(zhuǎn)錄本上調(diào)相關(guān)的信號(hào)通路及32條與轉(zhuǎn)錄本下調(diào)相關(guān)的信號(hào)通路。Zhu等[15]通過lncRNA芯片對(duì)5對(duì)骨肉瘤和癌旁組織進(jìn)行分析,同時(shí)篩選差異表達(dá)的lncRNA,結(jié)果發(fā)現(xiàn)65個(gè)lncRNA上調(diào),13個(gè)lncRNA下調(diào),隨后從差異表達(dá)的lncRNA中選擇5個(gè)上調(diào)和5個(gè)下調(diào)表達(dá)程度最顯著的lncRNA,在20對(duì)骨肉瘤和瘤旁組織中進(jìn)行進(jìn)一步驗(yàn)證,結(jié)果發(fā)現(xiàn)lncRNA核仁小RNA宿主基因16(ENSG00000163597)在骨肉瘤中的表達(dá)水平最高;進(jìn)一步研究表明,核仁小RNA宿主基因16(ENSG00000163597)可作為miR-205的內(nèi)源海綿,上調(diào)鋅指E盒鋅指蛋白1的表達(dá),顯著增強(qiáng)骨肉瘤細(xì)胞的增殖能力。張浩萌等[16]通過對(duì)5對(duì)骨肉瘤組織和瘤旁組織進(jìn)行高通量轉(zhuǎn)錄組學(xué)測(cè)序,篩選出差異表達(dá)的lncRNA,并驗(yàn)證了lncRNA纖維肉瘤癌基因同源物G-反義RNA1(antisense RNA1,AS1)在骨肉瘤細(xì)胞內(nèi)高表達(dá)且具有促進(jìn)細(xì)胞增殖的作用。Liu等[17]使用微陣列芯片技術(shù)分析了7對(duì)骨肉瘤與瘤旁組織中l(wèi)ncRNA的表達(dá)情況,結(jié)果顯示1 995 個(gè)lncRNA上調(diào),2 226個(gè)lncRNA下調(diào)(≥2.0倍,P<0.05),其中特異AT序列結(jié)合蛋白2(special AT-rich sequence-binding protein 2,SATB2)的反義轉(zhuǎn)錄物SATB2-AS1是被上調(diào)的lncRNA之一,SATB2-AS1可影響SATB2基因的翻譯表達(dá),調(diào)節(jié)骨肉瘤細(xì)胞周期并促進(jìn)骨肉瘤的增殖和生長(zhǎng)??梢?,lncRNA在骨肉瘤發(fā)生、發(fā)展中具有重要作用,可能是診斷骨肉瘤的新型候選生物標(biāo)志物或潛在的治療靶標(biāo)。
癌癥發(fā)生的特征為不受控制的細(xì)胞周期活動(dòng),包括不受控制的DNA復(fù)制和親代細(xì)胞分裂;細(xì)胞增殖與細(xì)胞凋亡之間的失衡促進(jìn)了各種癌癥的發(fā)展,歸因于致癌基因激活和(或)抑癌基因失活。而lncRNA在骨肉瘤發(fā)生、發(fā)展過程中扮演致癌因子或抑癌因子角色,通過多種信號(hào)通路調(diào)節(jié)細(xì)胞周期進(jìn)程或細(xì)胞凋亡,進(jìn)而調(diào)節(jié)細(xì)胞增殖,控制骨肉瘤的進(jìn)展。
3.1Wnt信號(hào)通路 Wnt信號(hào)通路在胚胎發(fā)育和成人組織動(dòng)態(tài)平衡中起著至關(guān)重要的作用。腫瘤的發(fā)生和轉(zhuǎn)移與Wnt信號(hào)通路的異常激活高度相關(guān),特別是lncRNA的失調(diào)會(huì)激活Wnt信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路,導(dǎo)致癌癥生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移。研究顯示,位于染色體21q22.3上的lncRNA整合素β2-AS1在骨肉瘤組織中顯著上調(diào),其通過調(diào)節(jié)Wnt/β聯(lián)蛋白(β-catenin)信號(hào)通路促進(jìn)骨肉瘤的增殖并抑制骨肉瘤細(xì)胞凋亡,高表達(dá)的整合素β2-AS1預(yù)示骨肉瘤患者的總體生存率較低[18]。Li等[19]研究發(fā)現(xiàn),lncRNA肌動(dòng)蛋白纖維相關(guān)蛋白1(actin filament-associated protein 1,AFAP1)-AS1在骨肉瘤組織和細(xì)胞系中的表達(dá)顯著上調(diào),AFAP1-AS1高表達(dá)與骨肉瘤患者的預(yù)后不良有關(guān);AFAP1-AS1可以通過海綿作用捕獲miR-4695-5p,從而上調(diào)轉(zhuǎn)錄因子4的表達(dá),轉(zhuǎn)錄因子4作為Wnt/β-catenin通路中的關(guān)鍵轉(zhuǎn)錄因子可促進(jìn)骨肉瘤的增殖,AFAP1-AS1/miR-4695-5p/轉(zhuǎn)錄因子4/β-catenin信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)級(jí)聯(lián)通路被證實(shí)參與了骨肉瘤的發(fā)展進(jìn)程。Huang等[20]發(fā)現(xiàn),lncRNA BE503655在人骨肉瘤和骨肉瘤細(xì)胞系中過表達(dá),過表達(dá)的lncRNA BE503655與Enneking分期、遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移以及組織學(xué)分級(jí)密切相關(guān),敲低lncRNA BE503655可抑制細(xì)胞增殖;進(jìn)一步研究表明,lncRNA BE503655正常發(fā)揮功能取決于骨肉瘤中Wnt/β-catenin信號(hào)的調(diào)節(jié)。
3.2磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B(phosphatidylinositol-3-kinases/protein kinase B,PI3K/Akt)信號(hào)通路 Akt作為一種原癌基因,在調(diào)控各種細(xì)胞功能的過程中發(fā)揮重要作用。PI3K/Akt信號(hào)通路通過促進(jìn)細(xì)胞增殖、抑制細(xì)胞凋亡,調(diào)控腫瘤的發(fā)生、發(fā)展。He等[21]研究表明,LINC00628在骨肉瘤組織中的表達(dá)顯著減少,LINC00628低表達(dá)預(yù)示著總生存率較低,而過表達(dá)LINC00628的骨肉瘤細(xì)胞系增殖能力被顯著抑制,細(xì)胞周期被阻滯在G0/G1期,凋亡率增加;此外,磷酸化的PI3K、Akt及Bcl-2蛋白表達(dá)水平顯著升高,而p53蛋白表達(dá)水平顯著降低,因此過表達(dá)的LINC00628通過PI3K/Akt信號(hào)通路的失活抑制骨肉瘤細(xì)胞的增殖,促進(jìn)細(xì)胞凋亡。肺腺癌轉(zhuǎn)移相關(guān)轉(zhuǎn)錄本1(metastasis-associated lung adenocarcinoma transcript 1,MALAT1)是最早發(fā)現(xiàn)的與癌癥相關(guān)的lncRNA之一,它參與了多種類型腫瘤的發(fā)生、發(fā)展,在肝細(xì)胞癌、宮頸癌、乳腺癌、卵巢癌和結(jié)直腸癌中均觀察到MALAT1的異常表達(dá)[22-23]。慢病毒介導(dǎo)的MALAT1小干擾RNA可以有效下調(diào)骨肉瘤細(xì)胞株中MALAT1的表達(dá)水平,敲除MALAT1可抑制人骨肉瘤細(xì)胞的增殖;同時(shí),增殖細(xì)胞核抗原、基質(zhì)金屬蛋白酶9以及磷酸化的PI3K p85α和Akt在缺失MALAT1的骨肉瘤細(xì)胞系中均受到抑制,表明MALAT1可能是通過PI3K/Akt信號(hào)通路促進(jìn)骨肉瘤增殖、轉(zhuǎn)移的致癌lncRNA,同時(shí)也被認(rèn)為是骨肉瘤的潛在治療靶標(biāo)[24]。另有研究發(fā)現(xiàn),賴氨酰氧化酶樣蛋白1(lysyl oxidase like protein 1,LOXL1)-AS1的高表達(dá)與骨肉瘤患者的Enneking分期、腫瘤大小、遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移、組織學(xué)分級(jí)以及總生存時(shí)間相關(guān),骨肉瘤組織和細(xì)胞系中LOXL1-AS1的表達(dá)水平均高于正常骨組織和正常成骨細(xì)胞系,敲低LOXL1-AS1可通過抑制PI3K/Akt信號(hào)通路顯著抑制骨肉瘤細(xì)胞的增殖[25]。
3.3轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β(transforming growth factor-β,TGF-β)信號(hào)通路 TGF-β的過表達(dá)是許多癌癥的標(biāo)志,包括原發(fā)性骨腫瘤。腫瘤細(xì)胞或基質(zhì)細(xì)胞分泌的TGF-β能夠以旁分泌的方式有效調(diào)節(jié)微環(huán)境的表型和功能,從而刺激致瘤性微環(huán)境的變化,因此TGF-β可通過促進(jìn)血管生成、骨重塑和細(xì)胞遷移,同時(shí)抑制免疫監(jiān)視,在原發(fā)性骨腫瘤中發(fā)揮促癌作用[26]。與健康人相比,骨肉瘤患者血清中的TGF-β水平升高[27]。lncRNA核富集轉(zhuǎn)錄本1通過競(jìng)爭(zhēng)性地刺激miR-339-5p介導(dǎo)TGF-β1的表達(dá),增加的TGF-β1可誘導(dǎo)骨肉瘤細(xì)胞增殖,從而導(dǎo)致骨肉瘤的發(fā)展[28]。另有研究表明,lncRNA前列腺癌相關(guān)轉(zhuǎn)錄本(prostate cancer associated transcript,PCAT)6作為競(jìng)爭(zhēng)性內(nèi)源RNA通過海綿吸附miR-185-5p,上調(diào)TGF-β受體1和TGF-β受體2的表達(dá),激活TGF-β通路,促進(jìn)骨肉瘤的增殖進(jìn)展[29]。
3.4信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)及轉(zhuǎn)錄激活因子3(signal transduction and activator of transcription 3,STAT3)信號(hào)通路 STAT3是在腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)、增殖、凋亡和癌變中起重要作用的轉(zhuǎn)錄因子之一。在正常細(xì)胞中,STAT3被短暫激活以維持體內(nèi)平衡,但如果STAT3在異常情況下持續(xù)被激活,則持續(xù)激活的STAT3可以觸發(fā)致癌途徑[30]。近年研究表明,應(yīng)用STAT3抑制劑那巴布卡星誘導(dǎo)骨肉瘤細(xì)胞系可降低細(xì)胞活力并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,應(yīng)用那巴布卡星治療除了可阻斷STAT3介導(dǎo)的轉(zhuǎn)錄和骨肉瘤細(xì)胞下游靶蛋白外,還可抑制STAT3的表達(dá)和磷酸化[31]。Wang等[32]研究表明,lncRNA AK093407可與STAT3相互作用,并促進(jìn)其磷酸化。在骨肉瘤中過表達(dá)的lncRNA持續(xù)活化STAT3通路,進(jìn)而促進(jìn)細(xì)胞增殖,同時(shí)抑制細(xì)胞凋亡。另有研究表明,lncRNA 膀胱癌相關(guān)轉(zhuǎn)錄本1(bladder cancer associated transcript 1,BLACAT1)在骨肉瘤組織和細(xì)胞中均上調(diào),BLACAT1的上調(diào)預(yù)示骨肉瘤患者的預(yù)后不良;同時(shí),上調(diào)表達(dá)的BLACAT1可以激活STAT3磷酸化途徑,加速細(xì)胞增殖生長(zhǎng)[33]。以上研究表明,lncRNA的異常表達(dá)參與了STAT3信號(hào)通路的活化,進(jìn)而加速骨肉瘤的疾病進(jìn)展。
3.5其他信號(hào)通路 Gao等[34]發(fā)現(xiàn),lncRNA X染色體失活特異轉(zhuǎn)錄本作為一種腫瘤機(jī)會(huì)因子,抑制X染色體失活特異轉(zhuǎn)錄本會(huì)靶向激活核因子κB/PUMA(p53 upregulated modulator of apoptosis)通路,誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡并減少骨肉瘤異種移植腫瘤的生長(zhǎng)。另有研究表明,Notch途徑被證實(shí)為一種骨肉瘤致癌途徑,lncRNA母系印跡基因3的過表達(dá)可通過抑制 Notch信號(hào)通路抑制骨肉瘤細(xì)胞的增殖,并促進(jìn)骨肉瘤細(xì)胞凋亡[35]。隨著對(duì)lncRNA在多種致癌信號(hào)通路中作用機(jī)制的深入研究,lncRNA與骨肉瘤細(xì)胞更深層的增殖凋亡調(diào)控機(jī)制逐漸明晰,這些lncRNA 有望成為骨肉瘤治療的潛在靶標(biāo)。
大多數(shù)骨肉瘤易發(fā)生早期遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移,這也是骨肉瘤預(yù)后較差的重要原因[4]。腫瘤的侵襲與轉(zhuǎn)移是一個(gè)多環(huán)節(jié)、多步驟、多基因參與的復(fù)雜調(diào)控過程,包括侵襲、內(nèi)滲、擴(kuò)散、外滲和定植。上皮-間充質(zhì)轉(zhuǎn)化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)是一種保守的細(xì)胞過程,以上皮細(xì)胞中的細(xì)胞極性喪失和間質(zhì)細(xì)胞的發(fā)育為特征,可以侵入并在體內(nèi)遷移,EMT被認(rèn)為是腫瘤轉(zhuǎn)移的重要機(jī)制;骨肉瘤細(xì)胞在轉(zhuǎn)移前獲得遷移增強(qiáng)的表型,完成EMT過程,從原發(fā)部位逃逸并侵襲鄰近的組織,然后通過脈管系統(tǒng)轉(zhuǎn)移至其他系統(tǒng),形成遠(yuǎn)處的繼發(fā)腫瘤灶[36]。
lncRNA也可通過調(diào)控EMT參與骨肉瘤侵襲和轉(zhuǎn)移的過程。EMT過程中伴隨上皮標(biāo)志物(上皮鈣黏素)下調(diào)和間質(zhì)標(biāo)志物(神經(jīng)鈣黏素)上調(diào)。研究表明,與癌旁的正常組織相比,lncRNA Ftx(Ftx基因是人類X染色體上的非蛋白質(zhì)編碼基因,也是一段位于X染色體失活中心的保守轉(zhuǎn)錄本)在骨肉瘤組織中的表達(dá)水平更高,其表達(dá)上調(diào)與臨床分期及遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移相關(guān);lncRNA Ftx通過EMT機(jī)制影響骨肉瘤的進(jìn)程,在蛋白質(zhì)和信使RNA水平上皮鈣黏素水平降低,而神經(jīng)鈣黏素水平升高,表明lncRNA Ftx可以作為判斷骨肉瘤進(jìn)展和預(yù)后的生物標(biāo)志物[37]。lncRNA PCAT1在前列腺癌中首先被發(fā)現(xiàn),隨后PCAT1在其他惡性腫瘤中的作用也得到證實(shí),包括結(jié)直腸癌、食管鱗狀癌、膀胱癌、肝癌和肺癌等,而且在這些惡性腫瘤組織中PCAT1均被上調(diào),PCAT1的過表達(dá)促進(jìn)了癌癥的進(jìn)展;與正常骨組織相比,PCAT1在骨肉瘤組織中上調(diào),PCAT1的上調(diào)與晚期臨床階段及腫瘤轉(zhuǎn)移顯著相關(guān);體外研究表明,MG-63細(xì)胞中PCAT1的過表達(dá)增強(qiáng)了細(xì)胞的增殖、侵襲和遷移能力,并促進(jìn)了EMT進(jìn)程[38]。另有研究表明,在骨肉瘤中過表達(dá)的lncRNA HOXA遠(yuǎn)端轉(zhuǎn)錄本可能通過與c-Myc形成正反饋環(huán)促進(jìn)體外遷移、侵襲和EMT過程[39]。
骨肉瘤發(fā)現(xiàn)時(shí)往往伴隨轉(zhuǎn)移,預(yù)后一般較差。既往腫瘤的大小和部位、化療反應(yīng)、堿性磷酸酶水平和P-糖蛋白表達(dá)可能是判斷骨肉瘤預(yù)后的獨(dú)立因素,但隨著對(duì)骨肉瘤相關(guān)lncRNA研究的深入發(fā)現(xiàn),骨肉瘤組織中異常表達(dá)的lncRNA與患者的不良預(yù)后密切相關(guān)[40]。HOX轉(zhuǎn)錄反義RNA是研究較深入的lncRNA之一,它位于HOXC基因簇反義鏈內(nèi)的人類染色體12q13上,與正常組織相比,骨肉瘤組織中的HOX轉(zhuǎn)錄反義RNA表達(dá)顯著上調(diào)(P<0.001);HOX轉(zhuǎn)錄反義RNA的過表達(dá)與晚期腫瘤階段(ⅡA期比ⅡB/Ⅲ期,P=0.043 9)和高度組織學(xué)分級(jí)(Ⅲ級(jí)比Ⅳ級(jí),P=0.009 7)以及較低的總生存率密切相關(guān),提示高表達(dá)的HOX轉(zhuǎn)錄反義RNA與骨肉瘤患者的不良預(yù)后相關(guān)[41]。Chen等[25]發(fā)現(xiàn),骨肉瘤組織和細(xì)胞系中LOXL1-AS1的表達(dá)水平均高于正常骨組織和正常成骨細(xì)胞系,且LOXL1-AS1的高表達(dá)與骨肉瘤患者的Enneking分期、腫瘤大小、遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移、組織學(xué)分級(jí)以及總生存時(shí)間相關(guān);此外,LOXL1-AS1的過表達(dá)是骨肉瘤患者總體生存的獨(dú)立不良預(yù)測(cè)指標(biāo)??傊?,LOXL1-AS1可預(yù)測(cè)骨肉瘤患者的臨床進(jìn)展和不良預(yù)后,并作為致癌lncRNA調(diào)節(jié)細(xì)胞增殖、細(xì)胞周期、遷移和侵襲。另外,一些正在探索的lncRNA也被鑒定為骨肉瘤中獨(dú)立的預(yù)后生物標(biāo)志物。如一項(xiàng)針對(duì)94例骨肉瘤患者的腫瘤組織和相應(yīng)的非癌性骨組織的鑒定研究表明,骨肉瘤組織中l(wèi)ncRNA牛磺酸上調(diào)基因1(taurine up-regulated gene 1,TUG1)的表達(dá)水平顯著高于鄰近的正常骨組織,TUG1的上調(diào)與骨肉瘤患者的腫瘤大小及晚期腫瘤階段淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移均顯著相關(guān);Kaplan-Meier曲線顯示,TUG1高表達(dá)的骨肉瘤患者總生存時(shí)間縮短;單因素和多因素分析表明,TUG1的低表達(dá)水平是骨肉瘤患者獨(dú)立的不良預(yù)后指標(biāo)[42]。這些發(fā)現(xiàn)表明,lncRNA有望成為骨肉瘤預(yù)后的生物標(biāo)志物。將lncRNA作為預(yù)后生物標(biāo)志物有利于骨肉瘤的早發(fā)現(xiàn)、早診斷、早治療,有助于提高骨肉瘤患者的整體生存率,具有重要的潛在臨床應(yīng)用價(jià)值。
在過去的幾十年中,雖然包括新輔助化療和外科手術(shù)切除在內(nèi)的綜合療法已將骨肉瘤患者的5年生存率提高到了約70%[6],但內(nèi)在或獲得性化療耐藥的發(fā)生顯著阻礙了生存率的進(jìn)一步提高,是癌癥治療的最大障礙[43]。骨肉瘤化療耐藥是一個(gè)多層次、多機(jī)制聯(lián)合發(fā)揮作用的復(fù)雜過程,包括藥物靶向基因表達(dá)下調(diào)、耐藥基因表達(dá)異常等。Kun-Peng等[44]通過lncRNA微陣列分析分別測(cè)定了阿霉素耐藥的人骨肉瘤細(xì)胞系和阿霉素敏感的人骨肉瘤細(xì)胞系(MG63/DXR與MG63),結(jié)果發(fā)現(xiàn),lncRNA FOXF1相鄰的非編碼發(fā)育調(diào)控RNA(FOXF1 adjacent non-coding developmental regulatory RNA,F(xiàn)ENDRR)在阿霉素耐藥的骨肉瘤細(xì)胞中下調(diào)程度最高,且與骨肉瘤患者的不良預(yù)后呈負(fù)相關(guān),F(xiàn)ENDRR可能通過抑制ATP結(jié)合盒B亞家族1和ATP結(jié)合盒C亞家族1的表達(dá)發(fā)揮降低耐藥性的作用;此外,F(xiàn)ENDRR還可以作為預(yù)測(cè)骨肉瘤患者化療敏感性和預(yù)后的生物標(biāo)志物。這些結(jié)果闡明了FENDRR在降低骨肉瘤化學(xué)耐藥性方面的新作用,并提出了潛在的靶點(diǎn),以提高骨肉瘤對(duì)阿霉素治療的敏感性。在骨肉瘤的順鉑化療耐藥研究方面,有研究表明,lncRNA NCK銜接因子蛋白1-AS1充當(dāng)骨肉瘤的致癌基因,沉默NCK銜接因子蛋白1-AS1可改善對(duì)順鉑耐藥的骨肉瘤細(xì)胞的敏感性;進(jìn)一步的機(jī)制研究表明,NCK銜接因子蛋白1-AS1通過與miR-137競(jìng)爭(zhēng),調(diào)節(jié)骨肉瘤細(xì)胞中的順鉑耐藥性[45]。此外,Wang等[46]報(bào)道,一種新型的lncRNA癌睪丸抗原可以被阿霉素激活,并通過競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合miR-210促進(jìn)骨肉瘤細(xì)胞凋亡,同時(shí)抑制細(xì)胞自噬。另有文獻(xiàn)報(bào)道,lncRNA NR_036444是骨肉瘤多柔比星耐藥形成過程中的重要分子,其可能作為區(qū)分骨肉瘤患者化療敏感性和判斷預(yù)后的生物標(biāo)志物[47]。如果能夠能篩選出對(duì)骨肉瘤化療增敏的lncRNA并應(yīng)用于臨床化療耐藥的患者,將會(huì)顯著提高化療效果,改善骨肉瘤患者的預(yù)后。
近年來,與骨肉瘤發(fā)病密切相關(guān)的lncRNA的研究逐漸增多,為骨肉瘤的臨床診斷以及l(fā)ncRNA作為判斷預(yù)后的生物標(biāo)志物提供了新的契機(jī),也為靶向精準(zhǔn)治療提供了理論基礎(chǔ)。然而,lncRNA與骨肉瘤的作用關(guān)系仍存在亟待探索和解決的問題,如現(xiàn)有的研究尚不能闡明lncRNA異常表達(dá)與腫瘤形成的因果關(guān)系,其深層作用機(jī)制仍待進(jìn)一步探索;另外,目前的研究?jī)H局限于單個(gè)lncRNA 對(duì)骨肉瘤惡性生物學(xué)行為等方面的影響,多個(gè)lncRNA與骨肉瘤形成的交互調(diào)控網(wǎng)絡(luò)值得深入研究;基因表達(dá)存在時(shí)空差異性,在不同部位的骨肉瘤以及同一部位不同腫瘤發(fā)展節(jié)點(diǎn),lncRNA的表達(dá)豐度是否具有差異性,也值得深入研究。