邱富娜,張躍京
(河南省獸藥飼料監(jiān)察所,鄭州 450000)
獸藥主要是指預(yù)防、診斷、治療動(dòng)物疾病的物質(zhì),其具有極強(qiáng)的針對(duì)性,能夠調(diào)節(jié)動(dòng)物的身體機(jī)能。在動(dòng)物養(yǎng)殖過(guò)程中,必須科學(xué)合理地使用獸藥,遵守衛(wèi)生法規(guī),這樣才能減少獸藥殘留。獸藥殘留對(duì)人體的影響并不是急性的,會(huì)隨著攝入量的增多不斷累積,最終導(dǎo)致慢性中毒。在此背景下,相關(guān)的檢測(cè)技術(shù)尤為重要。本文對(duì)飼料中常見(jiàn)的獸藥種類(lèi)及相關(guān)的獸藥檢測(cè)技術(shù)進(jìn)行了介紹,旨在進(jìn)一步保障食品安全。
磺胺類(lèi)藥物是氨基苯磺酰胺結(jié)構(gòu)類(lèi)藥物的總和,其主要功能在于預(yù)防和治療感染性疾病。在飼料的制作過(guò)程中,其可以作為添加劑進(jìn)行有效的使用,日常生活中最常見(jiàn)的磺胺類(lèi)藥物有磺胺間甲氧嘧啶(SMM)、磺胺二甲氧嘧啶(SDM)等[1]。根據(jù)相關(guān)的實(shí)踐調(diào)查研究可知,如果將有磺胺類(lèi)藥物殘留的動(dòng)物產(chǎn)品制作成食品后,人長(zhǎng)時(shí)間食用會(huì)直接對(duì)腎臟造成一定損害,嚴(yán)重時(shí)會(huì)導(dǎo)致個(gè)體過(guò)敏等一系列不良反應(yīng)。同時(shí),如果磺胺類(lèi)藥物使用過(guò)量會(huì)有致癌的風(fēng)險(xiǎn)。在這樣的背景下,對(duì)飼料中添加磺胺類(lèi)藥物的監(jiān)管的重要性逐漸凸顯。
大環(huán)內(nèi)酯類(lèi)藥物是一類(lèi)抑制生物生長(zhǎng)的藥物,是由鏈霉菌所產(chǎn)生的弱堿性抗生素,紅霉素是其重要組成部分,也是該類(lèi)藥物的主要代表。隨著科學(xué)技術(shù)的飛速發(fā)展,大環(huán)內(nèi)酯類(lèi)藥物也衍生出了羅紅霉素、螺旋霉素、竹桃霉素等[2]。大環(huán)內(nèi)酯類(lèi)藥物作為獸藥能夠有效治療動(dòng)物的各類(lèi)疾病。但需要注意的是,如果這類(lèi)藥物長(zhǎng)時(shí)間被動(dòng)物使用,藥物中的部分化學(xué)成分會(huì)在生物體內(nèi)不斷累積,當(dāng)達(dá)到一定含量時(shí)則會(huì)對(duì)動(dòng)物肝腎造成損傷,嚴(yán)重時(shí)甚至產(chǎn)生一系列毒性反應(yīng),當(dāng)有這類(lèi)藥物殘留的動(dòng)物被人類(lèi)食用后,人體腸道菌群的整體環(huán)境會(huì)發(fā)生改變,造成菌群失調(diào),產(chǎn)生過(guò)敏等不良反應(yīng);此外,人體也會(huì)因食用這類(lèi)動(dòng)物食品而獲得抗藥性,這對(duì)其后續(xù)的治療有著嚴(yán)重的不良影響。
氯霉素類(lèi)藥物是從委內(nèi)瑞拉鏈霉菌中分離出的一類(lèi)抗生素,主要包括妥氯霉素、甲砜霉素等。作為獸藥通常被用于治療和預(yù)防傳染性疾病,其在過(guò)去很長(zhǎng)一段時(shí)間內(nèi)被廣泛推廣運(yùn)用,但隨著制藥技術(shù)的成熟,相關(guān)技術(shù)人員發(fā)現(xiàn)氯霉素類(lèi)抗生素很容易在動(dòng)物及人體內(nèi)堆積,當(dāng)達(dá)到一定量時(shí)會(huì)產(chǎn)生一系列毒副作用。尤其是對(duì)于人類(lèi)而言,氯霉素類(lèi)抗生素很有可能會(huì)造成骨髓造血機(jī)能的損壞,因此目前大多數(shù)國(guó)家都已經(jīng)將其作為禁藥,在獸藥中也嚴(yán)格禁止使用。
氨基糖苷類(lèi)抗生素具有一定的廣譜抗菌性,有抑制蛋白質(zhì)合成的功能,因此在飼料中添加氨基糖苷類(lèi)藥物能夠有效預(yù)防家畜疾病,同時(shí)有助于家禽快速生長(zhǎng)。當(dāng)前,這類(lèi)藥物主要包括慶大霉素、鏈霉素、妥布霉素和卡那霉素等[3]。這類(lèi)藥物具有明顯的副作用,會(huì)造成腎中毒及耳中毒,因此大多數(shù)國(guó)家已經(jīng)禁止使用這類(lèi)藥物。
糖皮質(zhì)激素類(lèi)藥物是由腎上腺皮質(zhì)分泌的一種激素,因此也被稱(chēng)之為皮質(zhì)類(lèi)固醇,可以利用一定的技術(shù)手段進(jìn)行人工合成。糖皮質(zhì)激素類(lèi)藥物能夠調(diào)節(jié)生物代謝,快速分解糖類(lèi)、脂肪、蛋白質(zhì)等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。同時(shí),將其運(yùn)用在獸藥中能夠增強(qiáng)生物的免疫性及抗炎抗毒的能力,整體效果較為突出。目前,較為常見(jiàn)的糖皮質(zhì)激素類(lèi)藥物主要包括地塞米松、倍他米松等[4]。糖皮質(zhì)激素類(lèi)藥物是一種效果突出的生長(zhǎng)促進(jìn)劑,通過(guò)增加動(dòng)物的飼料攝入量使動(dòng)物體重快速增加并且產(chǎn)生相應(yīng)的脂肪。由于其效果顯著,也時(shí)常被用于非法途徑,當(dāng)前國(guó)際上已被很多國(guó)家所禁用,部分國(guó)家也明確規(guī)定了飼料中地塞米松、倍他米松的最大殘留量。
分光光度法是現(xiàn)階段極為常用的一種藥物分析方法,其對(duì)實(shí)驗(yàn)場(chǎng)所要求不高,在普通的實(shí)驗(yàn)室就能夠?qū)嵤?。商君等?]靈活運(yùn)用分光光度法對(duì)飼料中的泰樂(lè)菌素進(jìn)行了測(cè)量,并分析了預(yù)混劑的整體含量,明確其質(zhì)量濃度維持在5.0~50μg/mL,其濃度與吸光度存在緊密聯(lián)系。分光光度法能夠應(yīng)用的場(chǎng)所十分有限,只能在特定背景下對(duì)個(gè)別獸藥進(jìn)行檢測(cè)分析,例如青霉素、環(huán)丙沙星等。雖然分光光度法對(duì)儀器設(shè)備的要求不高,但所得出的結(jié)果精準(zhǔn)度偏低,具有極大的局限性,其程序復(fù)雜,相關(guān)技術(shù)人員必須具備良好的操作能力,而且也無(wú)法快速進(jìn)行多種獸藥的檢測(cè)。
微生物學(xué)法中管碟法是當(dāng)前國(guó)際上常用的獸藥檢測(cè)方法,其能夠?qū)Χ嘟M分發(fā)酵抗生素進(jìn)行檢測(cè),檢測(cè)原理在于利用抗生素對(duì)微生物的抗菌能力進(jìn)行分析。從整體上來(lái)講,該方法所涉及到的檢測(cè)量較少,其基本原理符合生物發(fā)展規(guī)律的同時(shí)靈敏度較高。在這樣的背景下,管碟法引起了各國(guó)的重視,并將其靈活運(yùn)用于抗生素檢測(cè)過(guò)程中,作為瓊脂擴(kuò)散法的重要組成部分。陳敏等[6]利用該方法對(duì)飼料中的恩拉霉素進(jìn)行了檢測(cè),明確其最低量為0.505 mg/kg。雖然該檢測(cè)方法具有極大的使用優(yōu)勢(shì),但對(duì)操作環(huán)節(jié)、檢驗(yàn)步驟要求極高,任何一個(gè)細(xì)節(jié)出現(xiàn)誤差都可能導(dǎo)致整個(gè)實(shí)驗(yàn)失敗,因此無(wú)法進(jìn)行大范圍推廣。
薄層色譜法在飼料檢測(cè)中的運(yùn)用極其廣泛,也經(jīng)過(guò)了長(zhǎng)時(shí)間的實(shí)踐應(yīng)用,其只能在一定程度上對(duì)飼料進(jìn)行粗淺的定量分析,但其成本低,所使用的設(shè)備設(shè)施簡(jiǎn)單,對(duì)實(shí)驗(yàn)場(chǎng)所環(huán)境要求不高,同時(shí)薄層色譜法可以在極短時(shí)間內(nèi)進(jìn)行大量樣品的快速處理,使用的溶劑也較少。高迎春等[7]利用該方法進(jìn)行了磺胺類(lèi)藥物的快速測(cè)量,明確其限量為0.05μg/mL,整體回收率達(dá)到65%左右。唐陽(yáng)剛等[8]也用該方法進(jìn)行了飼料中恩拉霉素的測(cè)量,整體效果較好。但值得注意的是,該方法無(wú)法進(jìn)行精準(zhǔn)篩選,只能定性篩查,且操作較為復(fù)雜。
氣相色譜法具有準(zhǔn)確度高、分析速度快、效率突出等優(yōu)勢(shì),但在對(duì)獸藥進(jìn)行檢測(cè)時(shí)由于其所涉及到的試劑種類(lèi)過(guò)多,整體操作較為復(fù)雜,成本高,因此在實(shí)際使用中并不普遍。但值得注意的是,氣相色譜法靈敏度極高,得出的結(jié)論可信度較高,因此國(guó)家技術(shù)部門(mén)在針對(duì)某些特定藥品的檢測(cè)時(shí)會(huì)采用該方法。例如,使用該方法對(duì)氯霉素的最低檢出限可達(dá)到0.005 mg/kg,這能夠全面滿足其檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)需求。彭加兵等[9]利用乙醚提取了相關(guān)的樣品之后,再通過(guò)HLB進(jìn)行了凈化,最后使用氣相色譜-質(zhì)譜法檢測(cè)出該飼料中含有多種激素藥物,整體回收率為76%左右。
高效毛細(xì)管電泳法是隨著現(xiàn)代信息技術(shù)發(fā)展所衍生出的一種新型技術(shù)手段,其本質(zhì)是利用高壓電場(chǎng)為驅(qū)動(dòng)力,以毛細(xì)管為分離通道,依據(jù)樣品中不同成分之間的淌度和分配行為上的差異而實(shí)現(xiàn)分離分析的方法,該方法不會(huì)受到外界添加劑的影響,也不需要高壓泵,在檢測(cè)時(shí)耗用的溶劑較少,分離速度較快,對(duì)飼料中的大多數(shù)獸藥都能夠快速檢測(cè)。鄧光輝等[10]利用該方法對(duì)飼料中的鹽酸克倫特羅進(jìn)行了快速檢測(cè)分析,明確其檢出限為0.5 mg/kg,該方法成本低廉、速度較快、準(zhǔn)確性有保障。
檢測(cè)器是高效液相色譜儀的主要組成部分,目前常用的檢測(cè)器主要有紫外吸收檢測(cè)器、二極管陣列檢測(cè)器等。
(1)紫外吸收檢測(cè)器使用的是線性檢測(cè)的方式,具有一定的靈敏度,同時(shí)也不受溫度、流速的影響。邸萬(wàn)山[11]利用三氯乙酸溶液采用HLB固相萃取柱凈化法,最終測(cè)量得出飼料中的鹽酸克倫特羅加標(biāo)回收率為98%~99%。
(2)二極管陣列檢測(cè)器也是利用線性檢測(cè)的方式,但其噪音低,準(zhǔn)確度高,通常被靈活運(yùn)用于梯度洗脫。張?jiān)伒龋?2]利用HPLC-二極管陣列檢測(cè)器檢測(cè)出飼料中含有4種硝基呋喃類(lèi)藥物,平均添加回收率大約為75%。
綜上所述,飼料中的獸藥殘留危害巨大,相關(guān)技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)靈活運(yùn)用分光光度法、微生物學(xué)法、薄層色譜法、氣相色譜法、氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法、高效毛細(xì)管電泳法及高效液相色譜法加強(qiáng)對(duì)飼料中獸藥的檢測(cè)分析,以確保動(dòng)物食品安全。